#1  
قديم 11-04-2015, 08:00 PM
رافت ابراهيم رافت ابراهيم غير متواجد حالياً
عضو ذهبي
 
تاريخ التسجيل: Dec 2011
المشاركات: 520
افتراضي تقدير الأطفال المصابين بالتوحد من خلال تحليل metallomics

 

المادة | مفتوح
تقدير الأطفال المصابين بالتوحد من خلال تحليل metallomics


تم الاستلام: 27 سبتمبر 2012 قبلت: 14 يناير 2013 نشرت على الانترنت: 4 فبراير 2013

ملخص مجردة

توضيح المرضية والعلاج من اضطرابات طيف التوحد هو واحد من التحديات اليوم. في هذه الدراسة، ونحن فحص تركيزات شعر فروة الرأس من العناصر النزرة 26 ل1967 طفل يعانون من اضطرابات التوحد (1553 ذكور و 414 إناث). تم العثور على خمس مئة وأربعة وثمانون (29.7٪) و 347 (17.6٪) و 114 (5.8٪) موضوعات من نقص في الزنك والمغنيسيوم والكالسيوم، على التوالي، و 2.0٪ أو أقل في المعادن الأساسية الأخرى. لوحظ بشدة معدل الإصابة من نقص المعادن الأطفال في عمر البالغ من العمر 0-3. في المقابل، تم العثور على 339 (17.2٪) و 168 (8.5٪) و 94 (4.8٪) الأفراد الذين يعانون من ارتفاع عبء من الألومنيوم، والكادميوم والرصاص، و 2.8٪ أو أقل من الزئبق والزرنيخ العبء. وتشير هذه النتائج إلى أن zinc- الطفلي ونقص المغنيسيوم و / أو أعباء المعادن السامة قد تلعب epigenetically الأدوار الرئيسية حيث العوامل البيئية في اضطرابات التوحد والتي قد تؤدي metallomics نهج الفحص المبكر والوقاية من اضطرابات النمو العصبي.

مقدمة تقديم

اضطرابات طيف التوحد هي مجموعة من اضطرابات التطور العصبي تتميز ضعف في التفاعل الاجتماعي والتواصل، وبسبب وجود قيود والمتكررة السلوكيات وانتشار هذا المرض في تزايد مستمر يصل إلى 1 في 88 طفلا 2 ، 4. ومن المعروف أن اضطرابات طيف التوحد لتكون الوراثية إلى حد كبير (~ 90٪)، كما تم الإبلاغ عن بعض الجينات المتعلقة 6. ومع ذلك، فإن المحددات الوراثية الهامة لا تزال توضيح لا وتفاعل العوامل الوراثية مع نمط الحياة غير مصدق والعوامل البيئية يبدو تلعب دورا مهما في المسببات المرضية. على سبيل المثال، قد ادعى الزئبق عضوي واحد من المرشحين البيئي يسبب اضطرابات التوحد ولكن لا تزال علاقته سيتم إنشاؤها. في الآونة الأخيرة، ويعتبر التعديل الجيني في التعبير الجيني عن عوامل بيئية واحدة من الأحداث الرئيسية في التسبب في الأمراض الوراثية وقد تم الإبلاغ عن بعض العناصر السامة مثل الكادميوم والزرنيخ أن تكون العوامل مرشح التي تحفز اضطرابات جينية 10، 11، 12، 13.
وقد مكننا تقدما كبيرا مؤخرا في العناصر النزرة طريقة رفيع حساس ويمكن الاعتماد عليها التحليل باستخدام إضافة بالحث مطياف الكتلة البلازما (ICP-MS) لتطبيقه على الأبحاث الطبية الطب الشرعي وتقدير العبء المعادن السامة المزمن ونقص المعادن في الجسم البشري 14، 15. وبالتالي، قد حوكموا التطبيقات السريرية من موثوق المعدنية الشعر أسلوب التحليل مع ICP-MS للتحقيق في ارتباط بعض الأمراض والأعراض مع حركية العناصر النزرة بما في ذلك المعادن السامة والمعادن الأساسية 16، 17، 18، 19، 20، 21.
على مدى السنوات الست الماضية، ونحن قمنا بفحص جمعية أعباء المعادن السامة يعانون من اضطرابات التوحد وذكرت أن بعض الأطفال المصابين بالتوحد يعانون من تراكم عالية من المعادن السامة مثل الكادميوم والرصاص أو الألمنيوم 22، 23، 24. في الآونة الأخيرة، أثبتنا رابطة نقص الزنك عند الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد 25.
في هذه الدراسة تحليل metallomics، فقد قررنا تركيزات شعر فروة الرأس الإنسان من 26 العناصر النزرة عن 1967 طفل يعانون من اضطرابات التوحد الذين تتراوح أعمارهم بين 0-15 عاما، وأظهرت أن العديد من المرضى، خصوصا الأطفال في عمر البالغ من العمر 0-3، يعانون من هامشية لzinc- شديد ونقص المغنيسيوم و / أو أعباء عالية من العديد من المعادن السامة مثل الألومنيوم والكادميوم والرصاص. وتشير هذه النتائج إلى أن هناك فترة حرجة "نافذة الطفولي" في النمو العصبي والمحتمل للعلاج من اضطرابات التوحد.

النتائج النتائج

يظهر الرسم البياني الشعر تركيزات الزنك لوغاريتمي ل1967 طفل يعانون من اضطرابات طيف التوحد في الشكل 1. وكان توزيع تركيز الزنك غير متماثل مع المخلفات في أقل المدى، وعثر على 584 في 1967 المواضيع (29.7٪) لديهم أقل تركيز الزنك من -2 SD (الانحراف المعياري) مستوى نطاق المرجعية (86،3 حتي 193 جزء في المليون؛ الهندسي متوسط ​​= 129 جزء في المليون)، كما تقدر نقص الزنك. ويقدر معدل الإصابة من نقص الزنك في الفئات العمرية من العمر سنة 0-3، 4-9 و10-15 43.5، 28.1 و 3.3٪ في الذكور و 52.5، 28.7 و 3.5٪ بين الإناث، على التوالي (الجدول 1) ولوحظ وجود ارتباط كبير من تركيز الزنك مع التقدم في العمر (ص = 0.367، P <0.0001) (الشكل 2)، مشيرا إلى أن الأطفال الرضع أكثر عرضة لنقص الزنك من الأطفال الأكبر. تركيز الزنك الحد الأدنى من 10.7 جزء في المليون في الكشف عن صبي يبلغ من العمر 2-يتفق مع حوالي 1/12 من المستوى المرجعي نفسه. وكان تركيز الزنك واحد فقط موضوع الإناث 0 عاما 173 جزء في المليون من المعدل الطبيعي (الشكل 2)، ويبدو أن يكون المشتبه به، لأنها كانت تعاني من أعباء عالية من الألومنيوم (52.5 جزء في المليون) والرصاص (9.1 جزء في المليون)، الحديد (12.8 جزء في المليون) والنحاس (134 جزء في المليون). لم يكن هناك فرق كبير بين الجنسين في تركيز الزنك الشعر ومعدل الإصابة من نقص الزنك.
الشكل 1: رسم بياني للتركيز الزنك لوغاريتمي في الأطفال المصابين بالتوحد (N = 1967).
ويظهر الرسم البياني تركيزات الزنك شعر فروة الرأس للأطفال 1967 (1553 ذكور و 414 إناث) الذين تتراوح أعمارهم بين 0-15 عاما في اللوغاريتم. الأرقام في الإحداثي تشير إلى وغاريتمات تركيزات الزنك شعر فروة الرأس (نانوغرام -1: جزء في البليون). ارتفاع كل مستطيل يمثل تردد في الفترة الفاصلة فئة في لوغاريتمي مستوى الزنك الشعر. اثنين من خطوط عمودية المنقطة تمثل ± 2 مستويات SD من مجموعة مرجعية من تركيزات الزنك الشعر.

الصورة بالحجم الكامل

الجدول 1: معدل حدوث نقص الزنك والحد الأدنى في الأطفال الذين يعانون من التوحد. وطرحت معدل عدد وقوع الأفراد مع الزنك نقص (أقل من -2 SD) في 1967 أطفال التوحد (1553 ذكور و 414 إناث) وتركيز الزنك الحد الأدنى في كل فئة عمرية
الشكل 2: علاقة تركيز الزنك لوغاريتمي مع التقدم في السن لدى الأطفال المصابين بالتوحد.
يظهر جمعية الشعر لوغاريتمي تركيز الزنك مع التقدم في السن لدى الأطفال الذين يعانون من التوحد (N = 1967). كل نقطة تمثل عمر المقابلة وتركيز الزنك لوغاريتمي للطفل على حدة. اثنين من خطوط أفقية المنقطة تمثل ± 2 مستويات SD للمجموعة المرجعية (86،3 حتي 193 جزء في المليون) من تركيزات الزنك الشعر. ويرد علاقة ذات دلالة تركيز الزنك مع التقدم في العمر (ص = 0.367، P <0.0001) في الأطفال الذين يعانون من التوحد.

الصورة بالحجم الكامل

وبعد أن نقص الزنك، لوحظ نقص المغنيسيوم والكالسيوم في 347 (17.6٪) و 114 (5.8٪) من الأفراد في الأطفال الذين يعانون من التوحد (الجدول 2)، والمعادن الأساسية الأخرى مثل الحديد والكروم والمنجنيز والنحاس والكوبالت ، وكانت معدلات الإصابة بها من نقص 2.0٪ أو أقل. كان معدل حدوث نقص المغنيسيوم في الفئات العمرية من العمر سنة 0-3، 4-9 و10-15 27.0، 17.1 و 4.2٪ في الذكور و 22.9، 12.7 و 4.3٪ في موضوعات الإناث على التوالي (الجدول 3) ، ولوحظ وجود ارتباط كبير من تركيز المغنيسيوم مع التقدم في العمر (ص = 0.362، P <0.0001) (الشكل 3)، مما يوحي بأن الاطفال هم أيضا عرضة لنقص المغنيسيوم من الأطفال الأكبر. تركيز المغنيسيوم الحد الأدنى من 3.88 جزء في المليون في الكشف عن فتاة تبلغ من العمر 2-يتفق تقريبا 1/10 من المستوى المرجعي المتوسط ​​(39.5 جزء في المليون). لوحظ نقص الكالسيوم فقط في أقل الفئات العمرية البالغ من العمر أقل من 10 (جدول 4).
الجدول 2: معدل حدوث نقص المعادن في الأطفال الذين يعانون من التوحد. وطرحت معدل عدد وقوع الأفراد مع نقص المعادن (أقل من -2 SD) في 1967 أطفال التوحد (1553 ذكور و 414 إناث)
الجدول 3: معدل حدوث نقص المغنيسيوم والحد الأدنى في الأطفال الذين يعانون من التوحد. وطرحت معدل عدد وقوع الأفراد يعانون من نقص المغنيسيوم (أقل من -2 SD) في 1967 أطفال التوحد (1553 ذكور و 414 إناث) وتركيز المغنيسيوم الحد الأدنى في كل فئة عمرية
الرقم 3: علاقة تركيز المغنيسيوم لوغاريتمي مع التقدم في السن لدى الأطفال المصابين بالتوحد.
يظهر جمعية الشعر لوغاريتمي تركيز المغنيسيوم مع التقدم في السن لدى الأطفال الذين يعانون من التوحد (N = 1967). كل نقطة تمثل عمر المقابلة وتركيز المغنيسيوم لوغاريتمي للطفل على حدة. خطوط أفقية المنقطة تمثل ± 2 مستويات SD للمجموعة المرجعية (9،6 حتي 163 جزء في المليون) من تركيزات المغنيسيوم الشعر. ويرد علاقة ذات دلالة تركيز المغنيسيوم مع التقدم في العمر (ص = 0.362، P <0.0001) في الأطفال الذين يعانون من التوحد.

الصورة بالحجم الكامل

الجدول 4: نسبة حدوث نقص الكالسيوم ومستوى الحد الأدنى في الأطفال الذين يعانون من التوحد. وطرحت معدل عدد وقوع الأفراد يعانون من نقص الكالسيوم (أقل من -2 SD) في 1967 أطفال التوحد (1553 ذكور و 414 إناث) وتركيز الكالسيوم الحد الأدنى في كل فئة عمرية
في المقابل، لوحظ عبء المعادن السامة عالية من الألومنيوم، والكادميوم والرصاص أكثر من مستوى +2 SD في 339 (17.2٪) و 168 (8.5٪) و 94 (4.8٪) فردا، وكانت معدلات الإصابة بها أعلى من ذلك من الزئبق والزرنيخ (2.8 و 2.6٪ على التوالي) (الجدول 5). وكان تركيز القصوى الكشف من الألومنيوم، والكادميوم والرصاص 79.4 جزء في المليون في صبي يبلغ من العمر 4 سنوات، 5.47 جزء في المليون في صبي يبلغ من العمر 5 سنوات و 24.9 جزء في المليون في فتاة تبلغ من العمر 5 سنوات، على التوالي، الموافق 21- ، 782- و 57 أضعاف كل يعني المستوى المرجعي. كان مستوى العبء القصوى من الزئبق والزرنيخ 36.3 جزء في المليون و 1.7 جزء في المليون، على التوالي، أي ما يعادل حوالي 9- و 33 أضعاف من المستوى المرجعي نفسه.
الجدول 5: معدل الإصابة من عبء ارتفاع المعادن السامة والحد الأقصى في الأطفال الذين يعانون من التوحد. وطرحت معدل عدد وقوع الأفراد مع ارتفاع عبء السامة المعادن (أعلى من +2 SD) في 1967 أطفال التوحد (1553 ذكور و 414 إناث) والحد الأقصى للتركيز
الشكل 4 يوضح لمحة metallome التوحد نموذجي في صبي يبلغ من العمر 1-الذين يعانون من zinc- شديد ونقص المغنيسيوم والأعباء العالية في وقت واحد من الكادميوم والرصاص. وأظهرت آخر البيانات الشخصية metallome التوحد مع أعباء عالية من الألمنيوم والمنغنيز في صبي يبلغ من العمر 2 في الشكل. 5.
الرقم 4: نبذة Metallome من الأطفال المصابين بالتوحد مع الكادميوم عالية وأعباء الرصاص.
ويرد الشخصي metallome نموذجية من صبي يبلغ من العمر 1-تشخيص التوحد، واظهار zinc- شديد ونقص المغنيسيوم والأعباء العالية في وقت واحد مع الكادميوم (107 جزء في البليون) والرصاص (8.11 جزء في المليون). يمثل كل شريط التركيز النسبي للعنصر التتبع المعنية في بلده العينة شعر فروة الرأس. الخط الأفقي منقط عند 1.0 يمثل مستوى التحكم إشارة من كل العناصر النزرة.

الصورة بالحجم الكامل

الرقم 5: Metallome الملف الشخصى الأطفال المصابين بالتوحد مع الألومنيوم عالية وأعباء المنغنيز.
ويظهر آخر الشخصي metallome نموذجية من صبي يبلغ من العمر 2-تشخيص التوحد، واظهار أعباء عالية في وقت واحد مع الألومنيوم (55.9 جزء في المليون) والمنغنيز (926 جزء في البليون) والكادميوم (44 جزء في البليون). يمثل كل شريط التركيز النسبي للعنصر التتبع المعنية في بلده العينة شعر فروة الرأس. الخط الأفقي منقط عند 1.0 يمثل مستوى التحكم إشارة من كل العناصر النزرة.

الصورة بالحجم الكامل
مناقشة نقاش

الزنك هو عنصر اساسي أثر الذي يلعب دورا هاما في الحمض النووي / تخليق البروتين، وتكرار الخلية، نمو الأنسجة وإصلاحها، لا سيما النساء الحوامل والرضع. لذلك، ومن المعروف يرتبط نقص الزنك مع مختلف الحالات المرضية، بما في ذلك خلل الذوق، وتأخر التئام الجروح، ضعف المناعة، تأخر في النمو، والأمراض العصبية التنكسية 26، 27، 28، 29، 30.
ابلغنا مؤخرا أن العديد من الأطفال الذين يعانون من اضطرابات التوحد وعانى من الهامشية إلى نقص حاد الزنك، مما يشير إلى علاقة طويلة من نقص الزنك عند الأطفال المصابين بالتوحد 25. في هذه الدراسة، فقد قررنا تركيزات شعر فروة الرأس من 26 من العناصر النزرة عن 1967 المواضيع تشخيص اضطرابات طيف التوحد والتحقيق ارتباطهم اضطرابات المعدنية.
أظهر الرسم البياني للتركيز الزنك لوغاريتمي في الأطفال المصابين بالتوحد لمحة غير متماثل مع المخلفات ملحوظ في انخفاض المدى، مشيرا إلى أن نحو 30٪ من الأطفال المصابين بالتوحد قد قدرت على أنها نقص الزنك (الشكل 1). على وجه الخصوص، ما يقرب من نصف (الذكور: 43.5٪، الإناث: 52.5٪) تم العثور على مجموعة الأطفال الذين تتراوح أعمارهم من عمره 0-3 تعاني من هامشية إلى نقص الزنك الشديد (الجدول 1). وهكذا، وقد لوحظ أدنى متوسط ​​تركيز الزنك في مجموعة الأطفال الذين تتراوح أعمارهم بين البالغ من العمر 0-3 في كلا الجنسين (الذكور: 87 جزء في المليون، الإناث: 81 جزء في المليون)، ولوحظ وجود ارتباط كبير ارتفاع تركيز الزنك مع التقدم في السن في أطفال التوحد (الشكل 2). هذه النتائج تشير إلى أن الأطفال عرضة لنقص الزنك لأنها تحتاج إلى كمية أكبر من الزنك (لكل كجم من وزن الجسم) لتطوره ونموه. بالإضافة إلى ذلك، قد تكون مرتبطة التغيرات المرتبطة بالعمر في إنتاج البروتينات metallothionein والاختلافات في مستويات الجلوتاثيون مع الاختلافات المرتبطة بالعمر في متطلبات الزنك 31. كان هناك اختلاف بين الجنسين ضئيل في معدل نقص الزنك وأيضا في تركيز الزنك الشعر (الجدول 1).
بجانب نقص الزنك، تم العثور على عدد كبير من الأطفال الذين يعانون من التوحد لتكون ناقصة في المغنيسيوم والكالسيوم، ولم يلاحظ أي نقص كبير للالمعادن الأساسية الأخرى (الجدول 2). كان معدل حدوث نقص المغنيسيوم في الفئة العمرية من العمر سنة 0-3 و4-9 27.0 و 17.1٪ في الذكور، و 22.9 و 12.7٪ في موضوعات الإناث على التوالي، مما يشير إلى أن نحو ربع المجموعة الرضع هم يعاني من نقص في وقت واحد من الزنك والمغنيسيوم. مقارنة المغنيسيوم، لوحظ نقص كبير في الكالسيوم فقط في الفئات العمرية الدنيا (جدول 4). هذه النتائج تشير إلى أن الأطفال الذين يعانون من التوحد الطفولي يكون لها طابع عرضة للنقص في الزنك والمغنيسيوم.
هناك دراسات عديدة مع نفس الموضوع الإبلاغ عن الحالة التغذوية ونقص المعادن في الأطفال المصابين بالتوحد 32، 33، 34، 35، 36. ومع ذلك، كانت نتائج دراستهم، التي فحصت موضوع الفئة العمرية المقيد (يبلغ من العمر أكثر من 3 أو 5) وعدد من المعادن، لا تتفق، وظلت العوامل البيئية الحرجة التي ستنشأ. في هذه الدراسة تحليل metallomics ل1967 الأطفال المصابين بالتوحد الذين تتراوح أعمارهم بين 0-15 سنة من العمر، وكنا قادرين على إثبات وليس فقط عاملا حاسما جينية (نقص المغنيسيوم zinc- وو / أو أعباء عالية من الألومنيوم والكادميوم والرصاص)، ولكن أيضا وجود عامل آخر بالغ الأهمية، "نافذة الطفولي" في النمو العصبي والعلاج على الأرجح.
ارنولد وآخرون. 37 المبلغ عنها يعني مستويات الزنك في مصل الدم أقل من ذلك بكثير في كل من التوحد والجماعات ADHD، وهذا المستوى الزنك في مصل الدم يرتبط عكسيا مع غفلة الآباء والمعلمين ومصنفة لدى الأطفال ADHD. وعلاوة على ذلك، يقال إن العلاج الزنك وكانت متفوقة بشكل كبير مع الدواء الوهمي في الحد من أعراض فرط النشاط والاندفاع وضعاف التنشئة الاجتماعية في مرضى ADHD 38، 39. وأظهرت دراسات أخرى بشأن الإنسان الأولية أن العديد من الأطفال الذين يعانون من ADHD يكون أقل تركيز الزنك مقارنة بالأطفال الأصحاء وذلك تكملة الزنك كعامل مساعد لميثيل له آثار إيجابية في علاج الأطفال ADHD، مشيرا إلى ارتباط محتمل من نقص الزنك وADHD الفيزيولوجيا المرضية 40 .
Kozielec وآخرون. 41 قد ذكرت أنه في مفرط 116 الأطفال الذين يعانون من ADHD، تم العثور نقص المغنيسيوم في 95٪ من المبحوثين، في أغلب الأحيان في الشعر (77.6٪)، يليه في خلايا الدم الحمراء (58.6٪) ومصل الدم (33.6٪). وعلاوة على ذلك، فإنها ذكرت أن هناك انخفاضا كبيرا فرط النشاط وزيادة في محتويات المغنيسيوم الشعر قد تحقق في مجموعة من الأطفال ADHD مهلة ستة أشهر من مكملات المغنيسيوم 42. Mousain-BOSC وآخرون. 43 كما ذكرت أن 52 شديدة منفعل الأطفال لديهم مستويات منخفضة من المغنيسيوم داخل كرات الدم الحمراء مع القيم العادية المغنيسيوم في الدم والتي المغنيسيوم / فيتامين B6 مكملات يمكن استعادة مستويات المغنيسيوم كرات الدم الحمراء إلى وضعها الطبيعي وتحسين تصرفاتهم غير طبيعية. كما ذكرت أن ثلاثة وثلاثين الأطفال الذين يعانون من الأعراض السريرية للاضطراب النمو المتفشي أو التوحد (PDD) المعرض أقل بكثير القيم المغنيسيوم خلايا الدم الحمراء وأن الجمع بين العلاج مع المغنيسيوم / فيتامين B6 لمدة ستة أشهر تحسنت بشكل ملحوظ الأعراض PDD في 23/33 الأطفال ( ف <0.0001) مع ما يصاحب ذلك من زيادة في المغنيسيوم داخل كرات الدم الحمراء القيم 44.
هذه النتائج تتفق مع التدرج فرضية اضطراب شاملة لاضطرابات طيف التوحد وADHD 45 وتشير إلى أن نقص المعادن الطفولي في الزنك والمغنيسيوم يلعب الأدوار الرئيسية epigenetically عن العوامل البيئية في التسبب في هذه الاضطرابات النمو العصبي، مما يوحي بأن مكملات المعادن ناقصة خلال "نافذة الطفولي" حرجة قد تكون مفيدة لعلاج والوقاية من هذه الأمراض.
مؤخرا، تم الإبلاغ عن نقص الزنك الناجمة عن تقييد الغذائية ليصل تنظيم الأمعاء الزنك المستورد (ZIP4) وحمل الزيادة في البروتين ZIP4 تقع على غشاء البلازما من المعوية 46، 47. ويعرف هذا الرد بالتبني لنقص الزنك إلى الرصاص لزيادة في مخاطر ارتفاع الإقبال من المعادن السامة مثل الكادميوم والرصاص 48. وهكذا، الاطفال الذين يعانون من نقص الزنك عرضة لخطر متزايد من امتصاص كمية عالية من المعادن السامة والاحتفاظ بها في أجسامهم، كما هو مبين في الجدول رقم 5 والشكل. 4. وتشير هذه النتائج إلى أن زيادة الأعباء المعادن السامة يصاحب ذلك على نقص الزنك قد تسهم أيضا epigenetically إلى التسبب في هذه الأمراض.
تم الإبلاغ عن تدخين السجائر الأمهات أن تترافق مع انخفاض الزنك والكادميوم وأعلى تركيزات الرصاص في الأطفال حديثي الولادة من 49. خلال فترة الحمل والرضاعة، وهذه المعادن السامة المتراكمة في أنسجة العظام الأمهات شارك في نقلها مع الكالسيوم لهيئات الجنين وحديثي الولادة من خلال تنشيط العظام ارتشاف 49، 50، 51، 52.
إكلوند وOskarsson 53 ذكرت أن الصيغ القائمة على فول الصويا تحتوي على ما يقرب من ست مرات أكثر الكادميوم من صيغ حليب البقر والصيغ القائمة على الحبوب لديهم مستويات أعلى 4-21 مرات. وهكذا، فإن المدخول الغذائي من المعادن السامة في الأطفال يتغذون على حليب الأطفال وأغذية الفطام قد تكون مرتفعة بالمقارنة مع تغذية الرضع حليب الثدي.
على الزئبق والزرنيخ، ومستوى عبء الحد الأقصى ل9.3- و 33.5 أضعاف من المستوى المرجعي (جدول رقم 5 قد) أيضا أن تلعب epigenetically بعض الأدوار المسببة للأمراض في الأفراد المصابين بالتوحد منها، على الرغم من أن معدل حدوثها كان 2.8٪ أو أقل.
باختصار، توضح هذه الدراسة metallomics أن العديد من الأطفال المصابين بالتوحد قد عانت من الهامشية إلى zinc- شديد ونقص المغنيسيوم و / أو أعباء المعادن السامة عالية من الألومنيوم والكادميوم والرصاص وهلم جرا. وتشير هذه النتائج إلى أن نقص المعادن الطفلي و / أو أعباء المعادن السامة قد تلعب epigenetically الأدوار الرئيسية في التسبب في اضطرابات طيف التوحد وأن هناك فترة حرجة "نافذة الطفولي" في النمو العصبي والعلاج لها. وبالتالي، فمن الممكن ان الاطفال المصابين بالتوحد قد يستجيب لنهج التغذية المكمل المواد الغذائية ناقصة ويزيل السموم المعادن السامة المتراكمة على أساس الأدلة. هذا النهج القائم على الأدلة الغذائية قد تسفر عن مسار جديد في العلاج والوقاية من المرضى الذين يعانون من اضطرابات التوحد الطفولي بما في ذلك المشتبه بهم. والمطلوب دراسات التدخل تسيطر عليها بشكل جيد لهذا العلاج الغذائي رواية لإنشاء الأدوار جينية من أوجه القصور طفولية المعدنية و / أو أعباء المعادن السامة في التسبب في اضطرابات النمو العصبي مثل اضطرابات طيف التوحد وADHD.
في الختام، توضح هذه الدراسة الأولية أن العديد من المرضى الذين يعانون من مرض التوحد الطفولي تشخيص قد عانت من الهامشية إلى zinc- شديد ونقص المغنيسيوم و / أو أعباء المعادن السامة عالية من الألومنيوم والكادميوم والرصاص وهلم جرا، مما يوحي بأن هذه الاضطرابات المعدنية قد تلعب epigenetically الأدوار الرئيسية حيث العوامل البيئية في التسبب في اضطرابات طيف التوحد.
طرق طرق

العينات وتحليل العناصر النزرة

على أساس الموافقة المستنيرة، وعينات من شعر فروة الرأس من 1967 (الذكور: 1553؛ الإناث: 414) على الرغم من أن موضوع عاما 0 وموضوعات اليابانية التوحد الذين تتراوح أعمارهم بين 0-15 سنوات جمعت في الفترة من يونيو 2005 إلى سبتمبر 2007، واحد فقط (القديمة الشهر-11 إناث). وتتكون هذه المواد من الأطفال المصابين يعانون من اضطرابات طيف التوحد من قبل أطبائهم. وأوصى أخذ العينات الشعر لخفض أقرب إلى فروة الرأس من الناحية القفوية وقت ممكن.
كان وزن عينة الشعر من 75 ملغ إلى 50 مل أنبوب من البلاستيك، وغسلها مع الأسيتون ثم مع 0.01٪ تريتون الحل، على النحو الموصى به من قبل مجلس تحليل الشعر توحيد 54. كانت مختلطة عينة الشعر المغسول مع هيدروكسيد 10 مل 6.25٪ الأمونيوم رباعي الميثيل (TMAH، طما الكيميائية، كاوازاكي، اليابان) و 50 ميكرولتر 0.1٪ محلول الذهب (سبكس موثق الإعدادية، Metuchen، NJ، الولايات المتحدة الأمريكية)، ثم حلت في 75 درجة مئوية مع اهتزاز لمدة 2 ساعة. بعد التبريد الحل لدرجة حرارة الغرفة، ومعيار داخلي (سكانديوم، الغاليوم والإنديوم) وأضيف الحل، وبعد تعديل قياس الثقل النوعي حجمه، وقد استخدم الحل التي تم الحصول عليها لتحليل متعدد المعدنية.وقد تحددت تركيزات العناصر النزرة مع إضافة بالحث البلازما الطيفي (ICP-MS، 7500 م، اجيلنت تكنولوجيز، سانتا كلارا، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية) كما ذكرت سابقا 19، 20 والتعبير عن نانوغرام -1 الشعر (جزء في البليون) أو ميكروغرام ز -1 الشعر (جزء في المليون). وقد استخدم الشعر المواد المرجعية الإنسان المعتمدة (NIES CRM رقم 13) للتأكد من دقة التحليل. كان التفاوت بين اليومي من الزنك والمغنيسيوم والكالسيوم والألمنيوم والكادميوم والرصاص والزئبق والزرنيخ تقرير 2.2، 9.6، 6.3، 8.2، 6.9، 11.1، 9.4 و 6.9٪. تم الحصول على السيطرة الهندسية القيمة المتوسطة ومجموعة مرجعية لكل العناصر النزرة من البيانات عن 436 أشخاص أصحاء من الذكور الذين تتراوح أعمارهم بين 21-40 سنة من العمر، كما ذكرت سابقا 19، 20، 25.
وقد اعتمدت هذه الدراسة عن طريق مراجعة اللجنة الأخلاقية لابيل مختبر أبحاث نافس. تقام كافة البيانات التي تم الحصول عليها بشكل آمن في مثل هذا الشكل لضمان عدم الكشف عن هويته.


 

__________________
استشارى الادوية الطبيعيه وباحث وخبير فى علاجات التوحد
رد مع اقتباس
  #2  
قديم 11-04-2015, 08:04 PM
رافت ابراهيم رافت ابراهيم غير متواجد حالياً
عضو ذهبي
 
تاريخ التسجيل: Dec 2011
المشاركات: 520
افتراضي

 

  1. التحليل الاحصائي

    لأن كل أثر تركيز العنصر في الشعر فروة الرأس تم توزيع ما يقرب من تسجيل-عادة، تم تحويل تركيز المعادن لوغاريتم، وهندسية وليس الحسابي يستخدم ممثلا للتركيز شعره. تم فحص العلاقة بين العمر وتركيز الزنك / المغنيسيوم من الموضوعات التي اختبار معامل ارتباط بيرسون.

    تغيير التاريخ

    • تحديثه عبر الإنترنت 13 أغسطس 2013

      وقد تم نشر التصحيح ويتم إلحاق إلى كل من HTML و PDF الإصدارات من هذه الورقة. تم إصلاح الخطأ في ورقة.

    المراجع المراجع

    • 1.
      وينتروب، K. التهم التوحد. الطبيعة 479، 22-24 (2011).
  2. 2.
    بينتو، D. آخرون تأثير وظيفي من التباين العالمي في عدد النسخ النادرة في اضطرابات طيف التوحد. الطبيعة 466، 368-372 (2010).
  3. 3.
    تشاكرابارتي، S. & Fombonne، E. اضطرابات النمو المتفشي في الأطفال قبل سن المدرسة: تأكيد انتشار عالية. آم. J. الطب النفسي 162، 1133-1141 (2005).
  4. 4.
    هيوز، V. التوحد: اضطراب مجمع. الطبيعة 491، S2-S3 (2012).
  5. 5.
    بيلي، A. وآخرون توحد باعتباره اضطراب وراثي بقوة: أدلة من دراسة التوأم البريطانية. Psychol. ميد. 25، 63-77 (1995).
  6. 6.
    مارشال، CR آخرون الاختلاف الهيكلي من الكروموسومات في اضطرابات طيف التوحد. آم. J. هوم. جينيه. 82، 477-488 (2008).
  7. 7.
    Dufault، R. وآخرون. عطارد التعرض، ونقص التغذية واضطراب التمثيل الغذائي قد يؤثر على التعلم لدى الأطفال. Behav. الدماغ Funct. 5، 44-58 (2009).
  8. 8.
    O'Rahilly، S. علم الوراثة البشرية ينير دروب للأمراض التمثيل الغذائي. الطبيعة 462، 307-314 (2009).
  9. 9.
    جين، YH آخرون. الكادميوم هو المغير الذي يعمل عن طريق تثبيط إصلاح عدم تطابق. نات. جينيه. 34، 239-241 (2003).
  10. 10.
    Takiguchi، M.، Achanzar، WE، تشو، W.، لي، G. & Waalkes، MP تأثير الكادميوم على DNA- (السيتوزين-5) النشاط ناقلة الميثيل وDNA حالة مثيلة خلال التحول الخلوي الناجم عن الكادميوم. إكسب. خلية الدقة. 286، 355-365 (2003).
  11. 11.
    Arita، A. & كوستا، M. علم التخلق في التسرطن المعادن: النيكل والزرنيخ والكروم والكادميوم. Metallomics 1، 222-228 (2009).
  12. 12.
    بيريرا، F. & Herbstman، J. التعرض قبل الولادة البيئي، علم التخلق، والمرض. Reprod. Toxicol. 31، 363-373 (2011).
  13. 13.
    Jakovcevski، M. & Akbarian، S. آليات جينية في الأمراض العصبية. نات. ميد. 18، 1194-1204 (2012).
  14. 14.
    Rodushkin، I. وAxelsson، MD تطبيق مجال القطاع مع التركيز المزدوج ICP-MS لتوصيف عناصر متعددة من الشعر البشري والأظافر. الجزء الأول المنهجية التحليلية. الخيال العلمي. مجموع البيئى. 250، 83-100 (2000).
  15. 15.
    Goulle، JP. وآخرون المعادن وشيبه المعدن متعددة الابتدائية التحقق من صحة ICP-MS في الدم والبلازما والبول والشعر كله: المرجع القيم. Forens. الخيال العلمي. المتدرب. 153، 39-44 (2005).
  16. 16.
    وانغ، CT، تشانغ، WT، تسنغ، WF ولين، CH تركيزات الكالسيوم والنحاس والحديد والمغنيسيوم والبوتاسيوم والصوديوم والزنك في البالغين شعر أنثوية مختلفة مؤشرات كتلة الجسم في تايوان. كلين. علم. مختبر. ميد. 43، 389-393 (2005).
  17. 17.
    موناكاتا، M. وآخرون تحليل أولي من العناصر النزرة في شعر فروة الرأس من المرضى الذين يعانون من إعاقات حركية شديدة تلقي التغذية المعوية. الدماغ التنمية 28، 521-525 (2006).
  18. 18.
    ياسودا، H.، Yonashiro، T.، يوشيدا، K.، إيشي، T. & تسوتسوى T. الخلل المعدنية في الأطفال الذين يعانون من اضطرابات التوحد. بيوميد. احتياط تتبع إيليم. 16، 285-291 (2005).
  19. 19.
    ياسودا، H.، Yonashiro، T.، يوشيدا، K.، إيشي، T. & تسوتسوى T. العلاقة بين مؤشر كتلة الجسم والمعادن في البالغين الياباني الذكور. بيوميد. احتياط تتبع إيليم. 17، 316-321 (2006).
  20. 20.
    ياسودا، H. وآخرون دراسة Metallomics باستخدام تحليل الشعر المعدنية ومتعددة تحليل الانحدار اللوجستي: العلاقة بين السرطان والمعادن. البيئى. الصحة السابق. ميد. 14، 261-266 (2009).
  21. 21.
    اوشي، A. وآخرون. تركيزات عنصري في شعر فروة الرأس، والحالة التغذوية والجودة ذات الصلة بالصحة الحياة لدى المرضى غسيل الكلى. Therap. فصادة غسيل الكلى 16، 127-133 (2012).
  22. 22.
    ياسودا، H.، Yonashiro، T.، يوشيدا، K.، إيشي، T. & تسوتسوى T. مستويات عالية من المعادن السامة في فروة الرأس الشعر من الرضع والأطفال. بيوميد. احتياط تتبع إيليم. 16، 39-45 (2005).
  23. 23.
    ياسودا، H.، يوشيدا، K.، زقعوا، M.، توكودا، R.، ياسودا، Y. وتسوتسوى T. تراكم عالية من الألمنيوم في الشعر من الرضع والأطفال. بيوميد. احتياط تتبع إيليم. 19، 57-62 (2008).
  24. 24.
    ياسودا، H.، يوشيدا، K.، ياسودا، Y. وتسوتسوى T. اثنان المرتبطة بالعمر ملامح تراكم المعادن السامة. الوغد. الشيخوخة الخيال العلمي. 5، 105-111 (2012).
  25. 25.
    ياسودا، H.، يوشيدا، K.، ياسودا، Y. وتسوتسوى T. الطفولي نقص الزنك: جمعية يعانون من اضطرابات طيف التوحد. الخيال العلمي. النائب 1، 129؛ 10.1038 / srep00129 (2011).
  26. 26.
    براساد، AS أثر اكتشاف نقص الزنك البشرية على الصحة. J. صباحا. كول. نوتر. 28، 257-265 (2009).
  27. 27.
    أرنولد، LE & DiSilvestro، RA الزنك في اضطراب نقص الانتباه / فرط النشاط. J. Adolesc الطفل. Psychopharmacol. 15، 619-627 (2005).
  28. 28.
    DiGirolamo، AM وRaminez-زيا، M. دور الزنك في صحة الأم والنفسية للطفل. آم. J. كلين. نوتر. 89 (ملحق)، 940S-945S (2009).
  29. 29.
    Scheplyagina، LA تأثير نقص الزنك الأم على الحالة الصحية للمرأة والمواليد الجدد. J. تتبع إيليم. ميد. بيول. 19، 29-35 (2005).
  30. 30.
    البرقوق، LM، تزلج، L. & هاس، H. السم أساسي: تأثير الزنك على صحة الإنسان. متدرب. J. البيئى. احتياط الصحة العامة، 7، 1342-1365 (2010).
  31. 31.
    Dufault، R.، Lukiw، WJ، Crider، R.، Schnoll، R.، Wallinga، D. & DETH، R. A نهج macroepigenetic لتحديد العوامل المسؤولة عن هذا الوباء التوحد في الولايات المتحدة. كلين. علم التخلق 4، 6 (2012).
  32. 32.
    Yorbik، O.، أكاي، C.، Sayal، A.، Cansever، A.، Sohmen، T. & Cavdar، AO وضع الزنك لدى الأطفال الذين يعانون من التوحد. J. تتبع إيليم. إكسب. ميد. 17، 101-107 (2004).
  33. 33.
    فيدو، A. والسعد، S. العناصر النزرة السامة في شعر الأطفال المصابين بالتوحد. التوحد 9، 290-298 (2005).
  34. 34.
    آدامز، JB، هولواي، CE، جورج، F. & Quig، D. تحليلات من المعادن السامة والمعادن الأساسية في شعر الأطفال المصابين بالتوحد ولاية اريزونا والشروط ذات الصلة، وأمهاتهم. بيول. تتبع إيليم. احتياط 110، 193-209 (2006).
  35. 35.
    فابر، S.، زين، GM، كيرن، JC & كينغستون، HM الزنك بلازما / نسبة النحاس في المصل والعلامات البيولوجية في الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد. المؤشرات الحيوية 14، 171-180 (2009).
  36. 36.
    لاكشمي بريا، MD & غيثا، A. مستوى من العناصر النزرة (النحاس والزنك والمغنيسيوم والسيلينيوم) والعناصر السامة (الرصاص والزئبق) في الشعر والأظافر من الأطفال الذين يعانون من التوحد. بيول. تتبع إيليم. احتياط 142، 148-158 (2011).
  37. 37.
    أرنولد، LE آخرون يرتبط مصل الزنك مع الآباء واملعلمني وتصنيف الغفلة في الأطفال الذين يعانون من نقص الانتباه / فرط النشاط. J. Adoles الطفل. Psychopharmacol. 15، 628-636 (2005).
  38. 38.
    Yorbik، O.، Ozdag، MF، اولجون، A.، سينول، MG، بك، S. واكمان، S. الآثار المحتملة من الزنك على معالجة المعلومات في الأولاد الذين يعانون من اضطراب نقص الانتباه والنشاط المفرط. Progr. Neuropsychopharmacol. بيول. الطب النفسي 32، 662-667 (2008).
  39. 39.
    DiGirolamo، AM آخرون محاكمة عشوائية من تأثير مكملات الزنك على الصحة النفسية للأطفال في سن المدرسة في غواتيمالا. آم. J. كلين. نوتر. 92، 1241-1250 (2010).
  40. 40.
    Akhondzadeh، S.، محمدي، MR & خادمي، M. كبريتات الزنك كعامل مساعد لالميثيلفينيديت لعلاج نقص الانتباه وفرط الحركة لدى الأطفال: تجربة مزدوجة العمياء والعشوائية [ISRCTN64132371]. BMC للطب النفسي، 4، 9-14 ( 2004).
  41. 41.
    Kozielec، T. & Starobrat-هيرميلين، B. تقييم مستويات المغنيسيوم في الأطفال الذين يعانون من اضطراب نقص الانتباه وفرط الحركة (ADHD). ماغنس. احتياط 10، 143-148 (1997).
  42. 42.
    Starobrat-هيرميلين، B. & Kozielec، T. آثار مكملات المغنيسيوم الفسيولوجية على فرط النشاط عند الأطفال الذين يعانون من اضطراب نقص الانتباه وفرط النشاط (ADHD). ردا إيجابيا على المغنيسيوم عن طريق الفم اختبار تحميل. ماغنس. احتياط 10، 149-156 (1997).
http://www.nature.com/articles/srep0...P-631-20130301

 

__________________
استشارى الادوية الطبيعيه وباحث وخبير فى علاجات التوحد
رد مع اقتباس
  #3  
قديم 11-04-2015, 09:21 PM
رافت ابراهيم رافت ابراهيم غير متواجد حالياً
عضو ذهبي
 
تاريخ التسجيل: Dec 2011
المشاركات: 520
افتراضي

 

https://translate.google.com.eg/tran...-th&edit-text=

http://www.pubfacts.com/detail/20625...-mercury-in-th
مستوى العناصر النزرة (النحاس والزنك والمغنيسيوم والسيلينيوم) والعناصر السامة (الرصاص والزئبق) في الشعر والأظافر من الأطفال الذين يعانون من التوحد.

بيول تتبع إيليم الدقة
بيول تتبع إيليم الدقة 2011 أغسطس 13، 142 (2): 148-58. النشر الإلكتروني 2010 13 يوليو.
Malarveni داموداران لاكشمي بريا، أروموغام غيثا
تحميل ورقة كاملة

التوحد هو علم الأمراض متعدد مضروب لوحظ في الأطفال الذين يعانون من مستويات غيرت من المستويات الأساسية ومرتفعة من العناصر السامة. وهناك دراسات أيضا الإبلاغ عن انخفاض في العناصر النزرة الغذائية في الشعر والأظافر من الأطفال المصابين بالتوحد مع الاصحاء. علاوة على ذلك، وقد ثبت bioelements للعب دورا هاما في الجهاز العصبي المركزي. ولذلك، كان الغرض من هذه الدراسة لتقييم مستويات العناصر النزرة مثل النحاس (النحاس) والزنك (الزنك)، الماغنسيوم، والسيلينيوم (سي) والعناصر السامة مثل الزئبق (زئبق)، والرصاص (الرصاص ) في الشعر والأظافر عينات من الأطفال المصابين بالتوحد، وتقييم ما إذا كان مستوى هذه العناصر يمكن أن يرتبط مع شدة مرض التوحد. وكانت عينة الدراسة 45 طفلا يعانون من التوحد مع درجات مختلفة من الشدة (منخفض (LFA) ومتوسطة (MFA)، وارتفاع (الصحة للجميع) يعمل التوحد) وفقا لالطفولة التوحد مقياس التصنيف، ن = 15 طفلا في كل مجموعة و 50 صحي الأطفال (العمر والجنس متطابق). وكان الفتيان والفتيات نسبة المشاركين في هذه الدراسة 4: 1، وكانوا 4-12 سنة من العمر. ولاحظت الدراسة مؤشرا صالحا من عبء الجسم النحاس في الأطفال الذين يعانون من التوحد. أظهر الأطفال الذين يعانون من درجات مختلفة من التوحد أهمية عالية (P <0.001) في مستوى النحاس في عينات الشعر والأظافر بهم بالمقارنة مع الاصحاء. يمكن أن يرتبط مستوى النحاس في الأطفال المصابين بالتوحد مع درجة من شدة (أكثر من عبء النحاس الشديد هو مرض التوحد). وأظهرت الدراسة وجود ارتفاع معنوي (p <0.001) في مستويات المعادن السامة والرصاص والزئبق في كل من الشعر والأظافر عينات من الأطفال المصابين بالتوحد بالمقارنة مع مجموعة المراقبة الصحية. أعلنت والارتفاع كثيرا في موضوعات مجموعة LFA مقارنة بين المجموعات التوحد MFA وإطار عمل هيوغو. مستويات العناصر النزرة المغنيسيوم والسيلينيوم وانخفض معنويا (P <0.001) في الأطفال المصابين بالتوحد بالمقارنة مع السيطرة. أظهر العناصر النزرة الزنك تفاوت كبير في كل من الشعر والأظافر للأطفال مجموعة LFA مقارنة بالمجموعة الضابطة ومجموعات الدراسة الأخرى. لوحظ ارتفاع كبير في تركيز النحاس، والرصاص، والزئبق، وانخفاض كبير في تركيز المغنيسيوم والسيلينيوم في الشعر والأظافر عينات من الموضوعات التوحد يمكن أن تكون مرتبطة بشكل جيد مع شهاداتهم من الشدة.

الانتماء

قسم الكيمياء الحيوية، كلية Bharathi، وتشيناي، 600 108 تاميل نادو، الهند.

 

__________________
استشارى الادوية الطبيعيه وباحث وخبير فى علاجات التوحد
رد مع اقتباس
  #4  
قديم 11-04-2015, 09:34 PM
رافت ابراهيم رافت ابراهيم غير متواجد حالياً
عضو ذهبي
 
تاريخ التسجيل: Dec 2011
المشاركات: 520
افتراضي آثار عوارض معدنية تتبع المميزة للتوحد على نقاط الاشتباك العصبي في الخلايا العصبية

 

http://www.hindawi.com/journals/np/2015/985083/

سيمون Hagmeyer، 1 كاتارينا Mangus (1)، توبياس M. Boeckers و 2 و أندرياس M. Grabrucker1،2

تحليل 1WG الجزيئية من Synaptopathies، قسم علم الأعصاب، Neurocenter من جامعة أولم، 89081 أولم، ألمانيا
2Institute عن التشريح وبيولوجيا الخلية، جامعة أولم، 89081 أولم، ألمانيا

تلقت 9 ديسمبر 2014؛ المنقحة 19 يناير 2015؛ قبلت 19 يناير 2015



وكشفت دراسات مختلفة حديثة أن dyshomeostasis biometal يلعب دورا حاسما في التسبب في اضطرابات عصبية مثل اضطرابات طيف التوحد (ASD). أدلة قوية تشير إلى أن تعطل التوازن العصبية من ايونات المعادن المختلفة مثل الحديد والنحاس والرصاص والزئبق وسي، والزنك قد توسط الخلل متشابك ويضعف تشكيل المشبك والنضج. هنا، أجرينا الدراسات في المختبر التحقيق في الآثار المترتبة على وجود خلل في الفلزات الانتقالية على نقاط الاشتباك العصبي glutamatergic من الخلايا العصبية قرن آمون. قمنا بتحليل ما إذا كان الخلل في أي أيون الفلز واحد يغير أرقام صحة الخلية والمشبك. وعلاوة على ذلك، قمنا بتقييم ما إذا كانت سمة الشخصي biometal للمرضى ASD تؤثر تشكيل المشبك، والنضج، وتكوين بشأن NMDA مفارز مستقبلات والبروتينات شانك. نتائجنا تظهر أن ASD مثل الملف الشخصي biometal يؤدي إلى الحد من NMDAR (NR / ابتسامة / GluN) فرعية (1) و2A، وكذلك شانك التعبير الجيني جنبا إلى جنب مع الحد من كثافة المشبك. بالإضافة إلى ذلك، يتم تخفيض مستويات بروتين متشابك من GluN2a والسيقان. على الرغم من أن الزنك هو قادرة على انقاذ التعديلات المشار إليها أعلاه، ونقص الزنك ليست مسؤولة فقط كعامل المسببة. وبالتالي، فإننا نستنتج أن تحقيق التوازن بين مستويات الزنك في ASD قد يكون هدفا رئيسيا لتطبيع التعديلات متشابك الناجمة عن dyshomeostasis biometal.
1 المقدمة

اضطرابات طيف التوحد (ASD) هي مجموعة من الاضطرابات العصبية يعتبر حاليا في إظهار من خلل متشابك أو synaptopathy [1]. ولا سيما تشكيل المشبك و / أو متشابك نقل الإشارة واللدونة قد تتأثر على أساس الجينات المرشحة التي تم تحديدها من الدراسات الجينية على نطاق واسع. ومع ذلك، على الأرجح، تسهم العوامل البيئية إلى مسببات ASD [2].

تم الإبلاغ عن وجود ارتباط قوي بين الخلل في توازن المعادن النزرة وASD في العديد من الدراسات [3]. النتائج الأخيرة تشير إلى أن ملامح metallomic من المرضى ASD تظهر العديد من التعديلات. على سبيل المثال، لوحظت أوجه القصور لالزنك، الكالسيوم، الحديد، المغنيسيوم، المنغنيز، والسيلينيوم، وكذلك زيادة تركيزات للشركة، كما والكادميوم والزئبق، والرصاص في عينات شعر من المرضى الذين يعانون من التوحد [4، 5] وعبء وأظهرت معادن سامة في المرضى الذين يعانون علاقة مع شدة التوحد النمط الظاهري [6]. هذا السيناريو المعقد دفعتنا للتحقيق التفاعل وآثار dyshomeostasis من ايونات المعادن المختلفة والتغيرات المرضية الناتجة من نقاط الاشتباك العصبي.

في الماضي، وقد أجريت العديد من الدراسات للتحقيق في ضرورتها وسمية المعادن النزرة، وذلك باستخدام الخلايا في الثقافة [7-12]. وقد حددت هذه الدراسة مختلف المعادن النزرة تعتبر في الوقت الحاضر أمرا ضروريا (biometals)، محايدة أو السامة للالفقاريات. بطبيعة الحال، كما biometals يمكن أن تكون ضارة في تركيزات عالية. وهكذا، ويستند الفرق بين العناصر السامة والأساسية على نافذة ضيقة من تركيزات، حيث ينظر إلى الوظيفة الفسيولوجية للbiometals [13]. ومع ذلك، المعادن النزرة لا تعمل كيانات منفصلة التأثير على آليات أو pathomechanisms في الخلايا ولكن توجد في حالة توازن دقيق مدبرة [3]. لدراسة هذا التوازن الذي لا يشمل فقط biometals ولكن أيضا أيونات المعادن السامة يتعرض الكائن الحي ل، على المستوى الخلوي في المختبر، ولقد نفذت تجارب على ايونات المعادن مثل الألمنيوم (آل)، الكادميوم (الكادميوم) والنحاس (النحاس) والحديد (الحديد) والزئبق (زئبق)، الماغنسيوم، الرصاص (الرصاص) والسيلينيوم (سي)، والزنك (الزنك)، وذلك باستخدام الخلايا العصبية الحصين الابتدائية.

لاختبار آثار المصب من خلل في أي أيون الفلز واحد، والتي قد تؤدي إلى تأثير الدومينو وتنتج تغييرات في جميع ايونات المعادن الأخرى، ويصف التقرير آثار ايونات المعادن الثقيلة والتفاعل بين الكادميوم والنحاس والزئبق والرصاص ، سي، و آل مع الزنك في الخلايا المستزرعة. أولا، قمنا بتحليل تأثير الزائد معدنيه المعادن النزرة واحد على مختلف المعلمات متشابك عن طريق العلاج المزمن للفئران الابتدائي الثقافات العصبية مع كلوريدات. المقبل، ونحن مصممون تأثير الزائد معدن الكادميوم والنحاس والزئبق، والرصاص في تركيبة لأن هذه المعادن كثيرا ما وصفت مرتفعة في المرضى ASD. قمنا بتحليل أيضا عما إذا كان عدم وجود الزنك والحديد، وهي سمة مشتركة في المرضى الذين يعانون من التوحد، يعدل تأثير ارتفاع الكادميوم والنحاس والزئبق، ومستويات الرصاص. وأخيرا، فإننا التحقيق ما إذا كانت مكملات الزنك قادر على التغلب على العيوب متشابك الناجمة عن المعادن النزرة الشخصي مميزة للمرضى ASD.

2. المواد والطرق
2.1. المواد

تم شراؤها ZnCl2، CuCl2، CdCl2، FeCl2، SeCl4، AlCl3، MgCl2، HgCl2، وPbCl2 من سيغما الدريخ. تم شراؤها Zinpyr-1 من سيغما الدريخ. تم شراؤها الأجسام المضادة الأولية من سيغما الدريتش (MAP2، GluN1، وShank1 لWB)، متشابك الأنظمة (الباسون، Homer1b / ج، Shank3)، ميرك ميليبور (GluN2a وGluN2b)، ونوفوس البيولوجية (Shank1 لIF). وقد وصفت الأجسام المضادة Shank2 سابقا [14]. تم شراؤها الأجسام المضادة الثانوية اليكسا من تقنيات الحياة. ما لم يذكر خلاف ذلك، تم الحصول على جميع المواد الكيميائية الأخرى من سيغما الدريخ.
2.2. الحصين الثقافة من الدماغ الفئران

تم إجراء إعداد الثقافات قرن آمون في الأساس كما هو موضح من قبل [15] من الفئران (يوم الجنينية 18، ​​E18). بعد إعداد وكانت المصنفة الخلايا العصبية الحصين على بولي ل يسين (0.1 ملغ / مل؛ سيغما الدريتش) coverslips الزجاج في لوحة 24-جيدا في كثافة 3 × 104 خلية / جيدا أو 10 سم طبق بتري في كثافة 2.5-3 × 106 خلية / طبق. وقد نمت الخلايا في Neurobasal (NB) متوسطة (لايف تكنولوجيز)، تستكمل مع ملحق B27 (لايف تكنولوجيز)، و 0.5 مم L-الجلوتامين (لايف تكنولوجيز)، و 100 U / مل البنسلين / الستربتومايسين (لايف تكنولوجيز) وحافظت على 37 درجة C في 5٪ CO2. يشار Neurobasal المتوسطة مع كل من يكمل ثلاث باسم NB +++. أجريت جميع التجارب على الحيوانات في الامتثال للمبادئ التوجيهية من أجل رفاهية حيوانات التجارب التي تصدرها الحكومة الاتحادية في ألمانيا وقبل لجنة الأخلاق المحلية (جامعة أولم)، رقم: 0.103.
2.3. مناعية

لالمناعي، كانت ثابتة الثقافات الأولية مع بارافورمالدهيد 4٪ (PFA) /1.5٪ السكروز / PBS في 4 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة ومعالجتها لالمناعية. بعد غسل 2X 5 دقائق مع برنامج تلفزيوني 1X مع 0.2٪ تريتون X-100 في RT، تم تنفيذ حظر مع 10٪ FBS / برنامج تلفزيوني 1X لمدة 1 ساعة على RT، تليها الأجسام المضادة الأولية في RT لمدة 2 ساعة. بعد 3X 5 دقائق غسل خطوة مع برنامج تلفزيوني 1X، الحضانة مع الضد الثاني إلى جانب Alexa488، تليها Alexa568، أو Alexa647 لمدة 1 ساعة على RT. تم غسلها الخلايا مرة أخرى في برنامج تلفزيوني 1X لمدة 10 دقيقة و counterstained مع دابي وغسلها لمدة 5 دقائق مع أكوا bidest والتي شنت مع Vecta جبل.
2.4. علاج الخلايا الحصين

تم علاج الخلايا لمدة 4 أيام مع ZnCl2 (10-200 ميكرون)، CuCl2 (10-200 ميكرون)، CdCl2 (1-10 ميكرون)، AlCl3 (10-500 ميكرون)، HgCl2 (1-10 ميكرون)، MgCl2 (10 -200 ميكرون)، PbCl2 (10-500 ميكرون)، SeCl4 (1-10 ميكرون) وFeCl2 (10-400 ميكرون)، أو ZnCl2 (50 ميكرومتر) وCuCl2 (120 ميكرومتر) مجموعات، ZnCl2 (50 ميكرومتر) وCdCl2 (5 ميكرومتر) مجموعات، ZnCl2 (50 ميكرومتر) وHgCl2 (5 ميكرومتر) مجموعات، ZnCl2 (50 ميكرومتر) وPbCl2 (5 ميكرومتر) مجموعات، أو ZnCl2 (50 ميكرومتر) وSeCl4 (6 ميكرومتر) مجموعات.

ولدت المعدنية نقص المتوسطة Neurobasal (لايف تكنولوجيز) باستخدام Chelex 100 الراتنج، 200-400 الجافة حجم فتحات الشباك، شكل الصوديوم (BioRad). وقد استخدم Chelex 100 الراتنج وفقا لتعليمات الشركة الصانعة (طريقة دفعة) والرقم الهيدروجيني للمتوسطة إعادة ضبطها باستخدام حمض الهيدروكلوريك. بالإضافة إلى ذلك، في بعض الظروف، تم إعادة تأسيس تركيزات المعادن الأصلية لبعض أو كل المعادن بالكلاب وفقا لNeurobasal المتوسطة (1X) صياغة وسائل الإعلام السائلة باستخدام CaCl2، الحديد (NO3) 3 * 9H2O، MgCl2، وZnSO4 * 7H2O. وتمت السيطرة على فعالية عملية إزالة معدن ثقيل من المعادن ثنائي التكافؤ التي كتبها إضافة بالحث البلازما الطيفي (ICP-MS) (الجدول 1).
الجدول 1: استنفاد الأيونات ثنائية التكافؤ المعدنية بنسبة 100 Chelex تنقية وسائط النمو. Chelex الراتنج مخلبية التبادل الأيوني لديه تفضيل عالية على النحاس، والحديد، والزنك، وغيرها من المعادن الثقيلة ثنائي التكافؤ على الكاتيونات الأحادية التكافؤ مثل الصوديوم والبوتاسيوم مع الانتقائية للثنائي التكافؤ على الأيونات أحادية التكافؤ من حوالي 5000 إلى 1. للسيطرة على فعالية أيون عملية إزالة معدن ثقيل، وقد تم قياس تركيز الزنك من Neurobasal المتوسطة التي كتبها ICP-MS، قبل وبعد تطبيق Chelex. بالإضافة إلى ذلك، تم تدعيم وسط النمو مع 50 ميكرومتر ZnCl2 وتعرض بعد ذلك إلى استنزاف المعادن. في كلتا الحالتين، انخفضت مستويات الزنك أقل من الحد الكشف بعد تنقية وسائل الإعلام عن طريق العلاج Chelex.
2.5. قياس تركيزات المعادن النزرة

وقد تم قياس تركيز المعادن النزرة من وسائط النمو التي كتبها ICP-MS في "Spurenanalytisches ابوراتوريوم الدكتور باومان" (Maxhütte-Haidhof، ألمانيا).

لالفلورسنت الزنك، تلطيخ الخلايا العصبية مثقف، تم تجاهل النمو المتوسطة وتم غسلها الخلايا ثلاث مرات مع برنامج تلفزيوني. حضنت Coverslips بمحلول مكون من 5 ميكرومتر Zinpyr1 في برنامج تلفزيوني لمدة 1 ساعة عند RT.
2.6. الكيمياء الحيوية البروتين
2.6.1. تجزئة البروتين

للحصول الكسور P2 من الثقافات الحصين، تم حصاد DIV 14 الخلايا المعرضة لمركبات مختلفة من الفائدة للمرة المشار إليها والمتجانس في المخزن التجانس (320 ملي السكروز، 10 ملي HEPES، ودرجة الحموضة 7.4) التي تحتوي على خليط مثبط البروتياز (روش). تم إزالة الحطام الخلية ونوى بواسطة الطرد المركزي عند 3200 دورة في الدقيقة لمدة 15 دقيقة مما أدى إلى S1 طاف (جزء قابل للذوبان) وبيليه P1 (غشاء المرتبطة جزء). تم طرد Supernatants (S1) لمدة 20 دقيقة في 11200 دورة في الدقيقة، مما أدى إلى S2 (جزء قابل للذوبان) وP2 (synaptosomal جزء الخام). كان معلق الناتجة بيليه P2 العازلة في تجانس لأداء برادفورد وتحليلها بواسطة النشاف الغربي.
2.6.2. التنشيف الغربي

تم فصل البروتينات بواسطة SDS-PAGE ونشف على الأغشية النيتروسليلوز. وتصور مناعية باستخدام الأجسام المضادة الثانوية HRP مترافق ونظام الكشف عن SuperSignal (بيرس، المرتفعات، والولايات المتحدة الأمريكية).
2.7. QRT PCR

أجريت التوليف حبلا الأول والكمي في الوقت الحقيقي-PCR التضخيم في خطوة واحدة، شكل أنبوب واحد باستخدام مجموعة QuantiFastTM SYBR_Green RT-PCR من QIAGEN وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة في إجمالي حجم 20 ميكرولتر وجين معين QuantiTect التمهيدي المقايسات (QIAGEN). أجريت الدراجات الحرارية والكشف الفلوري باستخدام الدوار الجينات Q الوقت الحقيقي PCR آلة (نموذج 2-بلكس HRM) (QIAGEN). تم قياس SYBR الأخضر I إشارة مراسل الصبغة. وقد تم تحليل البيانات الناتجة باستخدام الجينات HMBS كمعيار داخلي لتطبيع مستويات النص. تم تشغيل كل الوقت الحقيقي تفاعلات PCR الكمي في يثلث التقنية.
2.8. إحصائية
2.8.1. قياس المشبك

تم تنفيذ الاستحواذ وتقييم جميع الصور في ظل ظروف "أعمى". للتجارب زراعة الخلايا تم تصوير 10 خلايا لكل حالة. وقد تم الحصول على الصور مضان باستخدام المجهر تستقيم Axioscope مزودة بكاميرا زايس CCD (16 بت، 1280 × 1024 نقطة في البوصة) باستخدام Axiovision برنامج (زايس) ويماغيج 1.49i. تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام Microsoft Excel لماكنتوش واختبار لأهمية استخدام اختبارات (تم توزيع جميع القيم عادة).
2.8.2. البقعة الغربية الكمي

تم إجراء تقييم العصابات من البقع الغربية (هيكل تجزئة العمل) باستخدام يماغيج. أجريت ثلاث تجارب مستقلة وتصوير البقع باستخدام نظام التصوير MicroChemi من Biostep. وقد تم اختيار الفرق الفردية وتم قياس كثافة متكاملة. وتم تطبيع جميع نطاقات البنك الدولي لبيتا-III-تويولين أو بيتا الأكتين وبلغ متوسط ​​نسب واختبارها لأهمية مع مستوى الدلالة التي حددت في 0.05 (<0.05 *؛ <0.01 **؛ <0.001 ***).
2.8.3. QRT PCR الكمي

ويستند تقدير نسبي على الجينات المرجعية الداخلية لتحديد مستويات مرنا افتراضية من الجينات المستهدفة. حسبت دورة عتبة (CT) القيم من قبل الدوار الجينات Q البرمجيات (نسخة 2.0.2). تم تحويل القيم ط م إلى مستويات مرنا الظاهري وفقا للمعادلة: مستوى مرنا الظاهري = 10 * (/ المنحدر من منحنى قياسي).
3. النتائج

في دراستنا السابقة [3]، وذكرت لنا ملامح biometal مميزة في الاضطرابات العصبية. في ASD، ومن المعروف أن العديد من المعادن النزرة أن يكون قد استنفذ أو أن تحدث في الزائدة (الجدول 2). لذلك، لفهم عواقب كل هذه التعديلات في المعادن النزرة لنقاط الاشتباك العصبي، في أول مجموعة من التجارب، ونحن تهدف إلى تحليل لأول مرة تأثير كل المعادن النزرة على صحة أرقام الخلية والمشبك بشكل منفصل (أرقام S1A وباء في التكميلية المواد المتاحة الانترنت في http://dx.doi.org/10.1155/2015/985083 والشكل 1). تحقيقا لهذه الغاية، كنا نعامل ومزارع الخلايا العصبية قرن آمون بين DIV 10 و 14 DIV مع تركيزات مختلفة من المعادن النزرة القاعدة، الكادميوم، النحاس، الحديد والزئبق، والمغنيسيوم، والرصاص، سي، والزنك. كما هو متوقع، تم العثور على علاقة خطية بين مستويات المعادن وكمية من موت الخلايا، وخاصة بالنسبة الكادميوم، والنحاس، والزنك (الشكلان 1 (أ) و 1 (ب)). ومع ذلك، ليست كل المعادن عرض هذا الارتباط. لم نتمكن من الكشف عن موت الخلايا كبيرا على طيف واسع من تركيزات للشركة، الحديد، والرصاص. بالإضافة إلى ذلك، لالزئبق والسيلينيوم، وقد لوحظ زيادة هائلة في موت الخلايا وراء تركيز معين. تعرض الخلايا لزيادة المغنيسيوم بقاء الخلية في نطاق تركيز منخفض ومع تركيزات أعلى مما يؤدي إلى موت الخلايا (الشكلان 1 (أ) و 1 (ب)). وقد استخدم العلاج مع مانيتول لاستبعاد تأثير الضغط الاسموزي على صحة الخلية (الشكل S1C). وبناء على العلاقة بين صحة الخلية وتركيز المعادن النزرة معين التطبيقية، حسبت تركيزات LD50 لكل معدن (الشكل S1D). وكانت الخلايا الدبقية التي كانت موجودة إلى أدنى حد في الثقافات العصبية أكثر مقاومة للتغيرات في تركيزات المعادن النزرة ولم تظهر أي علامات على موت الخلايا في نطاق تركيز السامة للخلايا العصبية ينظر (الشكل S1E).
الجدول 2: البيانات الشخصية Biometal ينظر في كثير من المرضى ASD [3] المستمدة من قياسات عينات الشعر والدم.
الشكل 1: لمحات سمية العناصر النزرة في زراعة الخلايا العصبية الحصين الابتدائية. ((أ) و (ب)) ويحسب مبلغ موت الخلايا باستخدام تركيزات مختلفة لكل المعادن النزرة من خلال تقييم عدد من نوى أفكارك العصبية (التي حددتها MAP2 وتلطيخ دابي) في حقل الضوئية (من 5 حقول النظر والثقافات ) تطبيع مقابل العدد الإجمالي للخلايا العصبية في المجال البصري. تظهر النتائج أي تغييرات في صحة الخلايا تغطي نطاقا واسعا من تركيزات للشركة، الحديد، والرصاص، وجود علاقة خطية بين مستوى المعادن وموت الخلايا لالكادميوم، والنحاس، والزنك. قد توجد هناك علاقة خطية أيضا عن الزئبق والسيلينيوم على الرغم من زيادة هائلة في موت الخلايا وراء تركيز معين هو أكثر احتمالا. إضافة المغنيسيوم زادت بقاء الخلية في نطاق تركيز منخفض ومع تركيزات أعلى مما يؤدي إلى موت الخلية (أ). (ب) عن طريق -tests، حسبت القيم لتقييم، ما إذا كانت التغييرات بين تركيزات مختلفة مقارنة مع الخلايا السيطرة غير المعالجة هي كبيرة. (ج) كبديل للقراءة بها، والتحقيق في عدد من التشعبات الابتدائي والثانوي، والتعليم العالي. كانت ملطخة الخلايا مع MAP2 الأجسام المضادة. كما علامات موت الخلايا، تظهر الخلايا العصبية تجزئة (معسر إيقاف) التشعبات، بدءا من الفروع البعيدة أكثر من سوما. ولم يحتسب التشعبات التي تظهر عليها علامات التجزئة. تركيزات عالية من المعادن التي عرضت أن تؤدي إلى موت الخلايا ((أ) و (ب)) تؤدي إلى انخفاض في شجيري المتفرعة بدءا من التشعبات التعليم العالي والتي تؤثر الثانوية والابتدائية في الحالات الأكثر سمية أيضا. وعلى الرغم من بعض المعادن، واعتبر أي موت الخلايا كبيرا في تركيز معين، وبالفعل تفتيت التشعبات مرئيا (على سبيل المثال، 5 ميكرومتر زئبق). مغ والزنك تظهر زيادة كبيرة في شجيري المتفرعة يقتصر على التشعبات العالي في مجموعة تركيز أقل. (د) لتقييم ما إذا كانت بعض العناصر النزرة عرض تأثير synaptogenic، وصفت نقاط الاشتباك العصبي باستخدام الباسون مضان وعدد الباسون نقاط وإيجابية تم قياس في 10 ميكرون طول التغصنات على التشعبات الأولية (3 التشعبات في الخلايا، 10 الخلايا في المجموع في المعادن و التركيز). بينما عدد المشبك وانخفضت ربط مع التأثيرات السامة لمعظم ايونات المعادن، مثل الكادميوم، والنحاس، والسيلينيوم، وزيادة في عدد المشبك يمكن أن ينظر إليه على الحديد وتركيزات أقل من المغنيسيوم والزنك (ينظر اليه على انه الاتجاه). ((أ) - (د)) تم علاج جميع الخلايا مع المعادن بين DIV 10 و 14 DIV قبل التحليل.


وعلاوة على ذلك، تم التحقيق في عدد من التشعبات الابتدائي والثانوي، والتعليم العالي من الخلايا العصبية بعد العلاج. وبالنظر إلى أن الخلايا العصبية تظهر تفتيت التشعبات، بدءا من الفروع البعيدة أكثر من سوما كما أول علامة على صحة الخلايا المتضررة، انخفاضا في المتفرعة شجيري قد تكشف الخلايا التي لم تظهر نوى أفكارك حتى الآن تعاني بالفعل من التعرض للالمعادن النزرة. وعلى غرار النتائج المبينة أعلاه، أدت تركيزات عالية من المعادن التي عرضت أن تؤدي إلى موت الخلايا في الحد من شجيري المتفرعة بدءا من التشعبات التعليم العالي والتي تؤثر الثانوية والابتدائية في الحالات الأكثر سمية (الشكل 1 (ج)) أيضا. في الواقع، على الرغم من بعض المعادن، واعتبر أي موت الخلايا كبيرا في بعض تجمعات، إذا كنت تفتيت التشعبات مرئيا. ومن المثير للاهتمام، مكملات المغنيسيوم والزنك في تركيز منخفض يؤدي إلى زيادة كبيرة في شجيري المتفرعة يقتصر على التشعبات العالي (الشكل 1 (ج)).

فقدان نقاط الاشتباك العصبي هو عامل المصاحب من التنكس العصبي. لذلك، من المتوقع أن ترتبط الآثار السامة من المعادن النزرة وموت الخلايا مما يؤدي إلى انخفاض في عدد المشبك. والواقع أن القياس الكمي للكثافة المشبك في الخلايا العصبية المعالجة ومقارنة مع الخلايا السيطرة غير المعالجة يبين وجود علاقة من التأثيرات السامة وفقدان المشبك لايونات المعادن، مثل الكادميوم، والنحاس، والسيلينيوم (الشكل 1 (د)، الشكل S1F). ومع ذلك، يمكن أن ينظر إلى زيادة في عدد المشبك عن الحديد وتركيزات أقل من المغنيسيوم والزنك (الشكل 1 (د)، الشكل S1F).

منذ ذلك الحين، لبعض ايونات المعادن، يمكن أن نحدد لها تأثير على نقاط الاشتباك العصبي مستقلة ذات سمية الخلوية المحتملة (الشكل 2)، ودور هذه المعادن في تشكيل المشبك و / أو الاستقرار يحتمل. على سبيل المثال، يظهر المغنيسيوم إلا علاقة ضعيفة بسبب آثار سامة على الخلايا العصبية على نطاق وتركيز واسع. بالإضافة إلى ذلك، مكملات كل من الزنك والسيلينيوم، في تركيزات منخفضة زادت كثافة المشبك، والتي يمكن بعد ذلك وجدت زيادة مقارنة بالشاهد على الرغم من موت الخلايا مستمر.
الشكل 2: تأثير المعادن النزرة على تشكيل المشبك أو الاستقرار. في حين أن الانخفاض الملاحظ في عدد المشبك يمكن ربط مع موت الخلايا العام من الخلايا العصبية في ثقافة الكادميوم، والنحاس، والزئبق (اللوحة اليسرى)، تم العثور على أي علاقة للشركة، الحديد، والرصاص الذي لم يغير كثيرا الصحية الخلية. يظهر ملغ فقط وجود علاقة ضعيفة بسبب آثار سامة على الخلايا العصبية على نطاق وتركيز واسع. كل من الزنك والسيلينيوم قد يعرض حتى زيادة أعداد المشبك على الرغم من موت الخلايا مستمر.

واستنادا إلى النتائج المذكورة أعلاه، فإنه قد يكون من الممكن أن عدم وجود تأثير synaptogenic بعض المعادن مثل الزنك والآثار السامة للآخرين التصرف في تركيبة في ASD عندما تحدث أوجه القصور والزائد من بعض المعادن النزرة في نفس الوقت. لذلك، أنشأنا لمحة biometal تشبه التعديلات المعادن النزرة المفترضة في المرضى ASD وتقييم الآثار على صحة الخلايا وخاصة على نقاط الاشتباك العصبي.

وقد نمت الخلايا العصبية قرن آمون من DIV 10 إلى DIV 14 في وسائل الإعلام ثقافة الخلية التي تحتوي على مجموعات مختلفة من المعادن النزرة: خلايا التحكم (السيطرة) كانت تزرع في المعادن النزرة المنضب Neurobasal المتوسطة التي تم تشكيلها لجميع المعادن النزرة المنضب (الماغنسيوم، الكالسيوم، الحديد، و الزنك) وفقا لتركيزات المعادن المشار إليها الشركة المصنعة. في أي من قراءات، يمكن أن نلاحظ الفروق بين الأصلي وأعيد Neurobasal المتوسطة (الشكل S2). بالإضافة إلى ذلك، كانت تزرع الخلايا في Neurobasal المتوسطة مع إضافة المعادن السامة المفترضة (0.5 ميكرومتر الكادميوم والنحاس والزئبق، و2 ميكرومتر الرصاص) وجدت أن زيادة في المرضى الذين ASD (ASD1). وقد نمت الخلايا السيطرة لهذا الشرط في Neurobasal المتوسطة. في حالة ثالثة، كانت تزرع الخلايا في المعادن النزرة المنضب Neurobasal المتوسطة التي أعيد فقط لالمغنيسيوم والكالسيوم، مع إضافة المعادن السامة المفترضة (0.5 ميكرومتر الكادميوم والنحاس والزئبق، و2 ميكرومتر الرصاص) (ASD2). ASD2 متوسطة النمو، لذلك، مع الحديد والزنك نقص والزائد من الكادميوم والنحاس والزئبق، والرصاص يشبه الشخصي biometal مميزة وجدت في ASD [3].

الخلايا المعرضة لASD2 المتوسطة عرض بالفعل انخفاضا كبيرا في صحة الخلايا مرئية من قبل عدد متزايد من نوى أفكارك وزيادة تجزئة شجيري (الشكلان 3 (أ) و 3 (ب)). تم تخفيض عدد من نقاط الاشتباك العصبي في طول 10 ميكرون التغصنات المقررة من قبل الكمي للالباسون وHomer1b / ج نقاط وإيجابية بشكل كبير في الخلايا نموا في المتوسط ​​تشبه الشخصي biometal وجدت في المرضى ASD (ASD2) (الشكل 3 (ج)). جنبا إلى جنب مع تخفيض في عدد من نقاط الاشتباك العصبي، ومستويات التعبير الجيني لمستقبلات متشابك مثل NMDAR (GluN1، GluN2a، وGluN2b) وكذلك الزنك تعتمد شانك البروتينات سقالة (Shank1، Shank2، وShank3) تظهر تغيرات كبيرة (الشكل 3 (د)). في حين ارتفع جود معادن سامة المفترضة في المرضى ASD (ASD1) غير كافية لزيادة كبيرة في مستويات GluN2b التعبير، GluN1 وGluN2a وShank1، Shank2، ومستويات Shank3 مرنا تتغير كثيرا إلا في حالة وجود الزنك إضافية ونقص الحديد (ASD2 ). قراءات الفلورية للبروتينات شانك تظهر انخفاضا في مستوى البروتين في ظل ظروف ASD1، في حين أن نقاط الاشتباك العصبي المتبقية تحت ASD2 حالة عرض مستويات شانك العادية (الشكل 3 (ه)). ومع ذلك، التحليل باستخدام بروتين الكيمياء الحيوية يبين أنه، عموما، يتم تخفيض تركيزات البروتين شانك في جزء P2 من خلايا تنمو في ظل حالة ASD2 (الشكل 3 (و)). بالإضافة إلى ذلك، على غرار انخفاض مستويات مرنا من مفارز NMDAR، اكتشفنا أقل بكثير من البروتين GluN2a والاتجاه نحو انخفاض مستويات البروتين GluN2b في الخلايا المزروعة في ASD2 المتوسطة. وعلاوة على ذلك، ZnT-1 مستويات التعبير، مصدر الزنك وصفت مؤخرا بأنها المخصب في postsynapses [16]، يتفاعل بحساسية جدا للتغيرات في تركيزات المعادن النزرة مثل تلك الناجمة عن تطبيق ASD2 المتوسطة (الشكل 3 (و)).
الرقم 3: لمحة مقتضبة biometal ASD يؤثر على أعداد صحة الخلية والمشبك في المختبر. (أ) كانت تزرع الخلايا العصبية الحصين من DIV 10 إلى 14 DIV في وسائل الإعلام ثقافة الخلية التي تحتوي على مجموعات مختلفة من المعادن النزرة: خلايا التحكم (السيطرة) كانت تزرع في Neurobasal المتوسطة. ما نمت الخلايا ASD1 في Neurobasal المتوسطة مع إضافة المعادن السامة المفترضة (0.5 ميكرومتر الكادميوم والنحاس والزئبق، و2 ميكرومتر الرصاص). ما نمت الخلايا ASD2 في المعادن النزرة المنضب Neurobasal المتوسطة التي أعيد فقط لالمغنيسيوم والكالسيوم، مع إضافة المعادن السامة المفترضة (0.5 ميكرومتر الكادميوم والنحاس والزئبق، و2 ميكرومتر الرصاص). تم حساب كمية من موت الخلايا تقييم عدد من نوى أفكارك العصبية (التي حددتها MAP2 وتلطيخ دابي) في الحقل البصري (من 5 مجالات رأي) تطبيع مقابل العدد الإجمالي للخلايا العصبية في المجال البصري. ويمكن ملاحظة انخفاض كبير في صحة الخلية في الخلايا التي تعاني من نقص في الحديد والزنك وتعرض لمعادن سامة (ASD2). (ب) وكان التحقيق في عدد من التشعبات الابتدائي والثانوي، والتعليم العالي من 10 خلايا لكل حالة. كانت ملطخة الخلايا مع MAP2 الأجسام المضادة. كما علامات موت الخلايا، تظهر الخلايا العصبية تجزئة (معسر إيقاف) التشعبات، بدءا من الفروع البعيدة أكثر من سوما. ولم يحتسب التشعبات التي تظهر عليها علامات التجزئة. المقابلة للزيادة في موت الخلايا، الخلايا العصبية المتزايدة في ظل ظروف ASD2 أظهرت زيادة كبيرة علامات تجزئة شجيري. (ج) وصفت نقاط الاشتباك العصبي باستخدام الباسون وHomer1b / ج مضان وعدد من نقاط ومناعيا تم قياس في 10 ميكرون طول التغصنات على التشعبات الأولية (3 التشعبات في الخلايا، 10 الخلايا في المجموع لكل مجموعة). تظهر الصور المدمجة تلطيخ إضافية من نوى باستخدام دابي (السماوي) وMAP2 (الأزرق). ويمكن رؤية انخفاض كبير في الخلايا نموا في المتوسط ​​تشبه الشخصي biometal وجدت في المرضى ASD (ASD2). (د) تم قياس مستويات التعبير مفارز NMDA مستقبلات (GluN1، GluN2a، وGluN2b) والجينات SHANK (Shank1، Shank2، وShank3) من خلال QRT-PCR. وتظهر تركيزات مرنا افتراضية في المتوسط ​​من ثلاثة مكررات وتطبيع ضد HMBS. يمكن أن ينظر إلى انخفاض كبير في GluN1 وGluN2a مرنا مستويات التعبير في الخلايا المزروعة في ظل ظروف ASD2. في ظل ظروف ASD1، ومستويات GluN2b زيادة كبيرة. ويمكن أيضا لوحظ انخفاض كبير في مستويات التعبير الجيني في أفراد الأسرة شانك في ظل ظروف ASD2، وهو أمر مهم لShank1، Shank2، وShank3. (ه) سيتولوجية مناعية من الخلايا العصبية قرن آمون DIV 14 نمت تحت السيطرة، وظروف ASD1، وASD2. وقد تم قياس كثافة مضان من شانك نقاط وإيجابية باستخدام أجسام مضادة محددة لShank1، Shank2، وShank3. الصور المثالية (اللوحة العليا) وتقدير من متوسط ​​كثافة إشارة نقاط و10 خلايا لكل حالة (اللوحة السفلى). تظهر الصور المدمجة تلطيخ دابي إضافية للنواة. الخلايا العصبية نمت في ظل ظروف ASD1 تظهر انخفاضا كبيرا للبروتينات شانك متشابك، في حين أن الخلايا العصبية في ظل ظروف ASD2 لم تظهر انخفاضا. (و) تحليل مستويات البروتين التعبير في متشابك (P2) أجزاء من مفارز NMDAR والبروتينات للأسرة شانك، وZnT-1 من ثلاث تجارب مستقلة تطبيع ضد β-III-تويولين أو الأكتين. الخلايا العصبية التي تزرع في ASD2 المتوسطة تشير إلى انخفاض كبير في GluN2a مفارز مستقبلات واتجاها نحو الانخفاض من GluN2b. في المقابل، يظهر متشابك ZnT-1 على upregulation قوي. يتم تخفيض التعبير عن أفراد الأسرة شانك في ظل ظروف ASD2 (خفض اللوحة اليسرى). تخفيض مهم لShank1 وShank2 وينظر إليه على أنه اتجاه واضح لShank3. وتظهر عصابات المثالية في اللوحة اليمنى السفلى.

وأخيرا، في المجموعة الأخيرة من التجارب، أردنا لتحديد ما إذا كان إضافة واحد المعادن النزرة معين قد يؤدي إلى الإنقاذ في النمط الظاهري الملاحظ بعد حمل لASD مثل الملف الشخصي biometal في زراعة الخلايا أو ما إذا كان يتعين على جميع التعديلات التي ينبغي معالجتها كل على حدة. وبالنظر إلى أن اقترح دورا عدائيا من الزنك والرصاص أو النحاس قبل [3، 4]، وأننا يمكن أن تحقق لها تأثير يحتمل أن تكون مفيدة من الزنك على نقاط الاشتباك العصبي، أردنا المقبل لتوضيح ما إذا كانت مكملات الزنك في تركيبة مع المعادن الضارة (ASD2) هو قادرا على تعديل سمية المعادن النزرة على الخلايا العصبية في المختبر. تحقيقا لهذه الغاية، أجرينا قراءات مماثلة كما هو موضح أعلاه (الشكل 3). ومع ذلك، لم تستكمل ASD2 المتوسطة (Neurobasal المتوسطة التي أعيد فقط لالمغنيسيوم والكالسيوم، مع إضافة المعادن السامة المفترضة (0.5 ميكرومتر الكادميوم والنحاس والزئبق، و2 ميكرومتر الرصاص)) مع 50 ميكرومتر الزنك. وكان بالإضافة إلى ذلك من الزنك قادرة على إنقاذ موت الخلايا الملحوظ في الكشف عن الثقافات نمت في ظل ظروف ASD2 (الشكل 4 (أ))، على الرغم من أنها أدت إلى انخفاض كبير في تفتيت شجيري (الشكل 4 (ب)). مع هذا، تم انقاذ الانخفاض في عدد من نقاط الاشتباك العصبي في طول 10 ميكرون التغصنات المقررة من قبل الكمي للالباسون وHomer1b / ج نقاط والايجابية التي ظهرت في ظل ظروف ASD2 بعد إضافة الزنك (ASD2 + الزنك) (الشكل 4 (ج)). كان مكملات الزنك لتتمكن من زيادة كبيرة في خفض مستويات مرنا من NMDA مفارز مستقبلات وأفراد الأسرة شانك ينظر في الخلايا تنمو في ظل الظروف ASD2 (الشكل 4 (د)) أيضا. وكانت مستويات التعبير عرقوب مرنا لا تختلف كثيرا عن تلك الخلايا تنمو في ظل ظروف السيطرة. ومع ذلك، في حالة NMDA مفارز مستقبلات، لا يزال مستويات مرنا بشكل كبير انخفضت مقارنة بالمجموعة الضابطة. التغيرات الملحوظة في مستوى البروتين من NMDA مفارز مستقبلات، والزنك Shank2 وShank3، وZnT-1 ملزم بدوره تم انقاذ تماما بعد إضافة الزنك (ASD2 + الزنك) (الشكل 4 (و)). كشفت قراءات المناعي أي تغيير في مستويات البروتين متشابك بعد مكملات من خلايا تنمو في ظل الظروف ASD2 مع الزنك (الشكل 4 (ه)، الشكل S2D).
الرقم 4: العلاقات التعاونية والعدائية بين المعادن النزرة والزنك. وقد نمت الخلايا العصبية قرن آمون من DIV 10 إلى DIV 14 في وسائل الإعلام ثقافة الخلية التي تحتوي على مجموعات مختلفة من المعادن النزرة: خلايا التحكم (السيطرة) كانت تزرع في المعادن النزرة المنضب Neurobasal المتوسطة التي تم تشكيلها لجميع المعادن النزرة المنضب (الماغنسيوم، الكالسيوم، الحديد، و الزنك) وفقا لتركيزات المعادن المشار إليها الشركة المصنعة. ما نمت الخلايا ASD2 في المعادن النزرة المنضب Neurobasal المتوسطة التي أعيد فقط لالمغنيسيوم والكالسيوم، مع إضافة المعادن السامة المفترضة (0.5 ميكرومتر الكادميوم والنحاس والزئبق، و2 ميكرومتر الرصاص). ما نمت الخلايا ASD2 + الزنك في ASD2 المتوسطة إلا أن 50 ميكرومتر تمت إضافة الزنك إلى المتوسطة. تم حساب كمية من موت الخلايا تقييم عدد من نوى أفكارك العصبية (التي حددتها MAP2 وتلطيخ دابي) في الحقل البصري (من 5 مجالات رأي) تطبيع مقابل العدد الإجمالي للخلايا العصبية في المجال البصري. ويمكن ملاحظة انخفاض كبير في صحة الخلية في الخلايا التي تعاني من نقص في الحديد والزنك وتعرض لمعادن سامة (ASD2). لم تكن قادرة على إنقاذ موت الخلايا احظ (ASD2 + الزنك) زد إلى ذلك. (ب) وكان التحقيق في عدد من التشعبات الابتدائي والثانوي، والتعليم العالي من 10 خلايا لكل حالة. كانت ملطخة الخلايا مع MAP2 الأجسام المضادة. كما علامات موت الخلايا، تظهر الخلايا العصبية تجزئة (معسر إيقاف) التشعبات، بدءا من الفروع البعيدة أكثر من سوما. ولم يحتسب التشعبات التي تظهر عليها علامات التجزئة. يمكن انقاذ الانخفاض الكبير ينظر في ظل ظروف ASD2 بشكل كبير من إضافة الزنك. (ج) وصفت نقاط الاشتباك العصبي باستخدام الباسون وHomer1b / ج مضان وعدد من نقاط ومناعيا تم قياس في 10 ميكرون طول التغصنات على التشعبات الأولية (3 التشعبات في الخلايا، 10 الخلايا في المجموع لكل مجموعة). ويمكن رؤية انخفاض كبير في الخلايا نموا في المتوسط ​​تشبه الشخصي biometal وجدت في المرضى ASD (ASD2). إضافة الزنك تنقذ آثار رأيت على كثافة المشبك. (د) تم قياس مستويات التعبير مفارز NMDA مستقبلات (GluN1، GluN2a، وGluN2b) والجينات SHANK (Shank1، Shank2، وShank3) من خلال QRT-PCR. وتظهر تركيزات مرنا افتراضية في المتوسط ​​من ثلاثة مكررات وتطبيع ضد HMBS. كان مكملات الزنك لتتمكن من زيادة كبيرة في خفض مستويات مرنا في خلايا تنمو في ظل الظروف ASD2. ومع ذلك، في كل الحالات، لا يزال مستويات مرنا بشكل كبير انخفضت مقارنة مع الضوابط لمفارز NMDAR GluN1 وGluN2a. وتم انقاذ مستويات التعبير عن أفراد الأسرة شانك تماما (Shank1 وShank3). (ه) والزنك مكملات على DIV 10-14 لم يغير كثيرا من شدة مضان نقاط ومتشابك. (و) تحليل مستويات البروتين التعبير في متشابك (P2) أجزاء من مفارز NMDAR والبروتينات للأسرة شانك، وZnT-1 من ثلاث تجارب مستقلة تطبيع ضد β-III-تويولين أو الأكتين. الخلايا العصبية التي تزرع في ASD2 المتوسطة تشير إلى انخفاض كبير في GluN2a مفارز مستقبلات واتجاها نحو الانخفاض من GluN2b، التي أنقذت مكملات الزنك ل. وبالمثل، متشابك مستويات ZnT-1 انخفاض تقريبا للسيطرة على مستويات في ASD2 المتوسطة مع الزنك مقارنة ASD2 الزنك المتوسطة ناقصة. يتم تقليل التعبير عن البروتينات شانك في ظل ظروف ASD2 وتركيز متشابك من الزنك، تعتمد Shank2 وأفراد الأسرة Shank3 استعادة عن طريق الزنك مثل أن مستويات Shank2 هي انخفضت تحت ASD2 + الزنك حالة (اللوحة السفلى اليسرى) لم يعد إلى حد كبير. وتظهر عصابات المثالية في اللوحة اليمنى السفلى. (ز) استخدام ICP-MS، وتركيزات المعادن خارج الخلية من مزارع الخلايا قرن آمون (في المعادن، واختبار مان ويتني) وقد تم قياس مع وبدون وجود الزنك. شوهد انخفاض في امتصاص النحاس والزئبق، والسيلينيوم باعتبارها الاتجاه على coapplication من الزنك، في حين كانت زيادة في امتصاص الرصاص واضحة.

وعلاوة على ذلك، كنا ICP-MS لقياس تركيزات المعادن خارج الخلية من مزارع الخلايا قرن آمون مع وبدون وجود الزنك. وكان الانخفاض في امتصاص النحاس والزئبق، وسي مرئية على coapplication من الزنك، في حين كانت زيادة في امتصاص الرصاص مرئية (الشكل 4 (ز)). عندما تم الجمع بين ZnCl2 (50 ميكرومتر) مع أي CdCl2 (5 ميكرومتر)، CuCl2 (120 ميكرومتر)، HgCl2 (5 ميكرومتر)، PbCl2 (5 ميكرومتر)، أو SeCl4 (6 ميكرومتر) معاملة، بانخفاض طفيف من موت الخلايا العصبية على وقد لوحظ التعرض لZnCl2 وHgCl2 مقارنة مع التعرض لHgCl2 وحدها. وعلاوة على ذلك، تم تحديد تحسنا كبيرا في بقاء الخلية العصبية إذا استكملت ZnCl2 وCdCl2 معا. هناك، يمكن أن الزنك استعادة الحالة الصحية الخلية العصبية قريبة للسيطرة على مستويات (أرقام S2E، F).

التعديلات لاحظ لا يمكن تفسير التغيرات في عبر التشابك الزنك اشارة بالنظر إلى أن presynapses في زراعة الخلايا قرن آمون دينا منخفضة جدا إلى مستويات غائبة من حويصلي الزنك (الشكل S2G). بالإضافة إلى ذلك، تسببت التعديلات تحت ASD2-على الرغم من الظروف إلى حد عال انقاذهم من قبل الزنك مكملات-لا تستند على نقص الزنك وحدها. مقارنة بين ASD2 والزنك النقي ناقصة (ZND) الظروف تكشف أن نقص الزنك دون إجراء أي تعديلات إضافية في biometals لا يؤدي إلى انخفاض كبير في صحة الخلية (أرقام S3A، B) وعدد المشبك (الشكل S3C) مثل ينظر في ظل ظروف ASD2 . وعلاوة على ذلك، فإن الانخفاض في مستويات التعبير مرنا من NMDA مفارز مستقبلات أقل وضوحا وتغيب لأفراد الأسرة SHANK تحت نقص الزنك النقي (الشكل S3D). لكن، وكما ذكرت من قبل [14]، ونقص الزنك يؤثر تأثيرا كبيرا على مستويات متشابك من الزنك ملزمة أفراد الأسرة شانك Shank2 وShank3 باستخدام قراءات مناعي (الشكل S3E). الكيمياء الحيوية البروتين مع الكسور P2 (الشكل S3F) يكشف عن أن، على مستوى البروتين، ونقص الزنك وحدها بالفعل يؤثر NMDAR فرعية التعبير، ولكن إلى حد أقل في التعبير عن شانكس.
4. مناقشة

عدد متزايد من تقارير التتبع متوازن المعادن التوازن في الأطفال الذين يعانون من اضطرابات النمو العصبي زيادة الحاجة إلى فهم أفضل لكيفية تأثير المعادن السامة المفترضة الخلايا العصبية. ولذلك، فإننا التحقيق في الآثار من مختلف المعادن النزرة الأساسية وغير الأساسية على الخلايا العصبية في المختبر، ومزيد من الدراسة علاقتها مع الزنك، واحدة من معظم المعادن النزرة وفيرة في الدماغ.

في المجموعة الأولى من التجارب، ونحن التحقيق في تأثير الزائد مع العناصر النزرة واحد. على الرغم من المعادن النزرة مثل المغنيسيوم، النحاس، الحديد، سي، والزنك ضرورية مع دورا حيويا في وظائف المخ الطبيعية، وزيادة مستويات في الدماغ قد يؤدي إلى أعراض عصبية حادة. ومع ذلك، وجدنا مقاومة قوية من الخلايا العصبية ضد سمية FeCl2 يسببها مع عدم وجود تغيرات شكلية حتى بتركيزات عالية جدا (تصل إلى 400 ميكرومتر) والتي تعتمد على جرعة تأثير synaptogenic طفيف. هذا الغياب من موت الخلايا العصبية يتماشى مع النتائج من الأسقف وآخرون. [17] وتقول التقارير أن التعرض إلى 100 ميكرومتر من سترات الأمونيوم الحديديك لمدة 24 ساعة إلى الخلايا العصبية مثقف زيادة محتوى الحديد داخل الخلايا بواسطة عامل 30 لكنها لم تؤثر خلية الجدوى [17].

وبالمثل، فإن عددا قليلا فقط التغيرات المورفولوجية مرضي من الخلايا العصبية الأولية يمكن أن ينظر إليه بعد التعرض لMgCl2 في نطاق تركيز اختبارها. تم نشر نتائج مماثلة ريغان وآخرون. [18] الذين عالجوا العصبونات القشرية الأولية مع ما يصل إلى 3 ملم MgCl2 دون الكشف عن أي دليل الصرفي للإصابة الخلية [18]. في دراستنا، زادت تركيزات المتوسطة (100 ميكرومتر) من MgCl2 عدد من التشعبات التعليم العالي وزيادة طفيفة في عدد من نقاط الاشتباك العصبي. في المقابل، تعرض الخلايا العصبية لCuCl2 يؤدي إلى موت الخلايا تعتمد على الجرعة وانخفاض كبير في أعداد المشبك المترابطة إلى انخفاض عدد خلايا قابلة للحياة، والتي يمكن ملاحظتها أيضا في الخلايا العصبية الأصغر سنا في DIV 6 [19].

حد ذاته هو معدن اساسي أثر مع مجموعة ضيقة من تركيزات بين نقص وسمية. أيضا، في هذه الدراسة، وقد لوحظ مجموع موت الخلايا العصبية في 10 ميكرومتر SeCl4، في حين عرضت 8 ميكرومتر SeCl4 لزيادة أعداد المشبك. ولا يعرف سوى القليل عن التأثير السام لSeCl4 على الخلايا العصبية مثقف يرجع ذلك إلى حقيقة أن معظم الدراسات ركزت على تأثير وقائي من سي ضد الغلوتامات التي يسببها التحفيز الزائدة [20] أو ضد سمية الزئبق غير العضوي [21]. Savaskan وآخرون. [20] وقد ذكرت أن التعرض ل10 ميكرومتر سيلينات الصوديوم انخفض HT22 خلية بقاء حوالي 20٪. لم موت الخلايا لا تصل إلى 100٪ حتى 1 ملم [20]. وهذه الخلافات على الأرجح بسبب استخدام مختلف أنظمة زراعة الخلايا وليس من المستغرب أن خط الخلية الحصين خلد هو أكثر مقاومة ضد سي سمية الناجم من الخلايا العصبية الأولية.

ويشارك الزنك في مجموعة كبيرة من العمليات الخلوية ولكن تم الإبلاغ عن زيادة تركيز أيونات الزنك غير منضم إلى تكون ضارة خصوصا على الجهاز العصبي المركزي وقتل الخلايا في المختبر [22]. في هذه الدراسة، وتركيزات أعلى من 100 ميكرومتر ZnCl2 يسببها موت الخلايا العصبية. ومع ذلك، أدى الزنك إلى زيادة في أعداد المشبك.

وعلى النقيض من المعادن النزرة الضرورية، ومن المتوقع أن تكون أكثر ضررا بكثير التعرض للمعادن السامة المفترضة. في الواقع، كان حتى التركيزات المنخفضة من CdCl2 تأثيرات شديدة على الصحة الخلية العصبية (LD50 5 ميكرومتر). لاحظنا موت الخلايا العصبية التي تعتمد على الجرعة وخطي يرتبط الحد من نقاط الاشتباك العصبي. وقد أظهرت سمية الكادميوم تؤدي إلى ضعف تكوين الخلايا العصبية، وانخفاض تمايز الخلايا العصبية، وتخفيض axogenesis في المختبر [23] ولقد تم الإبلاغ عن تركيزات أقل من ذلك لقمع شجيري والتنمية متشابك [24، 25]. على الرغم من قاتل موت الخلايا العصبية، في تركيزات الكادميوم منخفضة، والخلايا الدبقية ويبدو أن أكثر مقاومة وهو ما يتفق مع التقارير السابقة [26].

على الرغم من أن القاعدة هو عصبي مقبولة تماما [27]، وناقش كعامل لتطوير التنكس العصبي، على سبيل المثال، كما رأينا في مرض الزهايمر (AD) [28]، ونحن لم تراع الآثار الضارة على الخلايا العصبية والمشابك حتى في عالية جدا تركيزات AlCl3 (تصل إلى 500 ميكرومتر) مماثلة لدراسة أجرتها كاواهارا وآخرون. [29]. ومع ذلك، أنواع الألومنيوم محبة للدهون مثل acetylacetonate الألومنيوم أو maltolate الألومنيوم قد تكون أكثر سمية من AlCl3 [29]. بالإضافة إلى ذلك، هطول الأمطار ممكن من AlCl3 في درجة الحموضة الفسيولوجية [27] قد منع القاعدة من الوصول إلى تركيزات داخل الخلايا عالية بما فيه الكفاية للحث على سمية. فمن الممكن أن آل لا يؤثر على عدد من نقاط الاشتباك العصبي بل يغير اللدونة متشابك [30، 31] أو قد تعمل بالإضافة إلى العوامل المهيئة الأخرى. يثير الاهتمام والفضول، واقترح أن المكون الجيني للأمراض AD قد ينطوي على الجين الحساسية، بعد، الكشف عن هويته، أن يزيد آل امتصاص [32].

الزئبق يسبب العجز العصبي والإعاقة حركي [33-36]. وبالتالي فإنه ليس من غير المتوقع أن مستويات الزئبق مرتفعة أدت إلى موت الخلايا العصبية الشديدة بالفعل في تركيزات منخفضة (LD50 5 ميكرومتر) ترافق مع انخفاض تعتمد على الجرعة من كثافة متشابك. تم الإبلاغ عن الزئبق سمية لزيادة مع مرور الوقت الحضانة [37]. وبالتالي، يمكن حتى في تركيزات أقل من HgCl2 (25-100 نانومتر) يؤدي إلى انخفاض كبير في بقاء الخلية العصبية في حالة التوسع التعرض [38].

كان معروفا للبرميل لتكون الملوثات البيئية المرتبطة العديد من الأمراض العصبية وتم الإبلاغ عن أن تؤثر على دماغ الطفل تطوير سلبا [39، 40]. ومع ذلك، في هذه الدراسة، بدا الرصاص للعمل مفيد قليلا على صحة الخلايا العصبية وزيادة طفيفة في عدد متشابك تركيزات أعلى. وبالمثل، Audesirk وآخرون. [41] وقد ذكرت أن الرصاص أظهر أقل التأثيرات على الخلايا العصبية قرن آمون في تركيزات المتوسطة (1-10 ميكرومتر) [41]. قد تردد أن سمية الرصاص لا ينتج عن تأثير مباشر على الخلايا العصبية ولكن عن طريق التدخل في العمليات بالفعل خارج الجهاز العصبي المركزي وربما يعود ذلك الى عدم وجود مستقبلات معينة أو المنافسة مع البروتينات المستهدفة. A تدخل السامة، كما ذكرت، على سبيل المثال، عن النحاس والزنك [42]، قد يحدث بالفعل داخل الجهاز الهضمي وليس في الدماغ.

وتجدر الإشارة إلى أن العديد من العوامل مثل استخدام FBS أو B27 في متوسط ​​النمو قد تؤثر على سمية بعض المعادن. على سبيل المثال، ألبومين المصل البقري (BSA) الحالي في مصل الجنين البقري (FBS) وB27 تكملة تمت عالية الزنك قدرة [43] وتركيز الفعلية التي تصل إلى الخلايا العصبية من الصعب التنبؤ ملزمة. في الواقع، تبين أن تركيز أكثر من 100 نانومتر "الحرة" الزنك هي سامة للخلايا [44]. وبناء على هذا والقيمة المحسوبة للزنك في هذه التجارب، فمن المرجح أن كمية عالية من المعادن النزرة سيتم تخزينها مؤقتا وملزمة للبروتينات مباشرة بعد التطبيق.

إذا كنت التلاعب من المعادن النزرة واحد يظهر تأثير على بقاء الخلية ولكن نقاط الاشتباك العصبي أيضا. ومع ذلك، في المرضى الذين يعانون مثل أولئك الذين يعانون من ASD، وهو مزيج من التعديلات المعادن النزرة (الزائدة والقصور) ويحدث ذلك قد خلق بيئة جديدة كليا لالخلايا العصبية وتؤثر على عدد المشبك وظيفة. وهكذا، في المجموعة الثانية من التجارب، أنشأنا لمحة biometal التي تمثل واحدة ذكرت في الأفراد الذين يعانون من التوحد وتقييم تأثير على صحة الخلايا وكثافة المشبك وتكوينها.

مؤخرا، تم تحديد مسار نقاط الاشتباك العصبي في glutamatergic مثير كتبها شاشات الوراثية على نطاق واسع ووصف ASD الجينات المرشحة [45] يتركز حول البروتينات للأسرة شانك. وقد وصفت الطفرات في أفراد الأسرة الثلاثة Shank1، Shank2 (ProSAP1)، وShank3 (ProSAP2) لتترافق مع ASD [46، 47] ونماذج حيوانية مع الحذف من هذه الجينات العارضة لASD مثل الظواهر [48، 49]. ومع ذلك، Shank2 وShank3 أيضا البروتينات التي تنظم كبير من قبل الزنك ملزم [50] وقيمتها تخفيض في النماذج الحيوانية للزنك نقص [14] أو النحاس الزائد [51]. لذلك، هذه البروتينات قد تكون واعدة المرشحين تقديم وصلة بين الخلل المعادن النزرة والعيوب متشابك في ASD. وبناء على هذا النموذج، هنا، قمنا بتقييم متشابك مستويات البروتين شانك. في الواقع، لاحظنا فقدان نقاط الاشتباك العصبي جنبا إلى جنب مع خفض مستويات بروتين P2 المرتبطة في أفراد الأسرة شانك.

وبالنظر إلى أن الزنك هو واحد من المعادن النزرة الأكثر وفرة في المخ وتعمل على postsynapse التأثير على البروتينات متشابك واللدونة [52-55]، ونحن التحقيق ما إذا كان الزنك قد تكون قادرة على انقاذ الملف الشخصي ASD biometal يسببها النمط الظاهري. كان مكملات الزنك المزمن قادرة على تطبيع تغييرات في الزنك ملزم Shank2 وShank3 ولكن لم يقدم مزيدا من زيادة مستويات شانك كما ذكرت أن تنجم عن مكملات الزنك الحاد [14]. وهكذا، وآلية التغذية المرتدة قد يكون متورطا الذي ينظم مستويات شانك على مر الزمن قصرها على مستوى ينظر في الضوابط.

بالإضافة إلى ذلك، ونحن مهتمون في مستويات مفارز NMDAR منذ تعديلات مثل وصفت ذلك بانخفاض قدره NMDARs في الخلايا ناقصة Shank3، Shank2 خروج المغلوب الفئران، والزنك قبل الولادة الفئران ناقصة التي تعرض أيضا الحد من Shank2 وShank3 [14، 56، 57]. في الواقع، على غرار التعبير عن البروتينات شانك، كان تعبيرا عن مفارز NMDAR حساسة لتعقب عوارض معدنية مثل تلك التي ظهرت في المرضى الذين يعانون من التوحد، ولا سيما زيادة مستويات المعادن السامة المفترضة بالاشتراك مع الزنك ونقص الحديد (ASD2)، على مرنا و مستوى البروتين متشابك. هذا ويقول مرة أخرى أن التعديلات في حالة المعادن النزرة كما رأينا في ASD المرضى إذا كان موجودا بطريقة مماثلة في الدماغ من المرضى قد تكون كافية لإحداث تغييرات مماثلة لتلك التي ظهرت في النماذج الوراثية للASD مثل شانك الفئران خروج المغلوب. على وجه الخصوص، قد تتأثر التحول من NMDAR فرعية 2B (GluN2b) التي تحتوي على نقاط الاشتباك العصبي لGluN2a كما رأينا في التطور الطبيعي بسبب انخفاض GluN2a ولكن ليس GluN2b التعبير على مرنا ومستوى البروتين الذي يحدث فقط في ملف تعريف المعادن النزرة مماثلة لتلك التي شوهدت في المرضى الذين يعانون ASD.

بعد الزنك، ومستويات مرنا من NMDA مفارز مستقبلات ظلت إلى حد كبير انخفضت مقارنة بالمجموعة الضابطة. ومع ذلك، بالمقارنة مع الظروف ASD2، تم انقاذ بشكل كبير من مستويات التعبير. في المقابل، يتم استعادة التعبير الجيني من أفراد الأسرة شانك تماما بعد الزنك. حاليا لا يفهم جيدا الآليات لكيفية الزنك قد تؤثر NMDAR وشانك النسخ. ومع ذلك، Myc على المرتبطة بالبروتين إصبع الزنك (MAZ) يرتبط عنصر مربع GC في المناطق التنظيمية من GluN1، GluN2A، GluN2B، وGluN2C [58]. وهكذا، وتوافر الزنك قد تؤثر، من بين العديد من عوامل النسخ الأخرى مع مجالات إصبع الزنك، MAZ، مما يؤثر على معدلات التعبير NMDAR الوحيدات. عامل آخر النسخ التي تعتبر حساسة لتعقب مستويات المعادن، وخاصة لزد، هو MTF1 (المعادن التنظيمي عامل النسخ 1). MTF1 بربط عناصر استجابة المعدنية (المغاربة المقيمين في الخارج) في منطقة المروج من الجينات في وجود الزنك لزيادة معدل النسخ الخاصة بهم [59، 60]. يثير الاهتمام والفضول، والمروج من Shank3 يحتوي على التوعية من مخاطر الألغام. ومع ذلك، ما إذا كان تنظيم الجينات من السيقان التي كتبها الزنك هو يعتمد على MTF1 لم يتم التحقيق فيها حتى الآن.

النتائج التي تم الحصول عليها من التعبير الجيني التحليلات لم تتطابق دائما مع التعبير البروتين يقاس تحليل لطخة غربية وتحليل كثافة المناعي. ومع ذلك، لمرنا التحليلات، واتخذ الحمض النووي الريبي مجموع من المحللة خلية كاملة. في المقابل، أجريت تحاليل لطخة غربية باستخدام جسيم مشبكي الكسور P2 المخصب. وبالتالي فمن الممكن أن انخفاض مستوى مرنا يمكن أن ينعكس انخفاضا في البروتينات extrasynaptic. بالإضافة إلى ذلك، فإن الانخفاض في مستويات مرنا ربما لم تكن موجودة لفترة كافية لتؤثر على تركيز البروتينات مستقرة مع بطء معدلات تسليم. وبالمثل، في قراءات مضان، متشابك فقط تم قياس نقاط ومناعيا. هنا، قد لا يكون تم الكشف عن فقدان كامل تقريبا من البروتينات مما يؤدي إلى شدة إشارة منخفضة جدا تحت مستوى الخلفية.

وعلاوة على ذلك، قمنا بتحليل التعبير متشابك من ZnT-1 التي تم الإبلاغ عنها مؤخرا لتخصيبه في مديرية الأمن العام ومقترن NMDAR [16]. وجدنا أن مستويات البروتين من ZnT-1 تتفاعل بحساسية للعوارض معدنية التتبع المعمول بها، مرة أخرى خاصة أن ASD2. يمكن للمرء أن يتكهن بأن تصدير الزنك كما إشارة التمثيل متشابك، والتي قد تكون انخفضت في الزنك المنضب المتوسطة، والتعويض عن زيادة عدد ZnT-1 البروتينات في المشبك. ومع ذلك، بالنظر إلى أن ZnT-1 التعبير العالمي وعادة ما upregulated استجابة لزيادة تركيزات الزنك [61]، آلية جديدة للمتشابك ZnT-1 التنظيم هو مضمر. يثير الاهتمام والفضول، يتم تقليل upregulation من الزنك-T1 بعد تجديد ASD2 المتوسطة مع الزنك.

على الرغم من أن التعديلات احظ لا يمكن تفسيرها عن نقص الزنك فقط، وتشير البيانات المتوفرة لدينا أن مكملات من ASD2 المتوسطة مع الزنك وحدها بالفعل كافية لانقاذ معظم الآثار الناجمة عن التعرض لالمفترضة المعادن النزرة السامة جنبا إلى جنب مع نقص الزنك والحديد. إضافة الزنك يمكن استعادة جزئيا الصحة الخلية (انخفاض المتفرعة من التشعبات العالي) وفقدان متشابك. بالإضافة إلى ذلك، إلى التأثير على نقاط الاشتباك العصبي، وسمية الرصاص والكادميوم، النحاس، والزئبق يمكن أن تخفض على علاج الزنك نظرا لعلاقة عدائية بين الزنك وهذه المعادن النزرة. وفقا للالأدب [62، 63]، يمكن أن نلاحظ سلوك عدائي قوي وكبير من الزنك والكادميوم على صحة الخلايا العصبية وكثافة المشبك. وعلاوة على ذلك، فقد رأينا انخفاضا طفيفا من النحاس والزئبق امتصاص عليه coapplication من ZnCl2 التي يمكن زيادة أكبر إذا سيكون التركيز الزنك لا يكون متساوي المولية إلى النحاس والزئبق ولكن يتجاوز تركيزها.

أخذت معا، نتائجنا تظهر أن، بغض النظر عن سؤال مهم ولكن ذلك لم تحل حتى الآن، ما إذا كانت هذه الاختلالات في العناصر النزرة ينظر في المرضى ASD هي السبب أو النتيجة، في الواقع وضعا biometal تغيير قد يكون لها تأثير على تكوين المشبك وظيفة. معالجة التقلبات من المعادن النزرة قد يكون نهجا جديدا في تعديل النمط الظاهري المرض في المرضى وينبغي التحقيق بدقة في الجسم الحي في الدراسات المستقبلية.
تضارب مصالح

تعلن الكتاب أنه لا يوجد تضارب في المصالح فيما يتعلق بنشر هذه الورقة.
شكر وتقدير

ويدعم أندرياس M. Grabrucker التي كتبها Baustein 3.2 (L.SBN.0083) وجمعية الزهايمر (NIRG-12-235441). ويدعم توبياس M. Boeckers من قبل الاتحاد الأوروبي وAIMS (مبادرة الأدوية المبتكرة المشتركة تعهد بموجب اتفاقية المنحة رقم 115300).
المراجع

R. Delorme، E. EY، R. تورو، M. Leboyer، C. جيلبرج، وT. Bourgeron "التقدم نحو علاجات لعيوب متشابك في التوحد،" طب الطبيعة، المجلد. 19، لا. 6، ص. 685-694، 2013. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
AM Grabrucker، "العوامل البيئية في التوحد،" حدود في الطب النفسي، المجلد. 3، والمادة 118، 2013. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
S. Pfaender وAM Grabrucker، "توصيف ملامح biometal في الاضطرابات العصبية،" Metallomics، المجلد. 6، لا. 5، ص. 960-977، 2014. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
H. ياسودا وT. تسوتسوى "تقييم الاختلالات المعدنية الطفلي في اضطرابات طيف التوحد (أي إس دي إس)،" المجلة الدولية لأبحاث البيئة والصحة العامة، المجلد. 10، لا. 11، ص 6027-6043، 2013. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
MD اكشمي بريا وA. غيثا، "مستوى من العناصر النزرة (النحاس والزنك والمغنيسيوم والسيلينيوم) والعناصر السامة (الرصاص والزئبق) في الشعر والأظافر من الأطفال الذين يعانون من التوحد،" التنوع تتبع العنصر بحوث، المجلد. 142، لا. 2، ص. 148-158، 2011. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
JB آدمز، T. Audhya، S. ماكدونو-وسائل وآخرون، "الوضع سمية الأطفال المصابين بالتوحد مقابل الأطفال neurotypical وبالتعاون مع التوحد شدة،" التنوع تتبع العنصر بحوث، المجلد. 151، لا. 2، ص. 171-180، 2013. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
PN الكسندروف، Y. تشاو، AI بوج، وآخرون، "الآثار المستمرة للحديد والألمنيوم على المرتبطة بالتوتر التعبير الجيني في الخلايا العصبية البشرية الأساسية،" مجلة مرض الزهايمر، المجلد. 8، لا. 2، ص. 117-215، 2005. عرض في جوجل الباحث العلمي
E. Bahbouth، B. Siwek، MC دي باو-جيليت، E. Sabbioni، وR. Bassleer، "آثار المعادن النزرة على خلايا سرطان الجلد الماوس B16 في الثقافة،" التنوع تتبع العنصر بحوث، المجلد. 36، لا. 2، ص. 191-201، 1993. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
RB هيرنانديز، M. فارينا، BP اسبوزيتو، NC-سوزا بينتو، F. باربوسا، وC. Suñol، "آليات العصبية التي يسببها المنغنيز في الثقافات العصبية الأولية: دور أنواع جديدة المنغنيز ونوع من الخلايا،" العلوم السمية، المجلد . 124، لا. 2، ص. 414-423، 2011. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
TK Rowles، C. WOMAC، GR براتون، وE. تيفاني-كاستيجليونى "التفاعل الرصاص والزنك في دبق نجمي الخلايا مثقف،" الاستقلابية أمراض الدماغ، المجلد. 4، لا. 3، ص. 187-201، 1989. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
JW فان Landingham، CA فيتش، وCW فينسون "، الزنك يمنع النبات النووي للورم القامع البروتين البروتين p53 ويحمي الخلايا العصبية البشرية المستزرعة من التي يسببها النحاس العصبية،" الطب NeuroMolecular، المجلد. 1، لا. 3، ص. 171-182، 2002. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
AR الأبيض، KJ برنهام، X. هوانغ وآخرون، "الحديد يمنع العصبية الناجمة عن النحاس التتبع والاختزال البيولوجية"، مجلة البيولوجية الكيمياء غير العضوية، المجلد. 9، لا. 3، ص. 269-280، 2004. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
K. يبشر وسميث، "العناصر النزرة الأساسية وغير الأساسية. وهناك طريقة لتحديد ما إذا كان عنصر ضروري أو غير الاساسيين في الأنسجة البشرية "أرشيف الصحة البيئية، المجلد. 17، لا. 6، ص. 881-890، 1968. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
S. Grabrucker، L. Jannetti، M. إيكرت وآخرون، "نقص الزنك dysregulates ومتشابك ProSAP / شانك سقالة ويمكن أن يساهم في اضطرابات طيف التوحد،" الدماغ، المجلد. 137، لا. 1، ص. 137-152، 2014. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
AM Grabrucker، B. فايدا، J. Bockmann، وTM Boeckers "Synaptogenesis من الخلايا العصبية قرن آمون في زراعة الخلايا الأولية،" خلية والأنسجة بحوث، المجلد. 338، لا. 3، ص. 333-341، 2009. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
C. Sindreu، À. بايز، X. التافاج، وJ. بيريز Clausell، "الزنك نقل-1 يركز على كثافة بعد المشبكي من نقاط الاشتباك العصبي الحصين،" الجزيئية الدماغ، المجلد. 7، لا. 1، والمادة 16، 2014. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
GM الأسقف، TN دانغ، R. Dringen، وروبنسون ريال، "تراكم الحديد غير ترانسفيرين-ملزمة الخلايا العصبية، الخلايا النجمية، والخلايا الدبقية الصغيرة،" البحوث العصبية، المجلد. 19، لا. 3، ص. 443-451، 2011. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
RF ريغان، E. جاسبر، Y. قوه، وSS بانتر "تأثير المغنيسيوم على إصابة الخلايا العصبية المؤكسدة في المختبر،" مجلة الكيمياء العصبية، المجلد. 70، لا. 1، ص 77-85، 1998. عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
AR الأبيض، G. Multhaup، F. ماهر وآخرون، "اميلويد المرض البروتين السلائف الزهايمر ينظم سمية الناجم عن النحاس والاكسدة في الثقافات العصبية الأولية،" مجلة علم الأعصاب، المجلد. 19، لا. 21، ص 9170-9179، 1999. عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
NE Savaskan، AU بروير، M. Kühbacher وآخرون، "نقص السيلينيوم يزيد القابلية للالغلوتامات التي يسببها التحفيز الزائدة،" إن FASEB جورنال، المجلد. 17، لا. 1، ص. 112-114، 2003. عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
K. أوشيما وM. Kasuya، "التفاعلات بين كلوريد الزئبق والصوديوم سيلينات على المثقف المخ الفئران،" علم السموم الآداب، المجلد. 6، لا. 3، ص. 181-186، 1980. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
RA Bozym، F. Chimienti، LJ Giblin وآخرون، "أيونات الزنك مجاني خارج نطاق التركيز الضيق سامة إلى مجموعة متنوعة من الخلايا في المختبر،" البيولوجيا التجريبية والطب، المجلد. 235، لا. 6، ص. 741-750، 2010. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
B. وانغ وY. دو "، الكادميوم والتأثيرات السمية العصبية لها،" الطب مؤكسد والخلوية طول العمر، المجلد. 2013، معرف المقالة 898034، 12 صفحة، 2013. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
R. Ohtani-كانيكو، H. Tazawa، M. يوكوسوكا، M. يوشيدا، M. ساتو، وC. واتانابي، "آثار القمعية من الكادميوم على الخلايا العصبية والبروتينات المتضررة في تربيتها تطوير خلايا القشرية،" علم السموم، المجلد. 253، لا. 1-3، ص. 110-116، 2008. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
E. لوبيز، S. فيغيروا، MJ-Oset Gasque، والنائب غونزاليس، "موت الخلايا المبرمج ونخر: حدثين متميزة الناجمة عن الكادميوم في الخلايا العصبية القشرية في الثقافة،" المجلة البريطانية لعلم الصيدلة، المجلد. 138، لا. 5، ص. 901-911، 2003. عرض على الناشر · عرض في جوجل الباحث العلمي · عرض في المكبر
C. Gerspacher، U. Scheuber، G. Schiera، P. Proia، D. Gygax، وI. دي Liegro، "تأثير الكادميوم على خلايا المخ في الثقافة،" المجلة الدولية للطب الجزيئي، المجلد. 24، لا. 3، ص

 

__________________
استشارى الادوية الطبيعيه وباحث وخبير فى علاجات التوحد
رد مع اقتباس
  #5  
قديم 12-02-2015, 08:43 PM
رافت ابراهيم رافت ابراهيم غير متواجد حالياً
عضو ذهبي
 
تاريخ التسجيل: Dec 2011
المشاركات: 520
افتراضي الشعر تركيزات المعادن السامة وطيف التوحد اضطراب خطورة في الأطفال الصغار

 

http://www.mdpi.com/1660-4601/9/12/4486/htm

ملخص

وقد وجدت دراسات سابقة أعلى هيئة عبء المعادن السامة، وخصوصا الزئبق (زئبق)، من بين موضوعات تشخيص اضطراب طيف التوحد (ASD) بالمقارنة مع الضوابط neurotypical:. وعلاوة على ذلك، كان مرتبطا زئبق الجسم الأعباء مع ASD شدة. تناولت هذه الدراسة مستعرضة العلاقة المحتملة بين الشعر تركيزات المعادن السامة وASD شدة في الفوج المحتملين من المشاركين تشخيص معتدلة إلى ASD شديد. وافق مجلس المراجعة المؤسسية في جامعة تكساس جنوب غرب المركز الطبي في دالاس (دالاس، TX) هذه الدراسة. المشاركين في الدراسة المؤهلة (ن = 18) وجرى تقييم لASD شدة باستخدام الطفولة التوحد مقياس تصنيف (CARS) وكميا للالزرنيخ والزئبق والكادميوم والرصاص والكروم والكوبالت والنيكل والألمنيوم والقصدير واليورانيوم، والمنجنيز باستخدام الشعر السامة اختبار عنصر عن طريق بيانات الطبيب (مختبر وافقت عليها CLIA). وقد أعمى CARS التهديف والشعر سامة اختبار عنصر واحد إلى آخر. تركيزات الزئبق زيادة الشعر يرتبط بشكل كبير مع زيادة شدة ASD. في المقابل، لم يلاحظ أي ارتباط ملموس بين أي دولة أخرى من الشعر بحثت المعادن السامة وASD شدة. تساعد هذه الدراسة إلى تقديم الدعم الآلية إضافي للزئبق في مسببات ASD شدة، وهي مدعومة من قبل عدد متزايد من الاستعراضات الحرجة الأخيرة التي تقدم معقولية البيولوجية لدور التعرض للزئبق في التسبب في أي إس دي إس.

الكلمات الدالة:
اسبرجر. مرض التوحد. التوحد. التنموية. شعر؛ معدن ثقيل؛ التطور العصبي. العصبية. PDD-NOS

1 المقدمة

قام ديسوتو وHitlan مراجعة الدراسات البحثية التي نشرت دراسة العلاقة بين التعرض المعادن السامة وخطر موضوعا يجري تشخيص اضطراب طيف التوحد (ASD) [1]. حدد هؤلاء الباحثون 58 المقالات والبحوث التي قدمت الأدلة التجريبية ذات الصلة لمسألة وجود صلة بين تشخيص ASD واحد أو التعرض المعدن أكثر سمية. تلك 58 المقالات والبحوث فحص، حدد هؤلاء الباحثون 43 التي دعمت رابط كبير بين تشخيص ASD والتعرض للمعادن السامة بينما أظهر 15 أي دليل يعتد به إحصائيا وجود صلة بين تشخيص ASD والتعرض للمعادن السامة. وهكذا، أظهرت 74٪ من الدراسات بحثت علاقة ذات دلالة إحصائية بين تشخيص ASD والتعرض المعادن السامة. وخلص هؤلاء الباحثون أن ميزان دعم الدراسات وجود صلة بين التشخيصات ASD والتعرض المعادن السامة.
منذ ديسوتو وHitlan الاستعراض، وقد أظهرت المزيد من الدراسات عبئا الجسم أعلى من المعادن السامة في المواد تشخيص مع ASD مقارنة مع الضوابط neurotypical [2، 9] وكشفت أيضا كبيرة العلاقة بين المعادن السامة الجسم عبء وASD شدة [5، 10، 11، 12، 13]. وقد فشلت عدة دراسات حديثة أيضا للعثور على العلاقة بين عبء الجسم أعلى من المعادن السامة وتشخيص ASD [14، 15، 16، 17]. على الرغم من أن الدراسات أظهرت وجود ارتباط بين تشخيص ASD والمعادن السامة المختلفة، مثل الكادميوم (الكادميوم)، (الرصاص) الرصاص، والزرنيخ (As)، الجزء الأكبر من الأبحاث ركزت على الزئبق (زئبق).
على سبيل المثال، لاكشمي وآخرون. العناصر السامة مثل الزئبق تقييمها والرصاص في الشعر والأظافر عينات من المواد تشخيص مع ASD وتقييم ما إذا كان مستوى هذه العناصر يمكن أن تكون مرتبطة مع شدة تشخيص ASD [7]. وأظهرت الدراسة وجود ارتفاع كبير في تركيزات المعادن السامة والرصاص والزئبق في كل من الشعر والأظافر عينات من تلك المواد تشخيص مع ASD بالمقارنة مع الضوابط neurotypical. أعلنت والارتفاع كثيرا في أداء المشاركين منخفضة بالمقارنة الى معتدلة للمشاركين أداء عال. بالإضافة إلى ذلك، دراسة قام بها Elsheshtawy وآخرون. نتائج مماثلة كشف [5]. ووجد الباحثون اختلافات كبيرة جدا بين مستوى الرصاص والزئبق في الشعر من الموضوعات بالتوحد مقارنة مع الضوابط neurotypical. ولاحظ هؤلاء الباحثون وجود علاقة ذات دلالة إحصائية بين زيادة شدة ASD يقاس الطفولة التوحد مقياس تصنيف (CARS) وزيادة الزئبق في الشعر من الخاضعين للدراسة تشخيص مع ASD، في حين لوحظ عدم وجود ارتباط كبير بين زيادة ASD شدة وزيادة الرصاص في الشعر من المواد الدراسية.
وعلاوة على ذلك، تشير الدراسات الحديثة إلى أن تأثير المعادن السامة قد يكون أكثر وضوحا في مواضيع تشخيص معتدلة إلى ASD شديد بالمقارنة مع المشاركين تشخيصها مع ASD معتدل [12، 13]. وحتى لوحظ أن السامة مسارات إفراز المعادن قد تتفاوت تفاوتا كبيرا بين الخاضعين للدراسة تشخيص معتدلة إلى ASD شديد بالمقارنة مع المشاركين تشخيصها مع ASD معتدل [10، 18]. قد يكون هذا أهمية خاصة عند النظر في تركيزات الشعر المعدن السام في الأطفال الصغار لأن الدراسات السابقة قد اقترح أن الشعر تركيزات سامة قد تكون ذات صلة السامة معدلات إفراز المعادن، وخاصة في اول طفل حلاقة الشعر من الموضوعات تشخيصها مع ASD [3، 19، 20، 21]. وبالتالي، قد الاختلافات في إفراز إدخال متغير الخلط عند دراسة العلاقة بين المعادن السامة في عينات الشعر وASD شدة.
وكان الغرض من هذه الدراسة لتقييم العلاقة المحتملة بين تركيزات المعادن السامة الشعر وقياس كمي لASD شدة في لفيف جمعها مستقبلا المشاركين تشخيص معتدلة إلى ASD شديد.
القسم التجريبية 2.

2.1. مجلس المراجعة المؤسسية الموافقة والمشاركون البشري الامتثال

بروتوكول المستخدمة في هذه الدراسة حصلت على موافقة من مجلس المراجعة المؤسسية في جامعة تكساس جنوب غرب المركز الطبي في دالاس (دالاس، TX، الولايات المتحدة الأمريكية). الدراسة تمتثل لمعايير الجمعية الأمريكية النفسية الأخلاقية في علاج المشاركين والحصول على الموافقة المسبقة. وقعت جميع الآباء والأمهات على موافقة ونقل التأمين الصحي وشكل قانون محاسبة (HIPAA) وحصل كل نسخة من كل من الأشكال. وكان الأطفال في وجود أحد الوالدين أو كليهما طوال فترة الزيارة التقييم.
2.2. المشاركين

تم جمع البيانات من الأطفال الموجودة في منطقة دالاس العاصمة والمناطق المحيطة بها. أدرجت المشاركين في الدراسة إذا كان لديهم ASD التشخيص السابق، وهو ما أكده في وقت الدراسة التي أعدها الباحث الرئيسي (JKK) استنادا إلى الدليل التشخيصي والإحصائي للاضطرابات العقلية، الطبعة الرابعة (DSM-IV) معايير [22 التقييم] وCARS يحددها الباحث الرئيسي (JKK) [23، 24]. أتيحت للمشاركين أن يكون معتدلة إلى CARS عشرات حادة (37-60) ليتم تضمينها في الدراسة الحالية. البيانات التي تم جمعها مستقبلا فحص تم من الأطفال التوالي التي تفي بمعايير مدخل دراسة.
لم يكن أي من الأطفال كانت أو يتلقون حاليا العلاج عملية إزالة معدن ثقيل. ولم يكن أي من الأطفال في أي حمية أو المكملات الغذائية التي كانت خارج عن المألوف. لا شيء من الأطفال لديهم اضطراب X الهشة، والتصلب درني، بيلة الفينيل كيتون (PKU)، متلازمة ليش نيهان، ومتلازمة الكحول الجنينية أو التاريخ من تعاطي المخدرات الأمهات. الجدول 1 يلخص المعلومات الديموغرافية التي تم جمعها على كل موضوع.
2.3. القياسات

وCARS هي 15 البند مقياس التصنيف السلوكي ضعت لتحديد التوحد وكذلك لوصف كمي لشدة الاضطراب. ويعتبر مجموع نقاط من 15 حتي 29،5 nonautistic. يعتبر على درجة من 30 حتي 36،5 خفيفة الى معتدلة مرض التوحد. يعتبر على درجة 37-60 معتدلة إلى التوحد الشديد. وCARS وراسخة التدبير. موثوقية الاتساق الداخلي α-معامل هو 0.94. موثوقية معامل الارتباط بين التصنيفات هو 0.71. ومعامل الارتباط الاختبار وإعادة الاختبار هو 0.88. CARS عشرات لها صلاحية عالية المتعلقة المعيار بالمقارنة مع التقييم السريري خلال جلسات التشخيص نفسها، مع وجود ارتباط كبير من 0.84 [25]. المحقق دراسة أصل (JKK) تمت زيارتها خبرة كبيرة في تقييم العديد من المشاركين في الدراسة تشخيص مع ASD باستخدام CARS تصبح النتيجة الجدول 1 يلخص مجمل متوسط ​​CARS عشرات ± الانحراف المعياري لدرس المشاركين.
دراسة الجدول 1. ملخص الديموغرافي للمشاركين تشخيص مع ASD.
وقد أجريت أعمى الشعر سامة تعرض عنصر الاختبار الشخصي عن طريق بيانات الطبيب، والسريرية مختبر تحسين قانون / تعديل (CLIA) مختبر وافق عليها، على كل مشارك الدراسة باستخدام بروتوكول موحد. لتقليل التباين العناية بالشعر، وكان جميع المشاركين في الدراسة شعرهم غسلها مع شركة جونسون آند جونسون شامبو الأطفال لمدة أسبوع على الأقل قبل جمع عينات الشعر. تم جمع جميع العينات الشعر وفقا لتعليمات الطبيب البيانات باستخدام مقص الفولاذ المقاوم للصدأ، وانقطعت عن الشعر في غضون 2 بوصة من فروة الرأس (للحد من التعرض للملوثات الخارجية). تم إرسال عينات الشعر لبيانات الطبيب في مجموعات الفردية المقدمة وتحليلها باستخدام تحليل البروتوكولات المخبرية الخاصة بهم [26، 27]. في بيانات الطبيب، وعينات الشعر مزيد من خفض وغسلها باستخدام طريقة تعديل وضعتها الوكالة الدولية للطاقة الذرية. قطعت عينات الشعر إلى حوالي 0.3 سم قطعة ومختلطة للسماح تمثيلية عينة فرعية من العينة الشعر. بعد القطع، وجرفت كل عينة أربع مرات مع 1: 200 التخفيف ت / v من تريتون X-100، ثم تشطف مع الأسيتون والسماح لاستنزاف. تم عينات ثم تشطف ثلاث مرات مع الماء منزوع الأيونات فائقة نقية ومرتين مع الأسيتون. وتم وزن العينات المجففة قبل النيتريك حمض الهضم / الميكروويف. بعد الهضم، وتبريد العينات وتمت إضافة قسامة 500 ميكرولتر من معيار داخلي (IS). وكانت مخففة العينات مع 50 مل من النقاوة والماء منزوع الأيونات كل الناتجة ارتفعت IS. ثم تم تحليل عينات الفرد الواحد للمحتوى عنصر باستخدام يقترن بالحث البلازما الطيف الكتلي (ICP-MS). لضمان صحة، تم تحليل البيانات التالية الطبيب: معايير التحقق المعايرة، عنصر تحكم إشارة الشعر المعتمدة، والضوابط في المنزل، ارتفعت عينات الشعر وغيرها من عينات الرقابة المناسبة تم تحليلها من قبل بيانات الطبيب [26، 27]. أعربت تقارير الدراسة على نتائج شعر المعادن السامة كما ميكروغرام المعادن السامة في غرام الشعر لكما، والرصاص والزئبق والكادميوم والكروم (الكروم) والكوبالت (المشارك) والنيكل (ني) والمنغنيز (المنغنيز) والألومنيوم (آل) والقصدير (القصدير)، واليورانيوم (U). الجدول 2 يلخص ± متوسط ​​تركيزات الشعر الانحراف المعياري الشاملة لكل المعادن السامة التي شملتها الدراسة الحالية.
دراسة الجدول 2. ملخص تركيزات المعادن السامة الشعر بين المشاركين تشخيصها مع ASD.
2.4. تصميم الدراسة

تم الانتهاء من CARS على كافة المشاركين في الدراسة من قبل المحقق دراسة أصل (JKK)، الذي لاحظ المشاركون وأجرت مقابلات مع آبائهم (ق). وبعد التقييم الأولي من كل موضوع من قبل المحقق دراسة أصل (JKK)، وقد تم جمع الشعر على كل موضوع للعناصر السامة شعر التعرض الاختبار الشخصي، وبالبريد الشعر لمختبر بيانات الطبيب في مجموعات اختبار الفردية المقدمة. تم ترميز كل عينة إلى مختبر البيانات المقدمة من الطبيب، وحصل المختبر أي معلومات سريرية حول المشاركين تقديم عينات للتحليل.
2.5. التحليل الاحصائي

تم استخدام الحزمة الإحصائية الواردة في StatsDirect (الإصدار 2.7.8) لجميع الاختبارات الإحصائية، وكان يعتبر على الوجهين ص -value <0.05 دلالة إحصائية في هذه الدراسة. من أجل تقييم العلاقة المحتملة بين ASD شدة والمعادن السامة شعر (ن = 18)، والاستفادة من سبيرمان رتبة ارتباط اختبار الإحصائية. نتائج تحليل قررت ارتباط سبيرمان للرتبة (رو)، فاصل الثقة 95٪ لرو (Z فيشر تحويل)، وعلى الوجهين ص -value. وكانت فرضية العدم انه لا توجد علاقة بين شدة ASD وتركيزات المعادن السامة الشعر موجودة. وقد استخدمت لسبيرمان رتبة ارتباط اختبار الإحصائية في الدراسة لأنه من المسلم به عموما بمثابة اختبار إحصائي اللامعلمية، وبالتالي، فإنه يتطلب الحد الأدنى من الافتراضات فيما يتعلق بتوزيع العام للبيانات التي تم فحصها.
3. النتائج والمناقشة

كما تلخيصها في الجدول 1، كان المشاركين في الدراسة بفحص بين 1-6 سنوات من العمر بمتوسط ​​عمر قدره 3.5 ± 1.1 سنوات من العمر. كان هناك ذكور أكثر من الإناث فحص المشاركين (نسبة الذكور / الإناث = 5: 1). وعموما، كان العام نفسه الميلاد 2001 ± 1.1 (المدى = 1999-2003). ومن بين المشاركين في الدراسة، كانت القوقازيين (72٪) أكثر الغالب من الأقليات (28٪). يسجل كانت CARS متوسط ​​الإجمالية 41.4 ± 4.1 (المدى = 37-51) للمشاركين في الدراسة. وعلاوة على ذلك، أكثر من المشاركين في الدراسة قد شهدت حدثا تراجعية في تنمية بعض الوقت بعد الولادة (55.6٪) من لم (44.4٪).
الجدول 3 يلخص العلاقة بين الشعر تركيزات المعادن السامة وASD شدة على النحو المحدد من قبل سبيرمان رتبة ارتباط اختبار الإحصائية. تم العثور على تركيزات الزئبق زيادة الشعر لربط بشكل كبير مع زيادة شدة ASD (رو = 0.58، P = 0.013). وعلاوة على ذلك، وإزالة الشاذة أعلى نقطة بيانات الزئبق (CARS يسجل = 43، والشعر زئبق مستوى = 4.4 ميكروغرام من الزئبق غرام من الشعر في المائة) من مجموعة العينة التي يتم تقييمها لا يزال كشفت عن وجود ارتباط كبير (رو = 0.57، P = 0.018). في المقابل، لم يلاحظ أي ارتباط ملموس بين أي من غيرها من تركيزات المعادن السامة الشعر وASD شدة.
الجدول 3. ملخص للعلاقة بين الشعر 1 تركيزات المعادن السامة وASD شدة 2.
الشكل 1 يلخص توزيع مؤامرة مبعثر من تركيزات الزئبق الشعر بالمقارنة مع CARS العشرات. نتائج هذه الدراسة تشير إلى وجود علاقة ذات دلالة إحصائية بين زيادة ASD شدة وزيادة تركيزات الشعر زئبق بين المشاركين في الدراسة تشخيص معتدلة إلى ASD شديد. في المقابل، أظهرت المعادن السامة الأخرى عدم وجود علاقة كبيرة مع ASD شدة. ونتيجة لذلك، تساعد هذه الدراسة إلى تقديم الدعم الآلية إضافي للزئبق في المسببات من شدة السريرية لتشخيص ASD. يتم اعتماد النتائج لوحظ في هذه الدراسة من قبل عدد متزايد من الاستعراضات الحرجة الأخيرة التي تقدم المعقولية البيولوجية للتعرض للزئبق تلعب دورا المسببة كبير في التسبب في أي إس دي إس.
على سبيل المثال، ذكرت Garrecht وأوستن أن الزئبق يتم التعرف على عصبي البيئي في كل مكان، وأن هناك أدلة متزايدة على ربطه أي إس دي إس من الأساليب التي تركز على المؤشرات الحيوية للضرر الزئبق، وقياسات الزئبق التعرض، البيانات الوبائية، والدراسات على الحيوانات [28]. ومن بين المناطق الرئيسية أظهرت لربط التعرض للزئبق مع تشخيص ASD فحصها من قبل هؤلاء الباحثون هي: (1) المسار والآليات الخلوية من الزئبق التعرض في أي إس دي إس. (2) أمثلة من المتغيرات الجينية المحتملة التي ترتبط كل من زئبق الحساسية وأي إس دي إس. (3) دور زئبق قد لعب دور السموم البيئية تأجيج الاكسدة الموجودة في أي إس دي إس. (4) دور ضعف الميتوكوندريا. و (5) دور الزئبق في neuroexcitory غير طبيعي وexcitotoxity التي قد تلعب دورا في ديسريغولاتيون المناعة وجدت في أولئك الذين لديهم تشخيص ASD.

الشكل 1. ملخص لتوزيع مؤامرة مبعثر من تركيزات الزئبق الشعر بالمقارنة مع CARS العشرات. يستبعد توزيع مؤامرة مبعثر أعلى الشعر الشاذة زئبق المراقبة.

وبالمثل، ووصف الباحثون أن الزئبق هو على نطاق واسع ومستمر في بيئة [29، 30، 31]. الزئبق هو مصدر كل مكان الخطر في الأسماك، والمخدرات، ومبيدات الفطريات / مبيدات الأعشاب، وحشو الأسنان، وموازين الحرارة، واللقاحات، وغيرها من المنتجات / المواد الغذائية. قد تبقى تركيزات مرتفعة من الزئبق في الدماغ من عدة سنوات لعقود بعد التعرض. هذا أمر مهم لأن المحققين قد اعترفت منذ وقت طويل أن الزئبق هو السم النمو العصبي الحيوي التراكمي. أنها يمكن أن تسبب مشاكل في هجرة الخلايا العصبية والفرقة، ويمكن أن يسبب في نهاية المطاف انحطاط الخلية والموت. وقد وصفت حالة على تقارير من الموضوعات انحدارات التنموية مع أعراض ASD التالية و / أو في مرحلة الطفولة المبكرة زئبق تعرض الجنين، وربطت الدراسات الوبائية التعرض للزئبق مع مخاطر مرتفعة للموضوع يتم تشخيصها مع ASD. المناعي، الحسية والعصبية، والسيارات، والاختلالات السلوكية مماثلة لسمات تعريف أو المرتبطة تم الإبلاغ عن أي إس دي إس التالية زئبق التسمم مع التشابه تمتد إلى التشريح العصبي، العصبية، والكيمياء الحيوية.
وأخيرا، كيرن وآخرون. فحص أوجه التشابه بين آثار التسمم من الزئبق على الدماغ وأمراض المخ وجدت في تلك تشخيص مع ASD [32]. ووجد هؤلاء الباحثون دليلا على الكثير من أوجه الشبه بين البلدين، بما في ذلك: (1) انحطاط أنيبيب، وتحديدا كبيرة، بعيدة المدى محور عصبي تنكس مع احق تنتشر المحاور فاشل (، محاور قصيرة رقيقة)؛ (2) فرط تغصنية. (3) neuroinflammation. (4) دبقية تفعيل / نجمي الخلايا. (5) تنشيط الدماغ استجابة مناعية. (6) مرتفعة الدبقية ييفي البروتين الحمضية. (7) الاكسدة وبيروكسيد الدهون. (8) انخفضت انخفاض مستويات الجلوتاثيون وارتفاع الجلوتاثيون المؤكسد. (9) ضعف الميتوكوندريا. (10) اضطراب في توازن الكالسيوم والإشارات. (11) تثبيط كربوكسيل حمض الجلوتاميك (GAD) النشاط؛ (12) تعطل GABAergic والتوازن glutamatergic. (13) تثبيط IGF-1 وميثيونين سينسيز النشاط؛ (14) ضعف في مثيلة. (15) الأوعية الدموية خلل الخلايا البطانية والتغيرات المرضية في الأوعية الدموية. (16) انخفضت الدماغي / المخيخ تدفق الدم. (17) زيادة البروتين اميلويد السلائف. (18) فقدان الحبيبية والخلايا العصبية في المخيخ. (19) زيادة مستويات خلوى الموالية للالتهابات في الدماغ (TNF-α، IFN-γ، IL-1β، IL-8)؛ و(20) الشاذة العامل النووي كابا ضوء سلسلة محسن من خلايا B تفعيلها (NF-kappaB). كما نظر هؤلاء الباحثون قدرة الزئبق لتحفيز وتآزر مع السموم ومسببات الأمراض الأخرى في الطريقة التي يمكن أن تسهم في أمراض الدماغ في ASD. وخلص هؤلاء الباحثون أن الأدلة تشير إلى أن الزئبق قد يكون إما سببية أو اشتراكات في أمراض الدماغ في ASD، وربما تعمل بالتآزر مع المركبات أو مسببات الأمراض السامة الأخرى، لإنتاج أمراض الدماغ لوحظ في تلك تشخيص مع ASD.
3.1. نقاط القوة الدراسة

ومن أهم نقاط القوة في هذه الدراسة هي المراسلات نتائجها لتلك التي ذكرت من قبل المحققين السابق. هذا ينطبق بشكل خاص فيما يتعلق دراسة سابقة أجراها Elsheshtawy آخرون هذا. [5]. درس هؤلاء الباحثون لفيف من الخاضعين للدراسة تشخيص مع ASD من نفس الفئة العمرية والجنس توزيع مثل تلك التي شملتها الدراسة الحالية. ولاحظ هؤلاء الباحثون وجود علاقة ذات دلالة إحصائية بين زيادة ASD شدة تقاس CARS وزيادة الزئبق في الشعر من الخاضعين للدراسة مقارنة لنتائج لوحظ في هذه الدراسة. كما هو الحال في هذه الدراسة، فشل هؤلاء الباحثون إلى إيجاد علاقة ذات دلالة إحصائية بين تركيزات الشعر الرصاص وASD شدة تقاس CARS. حتى أنهم لاحظوا، بما يتفق مع هذه الدراسة، وهو اتجاه غير هامة نحو وجود ارتباط بين زيادة تركيزات الرصاص الشعر وتقليل ASD شدة تقاس CARS.
آخر قوة كبيرة من هذه الدراسة هي التي تم تضمينها المشاركين في الدراسة فقط مع تشخيص ASD من معتدلة إلى شدة شديدة. هذه القوة من هذه الدراسة وقعت لأن الدراسات السابقة اقترحت الأولى التي قد تكون هناك اختلافات في المعادن السامة أنماط إفراز الشعر بين موضوعات تشخيص مع ASD بالمقارنة مع الضوابط neurotypical [3، 19، 20، 21]. ثانيا، اقترح دراسات سابقة أيضا أنه حتى بين موضوعات تشخيص مع ASD، وقد لوحظ أنه لوحظ سابقا أن الخاضعين للدراسة تشخيص معتدلة إلى شدة شديدة ASD كان إلى حد كبير تركيزات مختلفة من المعادن السامة من الخاضعين للدراسة تشخيص مع ASD من شدة معتدلة [12، 13]. ونتيجة لذلك، فإن المخاوف المذكورة أعلاه لا يحتاج إلى أن ينظر في هذه الدراسة لتم تشخيص جميع المشاركين في الدراسة بحثت مع معتدلة إلى ASD شديد. بالإضافة إلى ذلك، استخدمت هذه الدراسة إلى تحديد مبدئي من معتدلة إلى شدة ASD شديدة على CARS عشرات (37-60) المستمدة من التحقيقات التي تم نشرها مسبقا، بحيث يمكن إدخال أي تحيزات جمع البيانات المنصب من قبل المحققين في صدد طرق تحديد ASD شدة.
3.2. القيود الدراسة

عند النظر في القيود المفروضة على هذه الدراسة، وكانت عينة من المشاركين في الدراسة فحص الصغيرة. ونتيجة لذلك، فمن الممكن أن مع أعداد إضافية من المشاركين في الدراسة، ودراسة تصميم توظيف كان يتعين على السلطة إحصائية إضافية للكشف عن العلاقة المحتملة بين الشعر تركيزات المعادن السامة وASD شدة تقاس CARS. وعلى الرغم من هذا القيد المحتمل، إلا أن الدراسة الحالية لديها قوة إحصائية كافية للكشف عن وجود ارتباط ذات دلالة إحصائية بين تركيزات الزئبق الشعر وASD شدة. وكان آخر القيد المحتمل لهذه الدراسة أن بعض النتائج الملاحظة قد حدثت بسبب وجود فرصة إحصائية أو بسبب بعض التحيز غير معروف في البيانات التي تم فحصها. كان ينبغي أن يكون هذا القيد المحتمل تأثير صغير على الملاحظات التي أبديت بسبب أجريت على عدد محدود من الاختبارات الإحصائية على عينة البيانات الحالية، وحجم ونوعية الارتباطات احظ يجادل ضد نتائج هذه الدراسة كونها نتيجة الصدفة الإحصائية أو بسبب بعض التحيز غير معروف. أيضا، متانة الإحصائية للنتائج الحالية تشير إلى وجود علاقة ذات دلالة إحصائية بين تركيزات الزئبق الشعر وASD شدة، حتى بعد القضاء على الشعر الشاذة أعلى قيمة الزئبق من النتائج المعلنة. هذا يجادل ضد عازيا النتائج الملاحظة للصدفة الإحصائية أو بعض التحيز غير معروف. وعلاوة على ذلك، واتساق النتائج في هذه الدراسة مع دراسات سابقة تقول بالإضافة ضد فرصة إحصائية أو التحيز غير معروف في البيانات. وكان آخر القيد المحتمل لهذه الدراسة أن CARS اختبار استخدمت للمساعدة في تأكيد تشخيص ASD وقياس شدة ASD الشاملة. فمن الممكن أن اختبارات أخرى مثل التوحد جدول التشخيص مراقبة (ADOS) أو التوحد مقابلة تشخيصية، المنقحة (ADI-R) قد يفضي إلى نتائج مختلفة من تلك التي لوحظت في هذه الدراسة. سيكون من الاستخدام في الدراسات المستقبلية لتوظيف الاختبارات ASD الأخرى لتحديد إمكانية المقارنة بين النتائج المتحصل عليها مع تلك التي وجدت في هذه الدراسة. كما أنه ليس من الممكن مع المحتملين مستعرضة تصميم ASD فوج من هذه الدراسة لتعيين وجود علاقة سببية بين التعرض للزئبق وASD شدة أو لاستخلاص النتائج بين تركيزات الزئبق في المواد تشخيص مع ASD بالمقارنة مع الضوابط neurotypical. وعلى الرغم من هذه القيود، والعلاقة الكبيرة بين الشعر زيادة تركيزات الزئبق وASD شدة تقول أن تركيزات الزئبق لم يكن لها تأثير كبير على ASD شدة. ولذلك، ينبغي الدراسات المستقبلية تقييم أساس المسببة المحتملة للزئبق التعرض مع ASD شدة في مختلف قطاعات السكان. وأخيرا، فإن الدراسة الحالية أيضا لم تسمح لنا لتحديد مصادر الزئبق المساهمة بشكل كبير في الشعر تركيزات الزئبق الملاحظة. ومن المثير للاهتمام، والمحققين في السابق دراسة صغيرة نشرت على تركيزات الزئبق الشعر في تشخيص الأطفال مع ASD، مع التركيبة السكانية مماثلة للمشاركين درست في هذه الدراسة، لاحظ أن الزئبق التعرض من اللقاحات التي تحتوي على ثيميروسال ساهم إلى حد كبير في تركيزات الزئبق الشعر، حيث بوصفه وقد لوحظت زيادات غير هامة خفيفة من متوسط ​​الشعر تركيزات الزئبق في المواد تشخيص مع ASD الذي كان أعدادا متزايدة من حشو الأسنان خلال فترة الحمل أو كان زيادة تناول الأسماك أثناء الحمل [أمهات 33]. ونتيجة لذلك، ينبغي أن الدراسات المستقبلية تقييم العلاقة بين مصادر مختلفة من التعرض للزئبق وتركيزات الزئبق الشعر في مواضيع تشخيص مع ASD.
4. الاستنتاجات

في الختام، تقدم هذه الدراسة دليلا إضافيا على وجود صلة بين الزئبق وتشخيص ASD. النتائج الملاحظة تتفق مع الدراسات السابقة، وتساعد على الكشف عن رؤى الآلية في العلاقة بين زيادة تركيزات الزئبق وزيادة ASD تشخيص شدة. ينبغي أن الدراسات المستقبلية كذلك تقييم العلاقة بين التعرض للزئبق وASD تشخيص شدة في السكان دراسة أخرى.

شكر وتقدير

الكتاب أود أن أشكر توماس Carmody لخبرته وبائية في استعراض الأساليب الإحصائية المستخدمة في الدراسة الحالية.
تضارب المصالح

تعلن المؤلفين أنهم تورطوا في اللقاح / التقاضي بيولوجي.
المراجع

  • ديسوتو، MC. Hitlan، RT الفرز من الغزل التوحد: المعادن الثقيلة ومسألة حدوث اكتا Neurobiol. إكسب. (حرب) 2010، 70، 165-176. [الباحث العلمي من Google]
  • جاير، DA. Audhya، T .؛ كيرن، JK. جاير، ومستويات الزئبق MR الدم في مرض التوحد اضطراب طيف: هل هناك مستوى عتبة اكتا Neurobiol؟. إكسب. (حرب) 2010، 70، 177-186. [الباحث العلمي من Google]
  • Majewska، MD؛ Urbanowicz، E؛ بين جمهورية كوريا وBujko، P .؛ Namyslowska، I .؛ ميرزيفسكي، ومستويات P. العمر التي تعتمد على أقل أو أعلى من الزئبق في شعر الأطفال المصابين بالتوحد مقارنة بمجموعة التحكم الصحة. اكتا Neurobiol. إكسب. (حرب) 2010، 70، 196-208. [الباحث العلمي من Google]
  • يون، SI. جين، SH؛ كيم، SH؛ ليم، S. Porphyrinuria في الأطفال المصابين بالتوحد الكورية: العلاقة مع الاكسدة J. Toxicol. البيئى. الصحة A 2010، 73، 701-710. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • Elsheshtawy، E؛ طوبار، S؛ شيرا، K .؛ عطا الله، S؛ Elkasaby، R. دراسة بعض المؤشرات الحيوية في شعر الأطفال الذين يعانون من التوحد. الشرق الأوسط داء. والطب النفسي 2011 18، 10/06. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • Blaurock-بوش، E؛ أمين، OR؛ رباح، والمعادن الثقيلة T. والعناصر النزرة في الشعر والبول من عينة من الأطفال العرب يعانون من اضطراب طيف التوحد. Maedica (Buchar.) 2011، 6، 247-257. [الباحث العلمي من Google]
  • لاكشمي، MD؛ غيثا، A. مستوى من العناصر النزرة (النحاس والزنك والمغنيسيوم والسيلينيوم) والعناصر السامة (الرصاص والزئبق) في الشعر والأظافر من الأطفال الذين يعانون من التوحد. بيول. تتبع إيليم. احتياط 2011، 142، 148-158. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • Obrenovich، ME، Shamberger، RJ. ونسديل، D. المعادن الثقيلة غيرت وناقلة الكيتول وجدت في اضطراب طيف التوحد. بيول. تتبع إيليم. احتياط 2011، 144، 475-486. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • كيرن، JK. جاير، DA. آدامز، JB؛ ميهتا، JA. Grannemann، BD. جاير، المؤشرات الحيوية MR السمية في التوحد اضطراب طيف: دراسة أعمى البروفيرين البولية Pediatr. الباحث. 2011، 53، 147-153. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • آدامز، JB؛ بارال، M .؛ غايس، E؛ ميتشل، J .؛ انجرام، J .؛ هنسلي، A .؛ Zappia، I؛ نيومارك، S؛ Gehn، E؛ روبين، RA؛ ميشل، K .؛ برادستريت، J .؛ EL-ضهر، JM يرتبط شدة التوحد مع سمية عبء الجسم المعدني والأحمر مستويات الجلوتاثيون خلايا الدم. J. Toxicol. 2009، 2009، 532640. [الباحث العلمي من Google]
  • كيرن، JK. جاير، DA. آدامز، JB؛ جاير، MR العلامات البيولوجية الزئبق الجسم عبء المترابطة مع مجال التشخيص أعراض سريرية محددة من اضطرابات طيف التوحد. Biometals 2010، 23، 1043-1051. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • جاير، DA. كيرن، JK. كارفر، CR؛ آدامز، JB؛ Audhya، T .؛ ناتاف، R .؛ جاير، MR المؤشرات الحيوية السمية البيئية والتعرض في التوحد. J. Neurol. الخيال العلمي. 2009، 280، 101-108. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • جاير، DA. كيرن، JK. جاير، MR A تقييم المحتملين أعمى البروفيرين البولية الآيات شدة السريرية لاضطرابات طيف التوحد. J. Toxicol. البيئى. الصحة A 2009، 72، 1585-1591. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • رهبر، MH؛ Samms-فون، M .؛ وفيلاند، KA. Ardjomand الحسابي، M .؛ تشن، Z؛ Bressler، J .؛ شكسبير-Pellington، S؛ بستان، ML؛ ازهر، K .؛ بيرسون، DA. الور، GC. Boerwinkle، وتركيزات الاستهلاك والزئبق في الدم E. المأكولات البحرية في الأطفال الجامايكي مع وبدون اضطرابات طيف التوحد. Neurotox. احتياط 2012. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]

 

__________________
استشارى الادوية الطبيعيه وباحث وخبير فى علاجات التوحد
رد مع اقتباس
  #6  
قديم 12-02-2015, 09:18 PM
رافت ابراهيم رافت ابراهيم غير متواجد حالياً
عضو ذهبي
 
تاريخ التسجيل: Dec 2011
المشاركات: 520
افتراضي مستويات المعادن في الشعر في مرحلة الطفولة: جمعيات الأولية مع السلوكيات العصبية

 

http://www.mdpi.com/2305-6304/2/1/1/htm

تاريخ النشر: 30 ديسمبر 2013 ملخص

: لأكثر من 100 عاما، وقد محطة الكهروكيميائية تعمل في فيليكس (كاتالونيا، إسبانيا) من نهر إيبرو. وقد نشأت أنشطتها تراكم شديد من الملوثات البيئية (معادن، organochlorinated المبيدات والعناصر المشعة) في الرواسب من الخزان فيليكس، في حين أن الزئبق (زئبق) كما تم الإفراج عن كثير من الأحيان إلى الهواء. وقد ارتبط التعرض البيئي للملوثات الصناعية مع انخفاض الذكاء والمشاكل السلوكية. في هذه الدراسة، قمنا بتقييم، في 53 الأطفال الذين يعيشون في قرية فيليكس والمناطق المحيطة بها، والعلاقات بين تركيزات عدد من العناصر النزرة (باسم، كن، الكادميوم، جيم والزئبق والمنجنيز والنيكل، الرصاص، القصدير ، TL، U و V) في الشعر ومستويات هرمون التستوستيرون في الدم، فيما يتعلق التعديلات العصبية المحتملة. (الرصاص) الرصاص والزئبق أظهرت أعلى متوسط ​​التركيزات في عينات الشعر. ومع ذلك، كانت مستويات الزئبق الحالية أقل من تلك التي وجدت سابقا في الأطفال الذين يعيشون في نفس المنطقة، بينما كان تركيز العناصر المتبقية مماثلة لتلك التي ذكرت في الأدبيات العلمية. وأظهرت نتائج بعض المؤشرات العصبية ارتباط كبير مع المعادن مثل الرصاص واليورانيوم (U). وبشكل أكثر تحديدا، ارتبطت هذه العناصر سلبا مع الذاكرة وفترة رد الفعل ضرب العمل، مما يشير إلى الاندفاع. باختصار، على الرغم من أن تراكيز الرصاص وU في الشعر ضمن مستويات قياسية، يمكن أن تكون مرتبطة على حد سواء المعادن مع بعض، ولكن الطفيفة، والتعديلات العصبية في السكان الطفولة فيليكس. وينبغي تأكيد هذه النتائج عن طريق دراسات الأتراب الولادة في المستقبل، مع السكان دراسة أكبر واستخدام التحليلات الإحصائية أكثر تعقيدا، وتركز على تعرض الإنسان لهذه العناصر المحددة.

الكلمات الدالة:
معادن ثقيلة؛ التعرض البيئي؛ شعر الانسان؛ هرمون تستوستيرون. ن الظهر. الذاكرة العاملة؛ الاندفاع. التنصت على الاصبع

1 المقدمة

لأكثر من 100 عاما، وقد تم مصنع الكلور والقلويات العاملة في قرية فيليكس (كاتالونيا، إسبانيا) من نهر إيبرو. خلال العقود القليلة الماضية، كان هذا المرفق النفايات الصناعية الإغراق في خزان تقع مجاور، مما أدى إلى تراكم الرواسب مع تركيزات عالية جدا من المعادن والمركبات العضوية والعناصر المشعة [1]. بالإضافة إلى ذلك، تم اكتشاف مستويات عالية في الغلاف الجوي من سداسي كلورو البنزين في فيليكس. تم العثور على تركيزات مصل HCB أن تكون أعلى المعدلات المسجلة في أي وقت مضى في السكان عام الإنسان [2]. يمكن إدراج الملوثات البيئية في جسم الإنسان من خلال مسارات مباشرة، مثل ابتلاع التربة، وامتصاص الجلد والاستنشاق الهواء. بالإضافة إلى ذلك، تناول الإنسان من مياه الشرب والمواد الغذائية (بما في ذلك الخضروات والماشية من المناطق المحيطة بها) هو أيضا واحدة من أهم طرق التعرض [1]. في السنوات الأخيرة، وقد تم دفع بعض الانتباه إلى مستويات الملوثات البيئية في محيط فيليكس [3، 4]. وقد أجريت عدة دراسات بشأن تقييم المخاطر على صحة الإنسان، وذلك قبل استخراج الرواسب الملوثة [1، 5].
يتم تعريف الرصد البيولوجي البشري وقياس المباشر من تعرض الناس للملوثات البيئية عن طريق قياس المواد الكيميائية أو نواتج تفاعلاتها في الأنسجة البيولوجية، مثل الدم أو البول أو عينات أخرى [6]. وقد سمح تطوير منهجيات وتقنيات جديدة التحليلية الحديثة لاستخدام المصفوفات الأخرى، التي هي أقل أو غير الغازية. ومن بين هذه، والشعر البشري هو جهاز مناسب للكشف عن العقاقير الطبية وتعاطي المخدرات وتقييم العناصر النزرة نقص [7، 8]. وعلاوة على ذلك، والشعر البشري تم مختارة خصيصا لمدى ملاءمتها لتقييم تعرض الإنسان للالمعادن بشكل عام والزئبق، على وجه الخصوص. وقد أجريت دراسات الرصد البيولوجي سابقا في فيليكس من أجل قياس مستويات الزئبق (زئبق) في شعر الأطفال [9، 10]. ومع ذلك، لا توجد معلومات بشأن التعرض للزئبق الحالي أو عناصر أخرى متاحة حاليا.
وقد ارتبط التعرض البيئي للملوثات الصناعية مع المخابرات خفضت والمشاكل السلوكية [11]. ومن بين المواد السامة البيئية الأخرى، وقد تلقى المعادن اهتماما كبيرا، لأنها قد تتعلق التأثيرات السمية العصبية في الحيوانات والبشر [12]. على وجه الخصوص، والأطفال والمسنين هم السكان المعرضين للخطر بشكل خاص، حتى عند مستويات معتدلة من التعرض. ومع ذلك، يتم مفهومة آليات حقيقية من العصبية المعدنية. وعلاوة على ذلك، ارتبط وجود مستويات مفرطة من العناصر السامة والأساسية في جسم الإنسان ليس فقط مع بعض التعديلات المعرفية المحتملة، ولكن أيضا مع الاضطرابات النفسية لدى الأطفال [13]. في الواقع، وقد اقترح بعض الكتاب على ضرورة تحديد حمولة الجسم من المواد السامة البيئية، فضلا عن استهلاكهم الغذائي، ليفسر جزئيا الاضطرابات النفسية [13].
حاليا مفهومة على نطاق أوسع العلاقة بين الدماغ وجهاز الغدد الصماء. يحتوي الدماغ مستقبلات الاندروجين والاستروجين ل، كونها قادرة على تجميع واستقلاب هذه المنشطات، في حين الهرمونات تأثير على عوامل عصبية وتأثير السلوك المعرفي [14]. الغدد التناسلية هرمونات الستيرويد تصبح مرتفعة خلال فترة البلوغ، النحت الدماغ للمراهقين في كل من الإناث والذكور. وعلاوة على ذلك، تم الاعتراف بأن أفعال هرمونات البلوغ أثناء المراهقة قد تكون له عواقب طويلة الأمد [15]، في حين أن هناك أيضا أدلة على وجود دور التستوستيرون على الإدراك [14].
بناء على ما سبق، وتهدف هذه الدراسة إلى تحليل تركيزات عدد من العناصر النزرة في عينات الشعر ومستويات هرمون تستوستيرون في عينة دم من الأطفال (الذين تتراوح أعمارهم بين 12-13) الذين يعيشون في فيليكس والقرى المحيطة بها. تم التحقيق أيضا العلاقة بين تلك المعايير والتعديلات العصبية المختلفة، فضلا عن المتغيرات المعرفية والنفسية.
القسم التجريبية 2.

2.1. المواضيع

في عام 1997، بدأ الفوج الولادة في فيليكس (كاتالونيا، إسبانيا) والقرى المحيطة بها، وذلك بهدف تقييم الآثار الصحية السلبية المحتملة من التعرض للملوثات البيئية والملوثات العضوية الثابتة بشكل خاص، مثل البنزين، والزئبق. ودعي جميع النساء الحوامل يلدن في المستشفى الرئيسي في المنطقة تقييمها بين عامي 1997 و 1999 للمشاركة في الدراسة، منها 102 تم تجنيدهم في نهاية المطاف. تم متابعتها أطفالهم عليها في سن 1 و 4 سنوات (17.6٪ من خسر لمتابعة). في 12-13 سنة، دعيت جميع الأطفال من فوج للمشاركة في حملة المتابعة اللاحقة. قبلت أربعين واحد منهم (40.2٪) الدعوة، والانضمام إلى الدراسة. في المنطقة الواقعة تحت التقييم، هناك واحد فقط في المدرسة الثانوية حيث يدرس كل هؤلاء الأطفال. من أجل زيادة القدرة الإحصائية، دعي زملاء هؤلاء الأطفال أيضا للمشاركة في الدراسة، وأضيفت 19 منهم. وتم إبلاغ جميع الآباء والأمهات من الدراسة ووقع على استمارة الموافقة.
2.2. جمع البيانات

الانتهاء من الأطفال وأولياء أمورهم استبيان عام على استعداد للحصول على معلومات عن SES (الحالة الاجتماعية والاقتصادية) وفقا لمكان العمل الوالدين، وظروف المنزل، وأسلوب حياة والدي (السجائر واستهلاك الكحول) وذلك من الطفل (النشاط البدني والنظام الغذائي والسجائر واستهلاك الكحول) وصحة الجهاز التنفسي والتطور الجنسي للطفل (مقياس تانر) [16، 17]. تم استخدام تصنيف المملكة المتحدة المسجل العام 1990 لمواضيع مجموعة على حسب الطبقة الاجتماعية وفقا لاحتلال الأم والأب مشفرة باستخدام التصنيف الدولي الموحد للمهن (ISCO-88) [18 تم تجميعها] الطبقة الاجتماعية إلى ست فئات. تم إنشاء أربعة فقا لاحتلال الأمهات صنفت (، والمهرة المهنية وغير الماهرة والعاطلين عن العمل) النساء، والعاطلين عن العمل إلى ثلاث مجموعات وفقا لاحتلال أزواجهن [3]. تم جمع عينات الشعر من 53 أطفال لتحديد المحتوى المعدني، في حين أن 44 من هؤلاء كما تبرعت الدم للتحليل هرمون تستوستيرون. وأخيرا، تم تقييم تطوير العصبية للأطفال ذوي التجارب المختلفة، كما هو موضح أدناه.
2.3. تحليل الشعر

قطعت عينات الشعر من منطقة قريبة من المنطقة القفوية من فروة الرأس. تم غسلها العينات وهضمها بعد الإجراء المنهجي ذكرت سابقا [19]. لفترة وجيزة، تم علاج حوالي 150 ملغ من كل عينة مع 2 مل من حمض النيتريك 65٪ (Suprapur، ميرك، دارمشتات، ألمانيا) لمدة 8 ساعات في درجة حرارة الغرفة و 8 ساعات إضافية في 80 ° C. وفي وقت لاحق، وكانت مخففة مقتطفات إلى 10 مل وجمدت في أنابيب زجاجية حتى تحليل [20]. تركيز الزرنيخ (As)، والبريليوم (كن)، الكادميوم (الكادميوم) والسيزيوم (CS) والزئبق (زئبق) والمنغنيز (المنغنيز) والنيكل (ني)، (الرصاص) الرصاص والقصدير (القصدير)، الثاليوم ( TL) واليورانيوم (U) والفاناديوم (V) تم تحديدها من قبل إضافة بالحث البلازما الطيف الكتلي (ICP-MS، بيركن إلمر الهمة 6000، التايم، MA، الولايات المتحدة الأمريكية). أجريت مراقبة الجودة / ضمان الجودة (QA / QC) عن طريق تحليل المعايير (بنكرياس كبدي جراد البحر، NRC كندا ضرر-2) والفراغات كل 10 عينات. وكانت حدود الكشف: 0.003 ميكروغرام / غرام لكن وخدمات العملاء. 0.007 ميكروغرام / غرام لU؛ 0.03 ميكروغرام / غرام لالكادميوم والمنجنيز والرصاص، ثاليوم. 0.06 ميكروغرام / غرام في القصدير. 0.13 ميكروغرام / غرام لووالزئبق والنيكل. و 0.33 ميكروغرام / غرام لV. الانتعاش نسب تتراوح بين 70٪ و 120٪ (النيكل والزئبق، على التوالي).
2.4. تحليل هرمون التستوستيرون

تم جمع عينات الدم الصيام الصباح في الصباح الباكر (8: 00-10: 00 صباحا) في ABS-فيليكس، ومركز الرعاية الصحية الأولية من فيليكس. تم aliquoted المصل من كل مشارك إلى 0.5 مل. وقد تم تحليل العينات في غضون يوم الاستخراج. تم تنفيذ مجموع قياس التستوستيرون باستخدام الوصول (بيكمان كولتر، فولرتون، CA، الولايات المتحدة الأمريكية) الآلي محلل multianalyte (LXI-725 المتكاملة)، وذلك باستخدام تعليمات المسلم. والحد من الكشف تراوحت ،35-55،5 نانومول / لتر.
2.5. تقييم العصبية

في هذه الدراسة، قمنا بتقييم عدة جوانب التنمية العصبية. هذه المجالات المعرفية المختلفة شملت تتعلق وظيفة قشرة الفص الجبهي وظيفة الحركة والنتائج السلوكية المرتبطة السلوكيات التخريبية في الأطفال (الذاكرة، والمرونة، الطلاقة اللفظية وأداء المحرك يعمل). يتألف التقييم المعرفي من 5 الاختبارات النفسية العصبية المختلفة (ن مرة أخرى، ودرب جعل اختبار-B (TMT-B)، الطلاقة الدلالية والصوتية والتنصت على إصبع اختبار (FTT)).
الاختبار ن الظهير مهمة المستمرة للأداء تستخدم لقياس جزء من الذاكرة العاملة والسيطرة على الانتباه [21]. إن المهمة ن الظهير البصرية سلسلة من 4 محفزات مختلفة (الأرقام والكلمات) التي قدمت في وسط الشاشة. ويطلب من جميع المشاركين الضغط على زر "الهدف" عندما يظهر الهدف على الشاشة. في حالة 1 مرة أخرى، وكان الهدف أي حافز مطابق لتحفيز تسبقها مباشرة. في حالة 2 مرة أخرى، وكان الهدف أي حافز مطابق لاحد قدم تجربتين الظهر. في حالة 3 مرة أخرى، وكان الهدف أي حافز مطابق لاحد قدم ثلاث محاكمات الظهر. حسبت ستة مختلف أوقات رد الفعل ضرب (HRTs)؛ واحد لكل حالة (1-، 2- و3-الخلف) والتحفيز (الأرقام والكلمات). بالإضافة إلى ذلك، كما حسبنا كشف مؤشر الحساسية (د ') لكل كتلة على حدة. يستمد هذا المؤشر من نظرية الكشف عن إشارة ويسمح للتمييز من الإشارة والضجيج، حيث د العالي 'إلى أداء أكثر دقة [22]. نحن احتساب النتيجة الإعلانية "لكل من كتل 6 منفصل. كما استخدمنا اختبار TMT-B لتقييم المرونة الإدراكية وظيفة تنفيذية [23]. هذا الاختبار يتطلب رسم خطوط بالتتابع، وربط الأرقام والحروف، والتي حاصرت وزعت على ورقة ورقة. النتيجة تمثل مقدار الوقت اللازم لإتمام المهمة.
وتألفت اختبارات الطلاقة الدلالية والصوتية من يسأل الأطفال أن أقول الكلمات التي تبدأ بحرف معين أو كلمات ضمن فئة الدلالي محددة (كل دقيقة واحدة ضمن واحدة). هذه التجارب تعكس الأمامية والمناطق الجبهي الصدغي التنشيط، على التوالي [24]. وFTT هو اختبار العصبية أن يفحص محرك يعمل (على وجه التحديد)، سرعة المحرك والتنسيق lateralized [25، 26].
وعلاوة على ذلك، قمنا بتقييم عدة جوانب من سلوك الأطفال. من جهة، أكمل أطفال نقاط القوة والصعوبات الاستبيان (SDQ) [27]. هذا هو استبيان الفحص السلوكي موجز للأطفال الذين تتراوح أعمارهم بين 3 و 16 سنوات. وتنقسم البنود 25 إلى 5 الفروع الجانبية: الأعراض العاطفية (5 وحدات)، وأضاف معا لتوليد مجموع الصعوبات (على أساس 20 سلعة)، إجراء المشاكل (5 وحدات)، وفرط النشاط / الغفلة (5 وحدات)، ومشاكل العلاقة الأقران ( 5 وحدات) والسلوك الاجتماعي الإيجابي (5 وحدات). من ناحية أخرى، قمنا بتقييم نقص الانتباه فرط النشاط اضطراب (ADHD) الأعراض باستخدام معايير ADHD من الدليل التشخيصي والإحصائي للاضطرابات العقلية، الطبعة الرابعة (ADHD-DSM-IV) شكل [28]. و-تملأ الاستبيان من قبل المعلمين. يتكون ADHD-DSM-IV من قائمة 18 أعراض تصنف تحت مجموعتين أعراض منفصلة: الغفلة (9 الأعراض) وفرط النشاط / الاندفاع (9 الأعراض). يتم تصنيف كل بند ADHD-DSM-IV على نطاق و4 نقاط (0 = أبدا أو نادرا؛ 1 = أحيانا، 2 = في كثير من الأحيان، و3 = كثير من الأحيان). قمنا بتحليل نطاق والغفلة (IA) وعلى نطاق وفرط النشاط / الاندفاع (مرحبا)، والمتغيرات المستمرة، حيث تشير أعلى درجات أعلى الأعراض (درجة أسوأ).
2.6. التحليل الاحصائي

تم تقييم الارتباطات المحتملة بين مستويات المعادن في الشعر للأطفال، وتركيزات هرمون التستوستيرون في الدم ونتائج المؤشرات العصبية التي كتبها الارتباط سبيرمان. اختبرنا أيضا ارتباط SES (وفقا لمكان العمل الوالدين)، استهلاك السجائر من قبل الطفل وأسرته / أسرتها وعلى نطاق وتانر حول التنمية العمرانية في الأطفال الذين يعانون من التعرض (المعادن) مع نتائج (مستويات هرمون تستوستيرون والمؤشرات neuropsychobiological). منذ تم العثور على أي ارتباط ملموس بين SES واستهلاك السجائر مع أي متغير آخر، لم تكن مدرجة على حد سواء المعلمات كما شارك في المتغيرات. تم تعيين أهمية في ص <0.05. البرنامج الإحصائي، SPSS © v15.0، وكان يستخدم لعلاج البيانات. لتلك العناصر مع مستويات المعادن تحت الحد من الكشف (اللد)، افترضنا تركيزات تساوي نصف واحد من اللد منها (ND = 1 / 2LOD، ND، لم يتم الكشف).
3. النتائج والمناقشة

3.1. تركيزات المعادن في الشعر ومستويات التيستوستيرون في الدم

تركيزات المعادن في عينات شعر 53 الأطفال الذين يعيشون في فيليكس والمناطق المحيطة بها وصفت القرى في الشكل 1 الرصاص وأظهرت زئبق أعلى المستويات (متوسط ​​القيم: 0.66 و0.47 ميكروغرام / غرام على التوالي، والقيم متوسط: 0.40 و 0.36 ميكروغرام / غرام ، على التوالي). لم يتم الكشف عن الثاليوم في أي عينة، في حين تم الكشف عن السيزيوم فقط في عينة واحدة. في المقابل، أظهرت الكادميوم وV بتركيزات في اثنين من العينات 53.

الشكل 1. تركيزات المعادن (القيم المتوسطة في ميكروغرام / غرام) في عينات شعر الأطفال الذين يعيشون في منطقة فيليكس (كاتالونيا، إسبانيا) (ن = 53). القيم المتطرفة (> طول 1.5 مربع تحت ال25 مئوية أو أعلى من المئين ال75) وكما هو مبين الدوائر، في حين تم تحديد (طول> 3-مربع تحت ال25 مئوية أو أعلى من المئين ال75) الحالات القصوى العلامات النجمية.

في الدراسة الحالية، وكانت مستويات الزئبق (بين ND 1.8 ميكروغرام / غرام) أقل بقليل من تلك التي ذكرت سابقا للأطفال الذين يعيشون في فيليكس والقرى المحيطة بها. مونتوورى، وآخرون. [9] ذكرت مجموع زئبق يعني تركيز 1.09 ميكروغرام / غرام (الوسيط: 0.72 ميكروغرام / غرام) في نفس الفوج الميلاد، عندما كان عمرك أربع سنوات. وكانت مستويات الزئبق أعلى بكثير من تلك التي لوحظت في عدد السكان المرجعية (مينوركا، إسبانيا) (يعني: 0.72 ميكروغرام / غرام؛ المتوسط: 0.48 ميكروغرام / غرام). في عام 1996، باتيستا وآخرون. [10] عن تركيز متوسط ​​هندسي من 0.77 ميكروغرام / غرام في شعر الأطفال الذين تتراوح أعمارهم بين 6-16 المعيشة في مقاطعة تاراغونا، على بعد 80 كيلومترا من فيليكس. وقد تم الإبلاغ عن مستويات شعر مماثلة من الزئبق في الأطفال الذين يعيشون في المنطقة، مقاطعة تاراغونا، تحت تأثير المحتمل لمحرقة النفايات الخطرة، حيث يعني القيم من 0.73، 0.70 و 0.56 ميكروغرام / غرام تم العثور عليها في 1998 و 2002 و 2007، على التوالي [19، 20، 29]. في إيطاليا، Deroma وآخرون. [30] عن مستويات أعلى بكثير من إجمالي الزئبق في الشعر من 77 طفلا يعيشون بالقرب من مارانو-جرادو لاجون فيما يتعلق التركيزات التي وجدت في 72 طفلا يعيشون في المناطق الداخلية (0.88 مقابل 0.57 ميكروغرام / غرام). على نحو مماثل لفيليكس، ويقع مصنع الكلور والقلويات في منطقة البحيرة، حيث لوحظت مستويات الزئبق عالية في الرواسب (تصل إلى 11-14 ميكروغرام / غرام). في جمهورية تتارستان الروسية، Sitdikov وآخرون. [31] بتحليل مستويات بعض العناصر السامة وأساسية في شعر البنات (الذين تتراوح أعمارهم بين 7-9 سنوات) الذين يعيشون في المناطق الريفية. وكان تركيز الزئبق متوسط ​​0.41 ميكروغرام / غرام (المدى: 0،14-0،89 ميكروغرام / غرام)، في حين أن مستويات المعادن الأخرى مشابهة جدا لتلك التي وجدت في الدراسة الحالية. في البرازيل، ومتوسط ​​تركيز الزئبق في عينات شعر من 167 طالب صحي، الذين تتراوح أعمارهم بين 12-18 عاما، وجدت لتكون 0.14 ميكروغرام / غرام، بدءا ،004-،87 ميكروغرام / غرام [32]. لاكشمي بريا وغيثا [33 ذكرت] تركيز الزئبق متوسط ​​0.37 ميكروغرام / غرام في 50 طفلا التحكم (سن: 4-12 سنة)، عند دراسة أعباء الجسم المعدني في الأطفال الذين يعانون من التوحد. في المقابل، لوحظ مجموع مستويات الزئبق في الأطفال التشيكي أن تكون منخفضة نسبيا، بذروة تتراوح 0،13-0،26 ميكروغرام / غرام في الفترة 1996-2008 [34]. في المقابل، تم الإبلاغ عن متوسط ​​مستويات الزئبق في شعر الأطفال ما قبل المدرسة الاسبانية ليكون واحدا من أعلى القيم في السكان غير المكشوفة. في مينوركا وريبيرا دي إبري (كاتالونيا)، تم العثور على مستويات زئبق يعني في الشعر ليكون 0.71 و 1.09 ميكروغرام / غرام على التوالي [35]، في حين أن عدد السكان كان في غرناطة 0.96 ميكروغرام / غرام [36]. وقد ارتبطت هذه التركيزات مع استهلاك كميات أكبر نسبيا من الأسماك التي كتبها الاسباني عموم السكان [20، 35].
فيما يتعلق بالمبلغ المتبقي عناصر تحليلها، كانت التركيزات الحالية في نماذج من شعر الأطفال فيليكس من نفس الترتيب من حيث حجمها تلك التي ذكرت في الكتابات العلمية في الأطفال غير المعرضة لل[31، 37، 38]. عند تحليل تركيز المعادن في الشعر وفقا لنوع الجنس، لوحظت فروق ذات دلالة إحصائية بين الذكور والإناث (الجدول 1). هذا ما يتفق مع نتائج Dongarra وآخرون. [37]، الذي أفاد اختلافات غير ملحوظة لنفس العناصر في الشعر من 137 طفلا، تتراوح أعمارهم بين 11-13 عاما، الذين يعيشون في باليرمو (صقلية، إيطاليا). وكان الاستثناء الوحيد U، الذي قدم مستويات أعلى بكثير في الأولاد أكثر من الفتيات في.
الجدول 1. تركيزات المعادن (في ميكروغرام / غرام) في الشعر البشري من 53 أطفال فيليكس، وفقا لنوع الجنس.
وأجري أيضا تحليل معين من هرمون تستوستيرون وفقا لنوع الجنس. كان مستوى متوسط ​​في الأولاد في نطاق مقتبل البلوغ الكبار، في حين أنه في الفتيات كان داخل مدى محدد للبالغين. كما هو متوقع، قدم الأولاد مستويات أعلى بكثير من هرمون تستوستيرون من الفتيات (الجدول 2). سن البلوغ يبدأ من خلال تسلسل تغييرات النضج التي يتم تنظيمها من قبل الغدد الصم العصبية والعوامل الهرمونية التي بدورها تعمل تحت التأثيرات الجينية والبيئية [39، 40].
جدول 2. مستويات هرمون تستوستيرون (في نانومول / لتر) في دم الأطفال الذين يعيشون في المنطقة من فيليكس.
3.2. العلاقة بين المعادن في الشعر والتنمية الجنسية

ارتبطت مستويات الزئبق في شعر بإيجابية مع نضوج الجنسي عند الذكور، وبشكل أكثر تحديدا مع كثرة الشعر في الإبطين (ص = 0.658، P = 0.006). كانت مستويات الرصاص وجود علاقة إيجابية مع نضوج الفتيات الجنسي (ص = 0.463، P = 0.009)، التي تثبت أن الفتيات الذي كان قد بدأ بالفعل الحيض أظهرت مستويات أعلى من الرصاص. وتجدر الإشارة إلى أن الارتباط بين الرصاص والحديد (الحديد) وقد وصفت إلى حد كبير [41، 42، 43]. هذه المعادن اثنين يشتركان في نقل الأمعاء المشترك الذي upregulated خلال نقص الحديد [42]. ترتبط مستويات الرصاص والحديد في الدم عن كثب، وخاصة في الأطفال الذين يعانون من أي دليل من فقر الدم نقص الحديد [43]. ولذلك، فإن الحد الأدنى من التغيير في المصل مستويات الحديد التي يمكن أن تجنيها التغييرات في تركيزات الدم الرصاص [43]. منذ تم العثور على انخفاض واضح في تركيز الرصاص في الدم بالحديد تخمة [42]، الحديد إغناء تم حتى المقترحة لعلاج يؤدي التعرض المفرط. أخذ كل ما سبق في الاعتبار، ونحن هنا تشير إلى أنه بعد الحيض، والفتيات تظهر انخفاضا في مستويات معينة الحديد، والتي ستتحول إلى زيادة في امتصاص الرصاص.
3.3. العلاقة بين المعادن في الشعر والاختبارات النفسية العصبية

الجدول 3 يلخص العلاقة بين نتائج المؤشرات العصبية وتركيزات الشعر من الزئبق والمنجنيز والرصاص وU، المعادن الوحيدة مع ارتباط كبير بين كل من المعلمات. ارتبط الزئبق سلبا على العلاقة مع المشاكل الأقران، ويقاس استبيان SDQ (ص = -0.373، P = 0.008)، نتيجة انخفاض مشاكل العلاقة في الأطفال الذين يعانون من ارتفاع مستويات الزئبق. لم يتم العثور على ارتباطات أخرى وفقا لمستويات الزئبق في عدد السكان الحالي. مايرز وآخرون. [44 ذكرت] أن ميثيل الزئبق (ميثيل الزئبق) تعرض من تناول السمك وارتبط مع الآثار المفيدة للأطفال. ومع ذلك، سيتم ربط هذا الارتباط إلى فوائد استهلاك الأسماك، مجموعة المواد الغذائية مع مستويات أعلى نسبيا من ميثيل الزئبق. وعلاوة على ذلك، لوحظ أن أعلى التعرض ميثيل الزئبق قبل الولادة مع التناقصات في الاهتمام، لغة الذاكرة اللفظية، سرعة المحرك وظيفة إبصاري فراغي في دراسات الأتراب لدى المواليد وغيرها [45، 46، 47]. لم يتم تنفيذ دراسة أنواع جديدة هنا، كما تم قياس الوحيد إجمالي الزئبق في عينات الشعر. هذا هو الحد، مع الأخذ بعين الاعتبار أن فقط ميثيل الزئبق هو الشكل الزئبق مرتبطة بضعف النمو العصبي. هو أن هذا هو دراسة استكشافية-الأولية، ينبغي أن تؤخذ نتائجنا بحذر. من ناحية أخرى، فإن بعض الخصائص (أي الطبقة الاجتماعية أو المستوى التعليمي) من الأطفال المشاركين وأولياء أمورهم قد تكون مختلفة مقارنة مع أولئك الذين رفضوا المشاركة في هذه الدراسة، وبالتالي الحد من الصفة التمثيلية لعموم السكان.
مستويات المنغنيز في الشعر البشري تتناسب عكسيا مع نتائج SDQ: أعراض نفسية (ص = -0.372، P = 0.047)، المشاكل السلوكية (ص = -0.519، P = 0.004) ومجموع SDQ (ص = -0.548، ص = 0.002) (الجدول 3). في هذه العينة من الأطفال، تميل مستويات أعلى من المنجنيز يجب أن تكون متصلة مع أقل أعراض psychopathologic، وفقا لتقييم SDQ. وكانت مستويات المنغنيز وجدت في هذه الدراسة أقل بقليل من تلك التي ذكرت عادة [48]. المنغنيز هو عنصر أساسي ضروري لأنزيمات تشارك في التمثيل الغذائي للبروتين، وإنتاج الطاقة وتكوين العظام [48]. سيكون من المعقول أن بعد الاستهلاك الغذائي العادي، هو الحفاظ على التوازن المنهجي من المنغنيز.
الجدول 3. سبيرمان علاقة بين مستويات المعادن في شعر الأطفال (الأولاد والبنات معا) والمتغيرات النفسية العصبية (N = 53). SDQ، نقاط القوة والصعوبات الاستبيان؛ HRT، وأصيب وقت رد الفعل؛ FTT، اختبار التنصت على إصبع.
ارتبط الرصاص سلبا مع بعض المؤشرات للاختبار ن مرة أخرى: أرقام HRT 2-الظهر (ص = -0.303، P = 0.036) ومؤشر الكشف يتذكرون أرقام 2-الظهر (ص = -0.335، P = 0.020). لكن، وكما لا توجد ارتباطات مع غيرها من التجارب، ينبغي ألا تعتبر هذه النتيجة قوية حقا. على أية حال، فإن هذه النتائج هي في نفس الاتجاه من التحقيقات السابقة، والذي ارتبط الرصاص مع ضعف الذاكرة العاملة، شدة كونها مرتبطة بشكل مباشر مع مستويات الرصاص في الدم [49]. بالإضافة إلى ذلك، يرتبط الرصاص مع أداء ضعف في اختبار الأداء المستمر (CPT) [50]، وبطء الأداء في اختبار أرقام الرمز (SDS) [11]. اختبار SDS يعني التنسيق بين اليد والعين، ولكن أيضا من الاهتمام ونوع العمل أداء الذاكرة. انخفاض مؤشر الاهتمام ضرب، جنبا إلى جنب مع عدم فعالية، يمكن أن تشير إلى استجابة الاندفاع. وتشير بعض الكتاب إلى أن التعرض للرصاص أثناء الطفولة يضعف قدرة الطفل على تخصيص الموارد المعرفية اللازمة لمنع استجابة بشكل صحيح، مما أدى إلى زيادة الاندفاع [51]. بالإضافة إلى ذلك، فإنه ليس من الواضح ما إذا كان الرصاص قد تحتوي على مستويات السلامة [52]، كما لا يوجد توافق في الآراء حول هذه المسألة حتى الآن.
قدمت مستويات اليورانيوم الارتباطات السلبية مع بعض المؤشرات للاختبار ن مرة أخرى: HRT أرقام 3 الظهير (ص = -0.304، P = 0.048) الكلمات وHRT 3 الظهير (ص = -0.427، P = 0.003)، وكذلك مع مؤشر الكشف تذكر 1 الظهير رقم (ص = -0.487، P = 0.001) و 2 الظهير أرقام (ص = -0.374، P = 0.013). وعلى غرار الرصاص، كانت هناك صلة بين مستويات U المرتفعة الحالية إلى أسوأ عمل الذاكرة والاندفاع. كما ارتبطت مستويات اليورانيوم في الشعر بشكل إيجابي مع FTT. الحد الأقصى لعدد التكرار مع اليد جيدة (ص = 0.332، P = 0.026)، الحد الأقصى لعدد التكرار مع اليد سيئة (ص = 0.317، P = 0.034) وإضافة مرتين مع اليد جيدة (ص = 0.330، P = 0.027). وعموما، فإن نتائج FTT تشير وجود صلة بين U والسرعة في النشاط الحركي. وأظهرت دراسات سابقة أن الفئران التي تتعرض لU أظهرت الذاكرة العاملة أقل كفاءة وزيادة النشاط الحركي العفوي [53، 54، 55]. ومع ذلك، فإن تأثير U على النشاط الحركي لا تزال مسألة مثيرة للجدل [56]. الاضطرابات السلوكية التي نشأت U قد تكون مرتبطة إلى تغييرات في النظام الكوليني، وهذا يجري هدفا للU التعرض بطريقة بالهيكل وتعتمد على الوقت [56، 57].
وأخيرا، فقد ارتبط الطلاقة اللفظية بإيجابية مع الطلاقة الدلالية (ص = 0.298، P = 0.030). وأشارت نتائج اختبار الطلاقة فظي بعض الارتباط مع الجنسين (ص = 0.276، P = 0.45)، والفتيات كونها أولئك الذين لديهم أعلى الدرجات. ومع ذلك، لم يتم العثور على علاقة مع تركيزات المعادن في الشعر.
على الرغم من أية ارتباطات وجدت بين تركيزات المعادن في الشعر ونتائج الاختبارات النفسية العصبية، يجب التشديد على أن الشعر قد يكون biomonitor ذات فائدة محدودة لبعض العناصر، بخلاف ما هو وزئبق. للأسف، كان المبلغ المتاح من الدم من الأطفال لا تكفي لتقييم التعرض المعدنية. بدلا من ذلك، والشعر كان جهاز ال اختياره، لأنه هو أسلوب غير الغازية القدرة على تقدير التعرض الداخلي للمعادن الثقيلة [11].
3.4. العلاقة بين مستويات التستوستيرون في الدم والنفسية العصبية الاختبارات

في هذه الدراسة، وجدنا علاقة سلبية ذات دلالة إحصائية بين مستويات التستوستيرون في الدم والسلوك الاجتماعي الإيجابي لدى الفتيات (ص = -0.388، ع = 0.041) (جدول 4). تميل الفتيات لديهم مستويات هرمون التستوستيرون أعلى لديهم السلوك الاجتماعي الإيجابي أقل. هذه تؤكد صحة هذه الملاحظات من سيسك وزهر [15]، الذي خلص إلى أن التعرض للمراهقين لالأندروجين له آثار طويلة الأجل على العدوان في إناث الفئران. وعلاوة على ذلك، يو وخجول [58 وجدت] وجود علاقة إيجابية بين مستويات هرمون تستوستيرون اللعابية وعشرات عامل عدوان المرجعية سلوك الطفل (CBCL) في الطالبات. A علاقة ايجابية بين هرمون التستوستيرون وكشف مؤشر تذكر أرقام 3-الخلف (ص = 0.520، ص وحظ = 0.047) عند الذكور. ونتيجة لذلك، التستوستيرون أن تكون ذات صلة إلى الذاكرة عمل أفضل في الأولاد، وخاصة مع الأرقام. وفقا للبيانات الصادرة عن التحقيقات الحيوان، التستوستيرون يقلل من الاندفاع في ذكور الفئران [59].
الجدول 4. سبيرمان علاقة بين مستويات التستوستيرون في الدم للأطفال (بنين وبنات حدة)، والمتغيرات النفسية العصبية (N = 44).
وقد لوحظت الارتباطات إيجابية هامة بين مستويات التستوستيرون في الدم وإضافة مرتين مع اليد السيئة (ص = 0.426، P = 0.024)، وكذلك الحد الأقصى لعدد التكرار مع اليد السيئة (ص = 0.462، P = 0.013) في الفتيات. وهذا يدل على وجود علاقة بين هرمون التستوستيرون وسرعة النشاط الحركي، مع عدم وجود جهة المفضلة. والمثير للدهشة، كانت مرتبطة مستويات هرمون التستوستيرون في الأولاد سلبا مع نفس مؤشرين للاختبار التنصت على الإصبع (ص = -0.571، ع = 0.021؛ ص = -0.602، ع = 0.014) ومع أكبر عدد ممكن من التكرار مع اليد جيدة (ص = -0.539، ع = 0.031). فشلت دراسات سابقة في إثبات أن إدارة التستوستيرون تحسين الأداء النفسي لدى الرجال [60، 61]. ومن ثم المعقول أن الارتباطات بين هرمون التستوستيرون وFTT يمكن بوساطة بين الجنسين. وأخيرا، تم بشكل ملحوظ وإيجابي ترتبط مستويات هرمون تستوستيرون لدى الفتيات مع perseverations على استحضارها لفظي (ص = 0.415، P = 0.028). وهذا يعني أن ارتفاع مستويات هرمون تستوستيرون لدى الفتيات من شأنه أن يسبب لهم تميل إلى تكرار الكلمات، مما يعني أن الذاكرة العاملة قد لا تعمل بشكل جيد كما هو الحال في الفتيات مع انخفاض مستويات هرمون تستوستيرون. لم يتم العثور على ارتباط ملموس بين هرمون التستوستيرون في الدم ولفظي وfluencies الدلالية (لا تظهر البيانات).
بسبب انخفاض حجم العينة الحالية، ينبغي النظر في نتائجنا الأولية للغاية. كما دراسة استكشافية ونظرا لمجتمع الدراسة صغيرة، ونحن لا تؤدي التعديلات اختبار متعددة، لأنها ليست المطلوبة بدقة في هذا النوع من التحقيق [62، 63]. ومع ذلك، منذ أفعال هرمونات البلوغ أثناء المراهقة قد تكون له عواقب طويلة الأمد [15]، وينبغي تكرار هذه النتائج في دراسات أخرى مع عينة أحجام أكبر وأكثر قوة الإحصائية.
4. الاستنتاجات

بالرغم من أن مستويات المعادن في الشعر ضمن القيم القياسية، يمكن أن تكون مرتبطة تركيزات الرصاص وU مع بعض، ولكن الطفيفة، والتعديلات العصبية في السكان الطفولة فيليكس. على أية حال، ينبغي أن تؤخذ النتائج بحذر الحالية. متابعة الأفواج الولادة في المستقبل، مع السكان دراسة أكبر، وهناك حاجة إلى مزيد من تقييم العلاقة المحتملة بين التعرض للمعادن والتنمية العصبية في مرحلة المراهقة، عن طريق استخدام التحليلات الإحصائية أكثر تعقيدا.

شكر وتقدير

وأيد هذا البحث من المنح المقدمة من معهد السعود كارلوس الثالث FEDER (PS09 / 00362) ومن بمعهد Investigació SANITARIA بير فيرجيلي (ريوس، إسبانيا)، في إطار المشروع 2010 / IISPV / 08. المؤلفون ممتنون لروزا ماريا Sabaté (مركز الرعاية الصحية الأولية من فيليكس) لها دعما أساسيا في العمل الميداني، ماريوس Juanpere (مستشفى دي مورا دي إبري، اسبانيا) لمساعدته في تحليل هرمون التستوستيرون في الدم، والسيدة بياتريس ميلان لمساعدتها في المعالجة المسبقة للعينات.
تضارب المصالح

الكتاب تعلن أي تضارب في المصالح.
المراجع

  • نادال، M .؛ Casacuberta، N؛ غارسيا-أوريانا، J .؛ فيري-Huguet، N؛ قناع، P .؛ Schuhmacher، M .؛ دومينغو، JL تقييم المخاطر الصحية البشرية من جراء التعرض البيئي والغذائي إلى النويدات المشعة الطبيعية في تمتد الكتلانية نهر إيبرو، أسبانيا. البيئى. MONIT. تقييم. 2011، 175، 455-468. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • السلام.؛ Sunyer، J .؛ أوتيرو، R .؛ سانتياجو سيلفا، M .؛ المخيمات، C .؛ Grimalt، J. الكلورية العضوية في المصل السكان الذين يعيشون بالقرب من مصنع الكهروكيميائية. OCCUP. البيئى. ميد. 1999، 56، 152-158. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • ريباس-فيتو، N؛ سيل، M .؛ كاريزو، D؛ مونوز-أورتيز، L؛ Julvez، J .؛ Grimalt، JO. Sunyer، J. في تعرض الرحم لتركيزات خلفية تي والأداء الإدراكي بين مرحلة ما قبل المدرسة. آم. J. Epidemiol. 2006، 164، 955-962. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • كاريزو، D؛ Grimalt، JO. ريباس-فيتو، N؛ سيل، M .؛ Sunyer، J. في الرحم وتراكم ما بعد الولادة من المركبات الكلورية العضوية في الأطفال تحت ظروف بيئية مختلفة. J. البيئى. موني. 2007، 9، 523-529. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • فيري-Huguet، N؛ نادال، M .؛ Schuhmacher، M .؛ دومينغو، JL تقييم المخاطر الصحية البشري التعرض البيئي لمعادن في المرحلة الكتلانية نهر إيبرو، أسبانيا. همهمة. ECOL. تقدير المخاطر. 2009، 15، 604-623. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • استيبان، M .؛ كاستانو، المصفوفات A. غير الغازية في الرصد البيولوجي البشري: مراجعة البيئى. الباحث. 2009، 35، 438-449. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • Appenzeller، BM؛ Tsatsakis، تحليل AM الشعر لرصد بيولوجي من التعرض البيئي والمهني للملوثات العضوية: الدولة من الفن، مراجعة نقدية والاحتياجات المستقبلية Toxicol. بادئة رسالة. 2012، 210، 119-140. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • بيلينجر، DC غير عضوي التعرض للزرنيخ والنمو العصبي للأطفال: استعراض الأدلة. للسموم 2013، 1، 2-17. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • مونتوورى، P .؛ JOVER، E؛ دييز، S؛ ريباس-فيتو، N؛ Sunyer، J .؛ Triassi، M .؛ بايونا، JM الزئبق أنواع جديدة في الشعر للأطفال مرحلة ما قبل المدرسة الذين يعيشون بالقرب من مصنع الكلور والقلويات. الخيال العلمي. مجموع البيئى. 2006، 369، 51-58. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • باتيستا، J .؛ Schuhmacher، M .؛ دومينغو، JL. Corbella، J. الزئبق في الشعر لعدد الأطفال من محافظة تاراغونا، أسبانيا. الخيال العلمي. مجموع البيئى. 1996، 193، 143-148. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • Vermeir، G؛ Viaene، M .؛ Staessen، J .؛ هوند، ED. Roels والتحقيقات HA العصبية السلوكية لدى المراهقين عرضة للملوثات البيئية. البيئى. Toxicol. Pharmacol. 2005، 19، 707-713. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • تورانت، M .؛ كولومينا، MT؛ دومينغو، وتركيزات JL المعادن في الشعر والتقييم المعرفي في السكان المراهقين. بيول. تتبع إيليم. احتياط 2005، 104، 215-221. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
  • كلير، JA. Quig، والوضع DW المعدنية، والتعرض المعادن السامة وسلوك الأطفال. J. Orthom. ميد. 2001، 16، 13-32. [الباحث العلمي من Google]

 

__________________
استشارى الادوية الطبيعيه وباحث وخبير فى علاجات التوحد
رد مع اقتباس
  #7  
قديم 12-02-2015, 09:27 PM
رافت ابراهيم رافت ابراهيم غير متواجد حالياً
عضو ذهبي
 
تاريخ التسجيل: Dec 2011
المشاركات: 520
افتراضي مستويات الرصاص والحمض النووي من التلف في الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد

 

http://scielo.sld.cu/scielo.php?scri...32013000100003


مقدمة: تعتبر اضطرابات طيف التوحد عائلة من الاضطرابات العصبية النمائية التي تتميز صعوبات في التواصل والتفاعل الاجتماعي وجود سلوك نمطي ومتكرر. على الرغم من أن هناك العديد من الفرضيات التي تشمل العوامل الوراثية والبيئية في المرض، والمساهمة الحقيقية لهذه يزال مجهولا. في هذه الدراسة هو استكشاف العلاقة بين مستويات المصل من الرصاص، الحمض النووي من التلف وشدة مرض التوحد.
أساليب: لقد درسنا 15 طفلا تشخيص اضطرابات طيف التوحد بين 4 و 11 سنة ونفس الفئة العمرية السيطرة. تم تقييم IQ عن طريق اختبار تيرمان-ميريل وتم تصنيف الأطفال إلى درجتين من التخلف العقلي (خفيفة ومتوسطة / شديدة). تم قياس مستويات الرصاص في الدم عن طريق قياس الطيف الكتلي، في حين تم تحديد الحمض النووي من التلف في الخلايا الليمفاوية الدموية المحيطية مع استخدام لفحص الكهربائي القلوية (المذنب مقايسة).
النتائج: لا وأظهرت فرق كبير بين مستويات الرصاص المجموعات. كان الحمض النووي من التلف العالي في مرضى التوحد النسبي إلى السيطرة على المجموعة، وكان الفرق معنوي (p <0.05) عند مقارنة المجموعات مع الأخذ في الاعتبار شدة التخلف العقلي. وأظهر المرضى الذين يعانون من المعتدلين / اضطراب شديد أكبر بكثير الأضرار التي لحقت الضوء الذي قدم اضطرابات وDNA المجموعة الضابطة.
الاستنتاجات: إن النتائج تؤكد وجود الحمض النووي من التلف في المرضى الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد، مما يشير إلى أن هذا يمكن أن يكون عاملا تتعلق شدة التخلف العقلي في هؤلاء المرضى.
كلمات البحث: اضطراب التوحد، الحمض النووي من التلف، والرصاص، مقايسة المذنب.

الملخص
مقدمة: تعتبر اضطرابات طيف التوحد لتكون عائلة من التعديلات النمو العصبي تتميز صعوبة في التواصل والتفاعل اجتماعيا، فضلا عن النمطية، والسلوك المتكرر. على الرغم من عدة فرضيات تنطوي على العوامل الوراثية والبيئية في etiopathogeny دي حالة إستي، والمشاركة الراهنة لا تزال مجهولة. الدراسة الحالية يستكشف العلاقة بين مستويات الرصاص في الدم، الحمض النووي من التلف وشدة مرض التوحد.
الأساليب: أجريت دراسة مع 15 طفلا 4-11 سنة مع تشخيص اضطرابات طيف التوحد والمجموعة الضابطة من نفس الفئة العمرية. وقد تم قياس الذكاء من قبل الاختبار تيرمان-ميريل، وكان الأطفال تصنيفها إلى درجتين من التخلف العقلي (خفيفة ومتوسطة / شديدة). مستويات الرصاص في الدم تم قياس الطيف الكتلي، تم تحديد الحمض النووي من التلف لحين في الخلايا الليمفاوية في الدم الطرفية باستخدام الفحص الكهربائي القلوية (مقايسة المذنب).
النتائج: هذه الدراسة لم تظهر أي اختلاف كبير في مستويات الرصاص بين المجموعات. كان الضرر أكبر DNA في مرضى التوحد مما كانت عليه في السيطرة على المجموعة، وكان الفرق معنوي (p <0.05) عند النظر العقلي شدة. المرضى الذين يعانون من المعتدلين / اضطراب شديد حقت به أضرار الحمض النووي أكبر بكثير من أولئك الذين يعانون من اضطرابات خفيفة ومجموعة المراقبة.
الاستنتاجات: النتائج تؤكد وجود الحمض النووي من التلف في المرضى الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد، مما يشير إلى ويمكن أن يكون تهت عامل المتعلقة العقلية التخلف شدة.

الكلمات الرئيسية: اضطراب التوحد، الحمض النووي من التلف، والرصاص، ومقايسة المذنب.

مقدمة

اضطرابات طيف التوحد (ASD) هي الاضطرابات العصبية النمائية التي تتميز صعوبات في التواصل والتفاعل الاجتماعي، والاهتمام في الاضطرابات المعرفية وعيوب في التعلم، فضلا عن وجود حجرة والمصالح نمطية ومتكررة. يتم تشخيص أنهم أساسا في الأطفال ما بين 2-10 سنة من العمر مع انتشار الذروة ما بين 5 و 8 سنوات. 1 على الرغم من أن العرض الذي قدمه يحدث في مرحلة الطفولة المبكرة، آخر مظاهره عادة مدى الحياة. 2 انتشاره في العالم زادت بشكل ملحوظ في السنوات الأخيرة ل1/150. الذكور بين الجنسين هو أكثر المتضررين من النساء بمعدل حوالي 4: 1. 3 ومع ذلك، تظهر النسبة تختلف مع IQ وتتراوح بين 2: 1 في تلك المصابين بخلل وظيفي خطير لأكثر من 4: 1 في تلك مع معامل الذكاء العادي 4.5

على الرغم من النظريات والبحوث التي تهدف إلى تحديد أسباب هذا الاضطراب وسبب زيادته، وهذه هي يزال مجهولا. 6 انه تحد كبير لعلم الأعصاب الحالي لمعرفة والخوض في الآليات البيولوجية المعنية في التسبب بها، و كما في مساهمة حقيقية من العوامل الوراثية، وجينية وبيئية المعنية.
السموم البيئية المختلفة مثل المعادن الثقيلة والمبيدات الحشرية والأمراض النفاسية، وقد اقترحت في التسبب في مرض التوحد. إلا أنهما يشتركان في خاصية زيادة الاكسدة أن الأضرار DNA إلى بروتينات. 7.8

وبناء على هذه النتائج العلمية التي تحتج على مجموعة من العوامل الكيميائية الحيوية مع القابلية الوراثية في التسبب في هؤلاء المرضى، شرعنا في استكشاف العلاقة بين سلوك من الرصاص في الدم، وجود الحمض النووي من التلف وشدة التخلف العقلي في المرضى الذين يعانون من التوحد.



طرق

وتضمنت الدراسة رصد وصفية طولية مجموعة من 15 طفلا بين 4 و 11 سنة، 11 الفتيان والفتيات 4، من الطب النفسي التشاور تم تنفيذ مستشفى "سيرو طب الأطفال" في هافانا. وتكونت عينة الدراسة من جميع الأطفال الذين يعانون من التشخيص الأولي لمرض التوحد وفقا لمعايير التصنيف الدولي العاشر للأمراض (ICD-10)، تم استبعاد 9 الذين حضروا هذه المشاورات في عام 2011. الأطفال من الدراسة معاناة الثانوية من مرض التوحد أو مرض التوحد الابتدائي بالإضافة إلى أي مرض مزمن يصاحب الآخرين. بالإضافة إلى ذلك، فقد تم دراسة 15 طفلا السيطرة على نفس الفئة العمرية (بدون اضطرابات التعلم، أو الغدد الصماء الأيض أو الأمراض المعدية في وقت الدراسة) الذي خضع لاختبار الدم الذي سيخضع لعملية جراحية بسيطة .

تم تقييم الذكاء وفقا لاختبار تيرمان-ميريل، وصنفت الأطفال وفقا لدرجة الخطورة في مجموعتين :. الخفيفة و/ اضطرابات شديدة المعتدلة تم تحديد 10 مستويات الرصاص في 1 مل من الدم المجموع على طريقة القياس الطيفي للامتصاص الذري مع فرن الجرافيت زيمان القيم المرجعية 11 التصحيح في حدود 0-10 م غ / دل. 12

وقدرت الحمض النووي من التلف من قبل مقايسة المذنب (الكهربائي الخلايا الفردية قلوية من الكريات البيض الدموية المحيطية)، وعزل الخلايا في عينة من الدم الكامل (المراقبة السلبية)، والذي تم استخدامه في تشغيل الكهربي مع الخلايا اللمفية من المرضى . في كل هلام وقد شنت العينات في نسختين. تم إجراء عدد من 100 خلية في هلام وحسبت التهم متوسط ​​للفرد. وتفيد التقارير درجة التلف في الحمض النووي في كل حالة، عن طريق التفتيش البصري، وفقا للطريقة التي أبلغ عنها كولينز 13 وأخيرا وأعرب عن النتائج في وحدات التعسفي، مع القيم بين 0 و 400.

وقد أجريت الدراسة بعد الحصول على المرضى الوالدين على علم وموافقة المجلس العلمي للموافقة المؤسسة. وعلاوة على ذلك، كان له ما يبرره من أحد وجهة النظر الأخلاقية وفقا للمبادئ الأخلاقية للإعلان هلسنكي.



التحليل الإحصائي

وأعرب عن القيم كما المتوسطات الحسابية والانحرافات المعيارية والاختلافات بين مجموعات من المرضى وضوابط تم تحليلها من قبل الطالب اختبار تي. كان من المقبول إلى مستوى الدلالة الإحصائية للص 0،05 £ القيم.




النتائج

من 15 المرضى الخاضعين للدراسة، وأظهر الاختبار تيرمان-ميريل التي تم تصنيفها 7/15 الأطفال وضوء و15/08 TEA مع التخلف العقلي كما TEA مع معتدلة إلى التخلف الشديد. والجدول يبين مستويات الرصاص لوحظت في مختلف الفئات. أظهرت هذه لا توجد فروق ذات دلالة إحصائية بين المرضى الذين يعانون من ASD مع درجات مختلفة من الشدة، وبين هؤلاء المرضى والضوابط.


دراسة الحمض النووي من التلف والمقررة من قبل الفحص المذنب، كما هو موضح في الشكل 1. وأظهر المرضى TEA ل، وإن كانت زيادة طفيفة في nonsignificant الضرر مقارنة مع مجموعة التحكم (P = 0.26) ومع ذلك، عند المقارنة بين مجموعات فرعية من المرضى وفقا لمعدل ذكائهم (تقدره اختبار تيرمان-ميريل: TES الخفيفة والمعتدلة شديد)، لوحظ وجود زيادة كبيرة في الحمض النووي من التلف. وأظهرت المجموعة الثانية (معتدلة إلى حادة) التأثير الأكبر مقارنة مع أقل تأثرا (ع = 0.031) والمجموعة الضابطة (ع = 0.046). كان المرضى تصنف على أنها خفيفة والمجموعة الضابطة (ع = 0.88) لا تختلف كثيرا (الشكل 2).




مناقشة

ويبدو أن النظريات التي تعالج إشراك العوامل الوراثية والبيئية في التوحد واعدة جدا. هناك اهتمام علمية قوية لتبديد الشكوك المحيطة استقلاب المعادن الثقيلة في الأطفال الذين يعانون من التوحد مع الشك في أنه قد يكون عاملا في المسببات لهذا العامل اضطراب.
وتتناول العديد من الدراسات سلوك المعادن المختلفة مثل الزئبق والرصاص والسيلينيوم في TEA، مشيرا إلى أن هذه المعادن يمكن أن يكون ضارا على حد سواء الزائد وعيب. 14 هذه الأعمال المشار الأيض الرصاص، ومثيرة للجدل. وتشير بعض الدراسات إلى اضطرابات في إفراز الرصاص، في حين يصف البعض الآخر مماثل لضوابط صحية، وبنفس الطريقة التي وجدت هذا المصل من أو يساوي المعدن صحة السكان يفترض أن يرتبط التعبير عن إفراز جينات معينة 15-17. وفي الآونة الأخيرة، وغيثا لاكشمي بريا، 18 احظت زيادة كبيرة في تركيزات الرصاص في الشعر والأظافر من هؤلاء المرضى المترابطة مع شدة المرض.

في هذه الدراسة لاحظنا زيادة طفيفة في تركيزات الرصاص في المرضى الذين يعانون من ASD على حساب تلك المصنفة على أنها معتدلة / حادة. ومع ذلك، ينبغي إجراء دراسات أخرى لتأكيد فرضية تشير إلى تقدم ممكن وكيل مسبب هذا المرض، وذلك بسبب عدم تجانس ASD.

وعلاوة على ذلك، يتم تأكيد فائدة تحليل الرصاص في الأنسجة الأخرى (الشعر والأظافر) من قبل العديد من الكتاب الذين يؤيدون الارتباط بين تركيزات المعادن في الشعر وسوائل الجسم الأخرى في ظل الظروف الفسيولوجية والمرضية. هذه الهياكل لديها ميزة التي تعكس تغيرات التمثيل الغذائي للعناصر الكيميائية لفترات طويلة من الزمن وهذه التركيزات لا تخضع لتقلبات الناجمة عن النظام الغذائي أو المياه، التي تعتبر واحدة من أفضل المؤشرات الحيوية ل ويظهر تحليل المعادن. 19،20 بالتالي نتيجة الفائدة من استمرار هذه الدراسات الشعر والأظافر و / أو عدد أكبر من المرضى التي تسمح فك مساهمة حقيقية من الرصاص في التسبب في ASD.

العلاقة بين العوامل البيئية، وزيادة الاكسدة وتلف DNA، هي جانب آخر درس على نطاق واسع في السنوات الأخيرة في المسببات المرضى الذين يعانون من ASD 21 تم الإبلاغ عن زيادة الاكسدة في العديد من الأمراض العصبية، مثل مرض باركنسون ومرض الزهايمر، فضلا عن 22 ASD.

ومن بين التقنيات لقياس الحمض النووي من التلف، ويتميز المذنب بنسبة بسيطة وقابلة للتطبيق على أي طريقة حساسة خلية حقيقية النواة (أكثر من 100 مرة الاختبارات الوراثية الخلوية) وسريعة وغير مكلفة. 23،24 وهذا قد تطبق في الظروف الأكثر تنوعا. وقد استخدمت أساسا لدراسة الضرر الوراثي الناجم عن المطفرة البيئية، النتروزامين، والمخدرات، والإشعاع، وغيرها. 25،26 ومع ذلك، لم يتم الإبلاغ عن ذلك لاستخدامها في المرضى الذين يعانون من الشاي. 27 هذا الأسلوب يستكشف سوى وجود أضرار من DNA كسر ضفيرة واحدة في الحمض النووي في مواقع منزوع البورين وapyrimidinic، مما يزيد من فقدان الضرر dañadas.Estos قاعدة لا يمكن أن تكون ذات صلة خصيصا للأكسدة، بل وربما تمثل سيطة عمليات الإصلاح. 27

عدة ملاحظات تدعم الفرضية القائلة بأن الحمض النووي من التلف في مرضى التوحد هو في الغالب التأكسدي في الطبيعة ويترافق مع التعبير تغير من neurotrophins هامة للنمو الطبيعي والتفريق بين الدماغ. 28 على سبيل المثال، فقد كان في الآونة الأخيرة سجلت ارتفاعا في كل من المرضى TEA 3N التيروزين كما hidroxidesoxi-guanosyna 8 (8 OHdG) على حد سواء علامات الحمض النووي من التلف التأكسدي، تغيير 29 وneurotrophin 3 في الدماغ من المرضى الذين يعانون من مستويات TEA، التي قد تساهم في أمراض التوحد وتؤثر على نقاط الاشتباك العصبي في الدماغ، مما أدى إلى تفاقم الاكسدة وسبب تغيرات في الخلايا العصبية لهؤلاء المرضى. 30
بشكل عام، يمكن للتعليقات الضرر التأكسدي يرتبط مع التغييرات الهيكلية والوظيفية في الجهاز العصبي المركزي يفسر الزيادة الكبيرة في الحمض النووي من التلف في المرضى الذين يعانون من أكبر شدة التخلف العقلي (معتدلة إلى حادة).

هذه النتائج تدعم وجود الحمض النووي من التلف في هؤلاء المرضى، وتشير إلى أن الضرر في مرضى التوحد يمكن أن يكون عاملا تتعلق درجة من التخلف العقلي في هؤلاء المرضى.


مراجع

1. AK الأنصاري، باشا AG، آل Ayahdi LY. الأحماض الدهنية البلازما كعلامات التشخيص في المرضى الذين يعانون من التوحد من المملكة العربية السعودية. الدهون الصحية ديس. [الإنترنت]. [استشهد 10 أغسطس 2011] 2011؛ ​​10 (4): [حوالي 3 أقدام.]. دوى: 10.1186 / 1476-511X-10-62. متاح من: http://www.lipidworld.com/content/10/1/62

2. Theoharides TC، Kempuraj D، ريدوود L. التوحد: والناشئة 'اضطراب neuroimmune "بحثا عن العلاج. إكسب أوبان Pharmacot.2009، 10 (13): 2127-43.

3. RJ الفاريز نارانخو. مرض التوحد. عموما، بيولوجيا الأعصاب، تشخيص والعلاج. مراجعة مشفى Psiquiat هافانا [الإنترنت]. [استشهد 12 ديسمبر 2011] 2011، 8 (1): [. حوالي 1 ص]. متوفر في: http://www.revistahph.sld.cu /

4. JW هارينغتون. انتشار الحالي لمرض التوحد: هل نحن هناك حتى الآن؟. طب الأطفال [الإنترنت]. [استشهد 12 أغسطس 2011] 2010؛ 126: حوالي 3 أقدام] .. متاح from: http://hinari-gw.who.int/whalecompediatrics.aappublications.org/whalecom0/content/126/5/e1257.full.pdf+html?sid=871057ee-da04-4434-ba66-c6a5f7140a2c

5. Giarelli E، ويغينز LD، رايس EC، ليفي SE، كيربي RS، بينتو-مارتن J، وآخرون. الجنس الاختلافات في تقييم وتشخيص اضطرابات طيف التوحد بين الأطفال. الصحة Disab جور. [الإنترنت]. 2010 [استشهد 12 أكتوبر 2011]، 3 (2): [. حوالي 4 ص]. متاح from: http://hinari-gw.who.int/whalecompdn.sciencedirect.com/whalecom0/science?_ob=MiamiImageURL&_cid=276914&_user=277871 6&_pii=S1936657409000673&_check=y&_origin=browse&_ zone=rslt_list_item&_coverDate=2010-04-30&wchp=dGLzVlV-zSkWz&md5=06450981ca2df60f91249e849df7cf3d/1-s2.0-S1936657409000673-main.pdf

6. Careaga M، J فان دي المياه، أشووود P. المناعي اختلال وظيفي في التوحد: A الطريق إلى العلاج. Nuerotherapeutics [الإنترنت]. 2010 [استشهد 12 أكتوبر 2011]، 7 (3): [. حوالي 2 ص]. متاح from: http://hinari-gw.who.int/whalecompdn.sciencedirect.com/whalecom0/science?_ob=MiamiImageURL&_cid=273590&_user=277871 6&_pii=S1933721310000450&_check=y&_origin=browse&_ zone=rslt_list_item&_coverDate=2010-07-31&wchp=dGLzVlV-zSkWA&md5=fd5c2f7fdbdb7bd908f2ad34c4ea020b/1-s2.0-S1933721310000450-main.pdf

7. براون GE، SD جونز، MacKewn AS، اللوح الخشبي EJ. استكشاف ممكن قبل وبعد الولادة يرتبط التوحد: دراسة تجريبية. Psychol النائب [الإنترنت]. 2008 [استشهد 11 أكتوبر 2011]؛ 102 (1): حوالي 3 أقدام] .. متاح من: www.crcnetbase.com/doi/pdf/10.1201/9781420068870-c3

8. باردو T-غوفيا، والجوانب سوليز-أنس E. مستمنع التوحد: مراجعة. كلين الاستثمار. [الإنترنت]. 2009 [cited10 سبتمبر 2011]؛ 50 (3): [. حوالي 5 ص]. متاح من: http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.scielo.org.ve/whalecom0/pdf/ic/v50n3/art13.pdf

S. ويتاكر 9. استقرار معدل الذكاء في الناس مع انخفاض القدرة الفكرية: تحليل للأدب. Intellec جمعة disabil. [الإنترنت]. 2008 [استشهد 10 سبتمبر 2011]؛ 46 (2): [حوالي 5 ص]. متاح من: http://eprints.hud.ac.uk/4283/1/stability_of_IQ_

10. منظمة الصحة للبلدان الأمريكية. التصنيف الإحصائي الدولي للأمراض والمشاكل الصحية ذات الصلة. مراجعة 10TH. واشنطن، DC: منظمة الصحة للبلدان؛ 1995.

11. PJ بارسونز، W. سلافن A زيمان فرن الجرافيت طريقة مقياس الامتصاص الذري السريع لتحديد من الرصاص في الدم. Spectrochimica اكتا الجزء B: أتوم SPECTR. 1993؛ 48 (6-7): 925-39.

12. Pilliere F، فرانسواز C. Biotox. دليل Biotoxicologique صب ليه أطباء العناء. Inventaire قصر جرعات biologiques متاح من الطرح يصب LA المراقبة دي برودوي chimiques sujets ل[الإنترنت]. باريس: النسبة المطبعة دوليا. 2007. حوالي 53 ص.]. ED سبتمبر 7912007 [استشهد 11 سبتمبر 2011]. متاح from: http://www.inrs.fr/inrs-pub/inrs01.nsf/IntranetObject-accesParReference/Ed%20791/$File/Visu.html

13. كولينز A. المذنب الفحص عن الأضرار وإصلاح الحمض النووي، المبادئ والتطبيقات والقيود. التكنولوجيا الحيوية Molec. [الإنترنت]. [استشهد 10 سبتمبر 2011] 2004؛ 26 (3): [حوالي 3 أقدام.]. متاح from: http://hinari-gw.who.int/whalecomwww.springerlink.com/whalecom0/content/e62l3p154h35ttn8/fulltext.pdf

14. Ozand PT، آل Odaib-A، ميرزا ​​H، الحربي S .Autism: مراجعة. جور Pediatr Neurol. [الإنترنت]. [استشهد 11 أغسطس 2011] 2003؛ 1 (2): عن 5P] .. متاح from: http://hinari-gw.who.int/whalecomiospress.metapress.com/whalecom0/content/uet94gmdvqq861wf/fulltext.pdf

15. AK الأنصاري، باشا AB، آل Ayahdi LY. العلاقة بين سمية الرصاص والبلازما الناقلات العصبية المزمنة لدى المرضى الذين يعانون من التوحد من المملكة العربية السعودية. الكيمياء الحيوية السريرية [الإنترنت]. [استشهد 10 ديسمبر 2011] 2011؛ ​​44 (13): [. حوالي 3 أقدام]. متاح from: http://hinari-gw.who.int/whalecompdn.sciencedirect.com/whalecom0/science?_ob=MiamiImageURL&_cid=271896&_user=277871 6&_pii=S0009912011013919&_check=y&_origin=browse&_ zone=rslt_list_item&_coverDate=2011-09-30&wchp=dGLbVlS-zSkzS&md5=135c2479d25899da7607f77106f74970/1-s2.0-S0009912011013919-main.pdf


 

__________________
استشارى الادوية الطبيعيه وباحث وخبير فى علاجات التوحد
رد مع اقتباس
إضافة رد


تعليمات المشاركة
لا تستطيع إضافة مواضيع جديدة
لا تستطيع الرد على المواضيع
لا تستطيع إرفاق ملفات
لا تستطيع تعديل مشاركاتك

BB code is متاحة
كود [IMG] متاحة
كود HTML معطلة

الانتقال السريع


 المكتبة العلمية | المنتدى | دليل المواقع المقالات | ندوات ومؤتمرات | المجلات | دليل الخدمات | الصلب المشقوق وعيوب العمود الفقري | التوحد وطيف التوحد  | متلازمة داون | العوق الفكري | الشلل الدماغي | الصرع والتشنج | السمع والتخاطب | الاستشارات | صحة الوليد | صحة الطفل | أمراض الأطفال | سلوكيات الطفل | مشاكل النوم | الـربـو | الحساسية | أمراض الدم | التدخل المبكر | الشفة الارنبية وشق الحنك | السكري لدى الأطفال | فرط الحركة وقلة النشاط | التبول الليلي اللاإرادي | صعوبات التعلم | العوق الحركي | العوق البصري | الدمج التربوي | المتلازمات | الإرشاد الأسري | امراض الروماتيزم | الصلب المشقوق | القدم السكرية



الساعة الآن 11:04 AM.