تحديد ارتباط كبير والجينات الجين تفاعل الجينات gaba مستقبلات الوحدة الفرعية في التوحد

[رافت ابراهيم]

 

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/1...neu.22044/full

الكلمات الدالة:

• انفصام في الشخصية؛
• مرض التوحد.
• المناعي؛
• بيئة؛
• تفعيل المناعي للأم

ملخص

الجينات * تفاعلات البيئة تلعب أدوارا حاسمة في ظهور مرض التوحد وانفصام الشخصية الفيزيولوجيا المرضية. في كل من الاضطرابات، وقد وفرت الدراسات جمعية الجينية الأخيرة دليل على الاختلاف مرتبطة مرض في الجينات جهاز المناعة ودراسات التعبير الجيني بعد الوفاة أظهرت تشوهات المناعية المزمنة واسعة في العقول المريضة من الموضوعات. وعلاوة على ذلك، كشفت الدراسات العلامات البيولوجية الطرفية أن كلا النظامين المناعية الفطرية والتكيفية هي dysregulated. في كل الاضطرابات أعراض المرض ترتبط مع ضعف الجهاز المناعي؛ حتى الآن، على التوحد هذه العملية يبدو أن المزمن والمستدام، بينما في الفصام ويتفاقم ذلك أثناء النوبات الحادة. وعلاوة على ذلك، منذ تشوهات المناعة يدوم حتى سن البلوغ والمضادة للالتهابات وكلاء تظهر أن تكون مفيدة، فمن المرجح أن هذه التغيرات المناعية يسهم بفعالية في أعراض المرض. نمذجة هذه التغييرات في الحيوانات تقدم دليلا إضافيا على أن ما قبل الولادة تفعيل المناعي للأم يغير من النمو العصبي ويؤدي إلى التغيرات السلوكية التي هي ذات الصلة لمرض التوحد وانفصام الشخصية. الأدلة المتقاربة تجادل بقوة أن الشتائم في مأمن العصبية النمائية والخلفية الوراثية تتفاعل خطيرة وتؤدي إلى زيادة خطر من مرض التوحد وانفصام الشخصية. مزيد من البحوث في هذه المجالات قد يحسن صحة غربلة قبل الولادة في العائلات وراثيا المعرضين للخطر، وقد تؤدي أيضا إلى استراتيجيات وقائية و / أو علاجية جديدة. © 2012 ايلي الدوريات، وشركة تطوير Neurobiol، 2012

مقدمة

يتميز اضطراب طيف التوحد (ASD) من خلال الأعراض في مجالات التفاعل الاجتماعي، والاتصالات، والمصالح المقيدة والمتكررة والسلوكيات (ماير وآخرون، 2011؛ ​​نوتردام، 2011؛ ​​Ratajczak، 2011). في المقابل، المظاهر السريرية للمرض انفصام الشخصية (SCZ) وتشمل الأعراض الإيجابية، والأعراض السلبية والعجز المعرفي (Frangou وموراي، 2000؛ تاندون وآخرون، 2009). وعلى الرغم من العروض سريرية مختلفة، وهناك الأسس الفيزيولوجية المرضية مشتركة في كل من هذه الاضطرابات. ASD وSCZ تنشأ نتيجة قوية عوامل الخطر الجينية والبيئية التي تتفاعل بطرق معقدة لإعطاء ارتفاع اثنين من العمليات المرض متميزة. وقد وفرت دراسات التوائم تقديرات التوريث في ASD وSCZ تصل إلى 90 و 80٪ على التوالي، مما يشير إلى أن الاختلافات الوراثية تلعب دورا محوريا في المسببات لهذه الاضطرابات السلوكية (تاندون وآخرون، 2008؛ Geschwind، 2009). ومع ذلك، درست دراسة التوأم الأخيرة على وجه التحديد الآثار المحتملة على البيئة في ASD وخلص إلى أن حوالي 58٪ من التوريث ذكر يمكن أن يعزى إلى العوامل البيئية التي تؤثر عادة على أزواج التوأم (Hallmayer وآخرون، 2011). وبالمثل، فإن التحليل التلوي من دراسات التوأم في الفصام العثور على مكون بيئي قوي (سوليفان وآخرون، 2003). وعلاوة على ذلك، كان التوائم الزيجوت يشتركون في المشيمة (أحادي المشيماء) أعلى بكثير التوافق للفصام من تلك التي مع مشيمة منفصلة (ثنائي المشيماء)، بحجة أن العوامل البيئية قبل الولادة تمنح خطر لاضطرابات النمو العصبي حتى عندما يكون التركيب الجيني مطابق (ديفيس ETAL.، 1995) .

فمن الواضح أن كلا من الوراثة والبيئة تساهم في ظهور ASD وSCZ، ولكن كيف يمكن أن العوامل البيئية تغير البرامج المشفرة وراثيا وتؤدي إلى المرض؟ "البيئة" والأكثر شيوعا المشار إليها بوصفها مجموعة من المؤثرات الخارجية التي تؤثر على مختلف الآليات واسعة التماثل الساكن للكائن الحي. العوامل البيئية تمارس نفوذها مباشرة عن طريق التأثير في العمليات الخلوية محددة (على سبيل المثال، والسموم، والآثار على المدى القصير من المخدرات) أو بشكل غير مباشر عن طريق التلاعب في التعبير عن الجينات [على سبيل المثال، والهرمونات، والآثار على المدى الطويل من المخدرات، وتفعيل نظام المناعة، وممارسة (راسيل ، 2003)]. هذه الجينات التغييرات التعبير عن أثار البيئة يمكن أن تكون مفيدة أو ضارة في الاضطرابات مثل مرض الزهايمر (لازاروف وآخرون، 2005؛ Radak وآخرون، 2010)، مرض باركنسون (زيجموند وآخرون، 2009) أو إصابات في الدماغ ( ديفين وZafonte، 2009). على سبيل المثال، وقد ثبت أن الظروف البيئية مثل ممارسة للتأثير النظم البيولوجية من خلال التغييرات في التعبير عن شلالات الجينات المختلفة (ميتشل وآخرون، 2012). ومع ذلك، يبدو أن التأثيرات البيئية على التعبير الجيني في كل ASD وSCZ أن يكون ضارا في المقام الأول، والمساهمة في عملية المرض. لذلك، ما هي العوامل البيئية الرئيسية في ظهور ASD وSCZ وكيف يمكن أنها تزيد من خطر المرض؟ منذ أكثر من 40 عاما، وحددت الدراسات الوبائية إصابة الأم أثناء الحمل المبكر باعتباره عامل خطر كبير للASD (الشطرنج، 1971). وبالمثل، وزيادة نسبة التوافق من SCZ في مقابل المشيماء التوائم ثنائي المشيماء يمكن تفسير الدورة الدموية مشتركة والمشيمة المشتركة، مما يوحي بأن عدوى سوف تؤثر على كل من التوائم monchorionic بالمثل (ديفيس وآخرون، 1995). وبالإضافة إلى ذلك، حددت دراسات مختلفة أن التعرض لمجموعة واسعة من العوامل البكتيرية والفيروسية يزيد من خطر ASD وSCZ (براون وDerkits، 2010؛ Ratajczak، 2011)، بحجة أن تنشيط جهاز المناعة العام، وليس وكيل المعدية محدد هو المسؤول عن زيادة مخاطر في كلا المرضين.

علم الجينوم الأخيرة، وعلم الوراثة، والدراسات الفنية ونموذج حيواني من ASD وSCZ تدعم بقوة هذا التفسير. التعرف على التحليل التلوي من الجينوم السابق دراسة جمعية اسعة (GWAS) مجموعات البيانات أنواع من الجينات المعنية في الاستجابة المناعية التي ترتبط بشكل كبير مع SCZ التشخيص (Ripke ETAL.، 2011) وقد وجدت دراسات التعبير بعد الوفاة dysregulated المناعة نسخ الجين النظام في العقول (. ينتاس آخرون، المرضى الذين يعانون من ASD 2012) وSCZ (أريون وآخرون، 2007؛ سيكويرا وآخرون، 2012). وعلاوة على ذلك، في الدماغ من الموضوعات مع ASD، فارغاس وآخرون. لاحظنا تفعيل قوي من الخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا النجمية، وكذلك مستويات خلوى مرتفعة، مما يشير إلى أن يتميز ASD من قبل تنشيط الجهاز المناعي المستمر (فارغاس وآخرون، 2005). وأشير أيضا إلى تفعيل دبقية للعب دور في SCZ، على الرغم من يبقى دليلا على أن يقسم شامل (بيرنشتاين وآخرون، 2009؛ منجي آخرون، في الصحافة). بالإضافة إلى ذلك، كشفت الدراسات من الدم المحيطي مستويات خلوى المتغيرة بشكل واضح عبر كل من الاضطرابات (تشان وآخرون، 2011؛ ​​Onore وآخرون، 2012). وأخيرا، قدمت الأمهات تنشيط جهاز المناعة (MIA) دراسات في القوارض الدليل على تشريحية، التعبير الجيني والتغيرات السلوكية المتعلقة ASD أو SCZ (باترسون، 2009؛ Boksa، 2010؛ مولر وشوارتز، 2010).

ومع ذلك، فهمنا من ضعف الجهاز المناعي في هذه الاضطرابات اثنين لا تزال غير مكتملة حتى الآن. حاليا لدينا فهم محدود جدا من كيف يعطل ضعف الجهاز المناعي التنمية المخ المعتادة ويساهم في ظهور المرض. وبشكل أكثر تحديدا، نحن لا نعرف (1) كيف يمكن للعناصر الوراثية والشتائم البيئية تتفاعل. (2) ما إذا كان الخلل neuroimmune هو جزء أساسي أو التكيف عملية المرض؛ (3) كيف مأمن نظام الاضطرابات تتغير خلال كل مرض. و (4) ما إذا تشوهات الجهاز المناعي مسؤولة مسؤولية مباشرة عن الظواهر السلوكية ينظر في المرضى الذين يعانون وما إذا كانت تمثل أهدافا دواء جيد.

التباين الوراثي تورط الجينات ذات الصلة جهاز المناعة

الجينوم دراسة جمعية اسعة (GWAS) هي، طريقة خالية من الفرضية المعتمدة على الحمض النووي الذي يحلل الاختلاف الجيني بين الأفراد في عدد كبير من السكان. وتهدف في المقام الأول لكشف الاختلاف الجيني مثل الأشكال واحدة النوكليوتيدات (النيوكلوتايد)، والحذف الصغرى، أو تغيرات في عدد النسخ (التنوعات في عدد النسخ) التي ترتبط مع خاص سمة، الشرط، أو اضطراب. مع عدد كبير من السكان ومجموعة بيانات مرجعية جيدة، وهذه التقنية هي قوية جدا لتحديد الأليلات ومناطق الجينوم لا ترتبط سابقا مع المرض (Raychaudhuri، 2011). ومع ذلك، هذا الأسلوب هو عرضة للأخطاء اكتب II (السلبيات كاذبة) والأليلات نادرة تحدث إلا في جزء صغير من السكان يمكن أن تبقى غير مكتشفة. في اضطرابات طيف مثل ASD وSCZ، وهذا ما يضاعف من عدم التجانس الوراثي كبيرا في السكان المريض. وعلاوة على ذلك، لم يجر أي تحقيق في تأثير وظيفي للأغلبية حددت تعدد الأشكال شامل (خاصة غير المرمزة noncoding الموجودة تعدد الأشكال). ومع ذلك، يمكن أن يكون الدراسات GWA مفيدة جدا في توفير يؤدي لمتابعة والدراسات يحركها فرضية مع الهدف الأساسي لفهم الآثار البيولوجية التي اضطرابات التعبير الجيني يغير تطور الدماغ. مثل هذه الدراسات على أساس فرضية بدورها لديها القدرة التحليلية أعلى ويمكن تحليل بسهولة إشارة معينة مع ضرورة الحد الأدنى لتصحيح الإحصائي.

في المرضى الذين يعانون SCZ، كشفت الدراسات GWA وجود ارتباط بين التوافق النسيجي الرئيسي موضع (MHC) والتشخيص. موضع MHC يحتوي على الجينات الحفظ المتعددة التي تشارك في الفطري، على التكيف، وأنظمة المناعة الذاتية (Traherne، 2008). وقد تساءل العديد من المرضى من السكان من أصول جغرافية مختلفة. ذكرت بعض الدراسات جمعيات كبيرة من تعدد الأشكال في مكان MHC (سوليفان وآخرون، 2008؛ الحاجة وآخرون، 2009؛. بورسيل ETAL، 2009؛ شي وآخرون، 2009؛. ستيفانسون وآخرون، 2009؛ يو وآخرون. ، 2011)، في حين فشل الآخرون لتكرار هذه النتائج (أودونوفان وآخرون، 2008؛. Shifman ETAL، 2008؛ والش وآخرون، 2008؛ Athanasiu وآخرون، 2010؛ ما آخرون، 2011؛ ​​يامادا وآخرون .، 2011). ولكن عندما تم الجمع بين هذه الدراسات في التحليل التلوي، تم تحديد 129 الأشكال المتعلقة المرض في MHC موضع الموسعة (Ripke وآخرون، 2011). وعلاوة على ذلك، كشفت عن وجود نهج الجين مرشح يحركها الفرضية القائلة بأن الأشكال في العامل النووي كابا B (NFκB) (هاشيموتو وآخرون، 2011)، انترلوكين 2، 4 (شوارتز وآخرون، 2006)، 3 (شين وآخرون، 2007 ) و 6 و 10 (Bocchio Chiavetto ETAL. 2002؛ بول Samojedny ETAL، 2010؛ Almoguera وآخرون، 2011) كانت مرتبطة أيضا إلى SCZ.

في المقابل، ودراسات GWA من ASD لم تكشف عن ارتباط ملموس مع الجينات المتورطة في الوظيفة المناعية (ما وآخرون، 2009؛ وانغ وآخرون، 2009؛ وايس وآخرون، 2009؛. Anney وآخرون، 2010). ومع ذلك، كشفت التقييمات الوراثية يحركها فرضية أن HLA A2 (MHC الدرجة الأولى) وHLA DR4 (MHC من الدرجة الثانية) مواضع يرد تعدد الأشكال المرتبطة ASD، مما يشير إلى أن الاختلاف الجيني في المنطقة MHC يرتبط أيضا مع ASD (لي وآخرون، 2006؛ توريس وآخرون، 2006؛ Guerini وآخرون، 2009؛. Guerini ETAL، 2011). لذلك، والتباين الوراثي في ​​جينات جهاز المناعة يجب أن يتم تقييم مزيد كعامل خطر محتمل لكلا ASD وSCZ.

ومن المثير للاهتمام، وتشير الدراسات GWA الجينات المخاطر المتداخلة المرتبطة ASD / SCZ وأمراض الجهاز المناعي. اشتراك في موضع MHC على سبيل المثال يبدو أن واحدة من أقوى النتائج في دراسات GWA الأمراض الالتهابية المزمنة (Wucherpfennig وسيتي، 2011). وعلاوة على ذلك، يرتبط الاختلاف في موضع HLA DRB1 المصابين بالتهاب المفاصل الروماتويدي، وهو مرض المناعة الذاتية التي يبدو أن انخفاض معدل الإصابة في المرضى الذين يعانون من SCZ وحدوث زيادة في أمهات الأطفال الذين يعانون من التوحد (كريسبي وThiselton، 2011). وأخيرا، حددت الدراسات GWA أيضا أن بعض الأليلات neurexin يؤهب إلى الإصابة بأمراض المناعة الذاتية مثل التهاب المفاصل الروماتيزمي ومرض كرون ومرض التصلب المتعدد (بارانزيني، 2009) وneurexin كما تم تحديدها باعتبارها ASD وSCZ قابلية الجين (غوتييه وآخرون، 2011 ).

وعموما، تشير الدراسات GWA أن عناصر في جينات الاستجابة المناعية الهامة قد تساهم في ظهور المرض الفيزيولوجيا المرضية في كل ASD وSCZ. فإن الدور الدقيق (ق) من هذه الأليلات يتعين معالجتها في الدراسات المستقبلية، وخاصة بالنظر إلى أن الجينات الموجودة على مكان MHC ومجموعة متنوعة من الوظائف في جهاز المناعة والجهاز العصبي.

GENE بعد الوفاة التغيرات التعبير

يمكن أن الاختلافات الجينية تعطي مباشرة تؤدي إلى تغيرات التعبير الجيني، يغير بنية البروتين ووظيفته، تعدل التعبير الجيني بالتنسيق مع العوامل البيئية، أو ليس لها أي أثر. التغييرات التعبير الجيني التي تم العثور عليها في أنسجة الدماغ بعد الوفاة هي المنتجات المتراكمة لعلم الوراثة، وسبب الوفاة، ومدة المرض، والعلاج، والأحداث البيولوجية الأخرى التي ليست سوى المرتبطة محيطيا مع الفيزيولوجيا المرضية المرض. ومع ذلك، يمكن لدراسة التعبير الجيني بعد الوفاة تسيطر عليها بشكل جيد، تحديد التغييرات التعبير الجيني والممرات التي هي محددة لهذا المرض.

في SCZ، كشفت الدراسات Transcriptome على الجهاز المناعي، متشابك، دبقية قليلة التغصن، والأيض المرتبطة الاضطرابات الطاقة (فالودي وMirnics، 2011). ومن المرجح أن تكون ذات صلة، على الرغم من أن في الوقت الحاضر لدينا فهم محدود لكيفية تفاعل هذه المجالات هذه التغييرات. بوضوح، قد يؤدي اختلال النظام المناعي في عملية التمثيل الغذائي تغير الطاقة والقضاء المشبك، بعد القضاء متشابك أو تغيير وظيفة دبقية قليلة التغصن قد يؤدي أيضا الاستجابات المناعية / كوصي. على الرغم من أننا لا نفهم تماما التسلسل الزمني الذي التغييرات Transcriptome على الظهور، والأنسجة بعد الوفاة من الموضوعات مع SCZ أو ASD معارض قوي ديسريغولاتيون neuroimmune Transcriptome على. في أدمغة من الموضوعات مع الفصام، أريون وآخرون. وSaetre وآخرون. قدمت أدلة المتقاربة لقوي upregulation نسخة المناعة في قشرة الفص الجبهي تتكون من SERPINA3، IFITM2، وIFITM3. الأهم من ذلك، كل من الدراسات لاحظت التغييرات التعبير الجيني التي كانت مستقلة من الأدوية التاريخ المرضى (أريون وآخرون، 2007؛. Saetre وآخرون، 2007). وبالمثل، Garbett وآخرون. وجدت العديد من التغييرات التعبير ذات الصلة في مأمن في منطقة برودمان (BA) 46 من المرضى، في حين أفادت شاو وVawter تعبيرا عن زيادة الخلطية جينات الاستجابة المناعية في منطقة الدماغ نفسها (Garbett وآخرون، 2008؛. شاو وVawter، 2008). ومع ذلك، شميت وآخرون. لاحظ القمع المنهجي للنصوص المناعية في BA22 من الفص الصدغي، مما يوحي بأن الاضطرابات neuroimmune قد يكون لها طابع إقليمي في الفصام (شميت وآخرون، 2011). وأيد هذا التحديد يحتمل الإقليمية أيضا من خلال دراسة خرائط الدماغ شاملة Katsel وآخرون، الذي أبلغ عن النمط المكاني للاهتمام ومعقدة جدا من التقلبات المناعي عبر مناطق الدماغ (Katsel وآخرون، 2005).

باختصار، تشير تتلاقى دراسات تشريح الجثة SCZ أن تنشيط الجهاز المناعي هو مزمن، عملية تدريجية في جزء من السكان من المرضى، ويبدو أن هذا التوقيع التعبير المتبقية من أوائل تنشيط الجهاز المناعي. وعلاوة على ذلك، يرتبط المناعة النص التعريفي لغيرها من التغييرات التعبير الجيني، وخاصة downregulation النصوص علامة متشابك والنصوص استقلاب الطاقة ذات الصلة. وأخيرا، والتغييرات في نظام المناعة معقدة وتشمل كلا الجين يزيد التعبير والنقصان في نمط الخاصة بكل منطقة، مع الحصين والقشرة الأمامية الجبهية التي تبين أبرز neuroimmune نسخة التقلبات.

تفعيل نظام المناعة في ASD معقد على حد سواء. وقد كشفت الدراسات Transcriptome على التقلبات في المقام الأول ASD المصاحب من المناعة، ومتشابك النصوص التنموية. دراسة Garbett وآخرون. قدمت أدلة لتحريض قوي من كل من الفطرية وكذلك جهاز المناعة التكيفية (Garbett وآخرون، 2008). وبالمثل، فوانيجو وآخرون. الإبلاغ عن تحريض قوي في التعبير الجيني تشارك في الاستجابة المناعية والتهابات في قشرات الجبهي والزمنية، ولكن لوحظ عدم وجود ارتباط كبير بين الأليلات المرتبطة ASD في GWAS ومستويات مرنا الجينات المناعية. ووجد الباحثون أيضا أن التخصص الإقليمي والموهن إلى حد كبير في الموضوعات مع ASD (فوانيجو وآخرون، 2011). وأخيرا، وتستخدم Ziats ورينيرت والمتاحة للجمهور أطلس الجينات التعبير من 16 مناطق الدماغ التي تتراوح بين 21 أسبوعا من الحمل إلى 40 سنة من العمر، وبحثت عن أعربت غاية ASD-الجينات المخاطر في نمو الدماغ وتحليل المسارات المستخدمة لتحديد محاور يشير للتقارب الجينات خطر. ووجد الباحثون أن 219 التي سبق تحديدها المفترضة الجينات خطر ASD قد تتلاقى على مسارات خلوى الإشارات، مما يشير إلى أن تنشيط جهاز المناعة في وقت مبكر قد يكون سمة أساسية من ASD الفيزيولوجيا المرضية (Ziats ورينيرت، 2011).

جنبا إلى جنب، وتشير الدراسات Transcriptome على ASD أن الجهاز المناعي الاستقراء هو مزمن ومعقد، وربما ليسوا من أصل وراثي. بدلا من ذلك، فمن المحتمل أن يكون نتيجة للعمليات البيئية أو التكيف الناشئة عن تنشيط جهاز المناعة في وقت مبكر. على غرار التغييرات في SCZ، يرتبط تنشيط الجهاز المناعي في ASD بإحكام مع متشابك نسخة downregulation ويشمل الفطرية وكذلك التكيف النصوص الجهاز المناعي. هناك تداخل ملحوظ من أنماط التعبير الجيني محددة بين هذه الاضطرابات اثنين، من بينهم اثنان من انترفيرون محرض النصوص، IFITM2 وIFITM3 (أريون وآخرون، 2007؛. Saetre وآخرون، 2007؛ Garbett ETAL. 2008؛ فوانيجو وآخرون. ، 2011). ومع ذلك، وعلى النقيض من SCZ، تظهر التغييرات في نظام المناعة في ASD أن تكون موحدة في جميع أنحاء المناطق القشرية. الأهم من ذلك، هذه الدراسات تدعم احتمال أن قبل الولادة تنشيط جهاز المناعة قد يكون مساهما المشترك إلى ظهور ASD أو SCZ. ولكن منذ دراسات تشريح توفر لقطات فقط من Transcriptome على، فإن ظهور الزمني للتغيرات في جهاز المناعة يجب أن يحدده الطرق الطولية الأخرى.

المؤشرات الحيوية الطرفية

دراسات Transcriptome على بعد الوفاة بناء قضية مقنعة لاضطرابات neuroimmune في ASD وSCZ المرضى، ولكن هي هذه التغييرات المرتبطة المؤشرات الحيوية المحيطية على حدوث الالتهابات التي يمكن استخدامها لمساعدة التشخيص المبكر أو مراقبة فعالية العلاج؟ العديد من الدراسات هي مفيدة في هذا الصدد.

وقد وفرت الدراسات في وقت مبكر من علامات المناعة الطرفية نتائج متباينة، ولكن التحليل التلوي مؤخرا ميلر وآخرون. أبلغت عن زيادة في السيتوكينات الالتهابية IL-1β، IL-6، وTGFβ تحديدا أثناء النوبات الحادة للمرض (ميلر وآخرون، 2011). وتشير هذه الأدلة التعريفي محددة للدولة من علامات المناعة خلال فترات نشطة من SCZ، التي أثبتها تاكاهاشي آخرون. الذين وجدوا أن ظهور مؤخرا أو الحلقات النشطة يؤدي إلى تحريض العمليات البيولوجية والمناعية الالتهابية ذات الصلة (تاكاهاشي وآخرون، 2010). بالإضافة إلى ذلك، كوريان وآخرون. وذكرت أن هلوسة عالية والوهم عشرات ترتبط مع التعبير المرتبطة انترلوكين في مصل المرضى (كوريان وآخرون، 2011)، في حين Drexhage وآخرون. العثور على كبير يصل التنظيم من IL 1β، IL-6، وTNFα في الخلايا وحيدة النواة الدموية المحيطية في مرضى مؤخرا الحدوث (Drexhage وآخرون، 2010). مزيد من الدعم يأتي من دراسة أجراها كلمات وآخرون، التي أكدت زيادة TNFα وIL-1β مرنا ومستويات البروتين في المرضى ولم يتلقوا علاجا الحلقة الأولى (كلمات وآخرون، 2009). وهكذا، يبدو أن في المرضى الذين يعانون من SCZ، المرحلة الحادة من المرض يرتبط مع التغيرات الطرفية في كلا النظامين المناعية الفطرية والتكيفية.

في ASD، تنشيط جهاز المناعة الطرفية معقد على قدم المساواة ويبدو أن تنطوي على كل من أنظمة المناعية الفطرية والتكيفية. وعلاوة على ذلك، يبدو أن مستويات غيرت من علامات المناعة الطرفية للإشارة إلى شدة الأعراض. دراسات متعددة تدعم هذا الاستنتاج. ارتبطت التغيرات التعبير أولا، TNFα المتعلقة اشارة مع التشخيص وشدة ASD (هو وآخرون. 2006، هو وآخرون. 2009). وبالمثل، تم زيادة مستويات السيتوكينات proinflammatory مثل IL-1β، IL-6، وIL-8 في المرضى الذين يعانون من التوحد ويرتبط مع انخفاض السلوكي أكثر وضوحا (أشووود وآخرون، 2011). وبالإضافة إلى ذلك، ومستويات التعبير عن خلوى المضادة للالتهابات TGFβ تنخفض كلما ساءت الأعراض السلوكية (أشووود وآخرون، 2008). ولذلك، يبدو أن ميزان السيتوكينات الموالية للالتهابات ومضادة للالتهابات يتم تبديل في ASD وأن مستويات خلوى ترتبط مع شدة الأعراض بما في ذلك مهارات الاتصال الفقراء والسلوكيات الاجتماعية الضعيفة.

باختصار، دراسات العلامات البيولوجية مصل ASD وSCZ تشير العديد من أوجه التشابه بين هذه الاضطرابات اثنين. في كل ASD وSCZ، الخلل المناعي هو النظامية وليس مقصورا على الجهاز العصبي المركزي. ومن المهم أيضا أن نلاحظ أن كلا علامات المناعية الفطرية والتكيفية تظهر مستويات المتغيرة، ويبدو أن مستويات خلوى الطرفية لربط مع أعراض المرض في ظهور هذه الاضطرابات السلوكية (المرحلة الحادة في الفصام وشدة الأعراض في ASD).

إذا تسهم الاضطرابات المناعية لمظاهر ASD / SCZ، يمكن علاجهم تخفيف أعراض المرض؟ ومن المثير للاهتمام، ويبدو أن الأدوية المضادة للذهان يصد الاستجابة المناعية الطرفية في مرضى SCZ. على سبيل المثال، العلاج 4 أسابيع طويلة مع ريسبيريدون انخفاض مستويات المصل من IL-1β مرنا والبروتين والتي كانت مرتبطة مع الحد من شدة الأعراض (كلمات وآخرون، 2009). وقد اقترح مؤخرا أن تنظيم الجهاز المناعي قد تكون جزءا من التخفيف من حدة أعراض [انظر أيضا (Drzyzga وآخرون، 2006؛ Strous وShoenfeld، 2006؛ ميلر وآخرون، 2011)]. ونتيجة لذلك حققت العديد من الدراسات ما إذا كان العلاج مباشرة من الخلل المناعي يؤدي إلى تحسن في الأعراض. وكشفت هذه الجهود أن العلاج بالعقاقير المضادة للالتهابات مع الأسبرين (LAAN وآخرون، 2010 أو مثبط COX2) (مولر وآخرون، 2002؛ مولر وآخرون، 2010) تحسين الاستجابة للعلاج في المرضى الذين يعانون SCZ مع مستويات مرتفعة من علامات للالتهابات الطرفية أو الأعراض الحادة. في ASD، والمعاملة مع العقاقير المضادة للالتهاب تخفف باعتدال مجموعة فرعية من الأعراض ASD (روسينول، 2009). وعلاوة على ذلك، ذكرت دراسة حديثة أن حمى يقلل من شدة الأعراض في الأطفال المصابين بالتوحد (كوران وآخرون، 2007). الآليات الكامنة وراء هذا التأثير غير واضحة، ولكن يمكن للمرء أن يتكهن بأن تغيير التوازن خلوى قد تستفيد وظيفة الدماغ لدى هؤلاء المرضى.

ومع ذلك، فإن السؤال المركزي في أي دراسة العلامات البيولوجية هو: "يمكن لمجموعة من الجزيئات الطرفية يكون التنبؤي التشخيص، وصفي لتطور المرض، أو فعال في فعالية العلاج الرصد؟" يجب أن يكون هناك اختبار سريري يمكن الاعتماد عليها على حد سواء محددة (تحديد مواضيع الوحيدة مع الشرط) وحساس (تحديد جميع المواد مع الشرط). ونتيجة لذلك، فإن فائدة الجهاز المناعي القائم على العلامات البيولوجية التشخيص الطرفية لASD أو SCZ من المستبعد جدا، لأن أي تغيير الأمراض المرتبطة فمن المحتمل أن يخفيها استجابات النظام المناعي لمجموعة من داخلي (مثلا، المواد الغذائية، والنشاط البدني، والنوم) والخارجية (على سبيل المثال، والاتصال مع المواد الكيميائية أو العوامل المعدية) المحفزات. بالإضافة إلى ذلك، يتم التحكم في التعبير عن الجينات الطرفية جهاز المناعة في المقام الأول من الأحداث المحلية، لا تسبب CNS العمليات. وعلاوة على ذلك، فإن نسبة عالية من الظروف المرضية في المرضى النفسيين يجعل صعوبة في عزو التغييرات علامة محصنة ضد المرض الأساسي، خصوصا أن تظهر بعض علامات المناعة تفتقر إلى مرض خصوصية في مختلف الاضطرابات النفسية (عبد الله وآخرون، في الصحافة) . ومع ذلك، في حين أن علامات جهاز المناعة الطرفية من غير المرجح أن تكون أدوات التشخيص جيدة وحدها، المتكاملة "-omics" اختبارات تستند لديها فرصة أفضل لتحقيق الحساسية التشخيصية المطلوبة وخصوصية. رصد مستمر، تكاملية "لمحات -omics" شخصية تظهر الوعد في التمييز الاصحاء الحالات المرضية، على الرغم من أن هذا النهج ليس على استعداد ليتم اعتمادها في الممارسة السريرية في الوقت الحالي (شين وآخرون، 2012).

عموما، وقد حددت كلا الدراستين الدم بعد الوفاة والطرفية في ASD باستمرار تشوهات المناعي في مجموعة واسعة سن مجموعة من المرضى، مما يشير إلى تنشيط جهاز المناعة المزمن الذي يزيد مع شدة الأعراض. في الواقع، يتميز ملف السريري للمرضى ASD من قبل الاستمرارية النسبية للأعراض بدلا من الطابع العرضية من الذهان النشط في SCZ. وعلى النقيض من ASD، يبدو أن يتميز SCZ بواسطة علامات للالتهابات الطرفية التي هي أكثر قوة خلال النوبات الحادة. وهذا يشير إلى الملف الشخصي التهابي مزمن في SCZ مما يؤدي إلى تفاقم خلال فترات المرض النشطة. وهكذا، مؤثرات الخارجية عجل الحلقات ذهانية في SCZ (على سبيل المثال، والإجهاد) قد تعمل على شذوذ المناعية المزمنة مما أدى إلى اشتعال من العمليات الالتهابية. مثل هذه الاستجابة الالتهابية يمكن أن يؤدي إلى تفاقم التدريجي للشذوذ المناعية المزمنة، والتي قد تكمن وراء تأثير ضار من الحلقات ذهانية غير المعالجة، فضلا عن الأثر الإيجابي لاستخدام الفوري والمستمر للدواء (Frangou وموراي، 2000). ومع ذلك، تشير البيانات بعد الوفاة والعلامات البيولوجية الشاملة التي المزمن نسخة ديسريغولاتيون المناعة قد يكون سمة من جزء من السكان المريض وهذه الفئات السكانية لا تزال محددة بشكل واضح حتى الآن. سيكون إجراء المزيد من الدراسات لتحسين العلاقة بين الاضطرابات neuroimmune وأعراض المرض. في المستقبل، التحليل التلوي من بعد الوفاة البيانات التعبير الجيني من المرضى في مختلف مراحل المرض (مدة المرض وشدة الأعراض) قد توفر مزيد من المعلومات حول مسار الخلل Transcriptome على.

النمذجة المناعة الاضطرابات

البيانات من فوانيجو ETAL. أقترح أن بعد الوفاة المناعة تغييرات على النظام نص في ASD قد لا يكون سبب الاختلاف الجيني (فوانيجو وآخرون، 2011). وعلاوة على ذلك، تشير الدراسات الوبائية أن مجموعة واسعة من العوامل البكتيرية والفيروسية تزيد من خطر لASD وSCZ (براون وDerkits، 2010؛ Ratajczak، 2011)، ويقال زيادة مستويات خلوى في الأمهات الحوامل الذين يصابون فيما بعد الأطفال ASD وSCZ (براون . وآخرون، 2004؛ جوينز وآخرون، 2011). وهذا يثير سؤالين أساسيين: ما هو تأثير التنشيط المناعي للأم (MIA) على أن يكون وضع الجنين، ويمكن تحقيق هذه التغييرات باستخدام نماذج حيوانية؟

كشفت دراسات أجريت على الحيوانات معالجة هذه الأسئلة عدة ASD وSCZ الميزات ذات الصلة. بعد MIA، وارتفاع مستويات خلوى في مصل الأم فضلا عن دماغ الجنين (الجولان وآخرون، 2005؛ ماير وآخرون، 2006) وذرية أظهرت تشوهات في المخ المورفولوجية التي تحاكي تلك التي ظهرت في ASD وSCZ (Boksa، 2010 ؛ Kneeland وفاطمي، 2012).بالإضافة إلى ذلك، وقد لوحظت تغييرات النص المعقدة في دماغ الجنين مع التغييرات التالية عدوى فيروسية الأمهات المعروفة بأنها تلعب دورا في الفيزيولوجيا المرضية لASD وSCZ (فاطمي وآخرون، 2009؛ فاطمي وآخرون، 2009؛ Kneeland وفاطمي، 2012) . وعلاوة على ذلك، أظهرت الأدلة المتقاربة أن التغيرات السلوكية في النسل MIA مكشوفة كانت تذكرنا ASD وSCZ (Boksa، 2010، ماير، في الصحافة)، وأن بعض هذه العجوزات السلوكية وتحسينها بعد التعرض للأدوية المضادة للذهان (Piontkewitz وآخرون. ، 2009؛ ماير وآخرون، 2010؛. Piontkewitz وآخرون، 2011). وتوفر هذه الدراسات أدلة دامغة على أن ذرية MIA يتعرض في النماذج الحيوانية يحمل العديد من الميزات الهامة التي لوحظ أيضا في المرضى الذين يعانون من التوحد أو SCZ، مما يوحي بأن تفعيل المناعي للأم يلعب دورا في التسبب في هذه الاضطرابات.

ومع ذلك، كشفت هذه الدراسات أيضا أن العوامل المعدية لا يتصرف مباشرة على دماغ الجنين، وإنما من خلال تفعيل أجهزة الطرد المركزي المناعية. أظهر الأدلة في وقت مبكر أن أدمغة الأجنة أظهرت مستويات لا يمكن اكتشافها من الجينات الفيروسية بعد التعرض الفيروسي الأمهات (شي وآخرون، 2005). وتم تمديد هذه النتيجة تبين أن التعرض لالتناظرية من عدوى بكتيرية (lipopolysaccharide في، LPS) أدى إلى ارتفاع مستويات خلوى في دماغ الجنين والدورة الدموية للأم، ولكن لم تسفر عن تغير تركيب خلوى مرنا في دماغ الجنين، مما يشير إلى الأم وليس استجابة مناعية الجنين (Oskvig وآخرون، 2012). وعلاوة على ذلك، تعرض الأم لIL-6 وحده إلى تغيرات سلوكية ونسخة مماثلة لتلك التي ظهرت بعد التعرض للبولي المحاكاة الفيروسي noninfective (I: C) (سميث وآخرون، 2007؛ Garbett وآخرون، في الصحافة). جلب هذه النتائج معا، والعدوى الفيروسية، وبولي (I: C) وIL-6 أدى ليس فقط في أنماط مماثلة من التغييرات نص في دماغ الجنين (Garbett وآخرون، في الصحافة، ولكن تم منع التغييرات السلوكية وTranscriptome على من قبل الإدارة) من IL-6 تحييد الأجسام المضادة التالية بولي (I: C) تعرض (سميث وآخرون، 2007). وبالتالي، فإن هذه النتائج تقدم دليلا على أن الإصابة بالأمراض المعدية المختلفة تسبب تفعيل النظامية الأمهات المناعة الذي يؤثر على الجنين عن طريق السيتوكينات المتداولة، IL-6 على وجه الخصوص. ولذلك، فإن مسار IL-6 قد تمثل هدفا واعدا لمنع الآثار الضارة للMIA على الدماغ النامية.

تحريض المرحلة الحادة البروتينات الاستجابة المناعية هو موثقة جيدا، لكنه لا يزال معظمهم من غير الواضح كيف يمكن لنظام الحث المناعي يمكن أن تؤثر على نمو الدماغ. وكانت الدراسات على الحيوانات الأخيرة أيضا المفيد في هذا الصدد، وتقديم أدلة على أن جهاز المناعة يتفاعل مع آليات النمو العصبي. أولا، تم العثور على الخلايا العصبية معرضة للخطر في الفئران IL-6 بالضربة القاضية (بوين وآخرون، 2011). وعلاوة على ذلك، تعديل للخلوى الموالية للالتهابات TNFα غيرت الاستقرار والتقليم من نقاط الاشتباك العصبي (لي وآخرون، 2010، وتبين أنها تلعب دورا في اللدونة متشابك وتقليم متشابك (بيتي وآخرون،). 2002؛ Stellwagen وMalenka، 2006). بالإضافة إلى ذلك، تم العثور على IL1β لتعديل قوة متشابك في الدوائر GABAergic (Serantes وآخرون، 2006) وعثر على مكان MHC أن تلعب دورا حاسما في النتيجة مسار النشاط يعتمد العصبية والاستقرار في الاتصالات النشطة (Shatz، 2009). وأخيرا، كان تفعيل دبقية حاسم لنشأة والهجرة والاستقرار الانتقائي للخلايا عصبية جديدة (تشونغ وبارس، 2011؛ ​​Ekdahl، 2012)، تقليم متشابك (Paolicelli وآخرون، 2011) واللدونة العصبية (بن عاشور وباسكوال، 2010 ). يوفر هذه البيانات دليلا مقنعا على أن الوظيفة المناعية المعدلة الآثار ليس فقط الخلايا العصبية ولكن أيضا يؤدي إلى تعديلات حاسمة في اتصال الدماغ. ومن المثير للاهتمام، وتتميز عملية المرض في SCZ التي كتبها overpruning من نقاط الاشتباك العصبي (فالودي وMirnics، 2011)، في حين ASD، وعدم التقليم المناسب و / أو الاستقرار المبكر من نقاط الاشتباك العصبي يمكن أن يؤدي إلى وجود فائض من الاتصالات المشبكية، مما أدى في نهاية المطاف ظهور فرط رد الفعل وفرط البلاستيك الدوائر العصبية (ماركرام وآخرون، 2007 وminicolumns القشرية تغييرها) (Buxhoeveden وآخرون، 2006؛. كازانوفا وآخرون، 2006). هذا يجادل بقوة أن هذا الجين * تفاعل البيئة في الدماغ البشري لديه نتيجة مختلفة في SCZ بدلا من ASD. ومن المهم أيضا أن نلاحظ أن طبيعة التغييرات النص، تدابير خلوى، والتشوهات الهيكلية التالية MIA تعتمد على مرحلة تنموية للجنين في وقت التعرض، وتوفير دليل على أن التوقيت الدقيق لMIA يمكن أن يؤدي إلى مضاعفات المرضية متميزة في النماذج الحيوانية (ماير وآخرون، 2007؛ فاطمي وآخرون، 2012؛ Kneeland وفاطمي، 2012). ومع ذلك، تجدر الإشارة إلى أن ليس كل طفل من أم مصابة البكتريا أو فيروسي يطور حالة العصبية والنفسية (سيلتن وآخرون، 2010؛ وبراون، 2011). ولذلك فمن المرجح أن تأثيرات من MIA تعتمد على قوة الإصابة و / أو الجينات * تفاعل البيئة، وكذلك توقيت التنموي للإهانة. الدراسات على الحيوانات تدعم بقوة هذا الرأي كما MIA تعرض Nurr1 وDISC1 نماذج الماوس المعدلة وراثيا تفاقم الظواهر التشريحية والسلوكية. وعلاوة على ذلك، فمن المثير للاهتمام أن هذه الفئران أيضا عرضت توازن خلوى تغير دون التعرض MIA، مما يشير إلى أن بعض الطفرات في حد ذاتها يمكن أن تؤثر أيضا على الجهاز المناعي، وربما جعل كائن أكثر حساسية للإهانة المناعة (Abazyan وآخرون، 2010؛ Vuillermot وآخرون، 2012).

باختصار، الدراسات على الحيوانات من MIA ضرورية لفك رموز الطرق الجهاز المناعي يغير بنية الدماغ والربط وظيفة (Deverman وباترسون، 2009). ودمج هذه البيانات مع الملاحظات السريرية وبعد الوفاة البشرية أمرا بالغ الأهمية لفهم الجينات * تفاعلات البيئة التي تؤدي إلى ASD وSCZ الفيزيولوجيا المرضية. ومن الواضح أن الجينات هي متعددة الوظائف وأي تصنيف منهم إلى "متشابك"، "محصنة"، أو "فئات الدبقية" مصطنع إلى حد كبير. تنفيذ التقييم على أساس interactome مثل الجين المرجح تحليل الشبكة coexpression (WGCNA) (Mirnics، 2008؛ أولدهام وآخرون، 2008) سوف يكون السبيل الوحيد لفهم العلاقة الوظيفية بين شبكات الجينات وكيف يمكن أن الاضطرابات التي تدفع علم الأمراض.

الاستنتاجات

الخلل المناعي هو جزء لا يتجزأ من ASD وSCZ الفيزيولوجيا المرضية. الدراسات الوبائية، GWAS، دراسات الدماغ بعد الوفاة، المؤشرات الحيوية الطرفية، وMIA عن توفير المتقاربة دليل على وجود تأثير عميق من اضطرابات الجهاز المناعي على النمو العصبي التي هي ذات الصلة لASD / SCZ المسببات مباشرة. وعلاوة على ذلك، فإن وجود دائم الاضطرابات المناعية في المخ أثناء حياة الكبار ويرى أن هذه التغييرات هي المساهمة بشكل فعال في عملية المرض. ومع ذلك تبقى علامات الاستفهام وافرة. ومن غير المعروف ما إذا كان خطر لتطوير مرض يتطلب عدة ضربات الوراثية / البيئية أو تركيبة معينة من وراثية * يضرب البيئية. وعلاوة على ذلك، فإنه يبقى أن نحدد ما إذا كانت هذه التغيرات هي الجوانب الأساسية لكل اضطراب أو ما إذا كانت آليات التكيف / غير القادرة على التأقلم ردا على إهانة الأولية منفصلة. بغض النظر عن أصل هذه التغييرات، من المهم أن الأدوية المضادة للالتهابات تظهر أن يكون مفيدا في كل من عدد المرضى. مزيد من البحوث في هذه المجالات قد يحسن صحة غربلة قبل الولادة في العائلات وراثيا المعرضين للخطر، وقد تؤدي أيضا إلى استراتيجيات وقائية وعلاجية جديدة.

المراجع

• Abazyan B، نومورا J، كنان G، إيشيزكا K، Tamashiro KL، Nucifora F، بوجوريلوف V، وآخرون 2010. التفاعل قبل الولادة من DISC1 متحولة وتنشيط جهاز المناعة ينتج النفسية للبالغين. بيول الطب النفسي 68: 1172 - 1181.
  • CROSSREF،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 22
• عبد الله MW، لارسن N، بستان J، Nørgaard بيدرسن B، تورسن P، مورتنسن EL، Hougaard DM. الأمنيوسي السيتوكينات الالتهابية السوائل: علامات المحتملة لضعف مناعي في اضطرابات طيف التوحد. العالم J بيول الطب النفسي. PMID: 22175527، تحت الطبع.
• Almoguera B، Riveiro ألفاريز R، لوبيز كاسترومان J، دورادو P، لوبيز رودريجيز R، فيرنانديز نافارو P، باكا-غارسيا E، وآخرون. 2011. homozigosity ATA في المروج الجين IL-10 هو أحد عوامل الخطر ل الفصام في الإناث الإسبانية: دراسة حالة السيطرة. BMC ميد جينيه 12: 81.
  • CROSSREF،
  • CAS،
  • شبكة Science®
• Anney R، Klei L، بينتو D، ريغان R، كونروي J، ماجالهايس TR، كوريا C، وآخرون. 2010. الاشعة على نطاق الجينوم لالأليلات شيوعا التي تؤثر على خطر لمرض التوحد. همهمة مول جينيه 19: 4072 - 4082.
  • CROSSREF،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 54
• أريون D، أنجر T، لويس DA، ليفيت P، Mirnics K. 2007. الأدلة الجزيئية لزيادة التعبير عن الجينات المتعلقة الوظيفة المناعية وكوصي في قشرة الفص الجبهي في الفصام. بيول الطب النفسي 62: 711 - 721.
  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 90
• أشووود P، Enstrom A، Krakowiak P، هيرتز Picciotto I، هانسن RL، Croen LA، Ozonoff S، وآخرون. 2008. انخفاض عامل النمو المحول beta1 في التوحد: ارتباط محتمل بين التقلبات المناعة وضعف في النتائج السلوكية السريرية. J Neuroimmunol 204: 149 - 153.
  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 25
• أشووود P، Krakowiak P، هيرتز Picciotto I، هانسن R، عيد الفصح I، فان دي المياه J. 2011. السيتوكينات البلازما مرتفعة في اضطرابات طيف التوحد توفر دليل على ضعف المناعة، وترتبط مع نتائج سلوكية ضعف. الدماغ Behav إمان 25: 40 - 45.
  • CROSSREF،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 21
• Athanasiu L، Mattingsdal M، كالر AK، براون، غوستافسون O، Agartz I، Giegling أنا، وآخرون. 2010. يتم نسخ المتغيرات الجينات المرتبطة الفصام في دراسة الجينوم على نطاق النرويجية في لفيف الأوروبية الكبيرة. JPsychiatr الدقة 44: 748 - 753.
  • CROSSREF،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 33
• بارانزيني SE. 2009. وعلم الوراثة من أمراض المناعة الذاتية: منظور بالشبكة. داء أوبان IMMUNOL 21: 596 - 605.
  • CROSSREF،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 46
• بيتي EC، Stellwagen D، موريشيتا W، بريسناهان JC، ها BK، فون Zastrow M، بيتي MS، وآخرون. 2002. التحكم في قوة متشابك من قبل الدبقية TNFalpha. العلوم 295: 2282 - 2285.
  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 412،
  • ADS
• بن عاشور S، باسكوال O. 2010. الدبقية: إن العديد من الطرق لتعدل اللدونة متشابك. نوروتشيم كثافة العمليات 57: 440 - 445.
  • CROSSREF،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 3
• بيرنشتاين HG، شتاينر J، Bogerts B. 2009. الخلايا الدبقية في الفصام: أهمية المرضية والعواقب المحتملة للعلاج. الخبراء القس Neurother 9: 1059 - 1071.
  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS
• Bocchio Chiavetto L، بوان F، Zanardini R، بوبولي M، Michelato A، Bignotti S، طره GB، وآخرون. 2002. الشراكة بين المروج النسخ المتنوعة متعددة الأشكال انترلوكين 10 جينة وانفصام الشخصية. بيول الطب النفسي 51: 480 - 484.

 

[رافت ابراهيم]

 

http://www.nature.com/mp/journal/v15...mp201021a.html

وأشارت علم المناعة العصبية مرة واحدة لمن حيث دلالة المرضية فقط، وكان من المفهوم عموما كما تغطي تورط ضار للجهاز المناعي في مختلف الأمراض واضطرابات في الجهاز العصبي المركزي (CNS). ومع ذلك، لدينا تصور وظيفة الجهاز المناعي في الهيكل، وظيفة، واللدونة للجهاز العصبي المركزي قد خضعت لتغيير جذري بعد الاكتشافات على مدى العقدين الماضيين، ويستمر إلى أن يعترض عليه المزيد من الدراسات الأخيرة من النمو العصبي والإدراك. ويلخص هذا الاستعراض التطورات الحديثة في فهم مشاركة جهاز المناعة في تطوير وعمل الجهاز العصبي المركزي في ظل الظروف الفسيولوجية. تعتبرها من متلازمة ريت سبيل المثال مرض النمو العصبي المدمر، ونحن نقدم فرضية التي قد تساعد على تفسير الدور الذي تقوم به الخلايا المناعية في المسببات لها، وبالتالي يشير إلى أن جهاز المناعة قد يكون هدفا علاجيا ممكنا للتخفيف من حدة بعض الأعراض هذه وغيرها من اضطرابات طيف التوحد.

الكلمات الدالة:

متلازمة ريت؛ علم المناعة العصبية. خلايا T؛ جهاز المناعة؛ النمو العصبي. مناعة وقائية

أعلى الصفحة وظيفة الجهاز المناعي في إصابة الجهاز العصبي المركزي

وتتميز نظام المناعة والجهاز العصبي المركزي (CNS) من خلال مزيد من التشابه من الخلافات. كلا النظامين تتعلم من التجربة. كلا التواصل قطع منفصلة من المعلومات عبر مسافات قصيرة جدا من خلال نقاط الاشتباك العصبي وعبر مسافات طويلة جدا من خلال شبكات الإشارات الكيميائية المعقدة. على الرغم من أن كلا النظامين حاسمة لبقاء الكائن الحي، الذين يعتبرون عادة ككيانات منفصلة من حيث قدرتها على التواصل مع والتأثير على بعضها البعض. هذا الفصل المنهجي، الذي يكمن وراء مفهوم الدماغ "امتياز المناعي،" كان يعتقد منذ فترة طويلة أن تكون شبه مطلقة. إلا أنه في العقدين الماضيين أن هذه العقيدة العلمية مرونة لا سيما وقد تم الطعن على محمل الجد.
اتخذت خطوات أولية نحو طريقة أكثر دقة للتفكير في نظام المناعة من حيث وظيفتها فيما يتعلق بهذه الأجزاء "مميزة" من الحي كله في العمل الريادي تبين أن التضخيم تسيطر عليها بشكل جيد للاستجابة المناعة الذاتية يمكن أن تكون مرتبطة مع تحسين بقاء الخلايا العصبية في الجهاز العصبي المركزي الإصابة الحادة. 1، 2 تمت متابعة هذه الدراسات من قبل الآخرين من مجموعات متنوعة، وكلها عوامل تورط في كثير من الأحيان المناعية T autoreactive الخلايا كمفتاح لإصلاح وصيانة الجهاز العصبي المركزي فعال. 1، 3، 4، 5، 6، 7، 8، 9، 10 وأظهرت الدراسات كذلك إلى وظيفة محورية للنظام المناعة الفطري، تورط هذه الخلايا كما CNS الخلايا الدبقية الصغيرة 11، 12 والخلايا المشتقة من النخاعي الطرفية 13 في CNS تجديد والعصبية. 1، 3، 7، 8 نقطة البيانات الأخيرة إلى أكثر تعقيدا عدم التجانس في تنشيط المناعة الفطرية وظيفة مما كان يعتقد أصلا. 14، 15 وهكذا، على سبيل المثال، والاعتراف الفطرية الظواهر الخلايا المناعية كما الموالية للالتهابات (M1) أو المضادة للالتهابات (M2) 15، 16، 17 هو جذب اهتمام متزايد كأساس لآلية المصب المحتملة التي تربط بين عمل الخلايا الليمفاوية T لصحية وظيفة الجهاز العصبي المركزي.

أعلى الصفحة وظيفة الجهاز المناعي في وظائف المخ العليا

ومن المقبول عموما الآن أن الجهاز المناعي يمكن أن تكون حميدة، حتى واقية، 18، 19، 20 في سياق استجابة تسيطر عليها بشكل جيد لأمراض الجهاز العصبي المركزي. إصابة الحادة أو التهاب، ومع ذلك، هو كيان مختلف تماما عن الجمعية الفسيولوجية والحفاظ على الدوائر العصبية المعقدة الكامنة وظائف المخ العليا. وهكذا، كان محيرة ليكتشف أن الفئران مع نقص المناعة الشديد مجتمعة أظهرت انخفاض ملحوظ في المهام السلوكية (مثل اختبارات التعلم المكاني والذاكرة في المياه متاهة موريس)، وكنتيجة طبيعية، أن حقن الكبار الفئران T-الخلية التي تعاني من نقص مع من النوع البري تحسنت splenocytes التعلم والذاكرة المكانية أدائها إلى مستوى مماثل مع أن من الفئران العادية. 21 زيارتها نقل من splenocytes المنضب T-الخلوي أي تأثير من هذا القبيل على الوظيفة الإدراكية، مشيرا إلى أن التحسن الملحوظ يتوقف على وجود خلايا T. 22 وقدم دليلا على طبيعة الخلايا T المحددة اللازمة لمثل هذا التعلم والذاكرة من خلال التجارب مع T MBP وT OVA الفئران المعدلة وراثيا (هندسيا على التوالي للتعبير عن خلايا T محددة لحاتمة إما البروتين الأساسي المايلين (ب ب) مستضد ذاتي أو ألبومين البيض المستضد غير ذي صلة (OVA)). عندما تمت مقارنة أدائها في المياه متاهة موريس مع أن سيطرة من النوع البري، كان أداء الفئران T MBP يست أسوأ وأفضل قليلا من النوع البري، مما يدل على أن السكان واحد من الخلايا T رد الفعل إلى مستضد ذاتي CNS كان كافيا لدعم التعلم وظائف الذاكرة المكانية. أداء الفئران T OVA، التي تفتقر إلى القدرة على إدراك وتتفاعل مع خلايا الجهاز العصبي المركزي المستضد T، يعكس ضعف التعلم كبيرة. مجتمعة، أظهرت النتائج أن الخلايا T محددة لCNS مستضد كانت الداعمين الرئيسيين للتعليم المكاني والذاكرة.
على الرغم من أن يتأثر وظيفة الدماغ بصحة جيدة بشكل واضح من قبل النظام المناعي، 21، 23 أي خلايا T أو الخلايا المشتقة من النخاعي الطرفية الموجودة في لحمة CNS في ظل الظروف الفسيولوجية الطبيعية. ويحيط الدماغ، ومع ذلك، السحايا، التي توفر غطاء الغشائي الثلاثي، والتي بموجبها يتدفق السائل النخاعي التي تنتجها ظهارة الضفيرة المشيمية. 24، 25 والمصارف السائل النخاعي في الغدد الليمفاوية العنقية، 26 مما يتيح خلايا T الطرفية للاستجابة لمستضدات الجهاز العصبي المركزي. وهكذا، في حين أنه في الدماغ السليم، يتم تقييد الوصول للخلايا المناعية في لحمة CNS، ليست هذه هي الحال بالنسبة لحصولهم على الضفيرة المشيمية البطين والسحايا. والواقع المكتظة بالسكان هذه الأنسجة الأخيرة بواسطة الخلايا المشتقة من النخاعي مثل الضامة والخلايا الجذعية، 27، 28 وأعداد كبيرة من الخلايا T. 29، 30 لذلك، فمن المعقول أن تشير إلى أن التفاعلات neuroimmune التي تؤثر على التعلم والذاكرة قد تنشأ في السحايا والمناطق المشيمية الضفيرة / البطين بدلا من لحمة.
في الواقع، وقد أظهرت الأبحاث الحديثة في مختبرنا أن التغيرات المناعية في الوسط السحائي المحيطة CNS يكون لها تأثير كبير على وظيفة الجهاز العصبي المركزي (Derecki وآخرون، الملاحظات غير منشورة). أظهرنا أن نقص T-خلية، إما المزمن (في الفئران نقص المناعة المختلط الشديد) أو الحاد (صيدليا يسببها)، يشوه الحصانة الدم النخاعي السحائي نحو الموالية للالتهابات (M1) النمط الظاهري. ونحن نعتقد أن هذا الانحراف استجابة السحائية الموالية للالتهابات يمكن أن تسهم في التعلم والذاكرة وانخفاض رأينا في التجارب المذكورة أعلاه على نقص T-خلية الحادة والمزمنة. وتبين لنا أيضا ويرافق ذلك الأداء الناجح للمهمة موريس المياه متاهة من تراكم انترلوكين (IL) -4 إنتاج (T H2) الخلايا في السحايا، لافتا إلى وظيفة هامة لIL-4 في التعلم والذاكرة (Derecki وآخرون آل. والملاحظات غير منشورة).

أعلى الصفحة وظيفة الجهاز المناعي في تطوير الجهاز العصبي المركزي

شبكة معقدة بشكل مثير للدهشة تجميعها في مسار الأسلاك الجهاز العصبي المركزي الثدييات تشهد على قدرة جينات مفردة لإملاء نتائج المظهرية متعددة. في الواقع، العديد من الجينات التي كان يعتقد مرة واحدة لتشفير البروتينات ذات الصلة فقط إلى العوامل السيتوكينات، كيموكينات، معقد التوافق النسيجي الرئيسي (MHC)، بما في ذلك النظام وتكمل المناعة 31، 32، 33، 34 -هل تعرف الآن أن لها وظائف كبيرة في الجهاز العصبي المركزي في جميع مراحل التنمية.
يشير كتبها السيتوكينات أمر حاسم لتنمية الأنبوب العصبي والعصبية مواصفات / الدبقية. التعبير عن مخلق العظام البروتينات أعضاء النمو المحول عامل β يقمع الفصيلة-أكثر قدرة الحث العصبي ما لم يتم أنفسهم قمع هذه البروتينات بنشاط. 35 ومما يسهل هذا الإجراء من قبل رأس العوامل وchordin، 36 ويسمح التمايز نوتش التي تعتمد على الخلايا الظهارية العصبية من داخل الخلايا الدبقية شعاعي. في خطوات التمايز اللاحقة، IL-6 والسيتوكينات neuropoietic، مثل عامل اللوكيميا المثبطة، عامل التغذية العصبية الهدبي، وcardiotrophin 1، تشغيل أو إيقاف الجينات المصب المسؤولة عن تحديد مصير الخلايا الظهارية العصبية إلى خلايا شعاعي الدبقية، الخلايا العصبية، أو الدبقية التي كتبها يشير من خلال بروتين سكري 130 والنسخ عامل STAT3. 37 STAT3 الإشارات هي في حد ذاتها التي تخضع لرقابة بروتين التيروزين الفوسفاتيز SHP2. ومن المثير للاهتمام، سواء STAT3 وSHP2 مهمة في الجهاز المناعي كل من البلدان النامية والكبار. 38 السيتوكينات أخرى عديدة ذات وظائف محددة بوضوح في الجهاز المناعي، بما في ذلك IL-1β، IL-2، -3، -4، -5، -7، -9، و-11، وأعرب أيضا في الجهاز العصبي المركزي النامية. 39 على الرغم من أن التعبير المكاني والزماني لبعض من هذه السيتوكينات واضحة المعالم، 40، 41 ونظرة ثاقبة وظائف التنموية دقيقة من يحتاج إلى المزيد من التوضيح.
كيموكينات في فعل محيط المناعي المستمدة من خلال تدرجات لجذب خلايا تحمل مستقبلات وما شابه ذلك. في الجهاز العصبي المركزي، وقد ثبت كيموكينات لأداء بطريقة مماثلة، وبالتالي تنظيم هجرة الخلايا العصبية. وأعرب العديد من مستقبلات chemokine في أنماط النمطية في الجهاز العصبي المركزي، 31 ولكن بالنسبة لمعظمها، لا تزال غامضة وظائف محددة. وربما يرجع ذلك إلى الاختلاط معظم بروابط chemokine والمستقبلات، فضلا عن حقيقة أن الخلايا العصبية الفردية عادة ما تعبر عن مستقبلات chemokine متعددة. 42 الاستثناء الملحوظ هو CXCL12 / CXCR4 الاقتران، مما يدل على الانتقائية المتبادلة قوية، 43 وبالتالي، يعرف الكثير عن وظيفتها في الجهاز العصبي المركزي. فئرانا معدلة وراثيا التي تفتقر إلى أي طرف من هذا الزوج تظهر عيوب كبيرة في المخيخ 44 وقرن آمون 45 التنمية. العثور ذكرت أن السحايا هي المصدر الرئيسي للCXCL12 46 المثير للاهتمام لا سيما في ضوء النتائج الأخيرة في مختبرنا تبين أهمية الحصانة السحائية من أجل وظيفة الجهاز العصبي المركزي. نظرية واحدة تفترض أن CXCL12 السحائي، يفرز المجاور لحمة الدماغ، ويحافظ على الخلايا الحبيبية للدماغ في حالة القرب من القنفذ سونيك مولد للتفتل قبل هجرتهم. 47 في الحصين الماوس، CXCL12 السحائي يجذب الخلايا العصبية الناشئة في مكانه في التلفيف المسنن. 48 CXCL12 وCXCR4 أيضا المشاركة في التوجيه محور عصبي، والتفاعل مع جزيئات التوجيه الكنسي، بما في ذلك semaphorins 3A و C، روبو، والشق-2. 49، 50 ونتيجة لذلك، تظهر الفئران خروج المغلوب تشوهات في إسقاط المحاور. 51
وقد كشف العمل مؤخرا وظائف غير متوقعة في الجهاز العصبي المركزي للMHC-I وتكمل عامل C1q. MHC-I، هيكل بغشاء وجدت في خلايا الأنوية، تنشط في عرض ببتيد عصاري خلوي (الذات) الشظايا إلى الخلايا اللمفية تي. يتم التخلص من الخلايا البروتينية تقديم أجنبية أو لا يمكن التعرف عليها من قبل النظام المناعي. 32 يتألف النظام مكملا لأسرة مكونة من نحو 25 البروتينات الصغيرة التي ترتبط المركبات المناعية خارج الخلية أو مكونات البلازما غشاء والتوسط لإزالة الخلايا غير المرغوب فيها والحطام. 52 وفي الكشف عن التغييرات في تعتمد على النشاط التعبير الجيني في تطوير الجانبية النواة الركبية، لاحظ Shatz وزملاء العمل أن التقلبات في الخلايا العصبية MHC-I تحدث بشكل متزامن مع تحسين متشابك اللازمة لإنشاء الدوائر البصرية في الجهاز العصبي المركزي. 34 وتمشيا مع هذه الملاحظة،-I MHC تم العثور على الفئران الطافرة من نقص في أن تظهر انحرافات كبيرة في retinogeniculate صقل المحاور. 53 بناء على ذلك، افترض أن وظيفة MHC-I في القضاء متشابك قد تكون مماثلة لوظيفتها في محيط كوسيط لإزالة الخلايا المقدمة للمستضد 'غير المتمتعة بالحكم الذاتي. 33 وقد تم تحديد العوامل تكمل C1q وC3 في وقت لاحق من قبل بارس وزملاء العمل 32 في وظيفة مماثلة في نفس المسار. وفي الآونة الأخيرة، واقترح أن اثنين من البروتينات المناعية قد يكون في الواقع شريك واحد آخر في تحقيق صقل متشابك في النواة الركبية الجانبية. 54
عوامل المناعة تحتل مكانا بارزا في الجهاز العصبي المركزي النامية، التي تنظم التمايز الخلوي والهجرة، وتشكيل شبكة، وكما هو موضح أعلاه حتى متشابك الصقل. وهكذا، الخلل المناعي خلال تطوير الجهاز العصبي المركزي ما قبل أو ما بعد الولادة من المرجح أن لها تداعيات خطيرة من حيث الوظائف المعرفية الناشئة. وسطاء المناعة قد يكون لها وظائف المركزية أو المساهمة في كل من المسببات وتحسين من الأمراض التي تعبر عن نفسها خلال هذه الفترة، وهي اضطرابات النمو انتشارا، مثل متلازمة ريت (RTT)، على سبيل المثال، واضطرابات طيف التوحد الأخرى (ASD).

أعلى الصفحة متلازمة ريت

RTT هو اضطراب النمو المتفشي التي يتم تجميعها مع ASD. RTT يؤثر على 1 في 8500 الإناث. 55 في حالات نادرة، قد تعرض الذكور مع عدم توازن الصبغيات X كروموسوم أو الاصباغ الجسدية مع RTT النمط الظاهري الكلاسيكية. 56 المرضى الذين يعانون من RTT يكون الحركية والتطور الطبيعي محيط الرأس حتى سن حوالي 5 أشهر، تليها تباطؤ نمو رأس يرافقه تطور اللغة المتضررة، والنفسي التخلف، نمطية العجز الحركي والسلوكيات، وفقدان المشاركة الاجتماعية قبل سن 4 سنوات. 57 شكليا، والمرضى RTT يحمل العقول الصغيرة مع عدم وجود دليل على ضمور، النمط الظاهري يتفق مع انعدام التنمية السليمة بدلا من انحطاط مستمر. انخفضت الخلايا العصبية في RTT عرض المرضى تشجر شجيري، أقل العمود الفقري شجيري، وزيادة كثافة التعبئة. 58 ويظهر التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي نسبة زيادة تدريجيا الدبقية إلى الخلايا العصبية في المادة البيضاء، مما يشير إلى الضرر محور عصبي تدريجي وكثرة الخلايا النجمية التهابات الإرشادية معتدل أمراض البيضاء المسألة. بالإضافة إلى ذلك، هناك دلائل على زيادة الدراجات الجلوتامين الغلوتامات في المشبك، مشيرا إلى زيادة العصبي مثير في المرضى الأصغر سنا RTT. 59
في ما يقرب من 80٪ من الحالات، ويرتبط RTT إلى طفرة في الجين MECP2 على الكروموزوم (اكس). MECP2 يشفر بروتين الميثيل الدليل السياسي الشامل الملزم الذي يربط الحمض النووي الميثيلي ويعمل إما المنشط النسخي أو قامع، اعتمادا على السياق الجيني . 60 واحد فقط تحور X كروموسوم ضروري لهذا المرض في إظهار، لذلك الاختلافات في تعطيل كروموسوم X-بين مريضات يفسر جزئيا تقلب ينظر في النمط الظاهري المرض. 61

أعلى الصفحة جهاز المناعة، وRTT

ويرافق تشوهات عصبية في RTT عن التغيرات المناعية الأساسية في كل من الجهاز العصبي المركزي وفي محيط. MECP2، بصرف النظر عن وظيفة مركزية في مسببات RTT، وقد تبين أن لها وظيفة معاصرة في تطوير وتنظيم نظام المناعة ؛ 62، 63، 64 لا سيما، وكان اسمه مؤخرا باسم الجينات قابلية مرشح للاضطراب المناعة الذاتية الذئبة erythymatosus. 65 على الرغم من ذلك، فإن الأبحاث إلى تشوهات جهاز المناعة في RTT محدودة. في عدد قليل من هذه الدراسات التي أجريت حتى الآن، ومع ذلك، فقد أصبح من الواضح بشكل متزايد أن الطفرات في MECP2 لا تؤثر فقط على الجهاز العصبي المركزي بشكل مباشر، ولكن أيضا تغيير عميق في التعبير عن الجينات التي تؤثر على القدرات الوظيفية، والدول التنشيط، وملامح خلوى، والوصول إلى CNS من الخلايا اللمفية تي. 66، 67، 68، 69، 70
ملامح التعبير الجيني للخلايا T إيواء طفرة MECP2 تعكس التعقيد الكامن في توقع الآثار المصب وسيط النسخي. كمثال، T استنساخ الخلايا من المرضى RTT تظهر انخفض النصوص مرنا لT-مربع 21. 66 T-مربع 21 بترميز T-الرهان، وهو عامل النسخ الرئيسي الذي يسيطر على التزام نسب CD4 + الخلايا التائية المساعدة وبالتالي تعزيز T H1 تمايز جزئيا مما يتيح الوصول إلى γ المروج interferon-. 67 المحصلة وحدها، فإن T-رهان downregulation تشير إلى وجود ملحوظ انحراف T H2 في المرضى الذين يعانون RTT. ومع ذلك، الدراسات قد كشف أيضا زيادة مستويات النص من L-RAP (المشتقة من الكريات البيض أمينوببتيداز أرجينين)، جين يسببها γ interferon-، 68 وكذلك CD6. وينظم هذا الأخير transcriptionally التي كتبها RUNX1 / 3، 71 الذي يمنع التزام T H2. 72 وهكذا، فإن آثار انحراف التهاب MECP2 تتطلب مزيدا من التوضيح. والجدير بالذكر أن CD6 هو أيضا جزيء شارك في تنشيطية يشارك في تي خلية التنشيط والتمايز، 71 ويجند لها، ALCAM (تنشيط جزيء التصاق الكريات البيض خلية)، لديه وظيفة في هجرة الكريات البيض عبر حاجز الدم في الدماغ. 66، 73 وهكذا، وخلايا T في المرضى الذين يعانون RTT ربما يكون أكثر استعدادا نسبيا الوصول إلى الجهاز العصبي المركزي. وهذا من شأنه التأكيد على الأهمية الحاسمة لملف خلوى بهم، كما تدعم البيانات وظيفة المدمرة لمستويات فوق السواء من السيتوكينات الموالية للالتهابات في الجهاز العصبي المركزي. 74
على الرغم من أن هناك اتفاق عام على أن الأعداد الإجمالية للتعميم الخلايا الليمفاوية في المرضى الذين يعانون RTT طبيعية، 69، 70 لا يمكن الكشف عن IL-2 مستقبلات (CD25) -positive (تفعيلها بشكل قانوني) الخلايا اللمفية تي في مصل الدم من المرضى RTT، 69 تم العثور على وHLA-DR + T الليمفاوية إلى زيادة. 75 وأفادت فئات أخرى انخفاضا في خلايا CD8 + T وCD57 + الخلايا القاتلة الطبيعية وزيادة مستويات المصل للذوبان IL-2 مستقبلات. 70 يمكن أن أعدادا كبيرة بشكل غير طبيعي للخلايا HLA-DR + T تشير إلى أن أحد مكونات RTT محصن تعتمد، وربما المناعة الذاتية في الطبيعة. 76

أعلى الصفحة المسببات المناعة ممكن، والتدخل العلاجي لRTT

في حين دعمت الدراسات الأولية بقوة وظيفة الخلايا العصبية حصريا لMECP2 في RTT علم الأمراض، ومنذ ذلك الحين تبين أن الخلايا الأخرى، وتحديدا الخلايا الدبقية، لديها وظيفة رئيسية في المرض. 77، 78 استخدمت التلاعب الجيني في نماذج الفئران تبين أن التعبير مقيدة الخلايا العصبية معين من النوع البري MECP2 غير كاف لإنقاذ النمط الظاهري. 77، 79 هناك حاجة إلى التعبير عن عموم العصبية لها. 80 وكشفت دراسات لاحقة أن يتم التعبير عن MECP2 أيضا في الدبقية، وأن الخلايا النجمية تعبر عن شكل متحولة من البروتين يمكن أن تمنح النمط الظاهري المريضة 'توقف' في البرية من نوع الخلايا العصبية في المختبر. وأظهرت التجربة المتبادلة التي البرية من نوع الخلايا النجمية يمكن انقاذ الخلايا العصبية توقف وتعزيز التنمية محوار العادية. 78 لأن كلا من الخلايا النجمية والخلايا الدبقية الصغيرة توفر الدعم لتنمية الخلايا العصبية، ولأن هذه الأنواع اثنين من خلية تمثل العلاقة بين النظام المناعي التكيفي وحمة CNS، فإنه يبدو من المعقول تشير إلى أن أمراض الدبقية يدل على المشاكل المناعية أكبر المتورطين في RTT.
زيادة أعداد الخلايا HLA-DR + T مع انخفاض اللافت للنظر في IL-2 مستقبلات التعبير يمكن أن تشير إلى وجود عنصر الذاتية من خلل RTT وغيرها من ASD. 76 بدلا من ذلك، يمكن أن يكون مؤشرا على واهن النمط الظاهري T-الخلية، والتي قد تورط وظيفة محتملة للالخلايا الليمفاوية T في RTT بالمثل. بيانات أولية من قبل مجموعتنا، تهدف إلى تحديد خصائص الحصانة السحائية من MECP2 فئرانا معدلة وراثيا، هي إلى حد كبير في اتفاق مع البيانات المنشورة تشير إلى العجز الشديد في تنشيط الخلايا الليمفاوية T بالبشر؛ لاحظنا عدم وجود مماثل التعبير IL2R في السحايا بعد تدريب في التعلم والذاكرة المكانية المقايسات (Derecki وآخرون، الملاحظات غير منشورة).
وعلاوة على ذلك، ديسريغولاتيون للتعبير عن المستمدة من الدماغ عامل التغذية العصبية (BDNF) هو الآلية التي طفرات الجينات MECP2 قد يؤدي إلى نتائج عصبية مرضية والمشاكل التنموية للRTT. 81 خلال تعتمد على خبرة تنشيط الخلايا العصبية، تدفق الكالسيوم والكالسيوم 2 + / كالمودولين التي تعتمد على البروتين كيناز II التوسط الفسفرة انتقائية من MECP2 في الدماغ. هذا الفسفرة تقمع قدرة MECP2 لربط المروج عامل التغذية العصبية، وبالتالي منع السلوك الفاضح من عامل التغذية العصبية النسخ في أوقات نشاط الخلايا العصبية وتؤثر تشجر شجيري وتشكيل العمود الفقري. 81 هذا مثير للاهتمام لا سيما في ضوء حقيقة أن الإنتاج BDNF لا يقتصر على الخلايا العصبية. في الواقع، الخلايا الدبقية تنتج كميات كبيرة، كما تفعل الخلايا المناعية مثل الخلايا الليمفاوية T و B، وحيدات. 82
أخذ الملاحظات الواردة أعلاه في الاعتبار، والعلاجات المناعية المحتملة لRTT قد تكون موجهة نحو تعديل الظواهر الدبقية عن طريق التلاعب الحصانة السحائية ( الشكل 1). الخلايا الأكثر تأثرا على الفور من قبل السيتوكينات سحائي من المحتمل أن تكون الخلايا النجمية، التي، بسبب تفاعلها مع الأم الحنون (الغشاء الداخلي للالسحايا)، هل من الخلايا العصبية الأقرب إلى السحايا. 24، 83 النجمية لها وظائف عديدة في الدماغ، بما في ذلك إنتاج عامل النمو،، خارج متشابك الغلوتامات التخزين المؤقت، والتمثيل الغذائي للمياه. 84 كما أنها تدعم مرونة الدماغ وsynaptogenesis في كل من الطبيعي والجهاز العصبي المركزي المريضة. 85، 86 النجمية تعبر عن مستقبلات لأكثر من السيتوكينات المعروفة وثبت للحصول على النمط الظاهري أعصاب على التحفيز مع السيتوكينات الموالية للالتهابات مثل IL-1β ونخر الورم α factor-. 87، 88 تفعيل الخلايا النجمية من قبل خلايا T أو السيتوكينات المضادة للالتهابات، مثل IL-4، 89، 90 نتائج في تحقيق أفضل التخزين المؤقت الغلوتامات في ظل ظروف normoxic، ويعيد التخزين المؤقت الغلوتامات تحت ظروف الإجهاد التأكسدي. 89، 90 وعلاوة على ذلك، الخلايا الدبقية الصغيرة، التي نشر بكثافة لحمة (وتضم ما يقرب من 25٪ من المحدد للالدبقية، التي تقع مباشرة إلى جوار الأم الحنون) والرد بقوة على تحفيز خلوى وبالتالي يمكن الحصول على الظواهر على حد سواء وقائية والمدمرة. 91، 92 الدبقية الصغيرة تفعيلها من خلال IL-4 المنتجات الذي يشبه الانسولين عامل النمو، 1، 93 عاملا التي تدعم وظيفة الادراك والنمو العصبي، في حين أن الخلايا الدبقية الصغيرة تفعيلها من خلال السيتوكينات الموالية للالتهابات تعبر عن كميات كبيرة من محرض النيتريك سينسيز أكسيد والجزيئات neurodestructive أخرى 91، 94 يمكن أن الواقع يضعف عمليات التعلم.
الشكل 1.

الوظائف فرضية مناعية في RTT. وغالبا ما تسبب RTT عن طفرة في الجين MECP2. كما MECP2 هو العاشر مرتبطة، بسبب X-تعطيل بعض الخلايا في الإناث المنكوبة تعبر عن شكل متحولة من الجين، في حين أن البعض الآخر لا. في الرسم التوضيحي أعلاه، تظهر خلايا T متحولة في حالة غير نشطة أو تعطيلي. خلايا T غير نشطة تنتج مستويات منخفضة من السيتوكينات، ولا سيما IL4. وقد تبين فقدان التشكيل T-خلية الحصانة السحائية أن تؤدي إلى M1 انحراف النخاعي السحائي. خلايا الدم النخاعي M1 تنتج مستويات عالية من السيتوكينات neurodestructive الموالية للالتهابات (iNOS، TNF- α)، وبدوره قيام الخلايا الدبقية الصغيرة المتفاعلة. الخلايا النجمية على رد الفعل العازلة الغلوتامات في خفض مستويات، وتنتج مستويات تقلص إلى حد كبير من BDNF. كل هذه العوامل مجتمعة تؤدي إلى بيئة CNS الفقراء في عوامل النمو العصبية الحرجة، مما يؤدي إلى خلل كبير في الخلايا العصبية متحولة (B)، وظيفة تقلص في الخلايا العصبية العادية (A). تحسين وظيفة الخلايا التائية يمكن أن يعود التوازن إلى الوسط المناعة السحائي. أن مستويات طبيعية من IL4 يدفع الخلايا النخاعي السحائي إلى مصير M2، وتشجيع إنتاج عوامل اعصاب مثل TGFβ وأرجيناز. T-خلايا مشتقة γ interferon- (لا يظهر) وسوف IL4 أيضا دعم تحسين التخزين المؤقت الغلوتامات وتحسين إنتاج BDNF بواسطة الخلايا النجمية وكذلك إنتاج أرجيناز وIGF-1 عن طريق الخلايا الدبقية الصغيرة. ومن شأن تحسين سحائي والبيئة الدبقية يؤدي إلى دعم قوي لخلايا عصبية عادية (A) والخلايا العصبية متحولة (B) على حد سواء، وبالتالي تحسن وظيفة العصبية عموما وتحسين من RTT. وقد تم ربط العديد من الجينات المرتبطة بالمناعة (على سبيل المثال MHC) إلى ASD في دراسات تحليل الربط، وبالتالي بعض الأفكار الواردة في هذا النموذج يمكن تعميمها.

الرقم الكامل وأسطورة (188 K)

تجريد متشابك، النمط الظاهري العصبية ينظر في RTT، وقد تبين مؤخرا أن بوساطة الخلايا الدبقية الصغيرة. وكان أحد الاقتراحات المثير للاهتمام أن تجريد متشابك قد يكون في الواقع استجابة دبقية اعصاب لتفعيل الاستجابة المناعية في الجهاز العصبي المركزي. 14، 95 وهكذا، وعلم الأمراض ينظر في RTT قد يكون نتيجة استجابة مناعية dysregulated بدلا من مجرد العصبية في الأصل. ويظهر التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي نسبة زيادة تدريجيا الدبقية إلى الخلايا العصبية في المادة البيضاء من المرضى RTT، مما يشير إلى الضرر المحاور المستمر وكثرة الخلايا النجمية. بالإضافة إلى ذلك، هناك دلائل على زيادة الدراجات الجلوتامين الغلوتامات في المشبك، مما يؤدي إلى وجود فائض من الغلوتامات خارج الخلية 96 في RTT، الذي من شأنه أيضا أن تكون متسقة مع دبيقي وضعف astroglial. ومن المحتمل أن يكون RTT هو مرض ليس من الخلايا العصبية، ولكن بدلا من الخلايا الدبقية، وهو الاقتراح الذي تدعمه الأدلة الأخيرة. 77، 78، 80 إذا كان هذا هو الحال، في الواقع ثم التلاعب على مستوى النظام المناعي تهدف إلى تغيير النمط الظاهري دبقية، بدلا من العلاجات الموجهة neuronally اعتبرت حتى الآن، قد توفر في الواقع فرصة أفضل لتحسين المرض، وبالإضافة إلى ذلك تفادي حاجة ل الوصول المباشر إلى والتلاعب الجيني للأهداف العصبية.
علاج آخر مرشح لتحسين حال RTT علم الأمراض هو تناوله عن طريق الفم من البوليمرات (الشرطي) -1. COP-1 هو ببتيد الاصطناعية (4،7 حتي 11،0   كيلو دالتون) تتألف من أربعة الأحماض الأمينية، L -alanine، L -lysine، L حمض -glutamic، وL -tyrosine، في نسبة المولي محددة. تم تصنيعه أصلا في محاولة لمحاكاة نشاط MBP في تحريض التهاب الدماغ والنخاع المناعي الذاتي التجريبي في حيوانات المختبر. 97 مصادفة، تبين أن تكون غير دماغي المنشأ وفعلا القمعية من التهاب الدماغ والنخاع MBP التي يسببها. 98 في الوقت الحاضر، COP-1 هو الدواء الأكثر المنصوص عليها في كثير من الأحيان لعلاج التصلب المتعدد. وتشير النتائج الأخيرة التي COP-1 الحث على النمط الظاهري M2 في الخلايا المشتقة من النخاعي. 99 لافت للنظر، ويمكن حيدات M2 في نماذج نقل بالتبني توفر حماية قوية ضد التهاب الدماغ والنخاع. 100 ومن المفترض، وبالتالي، من خلال تشكيل مناسب وتنظيم الظواهر سواء دبقية وT-خلية في سياق neuroinflammation، قد يكون من الممكن السيطرة على الجهاز العصبي المركزي التهاب بطريقة موقع معين وسياق معين.
بالإضافة إلى إظهار خصائص مضادة للالتهابات في الجهاز العصبي المركزي، يسلك COP-1 أيضا نشاط اعصاب في الأمراض العصبية الحادة والمزمنة، 101، 102 على سبيل المثال في نماذج من الشلل الرعاش وأمراض الزهايمر، من قبل القيادة في امتصاص المركبات السامة للخلايا. وأظهرت النتائج الأخيرة في سحق العصب البصري نموذج الإصابة التي COP-1، عندما ألقاه الخلايا الجذعية محملة بالمخدرات خارج الحي، يمارس تأثير مباشر على الخلايا العصبية اعصاب المصابين ميكانيكيا. 103 على الرغم من أن الوقاية منها عن طريق حجمه ورسوم من عبور حاجز الدم في الدماغ من تلقاء نفسها، والمنضوية COP-1 بسهولة عن طريق الخلايا الجذعية، وقادر على تعزيز قدرتها على عبور حاجز الدم في الدماغ والتي ستصدر على متني الجانب. وبالتالي فإنه يوفر السبل الممكنة لدخول COP-1 في لحمة الجهاز العصبي المركزي. 104

أعلى الصفحة ملاحظات ختامية

الاكتشافات الحديثة، وبعضها المبينة في هذا الاستعراض، غيرت وجهات النظر التقليدية من وظيفة الخلايا المناعية في الجهاز العصبي المركزي وتغير مفهومنا للعلم المناعة العصبية كمصطلح الذي يغطي الحالات المرضية إلى واحد يشير إلى التفاعلات الفسيولوجية بين النظامين. وهناك اتفاق عام قبل الآن أن تسيطر عليها بشكل جيد ويعمل بشكل صحيح الجهاز المناعي هو شرط أساسي لسير الطبيعي للدماغ. لم يتم بعد إنشائها، ومع ذلك، ما إذا كان يقتصر على وظيفة الخلايا المناعية لصيانة CNS التوازن، أو ما إذا كان الجهاز المناعي تشارك مباشرة في وظيفة الدماغ. وهكذا، على سبيل المثال، في حالة من الوظائف المعرفية، وليس معروفا حتى الآن ما إذا كان الجهاز المناعي يشارك بنشاط في عمليات التعلم والذاكرة أو ببساطة يساعد الدماغ على التعامل مع الإجهاد، وبالتالي يسمح للعملية التعلم لتكون أكثر كفاءة. ومع ذلك، كما هو مبين بوضوح النتائج الملخصة في هذا الاستعراض، ونحن لا يمكن أن يتجاهل خلل المناعة كعامل محتمل مساهما أو حتى المسبب في المسببات من التطور العصبي والمعرفي، والأمراض النفسية. طرحناه هنا الفرضية القائلة بأن خلل المناعة هو المسؤول، على الأقل جزئيا، لعدة مظاهر RTT. والجهاز المناعي للمرضى RTT سليمة (أي تحمل من النوع البري MECP2 أليل)، قد تباطأ تطور المرض إلى أسفل والعديد من الأعراض تحسينها. على أساس هذه الفرضية، وينبغي أن تهدف الدراسات في فك رموز وظيفة جهاز المناعة في تطور المرض في نماذج حيوانية من RTT، وعلى يترتب على ذلك من تطوير علاجات تستند المناعة.
هنا، نحن خص مرض واحد من مجموعة واسعة من المتلازمات العصبية النمائية يطلق عليه ASD. ويبدو أن هناك سمة مركزية من المرضى ASD أن يكون خلل المناعة الذاتية، كما هو مقترح من قبل عدة أسطر من الأدلة على أساس بيانات إرشادية غير طبيعي تنشيط الخلايا اللمفاوية التائية، وجود الأجسام المضادة CNS، وعلامات تنشيط نظام المناعة الفطري في الجهاز العصبي المركزي . كأرقام اللمفاويات الشاملة طبيعية في هؤلاء المرضى، والسكان CD4 + (كما هو موضح لدعم تحديدا الوظيفة الإدراكية 21، 23، 105) تتقلص. وبالنظر إلى الوظائف الحيوية لعبت في تطوير الجهاز العصبي المركزي، والتنظيم، وظيفة عن طريق السيتوكينات، كيموكينات، الضامة، والخلايا T، خلل المناعة قد يكون جيدا وظيفة في ASD المسببات وبالتالي بمثابة الهدف العلاجي في المستقبل.
فرضيتنا، على عكس نظريات مما يدل على أن العامل الرئيسي لتحقيق التنمية والتقدم ASD هو نظام المناعة overactivation، يقترح أن النمو العصبي غير طبيعي وظيفة في ASD هي نتيجة عدم وجود أو خلل في الخلايا T ذات الصلة، وربما المناعة الذاتية في الطبيعة. مرة واحدة ومن المفهوم وظيفة الجهاز المناعي في مسببات هذه الأمراض على نحو أفضل، يمكن إدراجها العظام زرع نخاع واللقاحات التي تهدف إلى تعزيز وظيفة المناعة في العلاجات المستقبلية.

أعلى الصفحة تضارب المصالح

الكتاب تعلن أي تضارب في المصالح.

أعلى الصفحة المراجع

• المعلم G، ليبوفيتش-R أميت، Yoles E، F مور، كوهين الأشعة تحت الحمراء، خلايا شوارتز M. الذاتية T تحمي الخلايا العصبية من انحطاط الثانوية بعد axotomy الجهاز العصبي المركزي نات ميد 1999؛ 5: 49-55. | المادة | مجلات | ISI | ChemPort |
• كوهين IR، صيانة شوارتز M. الذاتية والعصبية في الجهاز العصبي المركزي J Neuroimmunol 1999؛ 100: 111-114. | المادة | مجلات | ChemPort |
• شوارتز M، المعلم G، ليبوفيتش-R عميت كوهين IR.يمكن الاستجابات المناعية الفطرية والتكيفية يكون مفيدا لCNS إصلاح. اتجاهات Neurosci 1999؛ 22: 295-299. | المادة | مجلات | ISI | ChemPort |
• Serpe CJ، تتزلاف JE، Coers S، ساندرز VM، جونز KJ. الانتعاش وظيفية بعد سحق الوجه العصب تأخر في الفئران شديدة العوز المناعي مجتمعة. الدماغ Behav إمان 2002؛ 16: 808-812. | المادة | مجلات
• Serpe CJ، Coers S، ساندرز VM، جونز KJ. CD4 + T، ولكن ليس CD8 + أو B، الخلايا الليمفاوية توسط بقاء العصبون الحركي الوجه بعد الوجه transection العصب. الدماغ Behav إمان 2003؛ 17: 393-402. | المادة | مجلات
• بيرام SC، كارسون MJ، DeBoy CA، Serpe CJ، ساندرز VM، جونز KJ. T-بوساطة الخلايا العصبية-CD4 إيجابي يتطلب المزدوج العرض مقصورة مستضد. J Neurosci 2004؛ 24: 4333-4339. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Hofstetter HH، سويل DL، ليو F، M ساندور، Forsthuber T، ليمان PV وآخرون. خلايا T Autoreactive التئام الجروح ما بعد الصدمة في الجهاز العصبي المركزي. J Neuroimmunol 2003؛ 134: 25-34. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Kipnis J، عمل شوارتز M. المزدوج من glatiramer خلات (COP-1) في علاج الجهاز العصبي المركزي المناعة الذاتية والاضطرابات العصبية. اتجاهات مول ميد 2002؛ 8: 319-323. | المادة | مجلات | ChemPort |
• كرمان J، تشو HH، شركة DO، Seroogy CM، ساندور M، والخلايا الجذعية فابري Z. تضخيم T-الخلية بوساطة الاستجابات المناعية في الجهاز العصبي المركزي. J IMMUNOL 2006؛ 177: 7750-7760. | مجلات | ChemPort |
• فرنكل D، وهوانغ Z، مارون R، Koldzic DN، موسكوفيتش MA، ينر HL. العصبية التي كتبها IL-إنتاج 10 MOG CD4 + الخلايا T التالية السكتة الدماغية. J Neurol الخيال العلمي 2005؛ 233: 125-132. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Butovsky O، اندا G، G كونيس، زيف Y، افيدان H، N غرينبرغ وآخرون. الحث وانسداد oligodendrogenesis بواسطة الخلايا الدبقية الصغيرة تفعيلها بشكل مختلف في نموذج حيواني من مرض التصلب المتعدد. J كلين استثمر 2006؛ 116: 905-915. | المادة | مجلات | ChemPort |
• بيرسون M، Brantefjord M، هانسون E، Ronnback L. lipopolysaccharide في زيادة دبيقي GLT-1 التعبير والغلوتامات قدرة امتصاص في المختبر من خلال آلية تعتمد على TNF-ألفا. الدبقية 2005؛ 51: 111-120. | المادة | مجلات | ISI
• Shechter R، لندن A، C فارول، Raposo C، Cusimano M، G يوفيل وآخرون. التسلل الضامة المشتقة من الدم هي خلايا حيوية تلعب دورا المضادة للالتهابات في التعافي من إصابة في النخاع الشوكي في الفئران. بلوس ميد 2009؛ 6: e1000113. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Hanisch UK، Kettenmann H. الدبقية الصغيرة: استشعار نشط والخلايا المستجيب تنوعا في الدماغ طبيعية ومرضية. نات Neurosci 2007؛ 10: 1387-1394. | المادة | مجلات | ChemPort |
• مانتوفاني A، سيكا A، Locati M. بلعم الاستقطاب يأتي من العمر. الحصانة 2005؛ 23: 344-346. | المادة | مجلات | ISI | ChemPort |
• Michelucci من A، Heurtaux T، Grandbarbe L، Morga E، Heuschling P. توصيف النمط الظاهري دبقية في ظل ظروف الموالية للالتهابات ومضادة للالتهابات معينة: آثار بلازميدة قليلة القسيمات وييفي اميلويد بيتا. J Neuroimmunol 2009؛ 210: 3-12. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Ransohoff RM، VH بيري. علم وظائف الأعضاء دبقية: مؤثرات فريدة من نوعها، ردود المتخصصة. أنو القس IMMUNOL 2009؛ 27: 119-145. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Kipnis J، مزراحي T، Hauben E، I شاكيد، Shevach E، شوارتز M. المناعة الذاتية اعصاب: تحدث بشكل طبيعي CD4 + CD25 + الخلايا التائية التنظيمية قمع القدرة على الصمود في إصابة الجهاز العصبي المركزي. بروك Natl أكاد العلوم الولايات المتحدة الأمريكية عام 2002؛ 99 : 15620-15625. | المادة | مجلات | ChemPort |
• شوارتز M، Kipnis J. المناعة الذاتية واقية والعصبية في أمراض الاعصاب التهابات واالتهابية. J Neurol الخيال العلمي 2005؛ 233: 163-166. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Yoles E، E Hauben، Palgi O، Agranov E، Gothilf A، A كوهين وآخرون. المناعة الذاتية وقائية هي الاستجابة الفسيولوجية لCNS الصدمة. J Neurosci 2001؛ 21: 3740-3748. | مجلات | ISI | ChemPort |
• Kipnis J، H كوهين، كاردون M، Y زيف، ونقص الخلايا شوارتز M. T يؤدي إلى الخلل المعرفي: الآثار المترتبة على التطعيم العلاجي لمرض انفصام الشخصية والظروف النفسية الأخرى. بروك Natl أكاد العلوم الولايات المتحدة الأمريكية عام 2004؛ 101: 8180-8185. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Brynskikh A، T ارن، وقال تشو J، Kipnis J. التكيف الحصانة يؤثر سلوك التعلم لدى الفئران. الدماغ Behav إمان 2008؛ 22: 861-869. | المادة | مجلات | ChemPort |
• زيف Y، رون N، Butovsky O، اندا G، E السدي، غرينبرغ N وآخرون. تساهم الخلايا المناعية في الحفاظ على الخلايا العصبية والتعلم المكاني قدراتهم في مرحلة البلوغ. نات Neurosci 2006؛ 9:

 

[رافت ابراهيم]

 

http://www.nature.com/tp/journal/v2/...tp201219a.html

المقالة الأصلية

الاقتباس: بالحركة الطب النفسي (2012) 2، E91، دوى: 10.1038 / tp.2012.19
نشرت على الانترنت 13 مارس 2012

A العلامات البيولوجية القائمة على الدم رواية للكشف عن اضطرابات طيف التوحد
فتح

N مؤمني 1، J بيرجكويست 2، L Brudin 3، F Behnia 4، B Sivberg 5، MT Joghataei 6 وBL بيرسون 1

• 1 كلية العلوم الطبيعية، جامعة لينيوس، كالمار، السويد
• 2 قسم الكيمياء الحيوية الطبية-مركز، الكيمياء التحليلية، جامعة أوبسالا، أوبسالا، السويد
• 3 قسم علم وظائف الأعضاء السريرية، مستشفى مقاطعة كالمار كالمار، السويد
• قسم 4 في العلاج الوظيفي في جامعة الرعاية الاجتماعية وعلوم التأهيل، طهران، إيران
• 5 وزارة العلوم الصحية، جامعة لوند، لوند، السويد
• 6 الخلوية ومركز الأبحاث الجزيئية، جامعة طهران الطبية، طهران، إيران

المراسلات: أستاذ BL بيرسون، كلية العلوم الطبيعية، جامعة لينيوس، نورا vagen 49، كالمار SE-39182، السويد. البريد الإلكتروني: bengt.persson@lnu.se
تلقى 3 فبراير 2012. قبلت 4 فبراير 2012

أعلى الصفحة ملخص

تصنف اضطرابات طيف التوحد (ASD) كما اضطرابات النمو العصبي. وقد أجريت العديد من الدراسات لإيجاد العلامات البيولوجية مرشح ربطها في تطوير هذه الاضطرابات، ولكن حتى الآن لا يوجد العلامات البيولوجية يمكن الاعتماد عليها هو متاح. وقد استخدمت تقنيات مطياف الكتلة لتحديد ملامح البروتين في بلازما الدم من الأطفال الذين يعانون من هذه الاضطرابات من أجل تحديد البروتينات / الببتيدات التي يمكن أن تستخدم المؤشرات الحيوية للكشف عن الاضطرابات. ثلاثة الببتيدات وأعرب تفاضلي مع المسؤول الكتلة (م / ض) قيم 2020 ± 1، 1864 ± 1 و 1978 ± 1   دا في البلازما الهيبارين من الأطفال الذين يعانون من التوحد التي تم تغييرها بشكل ملحوظ بالمقارنة مع يتم الإبلاغ عن نمط الببتيد المجموعة الضابطة غير ASD هنا. هذه مجموعة جديدة من المؤشرات الحيوية يسمح لالموثوقة أداة على الدم التشخيصية التي يمكن أن تستخدم في التشخيص ويحتمل أن تكون، في تشخيص ASD.
الكلمات الدالة:

ASD. اضطرابات طيف التوحد. العلامات البيولوجية. دم

أعلى الصفحة مقدمة

تتميز اضطرابات طيف التوحد (ASD) من خلال ضعف في التوجه الاجتماعي والاتصال وأنماط متكررة أو تقييد المصالح أو السلوكيات التي تظهر خلال 3 سنوات الأولى من عمر الطفل مع بداية منذ الولادة أو تدريجيا في عملية تراجعية من نهاية السنة الأولى ولكن أساسا خلال السنة الثانية 1، 2 وذلك في الدليل التشخيصي والإحصائي للاضطرابات العقلية (DSM) -IV تصنف على أنها اضطراب في النمو. 3 التسبب في ASD غير معروف حتى الآن. ويستند التشخيص على معايير DSM-IV، ويتألف من ثالوث الأعراض، بما في ذلك ضعف الاجتماعي، واضطرابات اللغة والتقيد الصارم التشابه.
في تشخيص الأطفال الذين يعانون من التوحد هناك طائفة من شدة هذه الأعراض يعكس التباين في النمو المعرفي بدءا من أعلى من المتوسط ​​إلى الإعاقة الفكرية. 4، 5 هي 4-5 مرات أكثر عرضة من البنات أن يكون التوحد بنين. 6 على الرغم من أن العوامل الوراثية لASD هي حتى الآن غير معروفة إلى حد كبير ويصف تقرير صدر مؤخرا التخصيب في مجموعات الجينات المختلفة التي يعرف أنها ترتبط إلى ASD. 7 الفيزيولوجيا المرضية من ASD ينطوي على تطوير الخلوية والعصبية المتضررة وظيفة ربما ترتبط أنماط غير عادية من البروتينات / الببتيدات في الدم والسائل النخاعي، 8، 9، 10 زيادة مستويات السيروتونين الناقل العصبي وβ-إندورفين، 11، 12، 13 مستويات منخفضة من الميلاتونين، 14 زيادة مستويات الأفيونية، 15 مستويات عالية من الحمض الاميني، 16 كا 2 + نقص القناة، 17 التفاعلات الجينات والبيئة، 18 مستويات غيرت سيرين نشاط الأنزيم البروتيني prolyl ببتيداز داخلية، 19 مستويات البلازما منخفضة من هرمون الأوكسيتوسين نيوروبيبتيدي، 20 الاستجابة المناعية مرتفعة 21 وتفعيل غير طبيعي في نظام المتممة. 22، 23، 24 تفعيل المتممة النظام ردا على مستضد أجنبي أو اضطراب وراثي يؤدي إلى تدهور البروتين C مكملا لC3A وC3b شظايا البروتين مع الجماهير الجزيئية من حوالي 9   كيلو دالتون و 177   كيلو دالتون، على التوالي. 25 عامل تكملة I-بوساطة الانقسام من C3b α -chain تحرره ثلاثة أجزاء البروتين مع الجماهير الجزيئية لل68 و 43 و 2   كيلو دالتون، 26 منها واحد آخر يعرف باسم C3f. 27، 28 وقد تبين أن الببتيد C3f لديك ضعف وظائف تشنجي المنشأ وanaphylatoxic ويعزز نفاذية الأوعية الدموية كما هو مبين في اختبارات الجلد خنزير غينيا. 28 وقد شهدت مزيدا من تدهور C3f إلى C3f-desArg بوساطة كربوكسي ببتيداز N أن يؤدي إلى خصائص تشنجي المنشأ وanaphylatoxic أقوى. 28 الشكل 1 يوضح موقع المجال C3f في التركيب البلوري للبروتين C3. 29 الكشف عن الببتيدات منخفضة الوزن الجزيئي من خلال التنميط البروتين من بلازما الدم والسائل النخاعي قد تكشف غيرت أنماط بروتين / الببتيد المرتبط الأمراض والاضطرابات. 30، 31، 32، 33 وفي دراسة حديثة، تبين البالغين الذين يعانون من متلازمة اسبرجر لعرض التعبير جنس معين من المؤشرات الحيوية في الدم. 33 وقد أدت المحاولات السابقة لإيجاد العلامات البيولوجية يمكن الاعتماد عليها لASD عن طريق استخدام البروتينات والتنميط بروتين / الببتيد إلى مجموعة من المؤشرات الحيوية المحتملة. كشفت دراسة البروتين في أدمغة التوحد تشريحها باستخدام 2-D الكهربائي للهلام تعدد الأشكال وحيدة النكليوتيد في غليوكسالاز I. 34 أظهرت آخر دراسة البروتين مصل من الأطفال الذين يعانون من التوحد التعبير التفاضلية من apolipoproteins وغيرها من مكونات المتممة. 35
الشكل 1.

البنية البلورية للبروتين مكمل C3 (C3b / A / 1) مع موقع المجال C3f. موقع المجال C3f (محاصر) في نموذج هيكل من PyMol (ديلانو العلمي LLC، سان كارلوس، CA، الولايات المتحدة الأمريكية).

الرقم الكامل وأسطورة (194 K)

في هذه الدراسة، التي قطعناها على أنفسنا نهج البروتين باستخدام سطح تعزيز الوقت-الرحلة الليزر الامتزاز / التأين (SELDI TOF) قياس الطيف الكتلي للمقارنة ملامح الببتيد من بلازما الدم من الأطفال الذين يعانون من التوحد والأطفال التحكم ( الجدول 1) بهدف اكتشاف المؤشرات الحيوية الببتيد جديدة مع أداة التشخيص وفهم دور هذه في الفيزيولوجيا المرضية لASD.
الجدول 1 - مشارك من التفاصيل.

الجدول الكامل

أعلى الصفحة المواضيع والأساليب

المشاركين

وقد تم اختيار اثنان وثلاثون الأطفال الذين يعانون من التوحد وإحدى وثلاثين الأطفال الأصحاء في البداية لهذه الدراسة. وتم تجنيد الأطفال في الفئة ASD من مركز إعادة التأهيل التوحد في جامعة الرعاية الاجتماعية وعلوم التأهيل في طهران، إيران. بعد تلقي الموافقة المسبقة من الوالدين، وقد تم جمع عينات الدم. تم فحص جميع الأطفال مع ASD من قبل خبراء السريرية في مرض التوحد. فحص طبيب نفساني الطفل جميع الأطفال الذين تم فحصهم أيضا طبيب أعصاب الأطفال أو طبيب نفساني الطفل. اتفق جميع الخبراء الاستشاريين على تشخيص مرض التوحد وفقا لمعايير DSM-IV. 3 ومع ذلك، الإجراءات التشخيصية المطبقة في أوروبا والولايات المتحدة الأمريكية / كندا باستخدام التشخيص جدول المراقبة التوحد 36 وتشخيص التوحد المنقحة مقابلة 37 لم تستخدم في عملية التشخيص المطبقة في ايران. قوبل هذا النقص من خلال تجربة سريرية طويلة من قبل الطبيب النفسي أعصاب الطفل / الطفل الذي كان على بينة من السلوكيات الأساسية في التوحد ذكر من قبل الأكاديمية الأمريكية لطب الأطفال في حصارها من 2007. 38 تم تشخيص جميع الأطفال في الفئة ASD وجود متلازمة التوحد (التوحد الطفولي أو كانر) مع درجة من التخلف العقلي ولكن ليس لديه معلومات حول اضطرابات نفسية أخرى مثل اضطرابات المناعة الذاتية متفاوتة كان المتاحة بالإضافة إلى أن أيا من الأطفال كانوا الفصام. وتألفت المجموعة الضابطة من الأطفال الأصحاء وضعت عادة مع عدم وجود علامات أو تشخيص الاضطرابات العصبية النمائية وجنده من نفس المنطقة من أجل تقليل التأثيرات السامة من بيئات مختلفة. تم استبعاد الأطفال على حد سواء في ASD ومجموعات المراقبة الذي كان أي نوع من العدوى أو المرض قبل أقل من 2 أسابيع من وقت الامتحان.
وكانت عينات الدم للسيطرة على واحد صحي (أنثى) وأربعة مرضى (أنثيين واثنين من الذكور) لا يمكن لتحليل نظرا لحجم العينة صغير جدا، مما أدى في 30 الضوابط و28 طفلا للأطفال الذين يعانون من التوحد لمزيد من الدراسات (لمزيد من التفاصيل مشارك ، شاهد الجدول 1). تتألف المجموعة ASD أكثر من الذكور، وكان الأصغر سنا معنويا.
وتمت الموافقة على الدراسة (MT / 1247) من قبل لجنة الأخلاق التابعة لجامعة العلوم الطبية في طهران.

إجراء

تم جمع جميع عينات الدم من قبل ممرضة الأطفال وأشرفت على تشخيص الأطفال المصابين بالتوحد من قبل طبيب نفسي للأطفال مع تدريب خاص في مجال الطفولة الذهان. تم جمع الدم الوريدي إلى 3 مل أنابيب الهيبارين (نظام Vacutainer؛ بيكتون ديكنسون، بليموث، المملكة المتحدة)، وفصل البلازما مباشرة بواسطة الطرد المركزي في 1300   ز لمدة 10   دقيقة على 4   ° C. بعد ذلك مباشرة، مثبط كوكتيل خالية من EDTA (وقف مثبط البروتياز؛ الحرارية العلمية بيرس البروتين منتجات البحث، روكفورد، IL، الولايات المتحدة الأمريكية) وأضيفت وPrefablock SC (Pentapharm، ميونيخ، ألمانيا) بتركيز 10   ميكرولتر   مل -1 البلازما و20   ميكرولتر   -1 مل بلازما، على التوالي. تم aliquoted البلازما التي تنتج في أجزاء صغيرة، وعلى الفور تجميد على الثلج الجاف وتخزينها في -80   ° C.

التنميط الببتيد

وقد استخدم SELDI-TOF مطياف الكتلة (MS) لمحة الببتيدات منخفضة الوزن الجزيئي، وأقل من 10   كيلو دالتون، في البلازما من الأطفال الذين يعانون من التوحد والمجموعة الضابطة صحية، ومناسبة لاحقة تحليل MS / MS (المذكورة أدناه) مصفوفة بمساعدة الليزر الامتزاز / التأين (MALDI) -TOF / TOF MS ومصدر آخر تسوس تجزئة. السطوح الميثيل كربوكسي البروتين CM10 رقاقة مجموعة أعدت (مبادل ضعيف الموجبة تحمل مجموعة وظيفية COOH) مع ثمانية البقع التطبيق وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة (BioRad، هرقل، CA، الولايات المتحدة الأمريكية). تم معايرتها CM10 البروتين صفائف رقاقة مرتين مع 100   العازلة ميكرولتر (0.1   M خلات الصوديوم، ودرجة الحموضة 5.0) لمدة 5   في 25 دقيقة   ° C. عينات البلازما مخففة 01:50 مع العازلة فوسفات الصوديوم (25   م M، ودرجة الحموضة 7.0) تم تطبيقها على bioprocessor جيدا. بعد 45   دقيقة من الحضانة مع اهتزاز عند 25   تم غسلها عينات ° C ثلاث مرات مع 150   ميكرولتر من العازلة التخفيف، تليها اثنين يشطف سريعة مع 150   ميكرولتر من 1   م M HEPES العازلة، ودرجة الحموضة 7.0. تم إزالة مجموعة رقاقة من bioprocessor، تجفف الهواء و 0.8   ميكرولتر من المشبعة (25   تمت إضافة BioRad) إلى كل بقعة، سمح ليجف في الهواء، وتكررت هذه الخطوة مرة واحدة؛ ملغ / مل) CHCA (α حمض -cyano-4-hydroxycinnamic. تم قراءة مجموعة رقاقة على القارئ BioRad البروتين رقاقة (PCS 4000) على نظام SELDI طبعة الشخصية. قبل قراءة صفائف رقاقة تم إجراء معايرة الخارجية عن طريق استخدام "الكل في واحد مستوى الببتيد" (BioRad) تحتوي على خليط من سبعة الببتيدات مختلفة في مجموعة الجزيئي لل7/1   كيلو دالتون.

تسلسل الببتيدات

100   تم المخفف ميكرولتر من عينات البلازما مع 300   ميكرولتر من 25   م M العازلة فوسفات الصوديوم، ودرجة الحموضة 7.0، وتعرض للالترشيح الفائق عن طريق استخدام 10 كيلو دالتون Microne غشاء (ميليبور، بيدفورد، MA، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تجفيفها رشاحة مستدقة في جهاز للطرد المركزي السرعة فراغ، تشكيلها في 10   ميكرولتر من 20   م M الصوديوم العازلة الفوسفات، ودرجة الحموضة 7.0، والمحلاة على ZipTip C-18 الأعمدة (ميليبور). تم تطبيق خمس ميكرولتر من العينة على الشريحة SELDI استعداد، حضنت، وغسلها وتجفيفها (كما هو موضح أعلاه). واحد ميكروليتر المشبعة (25   ملغ   مل -1) وأضيف CHCA إلى البقع، سمح ليجف في الهواء، وتكررت هذه الخطوة مرة واحدة.
كان الصك MALDI TOF / TOF MS المستخدمة للتحقق سلسلة من الببتيدات وULTRAFLEX II TOF / TOF (بروكر DALTONICS محدودة، بريمن، ألمانيا) مجهزة ليزر SmartBeam. تم الحصول عليها كل الأطياف باستخدام وضع reflectron. للحصول على MS / MS الأطياف، بعد اضمحلال مصدر TOF / TOF التي تفارق الليزر التي يسببها تم تنفيذها. وكان الهدف من اختيار للنهج MALDI هدفا SELDI-TOF (BioRad). تم عرض مستعدة البقع المصفوفة / عينة في ULTRAFLEX II وكانت سجلت MS الأطياف من كل بقعة عينة المعدة. وكانت معايرة استخدمت معايرة القريب الجار الخارجية. وكانت العينات المستخدمة لمعايرة خليط من الببتيدات التي تغطي مجموعة وكتلة 5/1   كيلو دالتون. من الجماهير الببتيد المكتسب (TOF MS)، وقد تم اختيار الببتيدات المرشح يدويا لتجارب لاحقة. تم المشروح الأطياف مع برامج معالجة البيانات، FlexAnalysis (بروكر DALTONICS محدودة، بريمن، ألمانيا)، وتفسير أخيرا من قبل البرامج بمساعدة دي نوفو تحليل تسلسل (BioTools، بروكر DALTONICS GmbH ل). تم تأكيد النتائج من MALDI TOF / TOF MS عن طريق التحليل باستخدام عالية الدقة نانو-LC-ESI FTICR MS.

تحليل البيانات والإحصاءات

وقد تم تحليل كثافة الذروة من أطياف الشامل SELDI TOF في ثلاث نسخ وحسبت متوسط ​​القيم. هذه وزعت تسجيل-عادة والتحليلات التالية كانت، بالتالي، تتم باستخدام القيم اللوغاريتمية. وقد تم تحليل الاختلافات مجموعة من القمم الفردية باستخدام الطالب ر -test، والجمع بين القمم، تم استخدام تحليل التمييز المجموعتين. 39 تحليل التمييز يعطي تركيبة خطية من ثلاث قمم (متغير مركب) أن يزيد من المسافة بين القيم المتوسطة من المجموعتين (ما يسمى مسافة العامة) التي يتم حسابها على النحو (ض A - Z B / √ التباين ض بين مجموعات، حيث Z A و z B هي القيم المتوسطة للمجموعتين A و B لمجموعة محددة من المعلمات (مؤشر ASD). ونظرا لعدم التيقن من أثر انحلال الدم، 40 تم إجراء التحليل باستخدام عينات غير الانحلالي تم احتساب مؤشر ASD (ن = 49) فقط، ولكن لجميع المواد الدراسية (الجدول 3). استقبال العاملة المنحنيات المميزة 41 ثم تم بناؤه لجميع المواد الدراسية 58 وبالنسبة لأولئك دون 49 انحلال الدم (الشكل 3). جميع المشاركين 58 التي تضم 30 طفلا السيطرة و28 طفلا في المجموعة ASD، تم تحديد 11 'القيم المتطرفة، 7 في السيطرة على المجموعة و 4 في المجموعة ASD. من العينات المشاركين 49 دون انحلال الدم (27 طفلا و 22 مراقبة الأطفال مجموعة ASD) الخمسة القيم المتطرفة "، وأربعة في السيطرة على المجموعة واحدة في المجموعة ASD، لوحظت. تم استخدام اختبار فيشر الدقيق لاختبار الفروق بين الجنس والفئات العمرية، وتم اختبار الفوارق العمرية أيضا مع مان ويتني U -test ( الجدول 1). لاستقبال تعمل تحليل سمات البرنامج الإحصائي MedCalc؛ واستخدام وأجريت جميع التحليلات الإحصائية الأخرى خارج باستخدام STATISTICA (الإصدار 8، Statsoft، تولسا، OK، الولايات المتحدة الأمريكية) (الإصدار 6.10، 2001 فرانك Schoonjans، Mariakerke، بلجيكا). واعتبر أن -value P أقل من 0.05 كبيرا.

أعلى الصفحة النتائج

أظهرت النتائج وجود فروق مجموعة كبيرة من شدة القمم الثلاث المختلفة مع كتلة لتوجيه الاتهام نسب (م / ض) 1864، 1978، و 2020 ± 1   دا ( الرقم 2. الجدول 2) في كل من وحيد المتغير (قمم الفرد، لا يظهر) وفي متعدد المتغيرات (قمم المركبة) التحليل ( الجدول 3. الشكل 3). قمم مع م / ض لعام 1864 و 2020 ± 1   تم upregulated دا وممثلة تمثيلا زائدا في الأطفال الذين يعانون من التوحد، في حين أن الببتيد من 1978 ± 1   وdownregulated دا في الأطفال الذين يعانون من التوحد بالمقارنة مع الأطفال الأصحاء. وقد تم اختيار الببتيدات بناء على قدراتهم تمييزا. بالإضافة إلى ذلك، كتلة وكثافة الببتيدات هو تحديد إمكانية تحديد وقت لاحق وتسلسل لهم MALDI-TOF / TOF MS وESI-FTICR MS. من الجماهير المكتسبة الببتيد (SELDI TOF MS البيانات)، والببتيدات مرشح، على سبيل المثال، أولئك الذين لديهم م / ض من 2020 ± 1، وقد تم اختيار ( الرقم 4 تم تحديد) والأحماض الأمينية تسلسل باستخدام جنبا إلى جنب MS (MALDI TOF / TOF MS) كما هو موضح في الجدول 2. وقد تأكدت هذه متواليات أيضا نانو-LC-ESI FTICR MS (لا يظهر). الببتيد الأول مع م / ض من 2020 ± 1   دا يتكون من 17 بقايا الأحماض الأمينية يتوافق مع الببتيد المعروفة باسم C3f (NCBI عدد الانضمام 1413205A) من C3 البروتين تكملة ( الشكل 1). الببتيد الثاني مع م / ض من 1864 ± 1   دا يتوافق مع الببتيد من 16 بقايا بنفس التسلسل كما C3f لكنه يفتقر الى أرجينين-C محطة وكما هو معروف C3f-desArg. الببتيد الثالث مع م / ض من 1978 ± 1   دا الذي يظهر في أعلى تركيز في مجموعة من الأطفال الأصحاء له نفس التسلسل كما C3f لكن يحمل بقايا أرجينين تعديل الموافق الأورنيثين، في محطة سي.
الرقم 2.

SELDI نموذجي TOF المستمدة من أطياف الشامل من البلازما من الأطفال المصابين ASD والأطفال السيطرة. وكانت العينات غير الحالة للدم من ثلاثة أطفال مصابين ASD (د 1، د 2، د-3) وثلاثة أطفال من التحكم (ج 1، ج 2، ج 3). إن كان تحليل اختبار أعمى مع هويات الأطفال غير معروف. بعد تحليل وكشف هويات الأطفال: د-1 (ذكر، العمر 5)، ج 1 (ذكر، العمر 5)، د-2 (ذكر، العمر 6)، ج 2 (ذكر، العمر 7)، د-3 (أنثى من العمر 4 سنوات) وج-3 (أنثى، العمر 5). مواقف الببتيدات الثلاثة، 1864 ± 1، 1978 ± 1، و 2020 ± 1   دا، والمشار إليها.

الرقم الكامل وأسطورة (109 K)

الرقم 3.

استقبال تعمل منحنيات مميزة لجميع المواد الدراسية 58 وبالنسبة لأولئك 49 تصحيح لانحلال الدم. A مركب من البيانات لالببتيدات 1864 ± 1، 1978 ± 1 و 2020 ± 1 في مجموعة من 58 مشاركا (خط تحاك) وفي مجموعة من 49 مشاركا غير الانحلالي (خط الصلبة). لمجموعة من المشاركين غير الانحلالي، حساسية وخصوصية هي 95.5 و 85.2 على التوالي. قيمة المعيار هو> 4.2068. الاختلافات بين المنحنيات، 0،923-0،814 = 0.109، ليست ذات دلالة إحصائية (P = 0.141).

الرقم الكامل وأسطورة (48 K)

الرقم 4.

نموذجي MALDI TOF / TOF الطيف الكتلي لتحليل تسلسل. تجزئة C3f (2020.1   دا) لC3f دي أرجينين (1864.2   دا) مع تحديد كتلة monoisotopic من أرجينين من 174.8 (M + H +)، وأرجينين تعديل C3f (1978.1   دا).

الرقم الكامل وأسطورة (84 K)

الجدول 2 - الببتيدات التي أعرب تفاضلي في الأطفال الذين يعانون من التوحد مقارنة مع الأطفال السيطرة.

الجدول الكامل

الجدول 3 - النتائج من ROC تحليل منحنى تظهر قمم الفردية والمتغير المركب (معا) لجميع المواد الدراسية (أعلى) وتلك دون انحلال الدم عينة (القاع).

الجدول الكامل

أظهرت النتائج وجود فرق كبير بين متوسط ​​القيم لم / ض من هذه الشدة الببتيد من الأطفال الذين يعانون من التوحد والمجموعة الضابطة مع -values ​​P <0.05 من الببتيدات المحدد ( الجدول 2).

أعلى الصفحة نقاش

قبل البدء في هذه الدراسة، تم تقييم الجوانب المختلفة التي قد يكون لها تأثير على الأطياف الناتجة مثل جمع ومعالجة وتجهيز العينات، بما في ذلك اختيار مثبطات الأنزيم البروتيني، ودرجة الحرارة، وتجميد ودورات الذوبان. ونحن نعتقد أن الإجراءات الأمثل أثناء التعامل مع العينة تأمين أطياف استنساخه من نوعية جيدة. في جمع عينات مصل الدم، فإنه ليس من غير المألوف أن يكون أحداث انحلال الدم بسبب تمزق خلايا الدم الحمراء أثناء خطوات المعالجة. لاحظنا أن من بين المواد 58، 9 أظهرت انحلال الدم المعتدل وتعرضوا للفصل التقييم الإحصائي. تم تقييم انحلال الدم في العينات عن طريق الفحص من قمم الجماعية في 7.6 و 15.1   كيلو دالتون المقابلة ل-subunit α انقر نقرا مزدوجا اتهم واحد المشحونة من الهيموغلوبين، على التوالي. 40 لتفادي أي تشويش من مفارز الهيموغلوبين في التنميط البروتين من العينات المصل متعددة حيث قد تنافس مفارز للأو يغير من تقارب ملزم للبروتينات مصل أخرى إلى السطح 40 عينات مع القيم> تم استبعاد 80 (انظر الجدول 3 و الشكل 3). في المجموعة ASD كان بعض الأطفال المصابين بالتوحد الشديد على الدواء مع ريسبردال للحد من فرط النشاط والسلوك العنيف، وكان عدد قليل من الأطفال على الدواء مع ريتالين لتحسين الانتباه ( الجدول 1). وكان من المشكوك فيه أخلاقيا لوقف الدواء بغرض السيطرة على تصميم البحوث. على الرغم من أننا لم نرى أي علاقة بين اكتشاف الدواء ووجود الببتيد العلامات البيولوجية في عينات البلازما من الأطفال ASD أنه لا يمكن استبعاد أن بعض الاختلافات قد يتأثر الأدوية، كما نوقش سابقا. 35 وفي دراسة نشرت مؤخرا على تكملة النشاط عامل الأول، 42 لا يمكن أن نجد أي تأثيرات واضحة من الأدوية تستخدم أيضا من قبل عينة الدراسة. ستة فقط من الأطفال في الفئة ASD ليس لديه الدواء. من هؤلاء الخمسة تم تصنيفها بشكل صحيح في التحليل والتمييز و1 عينة مع انحلال الدم وتصنيفها بشكل غير صحيح. من المؤشرات الحيوية الثلاثة، 2020 ± 1، 1978 ± 1 و 1864 ± 1، حدد في هذه الدراسة التنميط البروتين من الأطفال الذين يعانون من التوحد ومراقبة الأطفال و1978 كيلو دالتون الببتيد التي تحتوي على الأورنيثين التي حددها جنبا إلى جنب MS المثير للاهتمام كما هو الإيحاء بأن يتم الاعتراف أرجينين من الببتيد 2020 كيلو دالتون كهدف لتحويل الأنزيمية. كما يتطلب أرجيناز على أرجينين مجانا لتحويلها إلى الأورنيثين 43 على إمكانية بديلة للاهتمام هو أن هذا-C محطة بقايا أرجينين هو ribosylated ADP-قبل ADP-ribosyltransferase أرجينين محددة (ART) تحفيز نقل ADP-الريبوز من NAD + (المرجع. 44) مع إمكانية تعديل "الثانوية" للأرجينين ADP ribosylated، ما يؤدي إلى استبدال ADP-ribosylarginine التي كتبها الأورنيثين كما هو مبين على الشرطة الوطنية الهايتية-1. 45 قد سبق المترابطة نقص ART التعبير، وهذا هو ART2، مع تعزيز القابلية للأمراض المناعة الذاتية (انظر لينج وآخرون. 44 والمراجع فيه). تم الإبلاغ عن تغيير وظيفة المناعة ونقص تكمل نظام للأطفال الذين يعانون من التوحد مما يدل على حدوث المتكرر للأمراض المناعية. 46، 47، 48، 49، 50 التحقيقات الأخرى قد أظهرت زيادة كبيرة مستويات علامات للالتهابات مثل α TNF-، IL-6، IL-8، كما تم اقتراح GM-CSF وIFN- γ في ما بعد الوفاة أنسجة المخ من الأفراد يعانون من مرض التوحد والخلل المناعي كما آلية محتملة لإمراض ASD. 21، 51، 52
من النهج البروتين المستخدم في هذه الدراسة حددنا أعرب تفاضلي الببتيدات التي تتوافق مع أجزاء من البروتين مكمل C3. على الرغم من واستند الدراسة على مجموعة محدودة نسبيا من الأطفال فإنه يدل على إمكانات النهج البروتين الذي تم فيه تعزيز أهمية وفائدة التشخيص المحتملة للوحة المؤشرات الحيوية مزيدا من الجمعيات المعروفة بين البروتين أو الببتيد والتسبب في ASD. عن طريق استخدام نهج البروتين اكتشفنا مجموعة فريدة من المؤشرات الحيوية، والذي يحمل على احتمالية الكشف المبكر عن ASD مع دقة التشخيص المحسنة التي من شأنها أن تمكن التدخل المبكر في تطوير هذا الاضطراب.

أعلى الصفحة تضارب المصالح

وأيد الدكتوراه studentship ناغي مؤمني عن طريق التوحد Biodiagnostics السويد AB (ABSAB). كان ABSAB أي دور في تصميم الدراسة، جمع أو تحليل البيانات. الدكتور مؤمني لا يوجد لديه الودائع المالية في تلك الشركة، على الرغم من أنه قد تظهر بعض التعويضات مزيد من كان عمله يؤدي إلى منتج تجاري. جميع المؤلفين أخرى تعلن أي تضارب في المصالح.

أعلى الصفحة المراجع

• Veenstra-Vanderweele J، كريستيان SL، كوك الابن EH. التوحد اضطراب وراثي معقد نموذجي أنو القس الجينوم هوم جينيه 2004؛ 5: 379-405. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
• Ozonoff S، Goodlin BL، سليمان M. دراسة مستقبلية لظهور علامات سلوكية في وقت مبكر من مرض التوحد J آم أكاد الطفل Adolesc الطب النفسي عام 2010؛ 49: 256-266. | مجلات |
• أمريكا للطب النفسي جمعية. الدليل التشخيصي والإحصائي للاضطرابات العقلية (DSM-IV)، EDN 4TH. جمعية الأمريكية للطب النفسي: واشنطن، DC، 2000.
• لندن EA. البيئة باعتبارها عاملا خاص بأسباب الأمراض في التوحد: اتجاه جديد للبحث البيئى الصحة Perspec 2000؛ 108: 401-404.
• تشاكرابارتي S، Fombonne E. اضطرابات النمو المتفشي في الأطفال قبل سن المدرسة: تأكيد ارتفاع معدل انتشار آم J الطب النفسي 2005؛ 162: 1133-1141. | المادة | مجلات | ISI |
• انتشار اضطرابات طيف التوحد، التوحد والإعاقة التنموية شبكة رصد، مواقع ستة، الولايات المتحدة الأمريكية، 2000. مراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها MMWR MORB مورتال Wkly التشيك 2007؛ 56 (SS01): 1-11.
• بينتو D. تأثير وظيفي من التباين العالمي في عدد النسخ النادرة في اضطرابات طيف التوحد الطبيعة 2010؛ 466: 368-372. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
• كمبر TL، بومان MK. أمراض الأعصاب التوحد الطفولي مول الطب النفسي 2002؛ 7: 2-12. | المادة |
• نيلسون KB، Grether JK، Croen LA، Dambrosia JM، ديكنز BF آخرون. نيوروببتيد وneurotrophins في الدم الأطفال حديثي الولادة من الأطفال الذين يعانون من التوحد أو التخلف العقلي آن Neurol 2001؛ 49: 597-606. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
• ووترهاوس L، Modahl C، آلية فين D. Neurofunctional في التوحد Psycol القس 1996؛ 103: 457-489.
• كوك EH، يفينثال BL. نظام السيروتونين في التوحد داء أب Pediat 1996؛ 8: 348-354.
• سينغ VK، EA سينغ، وارن RP. Hyperserotoninemia والأجسام المضادة لمستقبلات السيروتونين في الأطفال المصابين بالتوحد ولكن ليس التخلف العقلي بيول الطب النفسي عام 1997؛ 41: 753-755.
• Tordjman S، أندرسون GM، ماكبرايد PA، Hertzig ME، سنو ME، قاعة LM وآخرون. البلازما بيتا إندورفين، هرمون الكظر، والكورتيزول في التوحد J الطفل Psychol الطب النفسي عام 1997؛ 38: 705-715. | مجلات |
• Melke J، Goubran بطرس H، عفيف P، C بيتانكور، نيغرن G، H Anckarsäter وآخرون. تركيب الميلاتونين غير طبيعي في اضطرابات طيف التوحد مول الطب النفسي عام 2008؛ 13: 90-98. | المادة | مجلات | CAS |
• شيفو R، Cioni M، نيكولوسي A، Batticane N، تيرولو C، N تيستا وآخرون. التفاعلات المناعية الأفيونية في التوحد: التقييم السلوكي والمناعية خلال العلاج مزدوجة التعمية مع nattrexone آن الخاصة العراقية سوبر سانيتا 1996؛ 32: 351-359. | مجلات |
• Pasca SP، النمس B، Vlase L، Gagyi CE، Dronca E، مياو AC آخرون. مستويات عالية من الحمض الاميني وانخفاض المصل النشاط paraoxanase-1-arylesterase في الأطفال الذين يعانون من التوحد علوم الحياة 2006؛ 78: 2244-2248. | المادة | مجلات | CAS |
• Krey JF، [دولمتسكه RE. الآليات الجزيئية للتوحد: دور محتمل ل Ca + 2 الإشارات داء أب Neurobiol 2007؛ 17: 112-119.
• GLASSON EJ، باور C، B بيترسون، دي كليرك N، تشاني G، Hallmayer JF. العوامل فترة ما حول الولادة، وتطوير التوحد: دراسة السكان قوس الجنرال الطب النفسي عام 2004؛ 61: 618-627. | المادة | مجلات | ISI |
• مؤمني N، نوردستروم BM، هورستمان V، Averseji H، Sivberg BV. التعديلات من prolyl النشاط ببتيداز داخلية في البلازما من الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد BMC للطب النفسي 2005؛ 5: 1-6.
• Modahl C، أخضر L، D فين، موريس M، L وترهاوس، فينشتاين C وآخرون. مستويات الأوكسيتوسين البلازما في الأطفال المصابين بالتوحد بيول الطب النفسي عام 1998؛ 15: 270-277.
• لي X، تشوهان A، الشيخ AM، باتيل S، تشوهان V لى XM آخرون. استجابة مرتفعة المناعة في المخ لمرضى التوحد J Neuroimmunol 2009؛ 207: 111-116. | المادة | مجلات | ISI |
• Delgiudice-آش G، Holander E. وظيفة غيرت المناعية في مرض التوحد CNS SPECTR 1997؛ 2: 61-68.
• وارن RP، Margaretten NC، بيس NC، تشوهات فوستر A. المناعي في المرضى الذين يعانون من مرض التوحد J التوحد ديف Disord 1986؛ 16: 189-197.
• وارن RP، Yonk LJ، برغر RA، كول P، أوديل دينار، وارن WL آخرون. نقص القامع-محفز الخلايا (CD4 + CD45RA +) T في التوحد IMMUNOL استثمر 1990؛ 19: 245-251. | مجلات | ISI | CAS |
• دي بروين MH، طفولي GH. البشري C3 عنصر مكمل. . [كدنا] تسلسل الترميز والهيكل الأساسي المستمدة بروك Natl أكاد العلوم USA 1985؛ 82: 708-712. | المادة | مجلات | CAS |
• غولدبرغر G، برونز GA، ريس M، حافة MD، Kwiatkowski DJ. عامل مكمل البشري الأول: تحليل الهيكل الأساسي المستمدة كدنا] وتعيين جين لكروموسوم 4. J بيول كيم 1987؛ 262: 10065-10071. | مجلات | ISI | CAS |
• سواميس CJ، سيم RB. التفاعلات بين مكونات تكملة الإنسان معامل H، I عامل وC3b الكيميائية الحيوية J 1997؛ 1: 553-561.
• Ganu VS، مولر ايبرهارد HJ، Hugli TE. عامل C3f هو جزء تشنجي المنشأ صدر من C3b بعوامل الأول وH: تم تصنيعه في heptadeca الببتيد C3f وتتميز مول IMMUNOL 1989؛ 26: 939-948.
• يانسن BJ، هويزينجا EG، Raaimakers HC، روس A، الدح MR، نيلسون-Ekdahl K وآخرون. هياكل تكملة المكون C3 توفر نظرة ثاقبة وظيفة وتطور مناعة الطبيعة 2005؛ 437: 505-511. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
• Petricoin EF، أورنستين DK، يوتا LA. البروتينات السريرية: تطبيقات لسرطان البروستاتا اكتشاف العلامات البيولوجية وكشف Urol Oncol 2004؛ 22: 322-328. | مجلات | CAS |
• هوانغ JT، Leweke FM، أوكسلي D، L انغ، هاريس N، Koethe D وآخرون. المؤشرات الحيوية المرض في السائل النخاعي من المرضى الذين يعانون من الذهان الأولى يصيب بلوس ميد 2006؛ 3: 2145-2158.
• سيمونسن ه، ماجواير J، Podust VN، ديفيس H، L Minthon، سكوغ أنا وآخرون. التعرف على لوحة جديدة من المؤشرات الحيوية السائل النخاعي لمرض الزهايمر Neurobiol الشيخوخة 2008؛ 29: 961-968.
• شوارتز E، زائر PC، Rahmoune H، L انغ، ليفين Y، Ingudomnukul E آخرون. أنماط الجنس محددة العلامات البيولوجية في الدم عند البالغين الذين يعانون من متلازمة اسبرجر مول الطب النفسي عام 2011؛ ​​16: 1213-1220. | المادة |
• جنيد MA، كوال D، باروا M، Pullarkat PS، Sklower بروكس S، Pullarkat RK. حددت الدراسات البروتين تعدد الأشكال النوكليوتيدات واحد في غليوكسالاز أنا كعامل التوحد الحساسية صباحا J ميد جينيه A 2004؛ 131: 11-17. | المادة | مجلات |
• كوربيت BA، كانتور AB، شولمان H، ووكر WL، اضاءت L، أشووود P آخرون. دراسة البروتين مصل من الأطفال الذين يعانون من التوحد تظهر التعبير التفاضلية من apolipoproteins وتكمل البروتينات مول الطب النفسي عام 2007؛ 12: 292-306. | المادة |
• الرب C، روتر M، Dilavore P، الريسي S. تشخيص التوحد جدول مراقبة (ADOS). الخدمات النفسية الغربية: لوس أنجلوس، CA، 1999.
• روتر M، LeCouteur AL يا رب C. تشخيص التوحد مقابلة - المنقحة. الخدمات النفسية الغربية: لوس أنجلوس، CA، 2003.
• جونسون CP، مايرز SM، المجلس على الأطفال ذوي الإعاقة. سياسة الحظر - تحديد وتقييم الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد صباحا أكاد Pediatr 2007؛ 120: 1183-1215.
• موريسون DF. الأساليب الإحصائية المتغيرات المتعددة، EDN 3RD. ماكجرو هيل: نيويورك، NY، 1990.
• دريك RR، كازاريس LH، كورسيكا A، مالك A، Schwegler EE آخرون. مراقبة الجودة، وإعداد القضايا والاستقرار البروتين لمصل الدم والبلازما المستخدمة في اكتشاف العلامات البيولوجية وفحوصات التنميط البروتين العمليات الحيوية J 2004؛ 3: 45-50.
• هانلي JA، ماك نيل BJ. معنى واستخدام منطقة تحت جهاز استقبال تعمل خاصية (ROC) منحنى الأشعة 1982؛ 143: 29-36. | مجلات | ISI | CAS |
• مؤمني N، Brudin L، Behnia F، نوردستروم B، Yosefi-Oudarji A، B Sivberg وآخرون. ارتفاع تكملة النشاط عاملا أنا في البلازما من الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد التوحد العلاج الدقة 2012؛ دوى: 10.1155 / 2012/868576. | المادة |
• جينكينسون CP، Grody WW، Cederbaum SD. الخصائص النسبية للarginases شركات الكيميائية الحيوية الفيزيولوجيا B الكيميائية الحيوية مول بيول 1996؛ 114: 107-132. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
• لينج S، M أنجر، كوخ نولتي F، هاج F. ADP-ribosylation من أرجينين الأحماض الأمينية 2011؛ ​​41: 257-269. | المادة | مجلات | CAS |
• ستيفنز LA، ليفين RL، Gochuico BR، موس J. ADP-ribosylation من defensin البشري الشرطة الوطنية الهايتية-1 النتائج في استبدال أرجينين تعديل مع noncoded الأورنيثين الأحماض الأمينية. بروك Natl أكاد العلوم الولايات المتحدة الأمريكية عام 2009؛ 106: 19796-19800.
• مورغان BP، Walport MJ. نقص تكمل والمرض. IMMUNOL اليوم 1991؛ 12: 301-316. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
• وارن RP، فوستر A، Margaretten NC. انخفاض النشاط القاتل الطبيعي الخلية في مرض التوحد. J آم أكاد الطفل Adolesc الطب النفسي 1987؛ 26: 333-335. | مجلات | ISI | CAS |
• Careaga M، فان دي المياه J، ضعف أشووود P. المناعي في التوحد: طريقا للعلاج. Neurotherapeutics 2010؛ 7: 283-292. | المادة | مجلات | ISI |
• زيمرمان AW. التعليق: العلاجات المناعية لمرض التوحد: في أسباب البحث عن نهج واعدة. J التوحد ديف Disord 2000؛ 30: 481-484.

 

[رافت ابراهيم]

 

http://www.mdpi.com/1660-4601/10/11/6027/htm

ملخص

: تعتبر الآن التفاعلات بين الجينات والبيئة التفسير الأكثر احتمالا لمرض التوحد. في هذا الاستعراض، ونحن تلخيص نتائج دراسة metallomics فحص فيه تركيزات شعر فروة الرأس من 26 من العناصر النزرة عن الأطفال المصابين بالتوحد 1967 (1553 ذكور و 414 إناث تتراوح أعمارهم بين 0-15 سنة من العمر)، ومناقشة التطورات الحديثة في فهمنا لل الأدوار جينية من الاختلالات المعدنية الطفلي في التسبب في مرض التوحد. في المواد 1967، 584 (29.7٪) و 347 (17.6٪) تم العثور على نقص في الزنك والمغنيسيوم، على التوالي، وقدرت نسبة الإصابة نقص الزنك في 43.5٪ في الذكور و 52.5٪ في موضوعات الرضع الإناث الذين تتراوح أعمارهم بين 0- 3 سنوات من العمر. في المقابل، تم العثور على 339 (17.2٪) و 168 (8.5٪) و 94 (4.8٪) من الأفراد يعانون من أعباء عالية من الألومنيوم والكادميوم والرصاص، على التوالي، و 2.8٪ أو أقل من الزئبق والزرنيخ. وعلى نحو أكثر تواترا لوحظ ارتفاع أعباء المعادن السامة في الأطفال الذين تتراوح أعمارهم بين 0-3 سنوات من العمر، والتي كانت 20.6٪، 12.1٪، 7.5٪، 3.2٪ و 2.3٪ على الألمنيوم والكادميوم والرصاص والزرنيخ والزئبق، على التوالي معدلات الإصابة. وتشير هذه النتائج إلى أن zinc- الطفلي ونقص المغنيسيوم و / أو أعباء المعادن السامة قد تكون حاسمة وحمل تعديلات جينية في الجينات وآليات التنظيم الوراثية من النمو العصبي في الأطفال الذين يعانون من التوحد، وتبين أن عامل الوقت "نافذة الطفولي" هو أيضا حرجة لنمو الجهاز العصبي، وربما للعلاج. وهكذا، تحليل metallomics في وقت مبكر قد يؤدي إلى أوائل فحص / تقدير والعلاج / الوقاية من اضطرابات النمو العصبي للمصاب بالتوحد.

الكلمات الدالة:

اضطرابات طيف التوحد. مسببات اضطرابات النمو العصبي. نقص الزنك عند الأطفال. أعباء المعادن السامة؛ لمحات metallomics. تعديلات جينية. نافذة الطفلي

1 المقدمة

أي إس دي إس هي مجموعة من اضطرابات التطور العصبي تتميز ضعف في التفاعل الاجتماعي والتواصل، وبسبب وجود السلوكيات المحظورة والمتكررة [1، 2]. توضيح المرضية والعلاج الفعال لاضطرابات طيف التوحد (أي إس دي إس) هي واحدة من التحديات اليوم. تواصل إس دي إس لزيادة في انتشار تصل إلى 1 في 88 أطفال [1، 2، 3] والمعروف أن الوراثية إلى حد كبير (~ 90٪)، وبعض الجينات المرتبطة تم الإبلاغ عن [4، 5، 6، 7، 8] . ومع ذلك، فإن المحددات الوراثية الكامنة ما زالت لم توضح [1، 9]، وتفاعل العوامل الوراثية مع نمط الحياة غير مصدق والعوامل البيئية يبدو تلعب دورا هاما في التسبب. على سبيل المثال، قد ادعى الزئبق عضوي واحد من المرشحين البيئي يسبب اضطرابات التوحد [10، 11، 12]، ولكن لا تزال علاقته سيتم إنشاؤها. في الآونة الأخيرة، ويعتبر التعديل الجيني في التعبير الجيني عن عوامل بيئية واحدة من الأحداث الرئيسية في التسبب في الأمراض الوراثية [13، 14]، وبعض العناصر السامة مثل الكادميوم والزرنيخ وقد تم الإبلاغ عن أن تكون العوامل مرشح التي تحفز على تعديلات جينية [15 ، 16، 17، 18، 19] والاضطرابات العصبية النمائية [20].
وقد مكنت التطورات الكبيرة التي حدثت مؤخرا في العناصر النزرة طريقة رفيع حساس ويمكن الاعتماد عليها التحليل باستخدام إضافة بالحث مطياف الكتلة البلازما (ICP-MS) ليتم تطبيقها للأبحاث الطب الشرعي وتقدير العبء المعادن السامة المزمن ونقص المعادن في الجسم البشري [21، 22]. وهكذا، فقد حاول التطبيق السريري لطرق تحليل الشعر المعدنية يمكن الاعتماد عليها على أساس ICP-MS للتحقيق في ارتباط بعض الأمراض / الأعراض مع تتبع حركية العنصر الحيوي بما في ذلك المعادن السامة والمعادن الأساسية [23، 24، 25، 26، 27 ، 28].
على مدى السنوات السبع الماضية، ونحن قمنا بفحص جمعية أعباء المعادن السامة يعانون من اضطرابات التوحد، وذكرت أن بعض الأطفال المصابين بالتوحد يعانون من تراكم عالية من المعادن السامة مثل الكادميوم والرصاص أو الألمنيوم [29، 30، 31]، ومما يدل مؤخرا بالتعاون مع الزنك نقص الطفولي [32، 33].
في هذه المقالة نظرة عامة في التي تم فحصها تركيزات شعر فروة الرأس الإنسان من 26 العناصر النزرة عن 1967 طفل يعانون من اضطرابات التوحد الذين تتراوح أعمارهم بين 0-15 سنوات، علينا أن نظهر أن العديد من المرضى، وخاصة في الأطفال الرضع الذين تتراوح أعمارهم بين 0-3 سنوات من العمر، هي الذين يعانون من الهامشية إلى zinc- شديد ونقص المغنيسيوم و / أو أعباء عالية من العديد من المعادن السامة مثل الألومنيوم والكادميوم والرصاص، مما يدل على وجود فترة حرجة "نافذة الطفولي" في النمو العصبي وربما للعلاج.

2. اضطرابات المعدنية في التوحد

2.1. الطفلي نقص الزنك

كان الرسم البياني الشعر تركيزات الزنك لوغاريتمي ل1967 طفل مصاب بالتوحد تشخيصها من قبل أطبائهم غير متماثل مع المخلفات في أقل المدى، و584 في 1967 المواضيع (29.7٪) وجدت لديهم تركيز الزنك أقل من 2 SD (الانحراف المعياري) مستوى نطاق المرجعية (86،3 حتي 193 جزء في المليون؛ الهندسي متوسط ​​= 129 جزء في المليون)، كما تقدر نقص الزنك. وقدرت معدلات الإصابة نقص الزنك في الفئات العمرية من 0-3، 4-9 و10-15 سنة من العمر 43.5٪، 28.1٪ و 3.3٪ في الذكور و 52.5٪، 28.7٪ و 3.5٪ بين الإناث، و لوحظ وجود ارتباط كبير من تركيز الزنك مع التقدم في العمر (ص = 0.367، P <0.0001) (الشكل 1)، مما يشير إلى أن الأطفال الرضع أكثر عرضة لنقص الزنك من الأطفال الأكبر. تم الكشف عن تركيز الزنك الحد الأدنى من 10.7 جزء في المليون في صبي يبلغ من العمر 2، ما يعادل حوالي 1/12 من المستوى المرجعي نفسه. وكان تركيز الزنك في حالة واحدة القديمة 0 عاما فقط (11 شهرا من العمر) 173 جزء في المليون في المعدل الطبيعي ويبدو أن هناك حالة اشتباه، لأنها كانت تعاني من أعباء عالية من الألومنيوم (52.5 جزء في المليون) والرصاص (9.1 جزء في المليون)، الحديد (12.8 جزء في المليون) والنحاس (134 جزء في المليون). وقد تميزت هناك القليل الفرق بين الجنسين في تركيز الزنك الشعر ومعدل الإصابة من نقص الزنك.

الشكل 1. علاقة تركيز الزنك لوغاريتمي مع التقدم في السن لدى الأطفال المصابين بالتوحد [33].

انقر هنا لتكبير الرقم

2.2. المغنيسيوم الطفولي / الكالسيوم نقص

وبعد أن نقص الزنك، لوحظ نقص المغنيسيوم والكالسيوم في 347 (17.6٪) و 114 (5.8٪) من الأفراد في الأطفال الذين يعانون من التوحد، والمعادن الأساسية الأخرى مثل الحديد والكروم والمنجنيز والنحاس والكوبالت، ومعدلات الإصابة بها نقص كانت 2.0٪ أو أقل (الجدول 1). وكانت معدلات حدوث نقص المغنيسيوم في الفئات العمرية من 0-3، 4-9 و10-15 سنة من العمر 27.0٪، 17.1٪ و 4.2٪ في الذكور و 22.9٪، 12.7٪ و 4.3٪ في مواضيع الإناث، و لوحظ وجود ارتباط كبير من تركيز المغنيسيوم مع التقدم في العمر (ص = 0.362، P <0.0001)، مما يوحي بأن الاطفال هم أيضا عرضة لنقص المغنيسيوم من الأطفال الأكبر. تم الكشف عن تركيز المغنيسيوم الحد الأدنى من 3.88 جزء في المليون في فتاة تبلغ من العمر 2، الموافق تقريبا 1/10 من المستوى المرجعي المتوسط ​​(39.5 جزء في المليون). وقد لوحظ كبير معدل نقص الكالسيوم فقط في أقل الفئات العمرية أقل من 10 سنة من العمر.
الجدول 1. انتشار نقص المعادن في الأطفال المصابين بالتوحد [33].

انقر هنا لعرض الجدول

2.3. أعباء المعادن السامة

وعلى النقيض من المعادن الأساسية، لوحظ ارتفاع أعباء الجسم من بعض المعادن السامة مثل الألومنيوم والكادميوم والرصاص من فوق مستويات +2 SD في 339 (17.2٪)، 168 (8.5٪) و 94 (4.8٪) فردا، على التوالي وكانت معدلات الإصابة بها من عبء ارتفاع أعلى من الزئبق والزرنيخ (2.8٪ و 2.6٪) (الجدول 2).
الجدول 2. انتشار عبء ارتفاع المعادن السامة والحد الأقصى في الأطفال المصابين بالتوحد [33].

انقر هنا لعرض الجدول

وعلى نحو أكثر تواترا لوحظ ارتفاع أعباء المعادن السامة في الأطفال الذين تتراوح أعمارهم بين 0-3 سنوات من العمر: وهذا هو، كان معدل الإصابة 20.6٪، 12.1٪، 7.5٪، 3.2٪ و 2.3٪ على الألمنيوم والكادميوم والرصاص والزرنيخ والزئبق . وكان تركيز القصوى الكشف من الألومنيوم، والكادميوم والرصاص والزئبق والزرنيخ 79.4 جزء في المليون، 5.47 جزء في المليون، 24.9 جزء في المليون، 36.3 جزء في المليون و 1.7 جزء في المليون، على التوالي، الموافق 21-، 782-، 57-، 9- و 33 أضعاف من كل يعني المستوى المرجعي.
وثمة علاقة عكسية ذات دلالة معنوية عالية بين الزنك وتركيزات الرصاص (ص = -0.339، P <0.0001؛ الشكل 2)، وأيضا الألومنيوم (ص = -0.247) والكادميوم (ص = -0.198) تركيزات، وقد لوحظ، مما يوحي بأن هذه سامة أعباء المعادن اقترانه نقص الزنك عند الأطفال.

الشكل 2. العلاقة العكسية من الزنك وتركيز الرصاص في الأطفال الذين يعانون من التوحد.

انقر هنا لتكبير الرقم

2.4. لمحات Metallomics في التوحد الرضع

هناك بعض الأنواع الفرعية لوحظ في metallomics لمحات مميزة في الأطفال الذين يعانون من التوحد. الشكل 3 يبين لمحة التوحد تمثيلي في صبي يبلغ من العمر 1-الذين يعانون من zinc- شديد ونقص المغنيسيوم والأعباء العالية في وقت واحد من الكادميوم والرصاص. وتظهر metallomics الأخرى ملامح التوحد مع أعباء عالية من الألومنيوم والزئبق أو الزرنيخ في الشكل (4)، الشكل (5) والشكل (6). الشكل 7 يبين ملف تعريف فريد مع ارتفاع الصوديوم والبوتاسيوم بتركيزات، لمحة مميزة للكشف في عينات الشعر. يبقى أن أوضح أي نوع من metallomcs ملامح يتوافق مع أي نوع من اضطرابات طيف التوحد.

الشكل 3. Metallomics الملف الشخصى الأطفال المصابين بالتوحد مع الكادميوم عالية وأعباء الرصاص [33].

انقر هنا لتكبير الرقم

الرقم الشخصي 4. Metallomics من الأطفال المصابين بالتوحد مع عبء الألمنيوم عالية.

انقر هنا لتكبير الرقم

الرقم الشخصي 5. Metallomics من الأطفال المصابين بالتوحد مع عبء عالية من الزئبق.

انقر هنا لتكبير الرقم

الرقم 6. Metallomics الملف الشخصى الأطفال المصابين بالتوحد مع عبء مرتفعة من الزرنيخ.

انقر هنا لتكبير الرقم

الرقم 7. Metallome الملف الشخصى الأطفال المصابين بالتوحد لديهم مستويات الصوديوم والبوتاسيوم عالية.

انقر هنا لتكبير الرقم

2.5. الطفلي الوقت النافذة في النمو العصبي والعلاج

والعمر عند التشخيص النهائي لاضطرابات طيف التوحد تتراوح من 3 إلى 6 سنوات، على الرغم من أن معظم حالات التوحد يتم تشخيصها في سن ثلاثة وفي وقت مبكر من 14 شهرا [34]. في الوقائع، تم الكشف عن نقص الزنك في العديد من المرضى الطفولي في أول 3 سنوات من الحياة (الشكل 1)، وتم الكشف عن أعباء ارتفاع المعادن السامة أيضا في المواضيع التوحد، وخاصة في الأطفال الأصغر سنا (الجدول 2). وهكذا، لتلقي العلاج / الوقاية من اضطرابات طيف التوحد، وفحص المبكر وتقدير ضروري وغير مرغوب فيه للتحقق في وقت مبكر أي اضطرابات التمثيل الغذائي و / أو المعدنية للرضع والأطفال الذين يعانون من أعراض التوحد، رغم أن هناك قيودا خطيرة للتشخيص الأطفال الأصغر سنا. وينبغي النظر في أن التسبب في اضطرابات النمو العصبي قد يبدأ في مرحلة ما قبل الولادة ويكون التدريجي ضمن إطار الوقت لتشخيص المرض.

2.6. الجينات ذات الصلة التوحد واضطرابات جينية التعديلات التي كتبها المعدنية

الزنك هو عنصر هيكلي من البروتينات الزنك الاصبع ومنظم النسخي، وتؤثر بعض الجينات المرشحة ذكرت أن تترافق مع تطور مرض التوحد، مثل MTF1 (المعادن استجابة عامل النسخ 1)، metallothionein، ZnT5 (نقل الزنك 5) ، COMMD1 (COMM التي تحتوي على نطاق البروتين 1)، ERK1 (خارج الخلية التنظيم إشارة كيناز 1)، TrkB (المتعلقة التيروزين كيناز B)، وProSAP / شانك (البرولين الغنية بالبروتين / SH ومتعددة ankyrin تكرار المجالات المرتبطة المشبك) التي تشارك أنفسهم في إشارة الزنك والتوازن [35، 36، 37، 38، 39، 40]. وهكذا، نقص الزنك لوحظ في المواد التوحد (الشكل 1) قد يدفع تعديلات جينية أساسية لتوفير آلية مركزية من الجينات التفاعل / البيئة للتدخل مع نضوج الخلايا العصبية خلال النمو المبكر [32، 38، 39].
وبالإضافة إلى ذلك، وارتفاع أعباء المعادن السامة في الكشف عن المرضى الذين يعانون من التوحد (الجدول 2) قد تسهم في آلية تفاعل الجينات / البيئة، لأنه قد تم الإبلاغ عن الكادميوم والزرنيخ أن تكون العوامل مرشح التي تحفز على تعديلات جينية [15، 16، 17، 18 ، 19] والاضطرابات العصبية النمائية [20].

3. مناقشة

في هذه الدراسة metallomics تركيزات شعر فروة الرأس الإنسان من 26 العناصر النزرة عن 1967 طفل يعانون من اضطرابات التوحد الذين تتراوح أعمارهم بين 0-15 سنوات، علينا أن نظهر أن العديد من المرضى، وخاصة في الأطفال الرضع الذين تتراوح أعمارهم بين 0-3 سنوات من العمر، تعاني من هامشية ل zinc- شديد ونقص المغنيسيوم و / أو أعباء عالية من العديد من المعادن السامة مثل الألومنيوم والكادميوم والرصاص.
ومن المسلم به جيدا الزنك كعنصر اساسي أثر الذي يلعب دورا هاما في تركيب الحامض النووي / البروتين، وتكرار الخلية، نمو الأنسجة وإصلاحها، لا سيما النساء الحوامل والرضع. في الواقع، تعمل أيونات الزنك كما كانت معروفة مراكز نشطة في أكثر من 300 نوع من الانزيمات، وحوالي 10٪ من إجمالي البروتينات ترميز الجين لديهم تسلسل الزنك إصبع [38، 39، 40، 41، 42]، التأكيد على أهمية فسيولوجية من هذه العناصر النزرة. في الدماغ، خصوصا في الحصين، الزنك مع الغلوتامات في الحويصلات قبل متشابك في محطة الخلايا العصبية مثير المخزنة المشترك، وإطلاق سراح من لهم ويتحكم في نشاط مستقبلات الغلوتامات مثير على الغشاء منفعل بعد متشابك [43، 44] . وهكذا، كما هو معروف يرتبط نقص الزنك مع مختلف الظروف ليس فقط المرضية، بما في ذلك خلل الذوق، وتأخر التئام الجروح، ضعف المناعة وتأخر في النمو، ولكن أيضا الأمراض العصبية واضطرابات النمو العصبي [45، 46، 47، 48، 49].
نحن ذكرت مؤخرا أن العديد من الأطفال الذين يعانون من اضطرابات التوحد يعانون من الهامشية إلى نقص حاد الزنك، مما يشير إلى علاقة طويلة من نقص الزنك عند الأطفال المصابين بالتوحد [32]. وعلاوة على ذلك، فقد قررنا تركيزات شعر فروة الرأس من 26 من العناصر النزرة عن 1967 شخصا مع اضطرابات طيف التوحد، وأظهر أن الأطفال الذين يعانون من التوحد الطفولي معرضون للنقص في المغنيسيوم والكالسيوم بجانب الزنك، ولكن ليس في المعادن الأساسية الأخرى (الجدول 1) [33 ]. هذه النتائج تشير الى ان الاطفال المصابين بالتوحد وربما الرضع عموما لديهم المسؤولية مميزة لzinc- ونقص المغنيسيوم، لأن هناك حاجة إلى كميات أكبر من المعادن الأساسية (لكل كجم من وزن الجسم) لتطوير والنمو.
هناك دراسات عديدة مع نفس الموضوع الإبلاغ عن حالة والمعدنية نقص التغذية عند الأطفال الذين يعانون من التوحد [50، 51، 52، 53، 54]. ومع ذلك، كانت نتائج دراستهم، التي تم فحصها سن المقيد (أكثر من 4 سنوات من العمر) للأطفال وعدد من المعادن، لا تتفق، وظلت العوامل البيئية الحرجة التي ستنشأ. في metallomics دراسة تحليلنا ل1967 الأطفال المصابين بالتوحد الذين تتراوح أعمارهم بين 0-15 سنة من العمر، وكنا قادرين على إثبات وليس فقط عاملا حاسما والبيئي جينية (zinc- ونقص المغنيسيوم وأعباء عالية من الألومنيوم، والكادميوم والرصاص وهلم جرا ) ولكن أيضا وجود عامل آخر بالغ الأهمية، "نافذة الطفولي" في النمو العصبي وربما للعلاج [32، 33].
في الآونة الأخيرة، غبريمدهين وآخرون. [55 ذكرت] أنه بالمقارنة مع النساء الحوامل الذين تتراوح أعمارهم بين 15-24 عاما، كان هؤلاء الذين تتراوح أعمارهم بين 25-34 و35-49 عاما 1.57 (95٪ CL: 1،04-2،34) و2.18 (95٪ CL: 1،25-3،63) مرات خطر أعلى نقص الزنك، على التوالي. ويرتبط دراستهم قد تثبت أن الحمل الشيخوخة سلبا على الوضع الزنك، وربما يشير إلى أن واحدا من أصل معدل ارتفاع حالات نقص الزنك عند الأطفال قد يكون الحمل سن أعلى من أمهاتهم. في الآونة الأخيرة، KURITA وآخرون. [56] ذكرت أن نقص الزنك في الرحم يدفع تعديلات جينية الجنين من التعديلات هيستون في metallothionein 2 منطقة المروج وجود عناصر الاستجابة المعادن في فئران عمرها 1 يوما و 5 أسابيع من العمر، والتي غذيت الأم الحامل اتباع نظام غذائي منخفض الزنك من الحمل يوم 8 وحتى الولادة.
ارنولد وآخرون. [57 ذكرت] كان ذلك يعني مستوى الزنك في الدم في الأطفال أقل من ذلك بكثير في نقص الانتباه / فرط النشاط اضطراب (ADHD) المجموعة، وهذا المستوى الزنك في مصل الدم يرتبط عكسيا مع غفلة الآباء والمعلمين ومصنفة لدى الأطفال ADHD. وعلاوة على ذلك، تم الإبلاغ عن علاج الزنك متفوقة بشكل كبير في الدواء الوهمي في الحد من أعراض فرط النشاط والاندفاع وضعاف التنشئة الاجتماعية في مرضى ADHD [58، 59]. أظهرت دراسة الإنسان أولية أخرى أن العديد من الأطفال الذين يعانون من ADHD يكون أقل تركيز الزنك مقارنة بالأطفال الأصحاء وملحق الزنك كعامل مساعد لميثيل له آثار إيجابية في علاج الأطفال ADHD، مشيرا إلى ارتباط محتمل من نقص الزنك وADHD الفيزيولوجيا المرضية [60 ].
Kozielec وآخرون. [61] وقد ذكرت أنه في 116 الطفل مفرط النشاط مع ADHD، وجد نقص المغنيسيوم في 95٪ من المبحوثين، في أغلب الأحيان في الشعر (77.6٪)، يليه في خلايا الدم الحمراء (58.6٪) ومصل الدم (33.6٪ ). وعلاوة على ذلك، فإنها ذكرت أن تعطى 6 أشهر من مكملات المغنيسيوم، وهو انخفاض كبير في النشاط المفرط وزيادة في محتويات المغنيسيوم الشعر تم تحقيقه [في مجموعة من الأطفال ADHD 62]. Mousain-BOSC وآخرون. [63] ذكرت أيضا أن 52 شديدة منفعل الأطفال لديهم مستويات منخفضة من المغنيسيوم داخل كرات الدم الحمراء مع القيم المغنيسيوم في الدم طبيعية، وأن المغنيسيوم / فيتامين B6 مكملات يمكن استعادة مستويات المغنيسيوم كرات الدم الحمراء إلى وضعها الطبيعي وتحسين تصرفاتهم غير طبيعية. كما ذكرت أن ثلاثة وثلاثين الأطفال الذين يعانون من الأعراض السريرية للاضطراب النمو المتفشي أو التوحد (PDD) المعرض أقل بكثير القيم المغنيسيوم خلايا الدم الحمراء، وأن الجمع بين العلاج مع المغنيسيوم / فيتامين B6 لمدة 6 أشهر تحسنت بشكل ملحوظ الأعراض PDD في 23/33 الأطفال (P <0.0001) مع ما يصاحب ذلك من زيادة في القيم المغنيسيوم داخل كرات الدم الحمراء [64].
في الآونة الأخيرة، اوشي وآخرون. [65] وجدت أن تركيز المغنيسيوم الشعر، ولكن ليس على مستوى مصل لها، كان معنويا (P <0.01) يرتبط عكسيا مع تضخم البطين الأيسر لدى مرضى غسيل الكلى، مما يشير إلى أن تركيز المغنيسيوم الشعر هو مفيد داخل الخلايا العلامات البيولوجية مستقلة عن مستوى مصل لها. في دراسة metallomics الأولية للمتطوعين أصحاء، لاحظنا وجود ارتباط كبير بين ارتفاع مستويات كلها في الدم ومستويات شعر فروة الرأس من العناصر النزرة، ولكن علاقة ضعيفة بين مستويات المصل ومستويات الدم الكامل (المراقبة غير منشورة). هذه النتائج تشير إلى أن كما عينة العلامات البيولوجية تمثل ديناميات المعدنية في الجسم البشري، والدم / كرات الدم الحمراء والشعر عينات كاملة تعلو على السوائل خارج الخلوية مثل المصل أو البلازما لتحليل metallomics، على الرغم من أنه من الضروري أن نعتبر أن هناك مشكلة التلوث بعض العناصر النزرة بسبب علاج الشعر الاصطناعية مثل دائمة والتلوين.
مؤخرا، تم الإبلاغ عن نقص الزنك الناجمة عن تقييد الغذائية ليصل تنظيم الأمعاء الزنك المستورد (ZIP4) وحمل الزيادة في البروتين ZIP4 تقع على غشاء البلازما من المعوية [66، 67]. ويعرف هذا الرد بالتبني لنقص الزنك أن تؤدي إلى زيادة في مخاطر ارتفاع الإقبال من المعادن السامة مثل الكادميوم والرصاص [68]. وهكذا، الاطفال الذين يعانون من نقص الزنك عرضة لخطر متزايد من امتصاص كمية عالية من المعادن السامة والاحتفاظ بها في أجسامهم، كما هو مبين في الشكل (4)، والذي يدل على وجود علاقة عكسية ذات دلالة معنوية عالية بين الزنك ومستوى الرصاص. وتشير هذه النتائج إلى أن زيادة المعادن السامة أعباء يصاحب ذلك مع نقص الزنك قد تسهم أيضا epigenetically إلى التسبب في هذا المرض.
نقص في المغنيسيوم / الكالسيوم يبدو أن تعزز الآثار السمية من الرصاص (رصاص) على التنمية المعرفية والسلوكية لدى الأطفال [69]. تم العثور على علاقة عكسية ذات دلالة إحصائية بين تركيزات الكالسيوم والرصاص في الدم الغذائية في 3000 الأطفال الأمريكيين فحص كجزء من NHANES الثاني [69]. تم العثور على مستويات الرصاص في الدم مرتفعة في بعض الأطفال المصابين بالتوحد وترتبط مع تطور ADHD [70، 71].
تم الإبلاغ عن حوالي 250،000 طفل في الولايات المتحدة لديهم ارتفاع الرصاص في الدم (الرصاص) مستويات فوق المستوى الحالي من القلق من 10 ميكروغرام / ديسيلتر [72]، على الرغم من يتقدم كبيرة على مدى نصف القرن الماضي في خفض معدلات التسمم بالرصاص الأطفال [73]. ولذلك، فإن المراكز الأمريكية لمكافحة الأمراض والوقاية منها (CDC) خفضت مستوى القلق من 10 ميكروغرام / ديسيلتر إلى 5 ميكروغرام / ديسيلتر [74]. ويستند هذا تغيير كبير في سياسة وطنية بشأن مجموعة كبيرة ومتزايدة من الأدلة التي تبين أن حتى مستويات في خانة الاحاد الدم الرصاص لها تأثيرات كبيرة على المخابرات القسمه، خطر لاضطراب نقص الانتباه فرط النشاط (ADHD)، وأمراض القلب والأوعية الدموية، وظيفة الكلى [75 ، 76، 77، 78، 79].
والتعرض للرصاص الأكثر شيوعا مسار للأطفال وابتلاع أو استنشاق غبار الطريق التي تحمل الرصاص، سواء في المنزل أو البيئة الخارجية [80، 81، 82]، والمصادر الأكثر شيوعا منه هي الوقود الأحفوري، الأسفلت والدهانات (كرومات الرصاص أو كربونات الرصاص) [82، 83، 84]. بالإضافة إلى ذلك، تم الإبلاغ عن تدخين السجائر الأمهات أن تترافق مع انخفاض الزنك والكادميوم وأعلى تركيزات الرصاص في الأطفال حديثي الولادة من [85، 86]. هذه المعادن السامة المتراكمة في أنسجة العظام الأمهات شارك في نقلها مع الكالسيوم لهيئات الجنين وحديثي الولادة من خلال تنشيط العظام ارتشاف أثناء الحمل والرضاعة [85، 86، 87، 88]. في الواقع، أظهرت دراسة أتراب الولادة الأخيرة للالمواليد الجديدة في نيبال أن النتيجة كتلة المحرك وارتبط عكسيا مع مستويات دم الحبل السري من الرصاص والزرنيخ، مما يوحي بأن التعرض عالية للرصاص وكما حدث أثناء فترة ما قبل الولادة يمكن أن تسبب التخلف خلال في -utero النمو العصبي [89].
على الزئبق والزرنيخ، ومستويات العبء القصوى من 9.3- و 33.5 أضعاف من المستوى المرجعي (الجدول 2) ويمكن أيضا epigenetically تلعب دورا المسببة للأمراض في الأفراد المصابين بالتوحد منها، على الرغم من أن معدلات الإصابة بها كانت 2.8٪ أو أقل. يبقى أن ثبت أن هذه الاضطرابات المعدنية تحفز العجز جينية في الجينات المرشحة المرتبطة بالتوحد. في المستقبل القريب، ونحن نأمل أن أوضح أنه نوع من metallomics الشخصية ويرتبط مع ما اضطراب في السلوك مختلف / العجز العصبية في اضطرابات طيف التوحد.
وتبين أن العديد من الأطفال المصابين بالتوحد يعانون من الهامشية إلى zinc- شديد ونقص المغنيسيوم و / أو أعباء المعادن السامة عالية من الألومنيوم والكادميوم والرصاص وهلم جرا. وتشير هذه النتائج إلى أن المرضى الذين يعانون من التوحد الطفولي الذين يعانون من اضطرابات المعدنية قد يستجيب للنهج القائم على الأدلة رواية الغذائي الذي يكمل العناصر الغذائية ناقصة ويزيل سموم المتراكمة المعادن السامة. هذا النهج القائم على الأدلة الغذائية قد تسفر عن ويندوز فيستا الجديد في وقت مبكر الفحص / التقييم والعلاج / الوقاية من المرضى الرضع الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد بما في ذلك المشتبه بهم. والمطلوب دراسات التدخل تسيطر عليها بشكل جيد لهذا العلاج الغذائي رواية لإنشاء الأدوار جينية من الاختلالات المعدنية الطفلي في التسبب في اضطرابات النمو العصبي ووضع الفحص المبكر والعلاج من اضطرابات النمو العصبي مثل اضطرابات طيف التوحد، ADHD واضطراب التعلم.

4. الاستنتاجات

توضح هذه النظرة أن العديد من المرضى الرضع الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد يعانون من الهامشية إلى zinc- شديد ونقص المغنيسيوم و / أو أعباء ارتفاع المعادن السامة، وأن هذه الاضطرابات المعدنية (الاختلالات المعدنية) في الهيئات قد تلعب المدرسة، والأدوار جينية مثل البيئة العوامل في التسبب في اضطرابات النمو العصبي. بالإضافة إلى ذلك، يقترح أن هناك وقت نافذة مهمة "نافذة الطفولي" في النمو العصبي وربما لعلاج والوقاية من هذه الاضطرابات. في المستقبل القريب، هو المطلوب مقدمة من الاختبارات السريرية المبتكرة مثل الايض وmetallomics تحليل لتقدير المبكر وعلاج اضطرابات النمو العصبي.

شكر وتقدير

المؤلفين نقدر الموضوعات التوحد وذويهم للتعاون في هذه الدراسة. هيروشي ياسودا تصور هذا المقال استعراض وكتب مخطوطة بمساعدة Toyoharu تسوتسوى.

تضارب المصالح

يعلن المؤلف أي تضارب في المصالح.

المراجع

• وينتروب، التهم K. التوحد.، طبيعة 2011 479، 22-24. [الباحث العلمي من Google]
• بينتو، D؛ Pagnamenta، AT. Klei، L؛ Anney، R .؛ Merico، D؛ ريغان، R .؛ كونروي، J .؛ ماجالهايس، TR؛ كوريا، C؛ آبراهامز، BS، وآخرون. تأثير وظيفي من التباين العالمي في عدد النسخ النادرة في اضطرابات طيف التوحد. طبيعة 2010، 466، 368-372. [الباحث العلمي من Google]
• تشاكرابارتي، S؛ Fombonne، E. اضطرابات النمو المتفشي في الأطفال قبل سن المدرسة: تأكيد ارتفاع معدل انتشار عامر. J. Psychiat 2005، 162، 1133-1141. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• بيلي، A .؛ لو Couteur، A .؛ غوتسمان، I؛ بولتون، P .؛ Simonoff، E؛ Yuzda، E؛ روتر، M. التوحد بأنه اضطراب وراثي بقوة: أدلة من دراسة التوأم البريطانية Psychol. ميد 1995، 25، 63-77. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• مارشال، CR؛ نور، A .؛ فنسنت، JB؛ ليونيل، AC. Feuk، L؛ Skaug، J .؛ Shago، M .؛ Moessner، R .؛ بينتو، D؛ رن، Y؛ وآخرون. الاختلاف البنيوي من الكروموسومات في اضطرابات طيف التوحد. عامر. J. هوم. جينيه 2008، 82، 477-488. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• كيم، SJ. سيلفا، RM؛ فلوريس، CG. يعقوب، S؛ Guter، S؛ Valcante، G؛ الزيتون، AM؛ كوك، EH. Badner، JA دراسة جمعية الكمية من SLC25A12 والمقيدة سمات السلوك المتكررة في اضطرابات طيف التوحد. مول. والتوحد 2011 2. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• مردوخ، JD؛ الدولة، MW التطورات الأخيرة في علم الوراثة من اضطرابات طيف التوحد. داء. أوبان. جينيه. ديف. 2013، 23، 310-315. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• Huguet، G؛ عين.؛ Bourgeron، T. المناظر الطبيعية الوراثية للاضطرابات طيف التوحد. آن. القس الجينوم هوم. جينيه. 2013، 14، 191-213. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• هيوز، V. التوحد: اضطراب مجمع الطبيعة 2012، 491، S2-S3. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• Dufault، R .؛ Schnoll، R .؛ Lukiw، WJ. لوبلان، B؛ كورنيت، C؛ باتريك، L؛ Wallinga، D؛ جيلبرت، SG. Crider، R. الزئبق التعرض، ونقص التغذية واضطراب التمثيل الغذائي قد يؤثر على التعلم لدى الأطفال. Behav. الدماغ Funct. 2009، 5، 44-58. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• بالمر، RF؛ بلانشارد، S؛ الخشب، R. القرب من نقطة مصادر إطلاق الزئبق البيئي باعتباره مؤشرا لانتشار مرض التوحد. Place الصحي 2009، 15، 18-24. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• Majewska، MD؛ Urbanowicz، E؛ بين جمهورية كوريا وBujko، P .؛ Namyslowska، I .؛ Mierzejewsky، ومستويات P. العمر التي تعتمد على أقل أو أعلى من الزئبق في شعر الأطفال الذين يعانون من التوحد مما كانت عليه في الاصحاء. اكتا Neurobiol. إكسب. 2010، 70، 196-208. [الباحث العلمي من Google]
• O'Rahilly، S. علم الوراثة البشرية ينير دروب للأمراض التمثيل الغذائي. طبيعة 2009، 462، 307-314. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• جيمس، SJ. Shpyleva، S؛ Melnyk، S؛ Pavliv، O؛ Pogribny، IP تنظيم جينية المتكامل للengrailed 2 (EN-2) homeobox الجينات في المخيخ التوحد. ترجمة. Psychiat. 2013، 3، E232. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• جين، YH. كلارك، AB؛ فيها سليبوس، RJ. الرفاعي، H؛ تايلور، JA. كونكيل، TA؛ ريسنيك، MA. Gordenin، DA الكادميوم هو المغير الذي يعمل عن طريق تثبيط إصلاح عدم تطابق. نات. جينيه. 2003، 34، 239-241. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• Takiguchi، M .؛ Achanzar، WE؛ تشو، W .؛ لي، G؛ Waalkes، MP تأثير الكادميوم على DNA- (السيتوزين-5) النشاط ناقلة الميثيل وحالة مثيلة الحمض النووي خلال التحول الخلوي الناجم عن الكادميوم. إكسب. خلية احتياط 2003، 286، 355-365. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• Arita، A .؛ كوستا، M. علم التخلق في التسرطن المعادن: والنيكل والزرنيخ والكروم والكادميوم. Metallomics 2009، 1، 222-228. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• بيريرا، F .؛ Herbstman، والتعرض قبل الولادة J. البيئي، علم التخلق، والمرض. Reprod. Toxicol. 2011، 31، 363-373. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• Jakovcevski، M .؛ Akbarian، آليات S. جينية في الأمراض العصبية. نات. ميد. 2012، 18، 1194-1204. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• Ciesielski، T .؛ Weuve، J .؛ بيلينجر، DC. شوارتز، J .؛ Lanphear، B؛ رايت، والتعرض والعصبية النمائية نتائج RO الكادميوم في الأطفال في الولايات المتحدة. البيئى. الصحة Perspect. 2012، 120، 758-763. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]
• Rodushkin، I؛ Axelsson، تطبيق MD حقل القطاع مع التركيز المزدوج ICP-MS لتوصيف عناصر متعددة من الشعر البشري والأظافر. الجزء الأول المنهجية التحليلية. الخيال العلمي. مجموع البيئى. 2000، 250، 83-100. [جوجل الباحث العلمي] [CROSSREF]

 

[رافت ابراهيم]

 

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/1...jnc.12113/full
ABA في نواة مهادي الحسية

• بيلين Goitia 1،2،
• ماريانا رينيري 1،2،
• لورا E. غونزاليس 1، †،
• خوسيه L. روزاس 1،
• إدغار غارسيا-الغدير 3،
• فيرونيكا Bisagno 2، و‡
• فرانسيسكو J. أوربانو 1، ‡، *

نشرت المقالة أولا متصلين: 7 JAN 2013
دوى: 10.1111 /

jnc.12113

ملخص

ميثيل (ميلا في الساعة) ويستخدم على نطاق واسع لعلاج الأطفال والمراهقين الذين يعانون من اضطراب الانتباه تشخيص العجز / فرط النشاط. على الرغم من أن سهم MPH الشبه الآلية لالكوكايين وتأثيراته على انتقال GABAergic في نواة مهادي الحسية غير معروفة. كان هدفنا لمقارنة الكوكايين وMPH آثار على توقعات GABAergic بين شبكي مهادي وventrobasal (VB) نوى. تعرض الفئران (P18-30) إلى حفلة تشبه الكوكايين وMPH الإدارات الحادة وشبه المزمنة. الكوكايين وMPH تعزيز hyperlocomotion، على الرغم من الآثار بوساطة الكوكايين شبه المزمنة كانت أقوى من الآثار ميلا في الساعة. الكوكايين وMPH إدارة شبه مزمن غيرت إقران النبض والمدخلات GABAergic عفوية بشكل مختلف. تغيرت آثار الكوكايين على أثار إقران النبض التيارات بوساطة GABA من الاكتئاب لتسهيل مع مدة البروتوكولات المستخدمة، في حين MPH يسببها زيادة مستمرة في جميع أنحاء بروتوكولات الإدارة. تم قياس المهادية نواة شبكي GAD67 وVB الكالسيوم V 3.1 مستويات البروتين باستخدام طخة غربية إلى فهم أفضل صلتها زيادة الإفراج GABA. وزادت كل من البروتينات عن طريق إدارة شبه المزمنة من الكوكايين. أظهر ميلا في الساعة الآثار المترتبة على انتقال GABAergic الذي يبدو أقل إرباكا من الكوكايين. آثار فريدة من نوعها من الكوكايين على التيارات الكالسيوم VB بعد المشبكي قد يفسر آثار الكوكايين الضارة على نواة مهادي الحسية. وتشير هذه النتائج إلى أن الكوكايين وMPH إنتاج التعديلات قبل المشبكي واضحة على انتقال GABAergic.

المختصرات المستخدمة ADHD

نقص الانتباه / فرط النشاط

CNQX

6-Cyano-7-nitroquinoxaline-2،3-ديون هيدرات الصوديوم والملح

DAT

نقل الدوبامين

DL-AP5

DL-2-الأمينية-5-phosphonovaleric حمض

GAD

كربوكسيل حمض الجلوتاميك

HVA

الجهد العالي تفعيلها

IPSC

كابح التيار بعد متشابك

LVA

الجهد المنخفض تفعيلها

MPH

ميثيل حمض الهيدروكلوريك

شبكة

نقل بافراز

PPR

نسبة إقران النبض

SERT

ناقل السيروتونين

TRN

نواة شبكي مهادي

TTX

سم الأسماك الرباعية الأسنان

VB

ventrobasal النواة

ويرتبط تعاطي المزمن للكوكايين مع الظروف العصبية الأمراض النفسية الكبرى (ديفلين وهنري 2008). وكانت إدارة مثل حفلة الحادة من الكوكايين قادرة على تغيير الخصائص الذاتية للخلايا العصبية مهادية قشرية وانتقال GABAergic عفوية، مما أدى إلى تحسينات من EEG النشاط التردد المنخفض في الفئران (أوربانو وآخرون 2009). إدارة النظامية من نوع T-حاصرات قنوات الكالسيوم في الجسم الحي ومنعت hyperlocomotion وGABAergic تعزيز العصبي على Ventrobasal (VB) الخلايا العصبية بعد حفلة الحاد تشبه إدارة الكوكايين (Bisagno وآخرون 2010)، مما يشير إلى الدور الرئيسي للقنوات T-نوع في آثار الكوكايين على شبكات GABAergic المهادية محددة.

نواة شبكي مهادي (TRN) هو عبارة عن طبقة رقيقة من الخلايا العصبية GABAergic أن المشروع لنواة مهادي الحسية (Spreafico وآخرون 1991)، ومترابطة الخلايا عن طريق محطات GABAergic (صن وآخرون 2012) وتقاطعات الفجوة (Landisman وآخرون . 2002). في القوارض، وهناك نقص في interneurons GABAergic في نواة VB، وتثبيط اللازم لالإدراك الحسي السليم يتم توفيرها من قبل afferents GABAergic TRN (دي بياسي وآخرون 1997). الخلايا العصبية تريليون لها خصائص الجوهرية التي تسمح لهم لتوليد إمكانات العمل وغشاء التذبذبات المحتملة في مجموعة واسعة من الترددات (التي استعرضتها Steriade 2005). الخلايا العصبية TRN تعبر عن الكالسيوم V 3.2 والكالسيوم V 3.3 T-نوع مفارز قناة الكالسيوم (تالي وآخرون 1999)، على الرغم من أن أكدت الدراسات الحديثة أيضا وجود الكالسيوم V 3.1 مفارز (كوفاتش وآخرون 2010). والتضمين TRN النظمية التي كتبها الأمينات الأحادية وGABA (بينو وديشين 1992؛ شمة-Lagnado وآخرون 1996؛ روتر وآخرون 1998؛ رودريغيز وآخرون 2011).

ميثيل (ميلا في الساعة)، منبه نفسي آخر لديه بعض المسؤولية عن الإدمان (Chait 1994)، ويستخدم على نطاق واسع لعلاج الأطفال والمراهقين بمرض نقص الانتباه / فرط النشاط (ADHD) (بيدرمان وآخرون 1999). في البشر، ميلا في الساعة وقد تعزز الآثار (المرتبطة زيادة مستويات الدوبامين خارج الخلية من خلال منع نقل الدوبامين، DAT) بعد الحقن الوريدي (Volkow آخرون 1999a). وقد وصفت الاستعداد خفضت إلى تعاطي المخدرات خلال مرحلة البلوغ بعد التعرض المبكر للMPH في البشر (بيدرمان وآخرون 1999) وفي النماذج الحيوانية (Carlezon وآخرون 2003). ومع ذلك، فقد اقترح مؤلفين آخرين على خلاف ذلك (براندون وآخرون 2001؛ Volkow وفي Insel 2003؛ Volkow وآخرون 1995). وقد ارتبطت الاختلافات في الدوائية بين الكوكايين وMPH في البشر مع عدم وجود تحسيس متصالب الاستخدام MPH قبل المراهقين (Guerriero وآخرون 2006). إدارة MPH تطبيع EEG النشاط التردد المنخفض (كلارك وآخرون 2003)، مما يشير إلى تورط مباشر للTRN في مسببات ADHD. وقد تبين أن إدارة MPH واحدة لمنع انتقال GABAergic من TRN من خلال تفعيل مستقبلات D4 على حد سواء في المختبر (Florán وآخرون 2004) والحية (Erlij وآخرون 2012). ومع ذلك، فإن آثار إدارة MPH المتكررة على انتقال GABAergic بين النوى المهادية الحسية لا تزال مجهولة.

وقد تبين الكوكايين لمنع نقل مونوامين (DAT، سرت، وNET)، ورفع مستويات متشابك الدوبامين (ريتز وآخرون 1987؛ الحكماء وBozarth 1987؛ هوز وآخرون 2000)، بافراز، والسيروتونين (Glowinski وأكسلرود 1966 ؛ روس وRENYI 1969؛ عموم وآخرون 1994؛ هوز وآخرون 2000). MPH يمنع أساسا DAT وNET، ولكن ليس SERT، الأمر الذي أدى الزيادة السريعة في مستويات الدوبامين خارج الخلية في العقد القاعدية (Kuczenski وسيغال 1997). تقارب MPH لDAT في الجسم الحي هو مشابه لذلك من الكوكايين (Volkow وآخرون 1999b، ولكن حركية الدوبامين كامل الدماغ بوساطة MPH تكون أبطأ من تلك التي من الكوكايين) (Volkow آخرون 1999a؛ Volkow وسوانسون 2003). في المرضى الذين يعانون ADHD الكبار، زادت MPH الدوبامين في الجسم المخطط البطني مع الحد من أعراضهم (Volkow وآخرون 2012).

وكان الهدف من هذه الدراسة لمقارنة آثار في الفئران من حفلة تشبه الكوكايين وحدة MPH (1 اليوم) وشبه المزمنة (3 اليوم) الإدارة على النشاط الحركي وانتقال GABAergic من TRN على الخلايا العصبية VB. أظهرت نتائجنا أن كلا من الكوكايين وMPH تعزيز hyperlocomotion، على الرغم من الآثار بوساطة الكوكايين كانت أقوى من MPH بعد تناوله شبه المزمنة. كل من الكوكايين وMPH تغير إقران النبض أثار وعفوية انتقال GABAergic من TRN. في حين الكوكايين زيادة كبيرة نسب إقران النبض بعد 24 ساعة فقط لمدة 3 أيام، MPH تعزيز منهم من يوم 1 حتى 3 إدارات اليوم. الكوكايين يتسبب في مزيد من GABA عفوية تردد الثياب مقارنة MPH بعد 1 يوم، ولكن ليس للإدارات التي استمرت 3 أيام. آثار الكوكايين على انتقال GABAergic مهادي والتيارات الكالسيوم بعد متشابك لوحظ في هذه الدراسة قد تكمن وراء تغيرات جذرية في التعبير البروتين من GAD و / أو قنوات T-نوع آخر متشابك. وكشف تحليل لطخة غربية زيادة في كا V 3.1 و مستويات GAD67 بعد تناوله شبه المزمنة من الكوكايين.

نتائجنا تشير إلى التقلبات كبير من انتقال مهادي GABAergic والتيارات الكالسيوم بعد متشابك الكوكايين، والتي قد تكمن وراء آثارها السمية العصبية طويلة الأمد. أيضا، MPH يسببها التعديلات الحالة المستقرة للتغيرات انتقال GABAergic، الذي من شأنه أن يؤدي إلى تغيرات طويلة الأمد في معالجة مهادي الحسي.

المواد والأساليب


الحيوانات

عموما، استخدمت 18-30 يوما من العمر من الذكور C57BL / 6 الفئران من مرفق المركزية الحيوان في جامعة بوينس آيرس. وكانت مبادئ رعاية الحيوان وفقا CONICET (2003)، والتي وافقت عليها السلطات في استخدام التوجيهات OLAW / ARENA (NIH في بيثيسدا، MD، الولايات المتحدة الأمريكية).

إدارة المخدرات

كانت تدار الكوكايين وميثيل الملكية الفكرية باستخدام بروتوكولات "مثل حفلة" (سبانجلر وآخرون 1993) لمدة 1 يوم (3 × 15 مغ / كغ، 1 ساعة بعيدا) أو لمدة 3 أيام (شبه المزمنة؛ 3 × 15 مغ / كغ ، 1 ساعة على حدة، كل يوم لمدة 3 أيام) (الشكل 1 أ). الحيوانات السيطرة تلقت حقن المياه المالحة موقوت على حد سواء.

الشكل 1. الكوكايين وميثيل البروتوكولات (MPH) إدارة استخدامها. أثار الممثل GABAergic التيارات الكالسيوم متشابك وأثار منحدر المسجلة من ventrobasal (VB) الخلايا العصبية. (أ) تستخدم بروتوكولات الكوكايين وMPH حفلة الإدارة. (ب) اليسار، GAD65 / 67 immunolabeled شريحة مهادية قشرية تظهر مواقع شبكي (متقاعد) ونوى VB، فضلا عن تسجيل (VB) وتحفيز كهربائي (STIM). (ب) أثار الصحيح، ممثل التيارات ما بعد المشبكية المثبطة (IPSCs) بعد 10 هرتز و 40 هرتز التحفيز إقران النبض في ظل وجود 50 ميكرومتر AP5 و 20 ميكرومتر CNQX قبل وبعد تطبيق Bicuculline حمام (50 ميكرومتر). وكانت إمكانية عقد -70 بالسيارات. (ج) التيارات الكالسيوم التمثيلية التي تولدها 500 طويلة MS-سلالم depolarizing قبل (الخط الأسود) و 20 دقيقة بعد تطبيق 20 ميكرومتر حمام mibefradil (خط رمادي). Mibefradil أساسا إلى انخفاض الجهد المنخفض تنشيط T-نوع المكون الحالي (السهم)، في حين تؤثر قليلا الجهد العالي تنشيط P / Q-نوع السعة الحالية (عنصر حساس ω-Agatoxin-IVA 100 نانومتر؛ أوربانو وآخرون 2009).

شرائح مهادي

وقد تم الحصول على شرائح مهادي قشري كما هو موضح سابقا (Bisagno وآخرون 2010)، 1 ساعة بعد مشاركة "مثل حفلة" الإدارة، إلا عندما 24 ساعة بعد أن تم استخدامها لمدة 3 أيام. سمح شرائح لاسترداد في 35 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة على الأقل في ACSF خالية من منبه نفسي (Bisagno وآخرون 2010).

تسجيلات خلية كاملة التصحيح، المشبك

وقدمت التسجيلات في 20-24 درجة مئوية باستخدام أقطاب التصحيح، المشبك (Bisagno وآخرون 2010). سجلت المثبطة المنمنمات بعد متشابك التيارات (الثياب) في وجود TTX (3 μΜ) وتحليلها باستخدام التحليل البسيطة (Synaptosoft، فورت لي، NJ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تركيب أمور الحدث منحنيات الفاصل إلى المعادلة الأسية واحدة (SigmaPlot؛ SYSTAT برامج، شيكاغو، IL، الولايات المتحدة الأمريكية)، وتمت مقارنة فترات صغيرة وسيطة بين المجموعات.

وقد أثار المثبطة التيارات ما بعد المشبكية (IPSCs) في وجود DL-AP5 (50 ميكرومتر) وCNQX (20 μΜ) (40-200 ميكرو ثانية، 200-1000 أمبير) باستخدام أقطاب القطبين (FHC المؤتمر الوطني العراقي، بودوين، ME، الولايات المتحدة الأمريكية ) المتمركزة على الحدود بين TRN وVB النوى (تشانغ وآخرون 1997). وقد استخدم Bicuculline (50 μΜ) للتأكد من أن التيارات تم بوساطة مستقبلات GABA-A (الشكل 1 ب). واستخدمت البقول يقترن في 10 هرتز أو 40 هرتز، وكانت IPSCs تطبيع إلى اتساع الأولى IPSC. وسجلت التيارات الكالسيوم التي تعتمد على الجهد مع بروتوكول مثل منحدر (0.3 فولت / ثانية؛ Bisagno وآخرون 2010). خفضت سلالم الجهد المتهدمة من التيارات الكالسيوم، مما يسمح لنا لحساب بدقة منخفضة الجهد النشط (LVA، T-نوع) والجهد العالي المنشط (HVA بوساطة P / Q-نوع والتيارات الكالسيوم ω-Agatoxin-IVA الحساسة، وانظر أوربانو وآخرون 2009) التيارات نسب الذروة (Bisagno وآخرون 2010). تم تسجيل إشارات باستخدام مكبر للصوت 700 MultiClamp بقيادة pCLAMP 10.0 (الأجهزة الجزيئية، سانيفيل، CA، الولايات المتحدة الأمريكية). استخدمت تركيزات منخفضة من mibefradil (20 μΜ) لمنع T-نوع التيارات (الشكل 1 ج)، كما هو موضح سابقا (Bisagno وآخرون 2010).

الدراسات السلوكية

تم تسجيل النشاط الحركي الماوس مع نظام الآلي (Ethovision XT7.0؛ Noldus، فاغينينغين، هولندا) كما هو موضح سابقا (Bisagno وآخرون 2010). سافر المسافة الإجمالية (سم) وكان كميا ليصبح المجموع 30 دقيقة قبل الحقن (خط الأساس)، و 45 دقيقة بعد الحقن الأخير من حفلة.

تجانس الأنسجة وصمة عار الغربية

تم تشريح TRN وVB من 350 ميكرون شرائح سميكة على مرحلة الجليد الباردة، التي تم جمعها في أنابيب بلاستيكية وتخزينها (-80 ° C). تم إذابة العينات والمتجانس في الترسيب المناعي الشعاعي فحص (RIPA) العازلة التي تحتوي على مثبطات الأنزيم البروتيني في 4 درجات مئوية. بعد الطرد المركزي (20 دقيقة في 21 500 غ)، وتم تحديد مستويات البروتين مع مجموعة البروتين BCA مقايسة (الحرارية العلمية، روكفورد، IL، الولايات المتحدة الأمريكية)، وحضنت 40 ميكروغرام من كل عينة مع تكسير العازلة (Laemmli 1970) لمدة 10 دقيقة في 100 ° C. تم تشغيل العينات على 10٪ بولي أكريلاميد حل جل وتم نقل البروتينات إلى غشاء النيتروسليلوز (سيغما الدريخ، سانت لويس، MO، الولايات المتحدة الأمريكية). تم بحثها وصمة عار مع الأجسام المضادة الأولية محددة، بما في ذلك الأرنب مكافحة GAD67 / 65 (1: 10 000، Chemicon، بيليريكا، MA، الولايات المتحدة الأمريكية)، الأرنب مكافحة الأكتين (1: 100، سيغما الدريخ)، والأرنب مكافحة كاليفورنيا V 3.1 (1: 200، Chemicon). كان الضد الثانوية المضادة للأرنب مترافق إلى البيروكسيديز الفجل (HRP) (1: 1000، داكو، غلوستروب، الدنمارك). وقد وضعت البقع مع chemiluminescent الفجل البيروكسيديز الركيزة (Immobilon الغربية، EMD ميليبور شركة، فالجهاز يبث اشعة تماثل، MA، الولايات المتحدة الأمريكية)، وتصور التوهج مع كاميرا CCD (LAS-1000، فوجي فيلم، طوكيو، اليابان). وكان كميا كثافة إشارة باستخدام يماغيج 1.43 م برنامج ( http://imagej.nih.gov/ij/index.html، NIH). وكانت العصابات الموافق GAD67 والكالسيوم V 3.1 تطبيع لالأكتين، وتم تطبيع جميع العينات للدلالة على مجموعة المالحة و.

التحليل الاحصائي

برنامج InfoStat (جامعة. ناسيونال دي قرطبة، الأرجنتين) كانت تستخدم لأغراض المقارنات الإحصائية. أجريت إحصاءات استخدام الطالب ر -test أو في اتجاه واحد أنوفا (ما لم ينص على خلاف ذلك) وتوكي-كرامر أو LSD فيشر مقارنات متعددة ظيفة واختبارات خاصة عند الاقتضاء. واعتبرت اختلافات كبيرة إذا ص < 0.05. كلما البيانات لم تمتثل الافتراضات من الاختبارات المعلمية، أجريت يتبع غير حدودي يلكوكسن-مان-ويتني أو كروسكال واليس اختبارات المقارنات المقترنة. عرض البيانات ± يعني كما الخطأ المعياري للمتوسط.

المواد

تم شراء الكوكايين، حمض الهيدروكلوريك من سيغما الدريخ، وميثيل حمض الهيدروكلوريك (مالينكرودت شركة، هازيلوود، MO، الولايات المتحدة الأمريكية) كان التبرع السخي من Osmotica الصيدلة SA (بوينس آيرس، الأرجنتين). خلال التسجيلات الكهربية، استخدمت الأدوية التالية: DL-AP5، CNQX، TTX، bicuculline، وmibefradil (كل من سيغما الدريخ).

النتائج


ميثيل المتكرر (MPH) التي يسببها إدارة حفلة تغييرات أكثر اعتدالا في hyperlocomotion من الكوكايين

قارنا في البداية آثار الكوكايين وMPH على تفعيل الحركي بعد تناوله بنهم الحاد 1 يوم (الشكل 2 أ). الكوكايين وMPH الناجم عن ارتفاع hyperlocomotion مقارنة مع المياه المالحة لكنها لم تختلف عن بعضها البعض (الشكل 2 ل؛ كروسكال واليس أنوفا، H = 11.08، ص < 0.05؛ الكوكايين مقابل المالحة: p < 0.001؛ MPH مقابل المالحة: p < 0.05؛ الكوكايين مقابل MPH: P> 0.05). بعد حفلة الإدارات لمدة 3 أيام، كل من الكوكايين وMPH يسببها hyperlocomotion (الشكل 2 ب، أنوفا، F (2،25) = 17.88، ص < 0.0001. LSD فيشر اللاحق الاختبار: كل العلاجات تختلف إحصائيا عن بعضها البعض مع ع < 0.01). ولوحظ hyperlocomotion العالي بعد 3 أيام إدارة الكوكايين حفلة مقارنة الردود بوساطة حفلة الكوكايين 1 يوم؛ ومع ذلك، أظهرت الفئران التي تديرها MPH hyperlocomotion مماثلة بعد 1 يوم و 3 الإدارة اليوم (1/3 القيم يوم = المالحة: 1690.62 ± 2149.19؛ الكوكايين: 7914.82 ± 1519.71، MPH: 630.05 ± 1754.81 أنوفا، F (2،24) = 5.73، p < 0.01؛ LSD فيشر اللاحق الاختبار: ص < 0.05، الكوكايين مقابل المالحة، ميلا في الساعة). لم يلاحظ أي الكوكايين أو بوساطة MPH الآثار على hyperlocomotion 24 ساعة بعد الحقن الماضي (الشكل 2 ج، أنوفا، ص> 0.05).

الشكل 2. ميثيل المتكرر (MPH) الإدارات حفلة أدى إلى حدوث تغييرات أكثر اعتدالا في hyperlocomotion من الكوكايين. (أ)، المسافة المقطوعة (في سم × 10 3) عن طريق حقن الفئران الملكية الفكرية بمحلول ملحي (شريط أسود؛ ثلاث حقن، 1 ساعة بعيدا)، والكوكايين، 1 يوم (شريط رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (شريط رمادي غامق) بنهم. ** ف < 0.001، الكوكايين مقابل المالحة. * ع < 0.05، MPH مقابل المالحة. (ب)، المسافة المقطوعة (في سم × 10 3) عن طريق الفئران الملكية الفكرية حقن بمحلول ملحي (شريط أسود)، 3 يوم الكوكايين (شريط رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (شريط رمادي غامق) بنهم 45 دقيقة بعد تلقي الحقن الماضي. ** ف < 0.01، الكوكايين، MPH مقابل المالحة (LSD فيشر آخر اختبار خاص). سافر (ج) مسافة (في سم × 10 3) تسجيل 24 ساعة بعد الحقن الماضي لنفس العلاج (المالحة: شريط أسود؛ الكوكايين: شريط رمادي فاتح، MPH: شريط رمادي غامق). لم يتم العثور على فروق ذات دلالة إحصائية بين العلاجات. وسجلت قيم أساسية قبل الحقن في يوم 1.

أظهر الكوكايين ترددات أعلى من الثياب GABAergic عفوية من MPH في حين الكوكايين الوحيد غيرت ما بعد متشابك الجهد المنخفض المنشط (LVA) / الجهد العالي المنشط (HVA) النسب الحالية الكالسيوم

الثياب GABAergic (mIPSCs) المسجلة من الخلايا العصبية VB بعد حفلة الكوكايين الحاد تتجلى ترددات أعلى مقارنة مع العلاجات ميلا في الساعة والمالحة (الشكل 3 أ و ب، كروسكال واليس أنوفا، الكوكايين مقابل MPH: H = 6.85، p < 0.01؛ الكوكايين مقابل المالحة: H = 15.75 ص < 0.05). وكانت فترات صغيرة لا تختلف كثيرا عند مقارنة المالحة وشرائح المعالجة ميلا في الساعة (الشكل 3 أ و ب، ص> 0.05). بعد 3 أيام البروتوكولات شبه المزمنة، أظهرت العلاجات الكوكايين وMPH ترددات أعلى من المياه المالحة (الشكل 3 ج، د، كروسكال واليس أنوفا، H = 9.9، P < 0.01)، في حين لوحظ عدم وجود فروق بين المجموعات 24 ساعة بعد آخر لمدة 3 أيام حقن شبه مزمن (الشكل 3 هاء وواو؛ P> 0.05).

أظهر الرقم 3. الكوكايين ترددات أعلى من الثياب GABAergic عفوية من ميثيل (ميلا في الساعة)، وتغير بعد متشابك الجهد المنخفض تنشيط (LVA) / عالية الجهد النشط (HVA) الكالسيوم النسب الحالية. (أ)، قطع الاحتمال التراكمي للفترات بين الحدث مصغرة GABAergic (يعني ± الخطأ المعياري للمتوسط) المسجلة في الخلايا العصبية VB من فئران حقنت بمحلول ملحي (المربعات السوداء)، 1-يوم حفلة الكوكايين (الدوائر الرمادية الخفيفة)، و1 -يوم حفلة ميلا في الساعة (الماس رمادية داكنة). (ب)، GABAergic فترات المتوسط ​​مصغرة من فئران حقنت بمحلول ملحي (شريط أسود) والكوكايين 1-اليوم (شريط رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (شريط رمادي غامق) بنهم. تم الحصول على القيم الوسيطة (أظهر في 3A مع الخطوط المنقطة) بعد الفردية المؤامرات الاحتمال التراكمي المناسب إلى وظيفة ذ = ذ 0 + ل* إكسب (-Time (مللي ثانية) / τ). * ع < 0.01، الكوكايين مقابل المالحة، ميلا في الساعة. (ج، د) قطع الاحتمال التراكمي للGABAergic فترات دقيقة بين الحدث وفترات المتوسطة المسجلة في الخلايا العصبية VB من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (المربعات السوداء والقضبان)، لمدة 3 أيام الكوكايين (الدوائر الرمادية الخفيفة والقضبان)، أو ميلا في الساعة (الظلام الماس الرمادي والقضبان) بنهم، وقتلت 1 ساعة بعد الحقن الماضي. أظهرت البيانات وتحليلها كما هو الحال في أ و ب. * ع < 0.05، المالحة مقابل الكوكايين، ميلا في الساعة. (ه، و) قطع الاحتمال التراكمي للGABAergic فترات مصغرة بين الحدث وفترات المتوسطة المسجلة في الخلايا العصبية VB من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (المربعات السوداء والقضبان)، لمدة 3 أيام الكوكايين (الدوائر الرمادية الخفيفة والقضبان)، أو ميلا في الساعة (الظلام الماس الرمادي والقضبان) بنهم، وقتلت 24 ساعة بعد الحقن الماضي. أظهرت البيانات وتحليلها كما هو الحال في أ و ب. (ز) الجهد المنخفض المنشط (LVA) / عالية الجهد النشط (HVA) الكالسيوم النسب الحالية في الخلايا العصبية VB من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (شريط أسود) والكوكايين 1-اليوم (شريط رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (شريط رمادي غامق) بنهم # ص < 0.05، الكوكايين مقابل ميلا في الساعة، والمياه المالحة. (ح) LVA / HVA الكالسيوم النسب الحالية للالخلايا العصبية VB من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (شريط أسود) والكوكايين لمدة 3 أيام (شريط رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (شريط رمادي غامق) بنهم، وقتلت 1 ساعة بعد الحقن الماضي. (ط)، LVA / HVA الكالسيوم النسب الحالية للالخلايا العصبية VB من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (شريط أسود) والكوكايين لمدة 3 أيام (شريط رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (شريط رمادي غامق) بنهم، وقتلت 24 ساعة بعد الحقن الماضي # ص < 0.01، الكوكايين مقابل المالحة، ميلا في الساعة (توكي-كرامر آخر اختبار خاص).

لم احدة MPH بنهم لن تتغير بعد متشابك الكالسيوم نسب LVA / HVA الحالية في الخلايا العصبية VB بالمقارنة مع المياه المالحة، في حين كانت نسب معاملة الحيوانات الكوكايين 1 اليوم أعلى بكثير من إما مالحة أو ميلا في الساعة (الشكل 3 غرام؛ في اتجاه واحد أنوفا، F (2،38) = 7،6، توكي-كرامر اللاحق الاختبار؛ المالحة مقابل ميلا في الساعة، ص> 0.05؛ الكوكايين مقابل MPH: p < 0.05؛ الكوكايين مقابل المالحة: p < 0.05). وقد لوحظت أي تغييرات في نسب LVA / HVA بين المياه المالحة و3 يوم (1 ساعة بعد) العلاجات الكوكايين وMPH (الشكل 3 ح، أنوفا، ص> 0.05). وقد لوحظت نسب أقل 24 ساعة بعد 3 ايام ادارة الكوكايين حفلة (الشكل 3 ط، في اتجاه واحد أنوفا، F (2،29) = 5.8، P < 0.01)، المتعلقة أعلى HVA، P / Q-نوع بوساطة الكثافة الحالية من دون تغيير في نوع T-الكثافة الحالية (253 ± 18٪ زيادة 24 ساعة بعد 3 ايام مقابل المالحة، ن = 10؛ كروسكال واليس أنوفا، H = 13.9، ص < 0.01). وقد لوحظت أي تغييرات في نسب LVA / HVA بعد العلاج MPH المتكررة مقارنة المالحة (الشكل 3 ح وأنا؛ P> 0.05).

الكوكايين وMPH تتأثر بشكل مختلف إقران النبض أثار انتقال GABAergic

تحظى بقبول واسع كمعلمة لتوصيف التعديلات قبل متشابك التي تعتمد؛ نسب إقران النبض (2ND-أثار التحفيز السعة / 1-أثار التحفيز السعة PPRs). قارنا نسب باستخدام كل 10 هرتز و 40 هرتز الترددات من التحفيز في جميع العلاجات. وكانت القيم PPR يعني أقل من واحد يشير إلى أن هناك الاكتئاب متشابك بين المحفزات. بعد العلاج بنهم 1 يوم، كانت نسب 10 هرتز لا تختلف كثيرا في العلاج (الشكل 4 أ، كروسكال واليس أنوفا، ص> 0.05). ومع ذلك، بالمقارنة الكوكايين والمالحة، وكانت 40 PPRs هرتز من مجموعة MPH أعلى حد سواء في ظروف التحكم (الشكل 4 أ، كروسكال واليس أنوفا، ف < 0.05) وبعد تطبيق حمام من mibefradil (20 ميكرومتر؛ 20-40 دقيقة؛ الشكل 4 ب، كروسكال واليس أنوفا، ف < 0.05)، مما يشير إلى عدم تورط كبير من القنوات T-نوع على إقران النبض الإفراج GABA بعد العلاج بنهم 1 يوم. واصلنا تميز آثار الكوكايين وMPH على أثار انتقال GABAergic في الفئران بعد بروتوكولات إدارة شبه المزمنة. مرة أخرى، أثارت MPH PPRs أعلى من المياه المالحة والكوكايين في كل من الترددات اختبار (الشكل 4 ج، 10 هرتز: أنوفا F (2،61) = 3.79، p < 0.05؛ توكي-كرامر اللاحق الاختبار، MPH مقابل. المالحة والكوكايين ص < 0.05؛ 40 هرتز: أنوفا F (2،48) = 8.64، p < 0.01؛ توكي-كرامر اللاحق الاختبار، MPH مقابل المالحة، الكوكايين، ص < 0.05). لم الكوكايين لن تتغير PPRs 1 ساعة بعد حفلة مقارنة المالحة إما 10 هرتز أو 40 هرتز (الشكل 4 C، أنوفا، ص> 0.05)، في حين كانت PPRs أعلى بكثير من MPH والمالحة 24 ساعة بعد 3 ايام علاج الكوكايين بنهم لكل 10 هرتز و 40 هرتز (الشكل 4 د و 10 هرتز: أنوفا F (2،42) = 20.27 ص < 0.01؛ توكي-كرامر اللاحق الاختبار، MPH مقابل الكوكايين، ص < 0.05، والمالحة مقابل الكوكايين، ص < 0.01؛ 40 هرتز: أنوفا F (2،34) = 18،8 ف < 0.01؛ توكي-كرامر اللاحق اختبار، ميلا في الساعة، مقابل الكوكايين، ص < 0.05 والمالحة مقابل الكوكايين، ص < 0.01). الأهم من ذلك، 40 PPRs هرتز 24 ساعة بعد 3 ايام علاج الكوكايين حفلة (الشكل 4 أظهرت د) نسب متجاوزا عتبة 1،0، مشيرا إلى تسهيل النقي أثناء الإرسال GABA في وتيرة عالية. بحضور mibefradil (20 ميكرون)، و24 ساعة بعد 3 ايام علاج الكوكايين بنهم 10 هرتز و 40 هرتز القيم PPR خفضت إلى حد كبير في مستويات المياه المالحة (10 هرتز: 0.61 ± 0.06، ن = 15؛ 40 هرتز: 0.74 ± 0.06، ن = 13؛ توكي-كرامر اللاحق اختبار، 24 ساعة بعد 3 يوم من دون مقابل mibefradil مع mibefradil، ص < 0.05؛ المالحة مقابل 24 ساعة بعد 3 أيام بحضور mibefradil، ص> 0.05). نسب MPH 24 ساعة بعد كانت 3 بروتوكولات إدارة اليوم أعلى من المياه المالحة فقط في 10 هرتز (توكي-كرامر اللاحق الاختبار، المالحة مقابل ميلا في الساعة، ص < 0.05). وكانت PPRs بعد تناوله MPH لا تختلف كثيرا مقارنة 1 ح (الشكل 4 ج) و 24 ساعة بعد 3 ايام حفلة (الشكل 4 د).

الرقم 4. الكوكايين وميثيل (MPH) تتأثر بشكل مختلف إقران النبض أثار انتقال GABAergic. (أ) نسب إقران النبض (IPSCs 2 الثانية التحفيز / IPSCs 1 الحادي والتحفيز) المسجلة من ventrobasal (VB) الخلايا العصبية بعد 10 هرتز و 40 هرتز إقران النبض تحفيز النواة المهادية الشبكية (TRN) المحاور من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (الأسود الحانات) والكوكايين 1-اليوم (الحانات رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (أشرطة رمادية داكنة) بنهم. (ب) نسب المقترنة نبض المسجلة من الخلايا العصبية VB بعد 10 هرتز و 40 هرتز إقران النبض التحفيز من المحاور TRN بحضور mibefradil (20 ميكرومتر)، من الفئران التي عولجت كما في ألف (المالحة: أشرطة سوداء؛ الكوكايين: رمادي فاتح الحانات، MPH: أشرطة رمادية داكنة). * ع < 0.05، MPH مقابل المالحة والكوكايين. (ج) نسب المقترنة نبض المسجلة من الخلايا العصبية VB بعد 10 هرتز و 40 هرتز إقران النبض التحفيز من المحاور TRN من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (أشرطة سوداء) والكوكايين لمدة 3 أيام (أشرطة رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (أشرطة رمادية داكنة ) بنهم، وقتل 1 ساعة بعد الحقن الماضي. * ع < 0.05، MPH مقابل المالحة والكوكايين. (د) نسب إقران النبض المسجلة من الخلايا العصبية VB بعد 10 هرتز و 40 هرتز إقران النبض التحفيز من المحاور TRN من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (أشرطة سوداء) والكوكايين لمدة 3 أيام (أشرطة رمادي فاتح) أو ميلا في الساعة لمدة 3 أيام (الظلام القضبان الرمادية)، وقتلت 24 ساعة بعد الحقن الماضي. * ع < 0.05، MPH مقابل المالحة والكوكايين. # ف < 0.01، الكوكايين مقابل المالحة، ميلا في الساعة. (ه) أضعاف تغيير ميلا في الساعة والكوكايين يعني نسب إقران النبض (تطبيع يعني نسب الملوحة) في 10 هرتز و 40 هرتز التحفيز. تم العثور على دلالة إحصائية مماثلة عند مقارنة نسب النسبية بين العلاجات.

في الختام، العلاج MPH زيادة PPRs مقارنة المالحة في جميع البروتوكولات الإدارة المستخدمة، ويجري عكسها 24 ساعة بعد تلقي العلاج لمدة 3 أيام في 40 التحفيز هرتز. ومع ذلك، يسببها الكوكايين سوى انتعاش في PPR القيم 24 ساعة بعد 3 ايام بعد إما 10 هرتز أو 40 هرتز التحفيز (الشكل 4 ه). انخفاض Mibefradil احظ القيم PPR أعلى 24 ساعة بعد العلاج الكوكايين لمدة 3 أيام.

زاد الكوكايين المهادية الكالسيوم V 3.1 مستويات البروتين

واقترح آثار الكوكايين على PPRs GABAergic وعلى النسب الحالية LVA / HVA وكذلك تخفيض بوساطة mibefradil في PPR 24 ساعة بعد 3 ايام علاج الكوكايين بنهم وجود تغيرات عابرة في TRN GAD67 متشابك أو VB الكالسيوم V 3.1 مستويات البروتين. الشكل 5 ويظهر مستويات البروتين GAD67 (تقاس طخة غربية) في ح TRN 1 و 24 ساعة بعد بروتوكول حفلة لمدة 3 أيام. وقد لوحظ عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية بين الفئران الكوكايين والمعالجة المالحة (P> 0.05). من ناحية أخرى، كانت الكالسيوم V 3.1 مستويات البروتين في VB نواة أعلى بكثير 24 ساعة بعد بروتوكولات بنهم 3 يوميا بالمقارنة مع المياه المالحة (الشكل 5 ب، طالب تي -test، T = 4.0، P < 0.05).

الرقم 5. الادارة المتكررة من الكوكايين تغيرت الكالسيوم V 3.1، ولكن ليس GAD67 مستويات البروتين في ventrobasal (VB) وشبكي (TRN) نواة مهادي، على التوالي. (أ) مستويات البروتين GAD67 (تطبيع لالأكتين ومتوسط ​​قيمة المجموعة المالحة) تقاس طخة غربية في ساعة TRN 1 و 24 ساعة بعد الحقن الأخير من بروتوكول حفلة لمدة 3 أيام. (ب) كا V 3.1 مستويات البروتين (تطبيع لالأكتين ومتوسط ​​قيمة المجموعة المالحة) تقاس طخة غربية في ساعة VB 1 و 24 ساعة بعد الحقن الأخير من بروتوكول حفلة لمدة 3 أيام. تم العثور على فروق ذات دلالة إحصائية بين الكوكايين والفئران المعالجة المالحة عندما تم قتل الحيوانات 24 ساعة بعد آخر حقن (ع < 0.05).

نقاش

النتائج المعروضة هنا تظهر تغيرات واضحة من قبل الإدارات حفلة تشبه شبه المزمن إما الكوكايين أو ميلا في الساعة على hyperlocomotion، التشكيل قبل متشابك من انتقال GABAergic والتيارات الكالسيوم بعد متشابك من النوى المهادية الحسية. نتائجنا تشير الى ان آثار الكوكايين كانت أقوى من MPH وتنوعت وفقا لبروتوكولات إدارة مختلفة. MPH تتأثر بشكل مطرد أثار انتقال GABAergic.

الكوكايين وMPH تتأثر بشكل مختلف hyperlocomotion

ارتبط تعزيز السريع الكوكايين وبوساطة MPH في الحركة في القوارض مع قدرتها على زيادة مستويات الدوبامين خارج الخلية وبافراز في النواة المتكئة والمذنبة-putamen (Kuczenski وسيغال 1992، 2001، سيجال وKuczenski 1999). على عكس الكوكايين، فشل MPH لزيادة مستويات السيروتونين خارج الخلية (Kuczenski وسيغال 1997؛ سيجال وKuczenski 1999) بسبب ضعف تقارب ملزم من أجل SERT (عموم وآخرون 1994؛ Gatley وآخرون 1996). MPH (IP) وقد استخدم على نطاق واسع في الفئران في مجموعة تركيز نفس الكوكايين (Kuczenski وسيغال 2001؛ Drerup وآخرون 2010؛ ثانوس وآخرون 2010). ومن المتفق عليه أن MPH والكوكايين قد تشترك الممرات العصبية لممارسة آثارها (Volkow وآخرون 1999b؛ أرجنتو وآخرون 2012). هنا، والإدارة MPH مثل حفلة، على غرار غير المنصوص عليها، MPH المتكررة الإدارة الذاتية وصفها في المراهقين (مورتون وستوكتون 2000)، ومقارنة مثل حفلة الكوكايين، ولم تظهر أي تغيير في hyperlocomotion بين أيام من العلاج، على الرغم من تعزيز hyperlocomotion فوق مستويات المالحة (Drerup وآخرون 2010). كانت يسببها MPH hyperlocomotion حساسة للنوع T-مانع قناة الكالسيوم 2-الأوكتانول (0.07 مغ / كغ، والملكية الفكرية؛ P> 0.05؛ لا تظهر البيانات). ذكرت مجموعتنا في وقت سابق ان شارك في إدارة إدارة النظامية من نوع T-قنوات الكالسيوم حاصرات خفضت بشدة hyperlocomotion الناجم عن واحد حفلة الكوكايين الحاد (Bisagno وآخرون 2010). كما تم وصفه أنه MPH زيادة مستويات الدوبامين في TRN، والحد من hyperlocomotion من خلال تفعيل مستقبلات D4 (Erlij وآخرون 2012)، مما يدل على أن عملية الحد الذي قد يفسر لماذا MPH الإدارة المتكررة لم تزد مستويات hyperlocomotion فوق بوساطة الحادة المستويات.

تغييرات الكوكايين والتي يسببها ميلا في الساعة على انتقال GABAergic من TRN: مستويات متشابك مونوامين مقابل الخصائص الذاتية

وقد لوحظت آثار الكوكايين وMPH على الإفراج GABA عدة ساعات بعد تشريح، مما يشير إلى الآثار طويلة الأمد متعددة من التفاعلات القاعدية العقد / الدماغ-TRN (كونتريراس وآخرون. 1993؛ شمة-Lagnado وآخرون. 1996). ومع ذلك، كانت القيم PPR من الفئران المالحة لا تختلف كثيرا إما عبر العلاجات أو الترددات. التردد استقلال PPRs المقدمة هنا هي في الاتفاق مع التقارير الأخيرة باستخدام اختبار PPR مماثل (تشانغ وآخرون. 2010).

وقد وصفت أن مستقبلات مونوامين يمكن أن تعدل الإفراج GABA من الكرة الشاحبة على TRN. في الواقع، وتفعيل مستقبلات الدوبامين من D4 يعزز PPRs 10 هرتز في afferents الكرة الشاحبة، دون تغيير انتقال GABAergic داخل TRN (Govindaiah وآخرون. 2010). حقيقة أن MPH هو معروف لتفعيل هذه المستقبلات في TRN (Erlij وآخرون. 2012)، ويمكن أن الكوكايين أيضا زيادة مستويات مونوامين في نواة مهادي الحسية الجسدية (روتر وآخرون. 1998)، واقتراح آلية أكثر تعقيدا الكامنة وراء الفروق الملحوظة في PPRs. التغييرات في PPR خلال شبه مزمن إدارات MPH أثرت على حد سواء 10 هرتز و 40 هرتز التحفيز، مما يشير إلى التشكيل من الخلايا العصبية TRN في كل من الترددات كما هو موضح في الجسم الحي (بينو وديشين 1992). بعد هذا التشكيل، قد تحتاج الخلايا العصبية TRN للتعافي من التغيير المباشر (حجب / فتح) من القنوات الأيونية غشاء فضلا عن انتقال GABAergic بعد شبه المزمنة الكوكايين وMPH الإدارات (شوجي وآخرون. 1998؛ فديريتشي وآخرون. 2005). وقد أكدت التجارب الأخيرة التي أدلى بها مجموعتنا هذه الفرضية، وتبين أن المطبقة حمام ميلا في الساعة (10 ميكرومتر) لم يكن لديها أي تأثير على وتيرة إطلاق الخلايا العصبية TRN، في حين الكوكايين (10 ميكرومتر) خفضت بشدة تواتر امكانات العمل (لا تظهر البيانات ؛ ن = 8). وهكذا، الكوكايين شبه مزمن العلاجات قد يوقف TRN النشاط الجسدي (من المعروف أن المطلوبة للنشاط مثير TRN-TRN بين الجسدي الصحيح؛ [الشمس وآخرون. 2012])، موضحا "انتعاش" لوحظ يعني إقران النبض 24 ساعة بعد تناوله الكوكايين لمدة 3 أيام. أن الآثار MPH أكثر اعتدالا على الخصائص الجوهرية للTRN شرح الآثار أكثر تواضعا، ولكن حقت على PPR. سوف GABA الثياب تردد الزيادة الكوكايين بعد يوم واحد (وتصل إلى ثلاثة أيام) يتم بوساطة تأثيره المباشر على ما قبل متشابك المحطات TRN GABAergic، بغض النظر عن العمل التردد المحتملين في مستويات جسدية TRN (أي بما يتوافق مع التقارير مجموعتنا السابقة في وجود TTX، [أوربانو وآخرون. 2009؛ Bisagno وآخرون. 2010]).

كما تم وصفها مستقبلات مثبطات لتعديل الخصائص الذاتية (على سبيل المثال، T-نوع قنوات الكالسيوم) من الخلايا العصبية الحسية المهادية. وتشارك قنوات الكالسيوم T-نوع في العابرين الكالسيوم شجيري البعيدة في الخلايا العصبية TRN مساعدة دمج afferents GABAergic شجيري (كراندال وآخرون. 2010؛ الشمس وآخرون. 2012). ومن المسلم به أنه ليس هناك سوى قنوات P / Q-نوع تقع في كل من التشعبات VB (Pedroarena ويناس 1997) وTRN محطات متشابك المسؤول عن الافراج GABA (إيواساكي وآخرون. 2000). ومن المثير للاهتمام، السيروتونين، ولكن ليس الدوبامين، وقد تم الإبلاغ عن أن تؤثر تأثيرا كبيرا T-نوع التيارات الكالسيوم (بيرغر وتاكاهاشي 1990؛ فريزر وMacVicar 1991)، مما يشير إلى آلية القائم على السيروتونين الممكنة التي تتوسط الكوكايين، ولكن ليس التغيرات التي يسببها ميلا في الساعة في آخر -synaptic LVA / HVA التيارات نسب خلال شبه المزمنة أظهرت الإدارات هنا. تأثيرات مختلفة في قنوات T-نوع بوساطة الكوكايين تتفق مع دون تغيير hyperlocomotion MPH بعد تناوله 2--أوكتانول، ولكن خلافا لعدم وجود آثار mibefradil على PPR بعد الحادة حفلة الإدارة من الكوكايين.

آخر تفسير مناسب لالفروق الملحوظة بين ميلا في الساعة والكوكايين شبه مزمن الإدارات على الإفراج GABA PPR قد يكون وجود تثبيط بوساطة MPH قبل متشابك الإفراج TRN GABA (فديريتشي وآخرون. 2005)، التي من شأنها أن توسط الزيادة في يعني القيم نسبة لوحظ في هذه الدراسة. على العكس من ذلك، فإن الكوكايين يكون لها تأثير أقوى حجب intersomatic TRN GABAergic تثبيط بينما تزايد الثياب عفوية في وقت واحد (أي، التي تعمل مباشرة على المحطات قبل متشابك)، وبالتالي تقدم احتمالات الإفراج GABA في نفس النطاق من محطات المعالجة المالحة (أي وهي حالة تجريبية تتميز PPRs متوسط ​​أصغر، [تشانغ وآخرون. 1997]). وفقا لذلك، حدوث انتعاش في PPR القيم 24 ساعة بعد العلاج الكوكايين 3 يوميا يمكن أن ينظر إليه باعتباره آلية تعويضية. اشتراك قنوات الكالسيوم T-نوع على TRN بين الخلايا GABAergic تثبيط يتسق مع الانخفاض الملحوظ من PPR القيم 24 ساعة بعد تناوله لمدة 3 أيام باستخدام تطبيق حمام من mibefradil. تخفيض بوساطة mibefradil في ارتفاعات عتبة منخفضة بوساطة قنوات T-نوع في TRN المستوى الجسدي (كراندال وآخرون. 2010؛ الشمس وآخرون. 2012) من شأنه أن يقلل الإفراج GABA بين الخلايا العصبية TRN. وبالتالي فإن انخفاض تثبيط الخلايا العصبية TRN تسمح للزيادة في الافراج GABA على الخلايا العصبية VB، الأمر الذي أدى في نهاية المطاف احتمالات أعلى من الإفراج GABA (أي استفزاز الاكتئاب القيم PPR). في اتفاق مع هذه الفرضية، دراسة سابقة من Huguenard والأمير (1994) وقد أظهرت كيف T-نوع التيارات مانع إيثوسكسيميد لم تخفض سوى انفجار اطلاق الخلايا العصبية TRN، ولكن يتزايد كل من أثار وعفوية الإفراج GABA على الخلايا العصبية VB في شرائح من قبل الفئران -adolescent. نحن اختبار هذه الفرضية أيضا بمقارنة القيم PPR التي تم الحصول عليها بعد 24 ساعة لمدة 3 أيام مقابل العلاج 4 يوم (الحيوانات قتلوا 1 ساعة بعد الحقن الماضي). إدارة الكوكايين يوم 4 مزيد من خفض القيم PPRs، على الرغم من أنها كانت أعلى بكثير من PPRs المالحة (ن> 15، المالحة؛ ن> 23 الكوكايين، لا تظهر البيانات).

ولذلك، نتائجنا تدعم فرضية وجود التحفيز الزائد الإفراج GABA عن طريق تغيير TRN تثبيط بين الجسدية بوساطة الكوكايين. بالإضافة إلى ذلك، آثار متباينة من MPH والكوكايين في نواة مهادي الحسية قد يكون لها علاقة مع التغيرات في تركيز الكالسيوم داخل الخلايا في الخلايا العصبية الحسية مهادي، كما ذكرت سابقا في المناطق القشرية (دو وآخرون. 2006). وهناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لتميز بين الخلايا، والأحداث اللاحقة التي قد تفسر الاختلافات الملحوظة بين التغيرات الكوكايين والتي يسببها MPH في القيم GABAergic PPR المهادية.

GAD67 والكالسيوم V 3.1 مستويات البروتين

عابر، والآثار بوساطة الكوكايين مثل يرتد على انتقال GABAergic مهادي والتيارات الكالسيوم بعد متشابك يمكن أن تكمن وراء تغيرات جذرية في التعبير البروتين من GAD أو بعد متشابك الكالسيوم V 3.1 قنوات T-نوع. النتائج طخة غربية قدمت هنا عن التغيرات التي يسببها الكوكايين في GAD67 أو الكالسيوم V مستويات 3.1 البروتين يمكن اعتبار الجديد، عدم وجود دراسة سابقة نشرت على حد علمنا. ومع ذلك، فقد استخدمت الكمي لطخة غربية للإبلاغ عن زيادة مستوى GAD بعد انسحاب الكوكايين في الهايبوتلاموس (ما وآخرون. 2008). هنا، مستويات لا تختلف كثيرا من GAD67 (الموجود في الغالب على المستوى الجسدي TRN؛ [Esclapez وآخرون. 1994]) وقد لوحظت تصل إلى 24 ساعة بعد 3 ايام حفلة الإدارة. ومع ذلك، في يوم واحد إضافي الإدارة لم الزيادة GAD67 (لا تظهر البيانات)، ودعم فكرة أن الكوكايين قد تقلل بشكل كبير مستويات GABA قبل متشابك، مما يؤدي إلى ارتفاع تخليق البروتين GAD.

دور قنوات T-نوع في نواة مهادي الحسية وقد توسعت في الآونة الأخيرة، واصفا أن كلا TRN قبل متشابك وبعد متشابك أنواع الخلايا العصبية VB تبادل الكالسيوم V 3.1 مفارز تحتوي على قنوات الكالسيوم T-نوع (كوفاتش وآخرون. 2010). في ضوء هذه التقارير الجديدة، والتغيرات الملحوظة في VB نسب التيارات الكالسيوم بعد متشابك (LVA / HVA) في جميع أنحاء الكوكايين binge- شبه المزمن قد يكون مثل الإدارات مما يشير إلى وجود تعبير التعويضي للقنوات T-نوع كتبها VB و / أو محطات TRN. كان هناك زيادة في كا V 3.1 مفارز التعبير 24 ساعة بعد العلاج لمدة 3 أيام، ولكن ليس في أي وقت اختبار مباشرة بعد كانت تدار الكوكايين (بما في ذلك إدارة لمدة 4 أيام، لا تظهر البيانات). يجدر بالذكر أنه من المتوقع أن يتم غسلها تماما خارج بعد 24 ساعة مستويات الكوكايين البلازما.

كل من حجم وتأخر الوقت آثار بوساطة الكوكايين في GAD والكالسيوم V مستويات 3.1 بروتين توضيحية من دائمة، والآثار الضارة طويلة أن هذا المنشط يمكن أن تمارس على معالجة المهادي القشري الحسي.

الآثار الفنية من الكوكايين التعديلات TRN مستدامة للتفاعل مهادية قشرية

نتائج هذه الدراسة تشير إلى أن الكوكايين وMPH قادرون على تعزيز انتقال GABAergic متشابك في كل المنخفض (10 هرتز) وارتفاع وتيرة (40 هرتز) التحفيز من المحاور TRN وكذلك hyperlocomotion بعد شبه المزمنة بروتوكولات الإدارة. وهذا قد يؤدي إلى فرط الاستقطاب غير طبيعي للخلايا العصبية VB مهادي قشري التصميم، مما أدى إلى المهادي القشري المتكررة التردد المنخفض النشاط انفجار كلا TRN (يناس وGeijo-بارينتوس 1988؛ Huguenard والأمير 1992) وVB الخلايا العصبية (Jahnsen ويناس 1984a، ب؛ ماكورميك و Feeser 1990). وقد اقترح التماسك لفترات طويلة بين التردد المنخفض انفجر اطلاق وارتفاع وتيرة النشاط المهادي القشري خلال الدول مستيقظا لعرقلة المعالجة الحسية (ماكورميك وFeeser 1990)، وكذلك لحث على تغييرات في حس الألم في الفئران (لياو وآخرون. 2011)، والتي هي المعروف أن تقف وراء الامراض المتعددة التي تعرف باسم متلازمة خلل النظم المهادي القشري (يناس وآخرون. 1999؛ Jeanmonod وآخرون. 2003). ارتبط T-نوع القناة خلال تفعيل على مستوى TRN مع السلوكيات المرضية بما في ذلك الصرع (Steriade ويناس 1988؛ Tsakiridou وآخرون. 1995)، وهو اضطراب عصبي يرتبط أيضا مع إدارة المزمنة من الكوكايين، ولكن ليس MPH (ديفلين و هنري 2008). ومن شأن تفعيل أكثر من TRN بوساطة انتقال GABAergic أيضا تغيير الحركة الحسية من خلال نوى الحسية التتابع في المهاد، آلية يعتقد أنها وراء تشوهات EEG كبيرة في مرضى ADHD (رو وآخرون. 2005).

النتائج الموضحة هنا باستخدام بروتوكولات شبه مزمن، تأكيد وتوسيع نتائج مجموعتنا السابقة تظهر التقلبات انتقال GABAergic مهادي وبعد متشابك الكالسيوم النسب الحالية الآليات الرئيسية التي قد تكمن وراء آثار ضارة طويلة الأمد من الكوكايين. التغيرات التي يسببها MPH في انتقال GABAergic باستخدام بروتوكولات إدارة المتكررة تشير إلى أن MPH قد تغير أيضا المعالجة الحسية ولكن بطريقة أقل التخريبية. التعديلات الحالة المستقرة التي كتبها MPH أهمية خاصة لفهم تأثير تناول MPH إما العلاج الدوائي للمرضى ADHD أو في تعاطي المنشطات غير المقررة بين المستخدمين صحي. الدراسات المستقبلية باستخدام أطول، لا تزال هناك حاجة بروتوكولات المزمنة لتحديد ما إذا كانت آثار الكوكايين وبوساطة MPH الموصوفة هنا قد تتحول إلى تغيرات المهادية طويلة الأمد.

 

[رافت ابراهيم]

 

حمض الغاما غاما (GABA) كتاب

http://www.fxmedicine.com.au/blog-post/gamma-aminobutyric-acid-gaba-monograph

• 

خلفية

يتم توزيع الغاما غاما حمض (GABA) على نطاق واسع في جميع أنحاء الجهاز العصبي المركزي (CNS)، وهو ناقل عصبي مثبط رئيسي في الدماغ. انخفاض معدلات GABA، أو اختلال وظائف GABA في الدماغ وقد تم ربط الاضطرابات النفسية والعصبية بما في ذلك القلق، والاكتئاب، والأرق والصرع. [1]
ويتم إنتاج المكملات GABA الطبيعية من خلال عملية التخمير التي تستخدم الملبنة hilgardii، والبكتيريا المستخدمة في تخمير الخضروات بما في ذلك الكيمتشي الطبق الكوري. [1] وتكملة طريق الفم، ويستخدم GABA عن القلق، والاكتئاب، والإجهاد، والأرق، ومتلازمة ما قبل الحيض (PMS)، والصرع، وتحقيق الاستقرار ضغط الدم، والإدمان واضطراب نقص الانتباه وفرط الحركة (ADHD). [2]

الفوائد الرئيسية

• ارتفاع ضغط الدم
• المضادة للإجهاد
• مزيل القلق
• الناقل العصبي المثبط الرئيسي في الدماغ
• المرخي

التطبيقات السريرية

• قلق
• اضطراب نقص الانتباه وفرط الحركة (ADHD)
• المخدرات وإدمان الكحول
• صرع
• فيبروميالغيا ومتلازمة الألم
• الأرق والنوم الصعوبات
• متلازمة ما قبل الحيض (PMS)
• ضغط عصبى

آليات العمل

يتم تصنيعه GABA في الأنسجة من حمض الجلوتاميك عبر كربوكسيل انزيم حمض الجلوتاميك (GAD)، مع بيريدكسال-5-الفوسفات (P5P) القيام بدور العامل المساعد. [1]
خارج الجهاز العصبي المركزي، ويتم تصنيع GABA من قبل البكتيريا القولونية. [3] أما الناقل العصبي المثبط الرئيسي، GABA يصد على الإثارة في المخ، وصفت بأنها تتصرف مثل "الفرامل" على الدوائر العصبية في أوقات زيادة التوتر . [4] وبعد صدوره من النهايات العصبية GABAergic، فإنه يعمل على كل من GABA A و B GABA المستقبلات، مع وجود تأثير مثبط صافي. [5]
المستقبلات GABAA تنظم استثارة الدماغ والمسؤولة عن الآثار المثبطة متشابك فورية GABA و. [3] وترتبط مستويات منخفضة GABA مع القلق، والاكتئاب، والأرق والصرع، وقد تم تطوير الأدوية التي تستهدف مستقبلات GABA هذه. هناك العديد من الأدوية الصيدلانية والكحول والعقاقير ذات التأثير العقلي التي تنتج من مزيل القلق، مسكن، مضاد، والآثار المهدئة عن طريق تحوير GABA A نشاط مستقبلات أو من خلال إعاقة إعادة امتصاص GABA من قبل الناقل GABA (GAT) البروتينات. [3]
بالإضافة إلى تأثيره على الدماغ، وقد ثبت جرعات عالية من GABA (جرعة واحدة 5-10g) لممارسة تأثيرات على نظام الغدد الصماء، بما في ذلك زيادة في مستويات هرمون النمو البلازما، وعلى الرغم من أن الأهمية السريرية لهذه الآثار غير معروفة حاليا. [1]
التأثيرات تخليق GABA وظيفة

اضطرابات القلق والمزاج

وترتبط المستويات المنخفضة GABA مع القلق والإضطرابات المزاجية بما في ذلك الاكتئاب. وقد استخدمت الأدوية التي تستهدف GABA A مستقبلات للقلق والاكتئاب واضطرابات المزاج المرتبطة بها لعدة عقود.
تم العثور على العجز GABA A مستقبلات في مناطق معينة من الدماغ في المرضى الذين يعانون من اضطراب القلق العام، نوبات الهلع واضطراب ما بعد الصدمة. [6] وبالمثل، تظهر الأبحاث أن المرضى الذين يعانون من الاكتئاب المعرض انخفضت تركيزات الدماغ من GABA والتعديلات في GABA A المستقبلات، مع عجز أكثر وضوحا وجدت في المرضى الذين يعانون من أنواع فرعية الحزينة ومقاومة للعلاج الاكتئاب. [6]
وأكدت الدراسات السريرية باستخدام GABA في المعرض شكل إضافي أنه يساعد على الإسترخاء، ويزيد من موجات الدماغ ألفا، ويحسن المزاج، ويقلل من علامات الإجهاد، ويوفر النشاط مزيل القلق في كل من والأصحاء. [7، 8] ويبدو مكملات GABA أن يتصرف بسرعة، مع الآثار المفيدة ملحوظة في غضون 60 دقيقة.

اضطرابات النوم

نظرا لتأثيره على القلق والاسترخاء، GABA يظهر محتمل لعلاج اضطرابات النوم بما في ذلك الأرق. وتتركز GABA A المستقبلات في المهاد، وهي منطقة من الدماغ تشارك في تنظيم النوم. [9] العديد من المسكنات والأدوية المنومة الأدوية تستهدف مستقبلات GABA A هذه. ووجد صغير، والمحاكمة غير منشورة من 100mg الاستفادة من GABA التي انخفضت من النوم الكمون (الوقت الذي يستغرقه لتغفو) بنسبة 20٪، مع زيادة الوقت الذي ينفق الأفراد في نوم عميق بنفس النسبة. [1]

صرع

الآليات الكامنة وراء المقترح في المسببات المرضية لمرض الصرع تشمل الاختلالات العصبي (بما في ذلك نقص GABA)، وانخفاض تثبيط نشاط الخلايا العصبية والتغيرات الهيكلية التي تؤثر على استثارة الخلايا العصبية. [10]
وهناك عدد كبير من الأدوية المضادة للصرع تمارس صالحهم من خلال تعزيز GABA مباشر أو غير مباشر، بما في ذلك زيادة GABAergic تثبيط، مما يعوق امتصاص GABA وزيادة تركيزات GABA متشابك. [1، 11]
GABA، في تركيبة مع فسفاتيديل في (PS)، وقد استخدمت في التجارب السريرية لعلاج نوبات الصرع. وأظهرت الأبحاث الأولية أن مجموعة GABA-PS بالنظر في زيادة الجرعات للمرضى الذين يعانون من الصرع المقاوم للأدوية أدت إلى ذلك، انخفاض كبير تعتمد على الجرعة في نوبات الغياب، ولكن ليس في نوبات جزئية بسيطة أو معقدة. [12 تلقى] المرضى 1500mg، 2000mg أو 2500mg من GABA وعلى 300mg، 400mg أو 500MG من PS يوميا في زيادة العلاوات الشهرية لمدة ثلاثة أشهر. حاليا، ولم يثبت GABA وحده لإنتاج هذه النتائج الإيجابية، على الرغم من أن هناك ما يبرر إجراء مزيد من البحوث.

فيبروميالغيا ومتلازمة الألم

وقد لوحظ أن GABA يلعب دورا حاسما في انتقال الألم. وتشير البحوث إلى أن تركيزات أقل من GABA مما أدى إلى انتقال المثبطة انخفضت قد تلعب دورا في الفيزيولوجيا المرضية فيبروميالغيا وغيرها من متلازمات الألم المركزية. وكشفت الدراسة السريرية التي تم العثور عليها المرضى الذين يعانون من فيبروميالغيا أن يكون أقل من ذلك بكثير مستويات GABA في العزل الأمامي الأيمن مقارنة مع الاصحاء. [13]

الدراسات السريرية

يوفر GABA المرخي، مزيل القلق والآثار لتعزيز المناعة

خلفية: دراسة من جزئين للتحقيق في آثار مكملات GABA على الاسترخاء والحصانة أثناء الإجهاد.
المواضيع / الطريقة: شملت الدراسة 13 مشاركا واحد الأصحاء الذين الانتهاء من كل 3 اختبارات، 7 أيام على حدة. وسجلت موجات الدماغ عن طريق electroencephalograms (EEG) قبل تلقي العلاج، ومرة ​​أخرى في 0، 30 و 60 دقيقة بعد تناوله العلاج. دراسة اثنين من المتورطين 8 مشاركين رهاب المرتفعات (الخوف من المرتفعات) الذين عبروا جسر مع وقف التنفيذ، والذي تم استخدامه كحافز المجهدة. تم قياس اللعاب المناعي سكرتير (SIGA) مستويات (علامة من الاسترخاء، والإجهاد والاستجابة المناعية) قبل وأثناء وعند الانتهاء من معبر جسر.
التدخل: دراسة واحدة تلقى المشاركون المياه 200ML في أسبوع واحد، بالإضافة إلى المياه 200ML من 100mg GABA في الأسبوع 2 و 200ML المياه بالإضافة إلى من 200mg L-الثيانين في الأسبوع 3. دراسة تلقى اثنان من المشاركين GABA من 200mg أو وهمي قبل عبور الجسر المعلق.
النتائج: في دراسة واحدة، نتج إدارة GABA في زيادة كبيرة في موجات المخ ألفا، مقارنة مع الماء أو L-الثيانين، بينما تتناقص أيضا موجات بيتا، مما يدل على تأثير ملطف ومزيل القلق. في الدراسة الثانية، شهدت المشاركين تلقي GABA ارتفاع كبير في مستويات بشؤون اللعابية في نهاية الاختبار الجسر، في حين أن المشاركين يتلقون العلاج الوهمي انخفاض مستويات SIGA في نهاية الاختبار الجسر. وكانت آثار مزيل القلق وارتخاء من GABA واضحة في حدود 1 ساعة الإدارة واستخدامه لديه القدرة على تعزيز مناعة تحت ظروف ضاغطة.
عبده AM، Higashiguchi S، K هوري، وآخرون. الاسترخاء وتعزيز مناعة آثار حمض (GABA) إدارة الغاما غاما في البشر. Biofactors 2006؛ 26 (3): 201-208.

GABA يقلل من الإجهاد ويحسن المزاج خلال المهام العقلية

خلفية: لتقييم الآثار النفسية والفسيولوجية للGABA في البشر تحت الضغط النفسي.
شارك 63 من البالغين (28 ذكور، 35 إناث) في التعمية واحد، وهمي تسيطر عليها، دراسة كروس العشوائية على مدى يومين التجربة: المواضيع / الطريقة. تعهد المشاركون اختبارات الإجهاد العقلي والشخصي الانتهاء من مزاج الأمريكية (POMS). واستخدمت تسجيلات EEG لتحليل موجات الدماغ.
I ntervention: GABA من 100mg أو وهمي كل يوم من أيام الاختبارات (2 أيام).
النتائج: أنشطة EEG بما في ذلك ألفا الفرقة وموجات الدماغ الفرقة بيتا انخفضت تبعا لكميات مهمة الإجهاد العقلي، مشيرا إلى أن GABA الإجهاد تخفيف الناجمة عن المهام العقلية. وأشارت نتائج POMS لتأثير تحسين المزاج مع مكملات GABA، والتي استمرت حتى 90 دقيقة بعد تناوله.
يوتو A، Murao S، M موتوكي، وآخرون. تناول عن طريق الفم من حمض الغاما γ يؤثر المزاج وأنشطة الجهاز العصبي المركزي أثناء حالة شدد الناجمة عن المهام العقلية. الأحماض الأمينية 2012؛ 43 (3): 1331-1337.

غير متوازن GABAergic المشابك في التوحد

خلفية: GABA والغلوتامات هي الناقلات العصبية الرئيسية المثبطة ومثير في الدماغ البشري. هدفت هذه الدراسة إلى إلقاء الضوء على العلاقة بين glutamatergic / GABAergic الخلل والعصبية التهاب في المسببات المرضية لمرض التوحد.
المواضيع / الطريقة: مستويات البلازما من الغلوتامات، GABA والغلوتامات / GABA نسبة كعلامات من التحفيز الزائدة جنبا إلى جنب مع عامل نخر الورم ألفا (TNF-ألفا)، انترلوكين (IL) -6، انترفيرون جاما (IFN-غاما) ومضاد للفيروسات جاما تم تحديد -inducible البروتين (IFI16) كعلامات من العصبية التهاب في 20 مريضا يعانون من التوحد و 19 الاصحاء المطابقة بين الجنسين.
النتائج: تحليل النتائج وكشف الارتباط بين انخفاض مستويات GABA، neuroinflammation والغلوتامات التحفيز الزائدة. وتشير النتائج إلى أن التوحد هو اضطراب متشابك التنموي تتميز خلل في GABAergic ونقاط الاشتباك العصبي glutamatergic المقرر أن neuroinflammation.
الأنصاري A، آل العياضي L. GABAergic / الخلل glutamatergic نسبة إلى neuroinflammation المفرط في اضطرابات طيف التوحد. J Neuroinflammation 2014؛ 11 (1): 189.

مجموعة الجرعة وفقا لدراسات سريرية

التحذيرات وموانع

• لا ينصح أثناء الحمل أو الرضاعة. [1]
• GABA قد يقلل ضغط الدم لدى الأشخاص المصابين بارتفاع ضغط الدم. من الناحية النظرية، يصاحب ذلك من استخدام GABA والأدوية الخافضة للضغط قد يؤدي إلى انخفاض ضغط الدم. [2]
• استخدام بحذر في المرضى الذين يتناولون أدوية ناهض GABA الاصطناعية أو الأعشاب التي تتفاعل مع نظام GABAergic (على سبيل المثال Valeriana المخزنية، بيرفوراتوم). إذا كانت هناك حاجة مهدئ / آثار ارتخاء إضافية، بدء مكملات GABA ببطء وبجرعة منخفضة.
• على عكس العقاقير GABA ناهض الاصطناعية، GABA الطبيعي هو تقريبا من دون آثار جانبية. [1]

المراجع

• حمض الغاما غاما (GABA). Altern ميد القس 2007؛ 12 (3): 274-279. [PDF]
• GABA (حمض غاما الغاما). الطبيعية قاعدة بيانات الطب الشامل عام 2015. وشوهدت 8 أكتوبر 2015، www.naturaldatabase.com
• GABA. الطب الطبيعي كتاب عام 2014. وشوهدت 10 أكتوبر 2015، https://naturalmedicines.therapeuticresearch.com/
• BS أسابيع. مستحضرات المكملات الغذائية والأعشاب مقتطفات للاسترخاء وعمل مزيل القلق: Relarian. ميد العلوم MONIT 2009؛ 15 (11): RA256-62. [ملخص]
• سيلز GJ. آليات عمل الأدوية المضادة للصرع. جمعية الصرع عام 2013. شوهد 12 أكتوبر 2015، http://www.epilepsysociety.org.uk/sites/default/files/attachments/Chapter25Sills.pdf
• Luscher B، شين Q، ساهر N. وGABAergic العجز فرضية اضطراب اكتئابي. مول الطب النفسي عام 2011؛ ​​16 (4): 383-406. [النص الكامل]
• عبده AM، Higashiguchi S، K هوري، وآخرون. الاسترخاء وتعزيز مناعة آثار حمض (GABA) إدارة الغاما غاما في البشر. Biofactors 2006؛ 26 (3): 201-208. [ملخص]
• يوتو A، Murao S، M موتوكي، وآخرون. تناول عن طريق الفم من حمض الغاما γ يؤثر المزاج وأنشطة الجهاز العصبي المركزي أثناء حالة شدد الناجمة عن المهام العقلية. الأحماض الأمينية 2012؛ 43 (3): 1331-1337. [ملخص]
• [أرسر] BA. مستقبلات GABAA Extrasynaptic هي أهداف حاسمة للعقاقير المهدئة والمنومة. J كلين النوم ميد 2006؛ 2 (2): S12-18. [ملخص]
• باوتيستا C. اضطرابات في وظائف المخ. في: غروسمان SC، بورث CM. الفيزيولوجيا المرضية بورث ل: مفاهيم دول الصحية المتغيرة، أد 9TH (pp.489-524). فيلادلفيا: الترز كلوير الصحة | يبينكوت وليامز ويلكنز، 2014.
• Czapinski P، Blaszczyk B، Czuczwar SJ. آليات عمل الأدوية المضادة للصرع. داء الأعلى ميد تشيم 2005؛ 5 (1): 3-14. [ملخص]
• لوب C، E بيناسي، بو GP، وآخرون. تقييم أولي للتأثير GABA وفسفاتيديل في مرضى الصرع. الصرع الدقة 1987؛ 1 (3): 209-212. [ملخص]
• فورستر BR، بيترو M، Edden RA، وآخرون. خفض حمض الغاما ص الانعزالية في فيبروميالغيا. التهاب المفاصل المخاط 2012؛ 64 (2): 579-583. [النص الكامل]
• اينو K، شيراي T، Ochiai H، وآخرون. الدم الضغط لخفض تأثير الحليب المخمرة الرواية التي تحتوي على حمض الغاما غاما (GABA) في ارتفاع ضغط الدم خفيفة. يورو J كلين نوتر 2003؛ 57 (3): 490-495. [النص الكامل]

 

[رافت ابراهيم]

 

https://www.aacp.com/Pages.asp?AID=8...e=&page=C&UID=
خلفية: في الوقت الراهن، إلا الأدوية واحد (ريسبيريدون) هو FDA وافقت عليها لعلاج اضطرابات طيف التوحد (ASD). ربما لهذا السبب، واستخدام الرواية، غير تقليدية، وخارج التسمية علاجات لASD هو شائع، مع ما يصل إلى 74٪ من الأطفال الذين يعانون من التوحد باستخدام هذه العلاجات. ومع ذلك، الأطباء المعالجين وغالبا ما يجهل هذا الاستخدام.

تم إجراء بحث موسع المنهجي للقواعد بيانات علمية إلكترونية للتعرف على دراسات من رواية والعلاجات الناشئة عن ASD، بما في ذلك المكملات الغذائية، والوجبات الغذائية، والأدوية، والعلاجات غير بيولوجية: طرق. ثم تم تعيينه على درجة من التوصية ("العلمية") إلى كل العلاج باستخدام توجيهي القائمة على الأدلة التحقق من صحتها على النحو المبين في هذا الاستعراض:

A: بدعم من 2 على الأقل المحتملين التجارب العشوائية المضبوطة أو 1 مراجعة منهجية

B: المعتمدة لا يقل عن 1 RCT المحتملين أو 2 تسيطر المحاكمات غير عشوائية

C: المعتمدة لا يقل عن 1 المحاكمة التي تسيطر عليها غير عشوائية أو 2 قضية سلسلة

D: دراسات أو دراسات الإبلاغ أي تحسن تتعارض مقلق أو غير حاسمة

كما تم استعراض الآثار السلبية المحتملة لكل علاج.

النتائج: الصف A علاجات لASD تشمل الميلاتونين، مثبطات أستيل، النالتريكسون، والعلاج بالموسيقى. وتشمل العلاجات الصف B الكارنيتين، tetrahydrobiopterin، وفيتامين C، ألفا 2 منبهات الأدرينالية والعلاج بالأكسجين تحت الضغط، المناعة والعلاجات المضادة للالتهابات، والأوكسيتوسين، والعلاج الرؤية. وتشمل العلاجات الصف C لASD كارنوزين، الفيتامينات / مجمع المعدنية، بيراسيتام، والأحماض الدهنية غير المشبعة وفيتامين B6 / المغنيسيوم، والوجبات الغذائية القضاء، عملية إزالة معدن ثقيل، سيبروهيبتادين، فاموتيدين، مضادات الغلوتامات، والوخز بالإبر، وتدريب التكامل السمعي، والتدليك، وneurofeedback.

الاستنتاجات: ويشيع استخدام العلاجات استعرض لASD، ومعتمدة من قبل بعض تجارب سريرية عشوائية مستقبلية. وتشمل العلاجات الواعدة الميلاتونين، ومضادات الأكسدة، مثبطات أستيل، النالتريكسون، والعلاج بالموسيقى. وتعتبر كل من العلاجات استعرض حاليا خارج التسمية لASD (أي لم توافق FDA) وبعض يكون لها آثار ضارة. وهناك حاجة إلى مزيد من الدراسات استكشاف هذه العلاجات. يجب أن الأطباء علاج الأطفال مع ASD تجعل من الممارسة القياسية للاستفسار عن استخدام كل طفل ممكن من هذه الأنواع من العلاجات.

كلمات البحث: مرض التوحد، وملاحق، والوجبات الغذائية، والعلاج رواية

حوليات الطب النفسي الإكلينيكي 2009؛ 21 (3): 213-236
المقدمة

اضطراب التوحد (التوحد)، ومتلازمة اسبرجر، متلازمة ريت، واضطراب النمو المتفشي لا ينص على خلاف ذلك (PDD-NOS) يضم مجموعة غير متجانسة من الاضطرابات العصبية النمائية (غالبا ما تسمى اضطرابات طيف التوحد أو ASD) التي تم تعريفها سلوكيا وتتميز ضعف في الاتصالات والتفاعل الاجتماعي، جنبا إلى جنب مع تقييدا ​​ومتكررة behaviors.1 عدد الأطفال المصابين مع ASD زاد بشكل كبير خلال العقد الماضي، 2-4 وASD تؤثر حاليا ما يقدر ب 1 من 150 فردا في States.5 المتحدة ASD عموما تعتبر اضطرابات النمو العصبي "ثابت"، 6 دون أي علاج معروف ومع عدد قليل جدا من العلاجات التي أثبتت جدواها وفعالة. استخدام الدواء في الأطفال الذين يعانون من التوحد هو شائع، وتفيد العديد من الدراسات أن أكثر من 45٪ من الأطفال مع ASD يتم التعامل مع العقلية medication.7-10 حاليا، ريسبيريدون الوحيد هو FDA وافقت عليها لعلاج مرض التوحد (ل علاج أعراض التهيج)، 11 ولكن هذا الدواء لديه القدرة لeffects.12،13 سلبية خطيرة بسبب استخدام الرواية، غير تقليدية، و / أو خارج التسمية العلاج للأطفال الذين يعانون من التوحد في ازدياد والشائع الآن، 14 الأطباء المعالجين وغالبا ما يطلب من الأطفال مع ASD أن يصف أو تقديم المشورة حول هذه الأنواع من treatments.15

هذا الغرض من هذه المقالة الاستعراض هو جمع وتقييم البيانات خطيرة العلمية المنشورة المتعلقة الرواية والعلاجات الناشئة عن ASD اضطرابات مع أي علاجات بيولوجية واضحة أو محددة جيدا. وأجري البحث المنهجي للمجلات وجوجل الباحث العلمي من 1966 إلى أبريل 2009 لتحديد الدراسات ذات الصلة بجميع اللغات باستخدام البحث حيث التوحد أو التوحد أو تفشي أو PDD في كافة تركيبات مع العلاجات المذكورة في هذه المادة. تم إنشاء قائمة من العلاجات المحتملة من المخزون الذي تحتفظ به معهد بحوث التوحد (انظر الجدول 1)، جنبا إلى جنب مع دراسة مقالات المراجعة ومعرفة المؤلف من الأدب الطبي. وقد بحثت في المراجع المشار إليها في المادتين حددت أيضا لتحديد دراسات إضافية. يتم سرد كافة الدراسات ذات الصلة التي تم تحديدها (بما في ذلك تقارير الحالة) في هذه المراجعة. يرجع ذلك إلى عدد من الدراسات التي تمت مراجعتها، ومناقشة متعمقة لكل أمر غير ممكن. بالنسبة لبعض العلاجات، وقد حددت الدراسات الداعمة متعددة؛ ومع ذلك، كان بعض العلاجات إما توجد دراسات أو جدا وقد حددت بعض الدراسات. تم تقييم كل حددت الدراسة بشكل فردي أولا تحديد مستوى المقابلة من الأدلة ("مستوى الأدلة")، بدءا من 1a إلى 5، وذلك باستخدام المبادئ التوجيهية القائمة على الأدلة التحقق كما هو موضح في الجدول 2.16 استخدام هذه المبادئ التوجيهية أمر ضروري، لا سيما وأن بعض عشوائية مزدوجة التعمية، وأفادت وهمي تسيطر عليها (R-DBPC) دراسات في الأفراد مع ASD وهمي معدل الاستجابة تصل إلى 30٪ إلى 37٪ .17،18 أعلى مستوى الأدلة (مستوى 1A أو 1B) تم تعيينه ل مراجعة منهجية (SR) من تجارب عشوائية محكومة (المضبوطة) مع التجانس (بما في ذلك مراجعات كوكرين) أو المحتملين RCT ذات جودة عالية، في حين أن أدنى مستوى الأدلة (مستوى 4 أو 5) تم تعيينها لحالة التقارير أو الدراسات التي تعتمد على رأي الخبراء دون تقييم نقدي (انظر الجدول 2). بعد تقييم جميع الدراسات المحددة لكل معاملة، ثم المستمدة الصف توصية لكل معاملة، كما هو مبين في الجدول 3،16 تتراوح بين ألف (على أساس مستوى 1 دراسات) لD (مستوى 5 الأدلة، أو دراسات غير متناسقة مقلق أو غير حاسمة في أي مستوى أو دراسات إبلاغ أي تحسن). إذا تم تحديد أي دراسات للعلاج، تم تعيينه على درجة في الفئة N (أي دراسات). وتتلخص الدرجات المخصصة لكل معاملة في الجداول من 4 إلى 6. يتم العثور على ملخص من العلاجات وتأثيراتها على بعض السلوكيات التوحد في الجدول 7. تعتبر كل من العلاجات التي تم استعراضها في هذه المادة حاليا خارج التسمية (أي ليس FDA وافق عليها) لASD.

تقع العديد من العلاجات استعرض في فئة الطب التكميلي والبديل (CAM). تم تعريف CAM باسم "مجال واسع من الموارد الشفاء الذي يشمل جميع النظم الصحية، والطرائق، والممارسات والنظريات والمعتقدات المصاحبة لها، وغيرها من تلك جوهري في النظام الصحي السائد سياسيا من مجتمع أو ثقافة معينة في فترة تاريخية معينة ". وأيد 19 بعض العلاجات CAM بشكل جيد من قبل الأدبيات الطبية وتصبح في نهاية المطاف practices.15 الطبية القياسية استخدام CAM هو شائع حتى في عادة تطوير children.20 في استطلاع واحد من 376 الأسر التي لديها طفل ذوي الاحتياجات الخاصة، وانتشار كان استخدام CAM عالية، وخصوصا عندما كان يعتقد أن شرط أن تكون "nonrepairable" (استخدام 76٪) 0.21 استخدام CAM في الأطفال الذين يعانون من التوحد هو شائع في الولايات المتحدة، إذ أبلغ بعض الدراسات أن ما يصل إلى 52٪ إلى 74 وقد تلقى٪ هذه العلاجات، 22،23 مقارنة مع 24٪ إلى 28٪ من عادة تطوير children.20،22 استخدام CAM في الأطفال الذين يعانون من التوحد مرتفع أيضا في مناطق أخرى من العالم، مثل كندا (استخدام 52٪) وهونغ كونغ (استخدام 41٪) 0.24 معهد أبحاث التوحد يتتبع آثار طرق العلاج المختلفة في الأطفال الذين يعانون من التوحد، بما في ذلك المكملات الغذائية والأدوية، وجمعت وصنفت بيانات من أكثر من 26،000 المسوحات الوالدين؛ يتم سرد أعلى العلاجات CAM 20 (باستثناء النظام الغذائي) من قبل الآباء (عن طريق النسبة المئوية للأطفال في المرتبة تحسين) حسب تصنيفها في جدول تقرير 1،25 معظم الآباء والأمهات أن العلاجات CAM إما مفيدة أو غير فعالة، ولكن عموما غير ضارة، وذكرت الدراسة 23 رغم أن واحدة أن 9 ٪ من الأطفال مع ASD يستخدمون CAM treatments.26 تكون ضارة في كثير من الحالات، الطبيب المعالج للطفل ليست على علم بأي الأطباء CAM usage.15 الذين يشجعون استخدام CAM في الأطفال الذين يعانون من التوحد هي الأكثر احتمالا أن يوصي العلاجات مثل الفيتامينات المتعددة، الأحماض الدهنية الأساسية، والميلاتونين، وprobiotics.27

في استطلاع واحد، ومعظم الآباء والأمهات مع الأطفال المعوقين تنمويا في المرتبة معرفة الطبيب الرئيسي في الطفل عن CAM بأنه "أسوأ من محايد." 28 وأفاد مسح وطني من 745 أطباء الأطفال أن 87٪ قد طلب من قبل الآباء والأمهات حول العلاجات CAM، ولكن أقل من 5 ورأى٪ "مطلعة جدا" حول هذه treatments.29 توصي الأكاديمية الأمريكية لطب الأطفال من اللجنة بشأن الأطفال المعوقين أن التدخلات CAM سيتم مناقشتها بطريقة nonjudgmental وأن الطبيب المعالج يقدم "المشورة المتوازنة حول الخيارات العلاجية" والمعلومات حول المخاطر المحتملة. يجب أن 15 أطباء محاولة للعمل مع أسر الذين يختارون لاستخدام العلاجات CAM، حتى لو كان هناك بعض الاختلاف في المعاملة philosophy.27،30 وعلاوة على ذلك، يجب أن الأطباء تجعل من الممارسة القياسية للاستفسار عن استخدام CAM في الأطفال مع ASD وللحفاظ على حوار مفتوح حول هذه العلاجات والأدلة المؤيدة usage.14،27 ​​CAM بما أن العديد من الأطباء قد لا يكون على بينة من نوع الرواية، غير تقليدية، و / أو خارج التسمية العلاجات أن بعض الأطفال الذين يعانون من التوحد يتلقون، تستعرض هذه المقالة أكثر العلاجات الشائعة المستخدمة حاليا.

بعض العلاجات في هذه المراجعة هي التغذية القائمة. تزايد الاهتمام في العلاجات الغذائية لبعض الاضطرابات النفسية في السنوات الأخيرة، وبعض المكملات الغذائية، مثل حامض الفوليك والأحماض الدهنية غير المشبعة، 31 التيروزين، التريبتوفان، وcholinelecithin، تم الإبلاغ عن 32 لتحسين بعض الاضطرابات النفسية، مثل الاكتئاب الرئيسي ، disorders.33 اضطراب الهوس الاكتئابي، والقلق العديد من الدراسات DBPC في وأفادت الأطفال تحسينات كبيرة في الإدراك مع استخدام بعض المكملات الغذائية ومع زيادة تناول الفواكه والخضراوات عادة النامية، حتى بالنسبة للأطفال الذين هم nourished.34- جيدا وقد تم اقتراح 38 كل من المواد الغذائية الرئيسية (مثل الأحماض الأمينية والدهون) والمغذيات الدقيقة (على سبيل المثال، والفيتامينات والمعادن) انها علاج لASD، وخاصة منذ ظهور بعض النقص في التغذية في الأطفال الذين يعانون من التوحد لتكون شائعة نسبيا. على سبيل المثال، أفادت دراسة واحدة من 138 طفلا يعانون من التوحد و 298 أطفال النامية عادة أن مجموعة ASD كان أكبر بكثير من مشاكل التغذية وأكلوا كميات أقل من الفواكه والخضار والبروتين، وعلى الرغم من أن تناسب أذواقهم الغذائية الأسرة ظهرت للتأثير selection.39 الغذاء وفي دراسة أخرى ل 46 طفلا يعانون من التوحد، وكان كثير عدم كفاية المدخول اليومي من الألياف، والكالسيوم، والحديد، وفيتامين D.40

العديد من العلاجات التي تم استعراضها في هذه المقالة أيضا تقليل الالتهاب و / أو الاكسدة. الأدلة الأخيرة إلى تورط الاكسدة في العديد من الاضطرابات النفسية، بما في ذلك 41،42 ASD.43-47 وعلاوة على ذلك، يبدو أن المشاكل المناعية والالتهابات إلى أن تكون مشتركة في بعض disorders.48 النفسية عدة دراسات حديثة في الأفراد مع ASD وقد ذكرت الأدلة على inflammation49 الشلل تظهر مشاكل GI inflammation.54-57 -53 والجهاز الهضمي (GI) مثل الجزر المعدي المعوي (GER) أو التهاب المريء، والإمساك المزمن أو بداغة، عدم تحمل اللاكتوز، والقيود الغذائية لتكون شائعة نسبيا في الأطفال الذين يعانون من التوحد. على سبيل المثال، في دراسة واحدة من 36 طفلا يعانون من مرض التوحد أشار إلى المعدة والأمعاء لمشاكل الجهاز الهضمي، وكان ارتداد المريء موجودة في 69٪، التهاب المعدة المزمن في 42٪، دودنتس المزمن في 67٪، وانخفاض الأمعاء الكربوهيدرات نشاط الإنزيم الهضمي في 58٪. ذكرت 58 دراسة أخرى من 50 طفلا يعانون من التوحد و50 طفلا النامية عادة أن 70٪ من مجموعة ASD كان لها تاريخ من مشاكل الجهاز الهضمي، مقارنة مع 28٪ من المجموعة الضابطة (P <0.001) 0.59 مشاكل GI المشتركة التي وجدت في واحد وشملت الدراسة 112 من الأطفال المصابين بالتوحد أشار إلى أمراض الجهاز الهضمي والإسهال (28٪)، gaseousness (60٪)، والنفخ (38٪)، ألم في البطن (38٪)، وانحشار البراز (19٪)؛ وكان 80٪ من الأطفال الذين يعانون من التوحد مشكلة تتعلق GI واحد على الأقل، وكانت هذه المشاكل بشكل ملحوظ أكثر شيوعا في هذه المجموعة، مقارنة مع 44 عادة تطوير siblings.60 عدة دراسات أن يكون كما ذكرت dysbiosis في الأطفال الذين يعانون من التوحد، بما في ذلك مستويات أعلى من species61-63 كلوستريديا والخميرة (المبيضات البيض) 64 في الجهاز الهضمي. بعض الأعراض التي تنسب عادة إلى "سلوك التوحد" قد يكون في الواقع مظاهر هذه المشاكل الطبية الأساسية. على سبيل المثال، والسلوك المضر بالنفس أو العدوان يمكن أن يكون سببه الألم ذات الصلة GER في بعض الأطفال مع ASD، وعلاج هذه الحالة الطبية يمكن أن تخفف من هذه المشكلة behavior.65

يتم تصنيف كل معاملة استعرض في هذه المقالة إما (على سبيل المثال، المكملات الغذائية، والوجبات الغذائية القضاء، والأدوية) "البيولوجية" أو "غير بيولوجية" (على سبيل المثال، neurofeedback والتدليك) وترد 0.66 العلاجات حسب التصنيف (البيولوجية تليها غير بيولوجية) ، ثم مستوى الأدلة (A إلى D)، تليها بالترتيب الأبجدي. هذا الاستعراض لا تدرس التحليل السلوكي التطبيقي (ABA)، والتي ثبت أن تكون فعالة في الأطفال الذين يعانون من ASD.23،30

الجدول 1

أفضل 20 علاجات الطب التكميلية والبديلة للأطفال مع ASD، باستثناء الوجبات الغذائية *
المستوى علاج Bettera (٪) لا changeb (٪) Worsec (٪) رقم responsesd العلمية
1 عملية إزالة معدن ثقيل 74 23 3 803 C
2 MB12 حقن 67 26 7 170 D
3 الميلاتونين 65 27 8 1105 A
4 B12 (عن طريق الفم) 61 32 7 98 D
5 HBOT 60 34 5 134 B
6 الانزيمات الهاضمة 58 39 3 1502 D
7 الأحماض الدهنية 56 41 2 1169 C
8 MB12 (الأنف) 56 29 15 48 D
9 زيت كبد سمك القد 51 45 4 1681 C
10 فيتامين B6 (حزب العمال التقدمي) 51 37 12 529 C
11 الزنك 51 47 2 1989 N
12 B6 / المغنيسيوم 48 48 4 6634 C
13 حمض الفوليك 43 53 4 1955 D
14 فيتامين B3 43 52 4 927 N
15 فيتامين C 43 55 2 2397 B
16 DMG 42 51 8 5807 D
17 مجموعة طلعت مصطفى 42 43 15 803 D
18 نقل عامل 42 48 10 174 D
19 فيتامين (أ) 41 57 2 1127 D
20 5 بالمشاركه 40 47 13 343 D
5-هتب: 5-هيدروكسيتريبتوفان. DMG: ثنائي مثيل. HBOT: العلاج بالأكسجين تحت الضغط. MB12: methylcobalamin. مجموعة طلعت مصطفى: trimethylglycine.
* كما تم تصنيفه من قبل ما يقرب من 26،000 تقارير الوالدين (عن طريق النسبة المئوية للأطفال تحسين) وفقا لتصنيف معهد أبحاث التوحد، جنبا إلى جنب مع 25 درجة من توصية مستمدة في هذا الاستعراض.
aPercentage الأطفال أن الوالدين في المرتبة كما تحسنت مع العلاج
bPercentage الأطفال أن الوالدين في المرتبة وجود أي تغييرات واضحة مع العلاج
cPercentage الأطفال أن الوالدين في المرتبة بأنه أسوأ مع العلاج
dNumber الوالدين الاستجابة على الاستبيان بشأن المعاملة
النسب المئوية قد لا تضيف ما يصل الى 100٪ بسبب التقريب.

الجدول 2

مستويات الأدلة
مستوى الوصف
1A ريال أو التحليل التلوي من التجارب العشوائية مع تجانس أو مراجعة كوكرين مع نتائج إيجابية
1B المحتملين RCT عالية الجودة
2A SR من الجماعة (المحتملين، غير عشوائية) دراسات مع تجانس
فوج 2B فردية (غير عشوائية المحتملين،) دراسة أو منخفضة الجودة RCT
3A ريال من الحالات والشواهد (بأثر رجعي) دراسات مع تجانس
مراقبة حالة 3B الفردية الدراسة (بأثر رجعي)
4 سلسلة القضية أو تقارير
5 رأي الخبراء دون تقييم نقدي أو على أساس علم وظائف الأعضاء أو مقاعد البدلاء البحوث
RCT: العشوائية تسيطر المحاكمة. SR: مراجعة منهجية.
المصدر: مقتبس من المرجع 16.

الجدول 3

الصف توصية
الصف الوصف
دراسة 1A مستوى واحد على الأقل أو دراستين مستوى 1B
B واحد على الأقل مستوى 1B، 2A، 3A أو الدراسة، أو اثنين أو مستوى 2B 3B الدراسات
C مستوى 2B أو الدراسة 3B، أو اثنين من مستوى واحد على الأقل 4 دراسات
D مستوى 5 الأدلة، أو مقلق الدراسات غير متناسقة أو غير حاسمة في أي مستوى، أو دراسات إبلاغ أي تحسن
N لا حددت الدراسات
المصدر: مقتبس من المرجع 16.

الجدول 4

الصف توصية للمكملات الغذائية والوجبات الغذائية في ASD
العلاج الصف
المكملات الغذائية
الميلاتونين A
الكارنيتين B
Tetrahydrobiopterin B
فيتامين C B
كارنوزين C
الفيتامينات / المعادن مجمع C
بيراسيتام C
غير المشبعة الأحماض الدهنية C
فيتامين B6 والمغنيسيوم C
حمض الفوليك وفيتامين B12 D
الجنكه بيلوبا D
إينوزيتول D
الحديد D
البروبيوتيك وأنزيمات الهضم D
نبتة سانت جون D
مجموعة طلعت مصطفى وDMG D
التربتوفان و5 بالمشاركه D
الفيتامينات A و D و D الكالسيوم
السيلينيوم N
الزنك N
الوجبات الغذائية
حمية التخلص C
5-هتب: 5-هيدروكسيتريبتوفان. ASD: اضطرابات طيف التوحد. DMG: ثنائي مثيل. مجموعة طلعت مصطفى: trimethylglycine.

الجدول 5

الصف توصية للرواية والأدوية الناشئة في ASD
العلاج الصف
مثبطات أستيل A
النالتريكسون A
ألفا-2 منبهات الأدرينالية B
HBOT B
المناعة / العلاجات المضادة للالتهابات B
الأوكسيتوسين B
عملية إزالة معدن ثقيل C
سيبروهيبتادين C
فاموتيدين C
مضادات الغلوتامات C
المضادات الحيوية D
سيكريتين D
ASD: اضطرابات طيف التوحد. HBOT: العلاج بالأكسجين تحت الضغط.

الجدول 6

الصف توصية لعلاجات غير بيولوجية في ASD
العلاج الصف
العلاج بالموسيقى A
العلاج رؤية B
الوخز بالإبر C
تدريب التكامل السمعي C
التدليك واليوغا C
Neurofeedback C
المثلية D
المبهم مشجعا العصبية D
ASD: اضطرابات طيف التوحد.

الجدول 7

ملخص من العلاجات التي تؤدي إلى تحسينات في بعض السلوكيات التوحد التوحد
خطاب / الاتصالات كارنيتين
كارنوزين
GFCF النظام الغذائي
ألفا-2 منبهات الأدرينالية
سيبروهيبتادين
مضادات الغلوتامات
AIT Tetrahydrobiopterin
B6 / المغنيسيوم
منظمة العفو الدولية
HBOT
فاموتيدين
العلاج بالموسيقى
Neurofeedback
التوحد كارنوزين السلوك
B6 / المغنيسيوم
البروبيوتيك
GFCF النظام الغذائي
ألفا-2 منبهات الأدرينالية
سيبروهيبتادين
رؤية العلاج بيراسيتام
حمض الفوليك / B12
الانزيمات الهاضمة
منظمة العفو الدولية
HBOT
العلاج بالموسيقى
التفاعل الاجتماعي Tetrahydrobiopterin
B6 / المغنيسيوم
منظمة العفو الدولية
HBOT
فاموتيدين
تدليك كارنوزين
GFCF النظام الغذائي
النالتريكسون
الأوكسيتوسين
مضادات الغلوتامات
Neurofeedback
الرتابة فيتامين C
B6 / المغنيسيوم
ألفا-2 منبهات الأدرينالية
فاموتيدين
AIT أوميغا 3 الدهنية
النالتريكسون
سيبروهيبتادين
مضادات الغلوتامات
تدليك
فرط النشاط أوميغا 3 الدهنية
منظمة العفو الدولية
ألفا-2 منبهات الأدرينالية
مضادات الغلوتامات
تدليك المغنيسيوم
النالتريكسون
عملية إزالة معدن ثقيل
AIT
العين الاتصال Tetrahydrobiopterin
منظمة العفو الدولية
فاموتيدين أوميغا 3 الدهنية
HBOT
العلاج بالموسيقى
الاهتمام أوميغا 3 الدهنية
ألفا-2 منبهات الأدرينالية
العلاج بالموسيقى AI
مضادات الغلوتامات
النوم الميلاتونين
الفيتامينات
ألفا-2 منبهات الأدرينالية كارنيتين
حديد
منظمة العفو الدولية: مثبطات أستيل. AIT: تدريب التكامل السمعي. GFCF: خال من الغلوتين خالية من الكازين النظام الغذائي. HBOT: العلاج بالأكسجين تحت الضغط.
العلاجات البيولوجية: المكملات الغذائية

الميلاتونين (الصف A). تم الإبلاغ عن خلل في وظائف الأعضاء من الميلاتونين في بعض الأفراد مع ASD، بما في ذلك غير طبيعي patterns.67،68 الإيقاعية الميلاتونين في دراسة واحدة من 14 طفلا يعانون من مرض التوحد و 20 طفلا النامية عادة، كانت مجموعة التوحد أقل بكثير يعني تركيز الميلاتونين في الدم ( P <0.001) 0.68 وفي دراسة أخرى، كان إفراز البول ليلا من 6 sulphatoxymelatonin (المستقلب الرئيسي من الميلاتونين) أقل من ذلك بكثير في 49 طفلا يعانون من مرض التوحد، مقارنة مع 88 طفلا النامية عادة (P = 0.0001) وارتبط مع ضعف في مهارات التواصل اللفظي واللعب (P <0.05 على حد سواء) في التوحد group.69 أفادت دراسة حديثة أن الأشكال في الجين ASMT، الذي يشفر لإنزيم آخر يشارك في تركيب الميلاتونين، كانت أكثر شيوعا في 250 الأطفال الذين يعانون من التوحد، مقارنة مع 255 أطفال النامية عادة (P = 0.0006). وترتبط هذه الأشكال مع انخفضت بشكل ملحوظ مستويات الميلاتونين في الدم في مجموعة ASD (P <0.00001)، واقترح الباحثون ان مستوى الميلاتونين منخفضة قد يكون عامل خطر لتطوير ASD.70

وقد تبين أن استخدام الميلاتونين لتحسين النوم لدى بعض الأطفال مع ASD. على سبيل المثال، أفادت دراسة استعادية واحد من 100 طفل يعانون من اضطرابات النوم المزمنة والعصبية أو عجز في النمو (بما في ذلك عدد غير محدد مع التوحد) أن الإفراج السريع الميلاتونين (2،5 حتي 10 ملغ في وقت النوم) تحسن النوم في أكثر من 80٪ من الأطفال، دون أي آثار سلبية أو observed.71 التسامح في تقرير حالة واحدة لطفل يبلغ من العمر 14 عاما يعانون من مرض التوحد، 6 ملغ من الميلاتونين تعطى في 11:00 لفترات طويلة الكلي من النوم ليلا وتحسين النوم واليقظة rhythm.72 في مفتوح ، تدار الميلاتونين في وقت النوم قاد الدراسة -label من 50 شخصا يعانون من اضطراب النوم واضطراب في النمو، بما في ذلك 27 يعانون من مرض التوحد في تحسين النوم في 84٪. الآثار السلبية خفيفة، بما في ذلك النعاس الصباح، صحوة ليلا، والإثارة قبل الذهاب إلى النوم لوحظت، في 34٪ 0.73 في دراسة المفتوح التسمية 2 أسابيع من 15 طفلا يعانون من متلازمة اسبرجر، كان الميلاتونين (3 ملغ في وقت النوم) جيدا التسامح وتحسن كبير في أنماط النوم وانخفاض الكمون النوم (P = 0.002) 0.74 في دراسة المفتوح التسمية آخر 25 طفلا يعانون من مرض التوحد ومشاكل النوم، واستخدام تسيطر عليها الافراج عن الميلاتونين (3 ملغ في وقت النوم) النوم تحسنت في كل من الأطفال دون أي آثار سلبية لوحظت (P <0.001) 0.75 عندما أوقف الميلاتونين، 16 من الأطفال عادوا إلى مشاكل في النوم المعالجة وتحسين مرة أخرى عندما أعيد الميلاتونين. واستمرت التحسينات مع الميلاتونين في كلا 12- و 24 شهرا المتابعة ups.75 في دراسة استعادية من 107 طفل يعانون من التوحد الذي حصل الميلاتونين (،75-6 ملغ في وقت النوم) للأرق، كان 85٪ من الأطفال تحسينات في نوم. طفل واحد فقط قد تفاقم من النوم مع الميلاتونين وكان 3 أطفال آخرين الآثار السلبية خفيفة، بما في ذلك النعاس الصباح أو زيادة التبول. وقد لوحظ عدم وجود زيادة في المضبوطات في مجموعة فرعية من الأطفال الذين لديهم أيضا epilepsy.76 أحد R-DBPC كروس الدراسة من 51 طفلا يعانون من اضطراب النمو العصبي (بما في ذلك 16 طفلا مع ASD) ومشاكل في النوم درس استخدام الميلاتونين (5 ملغ controlled- الإفراج) تعطى في وقت النوم. تحسن النوم في 47 من 51 طفلا عندما تعامل مع الميلاتونين، بما في ذلك إدخال تحسينات على طول النوم (P <0.01) والكمون النوم (P <0.01)، مقارنة مع placebo.77 2 شهرا R-DBPC دراسة كروس آخر من 11 أظهر الأطفال الذين يعانون من التوحد أن الميلاتونين (5 ملغ في وقت النوم) تحسنت بشكل ملحوظ الكمون النوم قبل ما يقرب من 0.9 ساعة (P <0.05)، انخفض الاستيقاظ ليلا (P <0.05)، وزيادة مدة النوم بنسبة 1.1 ساعة (P <0.05) بالمقارنة مع placebo.78 أخيرا، أفاد استخدام الميلاتونين (3 ملغ في وقت النوم) في دراسة كروس آخر 4 أسابيع R-DBPC من 18 طفلا يعانون من مرض التوحد و / أو متلازمة X الهشة التي الميلاتونين زيادة متوسط ​​مدة النوم (P =. 02)، الكمون النوم (P = 0.0001)، والنوم يصيب الساعة (P = 0.02)، مقارنة مع placebo.79

الكارنيتين (الصف B). في دراسة استعادية من 100 طفل يعانون من مرض التوحد، ومستويات الكارنيتين المصل حرة ومجموع انخفاضا كبيرا (P <0.001)، مما يشير إلى dysfunction.80 الميتوكوندريا خفيفة في دراسة للرقابة لمدة 6 أشهر من 21 شخصا يعانون من متلازمة ريت، مكملات مع L- الكارنيتين (100 ملغ / كغ / د) أدى إلى تحسينات في كفاءة النوم (P = 0.027)، ومستوى الطاقة (P <0.005)، ومهارات الاتصال (P = 0.004)، والكلام التعبيري (P = 0.011)، مقارنة مع 62 طفلا يعانون من متلازمة ريت الذين لم يتلقوا L-كارنيتين. وتشمل الآثار السلبية الإسهال ومريب odor.81 الجسم في 4 أشهر R-DBPC دراسة L-كارنيتين (100 ملغ / كغ / د) في 35 الأفراد المصابين بمتلازمة ريت، تم العثور على تحسينات في الرفاه العام (P <. 02) وفي فموي وجهي / السلوك الحركي في الجهاز التنفسي (P <0.02)، مقارنة مع الدواء الوهمي. وتشمل الآثار السلبية براز رخو ومريب odor.82 الجسم

Tetrahydrobiopterin (الصف B). في دراسة للرقابة من 20 طفلا يعانون من مرض التوحد و 10 أطفال النامية عادة، السائل النخاعي (CSF) كانت تركيزات tetrahydrobiopterin (BH4) أقل بكثير في المجموعة التوحد (P <0.01) تم العثور على 0.83 التحسينات السريرية في اللغة والتفاعل الاجتماعي في 7 من 14 طفلا يعانون من مرض التوحد في دراسة المفتوح التسمية 24 أسبوعا باستخدام BH4 في 1 ملغ / كغ / د. كانت معاملة جيدة tolerated.84 في دراسة المفتوح التسمية آخر 136 الأفراد المصابين بالتوحد، بقيادة BH4 (1-3 ملغ / كغ / د) لتحسينات معتدلة أو ملحوظة في 49٪ 0.85 BH4 (3 ملغ / كغ / يوم) وأفادت التقارير أيضا إلى تحسين التفاعل الاجتماعي، والتواصل البصري، والمفردات، وأدى إلى زيادة مستويات CSF BH4 بعد العلاج لمدة 3 أشهر في دراسة المفتوح التسمية من 6 أطفال المصابين بالتوحد الذين كان مبدئيا مستويات منخفضة من CSF BH4.86 ان R- ذكرت DBPC كروس الدراسة من 12 طفلا يعانون من مرض التوحد وانخفاض CSF مستويات BH4 تحسن كبير في التفاعل الاجتماعي (P = 0.04) بعد 6 أشهر من العلاج مع BH4 (3 ملغ / كغ / د)، مقارنة مع الدواء الوهمي. وتشمل الآثار السلبية التحريض ومشاكل النوم، والتي كانت مشابهة في عدد الرحلات من placebo.87 في دراسة DBPC أخرى من 82 أفراد ياباني يعانون من مرض التوحد، مكملات مع BH4 في 1 ملغ / كغ / د أدى إلى معتدلة إلى تحسن ملحوظ في 54٪، مقارنة مع 31٪ الذين تلقوا العلاج الوهمي (

P <0.05) 0.88









فيتامين C (الصف B). في الآونة الأخيرة، كانت 2 تقارير حالة الاسقربوط لدى الأطفال المصابين بالتوحد reported.89،90 دراسة كروس R-DBPC 30 أسبوع من فيتامين C (حوالي 114 ملغ / كغ / د) في 18 طفلا يعانون من مرض التوحد وأفادت تحسينات كبيرة في السلوكيات النمطية ( P <0.05)، بما في ذلك هزاز، سرعة، الخفقان، ودوراني، مقارنة مع الدواء الوهمي. لم تكن هناك آثار سلبية noted.91

كارنوزين (الصف C). في دراسة R-DBPC من 31 طفلا يعانون من التوحد، واستخدام 800 ملغ من L-كارنوزين يوميا لمدة 8 أسابيع وكان جيد التحمل، وأدى إلى تحسينات كبيرة في سلوك المصابين بالتوحد، والتنشئة الاجتماعية، والاتصالات، والمفردات (P <0.05 ل لكل منهما)، مقارنة مع أي تحسن ملحوظ على placebo.92

الفيتامينات المعقدة المعدنية / (الصف C). استخدام تكملة الفيتامينات / المعادن قد يكون مفيدا في الأطفال الذين يعانون من التوحد للمساعدة في ضمان الحصة الغذائية الكافية. في 3 أشهر R-DBPC دراسة 20 طفلا يعانون من التوحد، واستخدام بعض الفيتامينات / المعادن (التي تحتوي على مستويات معتدلة من الفيتامينات B، وحامض الفوليك، والكالسيوم، والزنك، والسيلينيوم، وفيتامينات A، D و E) تحسن النوم (P = 0.03) وGI الأعراض (P = 0.03) على الانطباع العام السريري (CGI) جدول مقارنة مع الدواء الوهمي (على الرغم من أن النتيجة CGI الإجمالية لم تتحسن)؛ لم تكن هناك آثار سلبية observed.93

بيراسيتام (الصف C). وتكهن بعض المحققين أن بيراسيتام (أ منشط الذهن) قد يكون مفيدا في ASD.94 وفي دراسة R-DBPC من 40 طفلا يعانون من مرض التوحد، بيراسيتام (800 ملغ يوميا) جنبا إلى جنب لمدة 10 أسابيع مع ريسبيريدون كان جيد التحمل، وأدى إلى تحسينات كبيرة في سلوك التوحد (P <0.0001)، مقارنة مع ريسبيريدون جنبا إلى جنب مع placebo.95

الأحماض الدهنية غير المشبعة (الصف C). الأحماض الدهنية ارتبط نقص (PUFA) مع ضعف القراءة والهجاء، والسمعية الذاكرة العاملة و 96 و تورطت في العديد من الاضطرابات النمائية العصبية، بما في ذلك نقص الانتباه / فرط النشاط (ADHD)، ASD، عسر القراءة، خلل الأداء، والتنموية disorder.97،98 التنسيق في دراسة واحدة من 100 فتى مع المشاكل السلوكية والتعلم، وتلك مع انخفاض البلازما كان أوميغا 3 الأحماض الدهنية تركيزات أكبر بكثير من المشاكل السلوكية، بما في ذلك فرط النشاط (P = 0.002)، نوبات الغضب (P = 0.002 )، مشاكل في النوم (P = 0.02)، والتعلم مشاكل (P = 0.005)، بما في ذلك مشاكل مع الرياضيات (P = 0.05)، مقارنة مع أولئك المشاركين في الدراسة مع حمض الدهني العالي levels.99

يبدو أوميغا 3 الأحماض الدهنية نقص للعب دور في تطوير ASD. تم العثور على مستويات أقل من البلازما أوميغا 3 الأحماض الدهنية في دراسة واحدة من 15 أطفال المصابين بالتوحد مقارنة مع 18 طفلا المتخلفين عقليا (P = 0.032) 0.100 ذكرت دراسة أخرى من 94 طفلا يعانون من مرض التوحد و 10 يعانون من متلازمة اسبرجر أن خلايا الدم الحمراء وكانت غشاء أوميغا 3 مستويات الأحماض الدهنية أقل (P <0.05) و6 أوميغا الأحماض الدهنية أعلى (P <0.05) مقارنة مع 71 عادة تطوير children.101 ومع ذلك، فإن دراسة أصغر من 16 طفلا يعانون من مرض التوحد و 22 تتطور عادة وأفاد الأطفال أن حمض الدوكوساهيكسانويك البلازما (DHA) المستويات كانت أعلى بكثير في المجموعة التوحد (P = 0.02) 0.102 وأخيرا، في دراسة أجريت على 861 طفل يعانون من مرض التوحد و 123 أطفال النامية عادة، لوحظ وجود خطر أعلى بكثير من مرض التوحد النامية في الأطفال الذين لم يتلقوا DHA وحمض الأراكيدونيك عن طريق الرضاعة الطبيعية (نسبة الأرجحية [أو] = 2.5؛ فاصل الثقة 95٪ [CI]، 1،4-4،4) أو في حليب الأطفال (OR = 4.4؛ 95٪ CI، 1،2-15،7 ) 0،103

مكملات مع PUFA قد تتحسن الأعراض في ASD. في تقرير حالة واحدة، أدى استخدام حمض الدهني (EPA) وغيرها من الأحماض الدهنية أوميغا 3 (مجموعها 3 ز / د) إلى "القضاء التام" القلق والاضطراب في طفل يبلغ من العمر 11 عاما مع autism.104 في دراسة 3 أشهر المفتوح التسمية من 18 طفلا يعانون من مرض التوحد، مع مكملات أوميجا 3 (247 ملغم / د) و أوميجا 6 (40 ملغ / د) أدت الأحماض الدهنية إلى تحسينات كبيرة في المهارات اللغوية (P <0.01) وفي العديد من المجالات الأخرى. ومع ذلك، كان لا نظير هذه الدراسة reviewed.105 إضافة 860 ملغ من EPA و 300 ملغ من DHA في 2 الأطفال الذين يعانون من متلازمة اسبرجر و 7 أطفال المصابين بالتوحد أدى إلى تحسينات (كما صنفت من قبل الآباء) في الصحة العامة، والنوم، والتركيز، الاتصال بالعين، والعدوان، وفرط النشاط في دراسة غير المنضبط. ومع ذلك، كان العديد من الأطفال أيضا زيادة في problems.101 السلوكية في دراسة المفتوح التسمية من 19 البالغين الذين يعانون من التوحد الشديد، أدى استخدام 930 ملغ من EPA و DHA خلال فترة 6 أسابيع إلى أي improvements.106 واضح ومع ذلك، ولوحظت بعض التحسينات في الفترة posttreatment، مما يشير إلى احتمال وجود effect.106 علاج تأخر في دراسة المفتوح التسمية مدة 3 أشهر من 30 طفلا يعانون من مرض التوحد و 30 طفلا النامية عادة، والدم أوميغا 3 مستويات الأحماض الدهنية كانت أقل من ذلك بكثير في المجموعة التوحد (P <0.0001). (240 ملغم / د، EPA 52 ملغ / د، جاما لينوليك حامض 48 ملغ / د، وحامض الأراكيدونيك 20 ملغ / د DHA) أدى مكملات مع PUFA إلى تحسينات السلوكية في 66٪ من الأطفال الذين يعانون من التوحد (P <0.0001 )، بما في ذلك تحسين التواصل البصري، واللغة، والتركيز، وskills.107 السيارات في دراسة R-DBPC من 13 طفلا يعانون من مرض التوحد، مكملات 6 أسابيع مع ما يقرب من 1.5 غرام / د من أوميغا 3 الأحماض الدهنية (EPA 840 ملغ و DHA 700 ملغ) كان جيد التحمل، وشوهدت تحسينات في فرط النشاط والرتابة (مع حجم تأثير كبير لكل منهما) مقارنة مع الدواء الوهمي. ومع ذلك، فإن التحسينات لم إحصائيا significant.108 وجدت مراجعة منهجية حديثة أدلة كافية لتحديد ما إذا كان العلاج مع أوميغا 3 الأحماض الدهنية غير فعالة لASD.109

فيتامين B6 والمغنيسيوم (الصف C). وقد أفادت بعض الدراسات في الأطفال الذين يعانون من التوحد أن مستويات فيتامين B6 البلازما عالية في بعض الأحيان، 110 في حين أن تركيزات شكل نشط من فيتامين B6 (بيريدكسال-5'فوسفات أو حزب العمال التقدمي) غالبا ما تكون منخفضة، مما يشير إلى وجود مشكلة في تحويل فيتامين B6 ل لPLP.93 وعلاوة على ذلك، تم الإبلاغ عن انخفاض مستويات البلازما من المغنيسيوم في دراسة واحدة من 29 طفلا يعانون من التوحد مقارنة مع 14 طفلا النامية عادة (P = 0.02) 0.111 ذكرت Bonish أولا أن البيريدوكسين (فيتامين B6) أدت الإدارة إلى تحسينات في خطاب وأشارت اللغة في بعض الأطفال الذين يعانون من ASD.112 Rimland أن الجمع بين فيتامين B6 مع المغنيسيوم (B6 / ملغ) التخفيف من بعض الآثار السلبية رأينا مع B6 وحده، بما في ذلك سلس البول، والتهيج، وحساسية للصوت، وأدى إلى improvements.113 إضافية وأبلغ ما مجموعه 7 دراسات المفتوح التسمية تحسينات كبيرة في الكلام، والتفاعل الاجتماعي، والسلوكيات التوحد الأخرى في الأطفال الذين يعانون من التوحد باستخدام B6 / Mg.112،114-119 معظم هذه الدراسات استخدام جرعات عالية من فيتامين B6 (30 ملغ / كغ / د ) والمغنيسيوم (10-15 ملغ / كغ / يوم). وعلاوة على ذلك، أفاد 7 التجارب مزدوجة التعمية، كروس أيضا تحسينات كبيرة في الكلام، والتفاعل الاجتماعي، والسلوكيات التوحد أخرى باستخدام B6 / المغنيسيوم في الأطفال الذين يعانون ASD.120-126 في بعض من هذه الدراسات، انخفضت مستويات حمض البول هوموفانيليك مع B6 / مغ العلاج، مما يشير إلى أن improved.115،116،123 التمثيل الغذائي الدوبامين في دراسات أخرى، المتوسط ​​أثار إمكانات تحسين، مما يشير إلى تحسن تجهيز ability.116،118،123 الحسية

بالإضافة إلى ذلك، 3 دراسات R-DBPC صغيرة تقييم B6 / العلاج المغنيسيوم في ASD. في دراسة واحدة R-DBPC، تم علاج 15 طفلا يعانون من مرض التوحد خلال فترة 35 أسبوع مع 2.9 ملغ / كغ / يوميا من B6 و 1.4 ملغ / كغ / د من غلوكونات المغنيسيوم، مع أي تغيير في سلوكيات التوحد وحظ، مقارنة مع placebo127 ؛ ومع ذلك، كانت هذه الجرعات أقل بكثير من تلك التي استخدمت في دراسات أخرى. وفي دراسة أخرى لمدة 10 أسابيع R-DBPC من 12 طفلا يعانون من مرض التوحد، واستخدام B6 (30 ملغ / كغ / د) والمغنيسيوم (10 ملغ / كغ / د) كان جيد التحمل، ولكن لم يتم العثور على المنافع، مقارنة مع الدواء الوهمي 0،128 أخيرا، في دراسة R-DBPC من 15 طفلا يعانون من التوحد، واستخدام B6 4 أسابيع (100-200 ملغ / د) أدى إلى تحسينات كبيرة في معدل الذكاء اللفظي مقارنة مع الدواء الوهمي (P = 0.01). لم تكن هناك آثار سلبية observed.129 مراجعة كوكرين الأخيرة، التي استبعدت جميع الدراسات باستثناء 3 دراسات R-DBPC، ذكرت 127-129 أن هذه الدراسات كانت المشاكل المنهجية وأحجام عينة صغيرة، وأن استخدام B6 / المغنيسيوم لتحسين المصابين بالتوحد لا يمكن supported.130 السلوك منذ أن تم نشر هذا الاستعراض، ذكرت دراسة لمدة 6 أشهر من 33 طفلا مع باضطراب النمو (PDD) و 36 أطفال النامية عادة أن متوسط ​​مستوى المغنيسيوم intraerythrocyte كان أقل من ذلك بكثير في الأطفال الذين يعانون من PDD مقارنة مع الضوابط (P <0.05). وعلاوة على ذلك، أدى استخدام B6 (0.6 ملغ / كغ / د) والمغنيسيوم (6 ملغ / كغ / د) إلى تحسينات كبيرة في أعراض التوحد في 70٪ من مجموعة PDD (P <0.0001)، بما في ذلك التفاعل الاجتماعي والتواصل والرتابة. لم يلاحظ أي آثار سلبية، وعندما توقف B6 / العلاج المغنيسيوم، عاد سلوك غير مرغوب في غضون بضعة الحذر weeks.131 يجب أن تمارس عند استخدام جرعات عالية من المغنيسيوم، كما ذكرت فرط مغنيزيوم الدم فادح في أحد الأطفال الذين تلقوا جرعات كبيرة nonautistic من الفيتامينات وminerals.132

حمض الفوليك وفيتامين B12 (الصف D). في دراسة للرقابة من 12 طفلا يعانون من التوحد، وقد تم قياس حمض الميثيل البولية في 8 أطفال ووجد أن أعلى بكثير بالمقارنة مع 14 طفلا النامية عادة (P = 0.003). وتتوافق هذه النتيجة مع ظيفية deficiency.133 فيتامين B12 في دراسة أجريت على 43 أشخاص يعانون من مرض التوحد، ومستويات المصل والأحمر حمض الفوليك خلايا الدم وتركيزات مصل B12 قورنت طبيعية مع 77 children.134 التحكم في 6 أشهر R-DBPC دراسة كروس من حمض الفوليك عن طريق الفم (1.5 ملغ / كغ / يوم) في 4 الأطفال مع كل من التوحد ومتلازمة X الهشة، وعلاج جيد التحمل، وكان 3 أطفال خفيفة الى معتدلة تحسن في سلوك المصابين بالتوحد عندما على حمض الفوليك مقارنة مع الدواء الوهمي. كان الطفل الآخر لا change.135 وضوحا وذكرت دراسة أخرى من 20 طفلا يعانون من مرض التوحد و33 طفلا النامية عادة أن حمض الشفوي الفولينيك (800 ميكروغرام / د) وtrimethylglycine (TMG، 1000 ملغ / د) لمدة 3 أشهر، جنبا إلى جنب مع إضافة الحقن تحت الجلد من methylcobalamin (MB12، و 75 ميكروغرام / كغ مرتين في الأسبوع) لمدة 1 شهر، زاد مجموع مستويات الجلوتاثيون البلازما في المجموعة التوحد (P = 0.016). لا آثار سلبية لوحظت. ولوحظت أيضا تحسينات السريرية في الكلام والإدراك من قبل الطبيب المعالج ولكن لم تكن رسميا quantified.45 أظهرت دراسة المفتوح التسمية من 13 طفلا يعانون من مرض التوحد الذي MB12 (25-30 ميكروغرام / كغ / د) لمدة تصل إلى 25 شهرا كان جيدا التسامح وأدى إلى تحسينات في IQ (P <0.05) والسلوكيات التوحد (P <0.001) 0.136 في دراسة المفتوح التسمية آخر من 40 طفلا يعانون من مرض التوحد، واستخدام الحقن تحت الجلد من MB12 (75 ميكروغرام / كغ مرتين الأسبوع) وحمض الفولينيك عن طريق الفم (400 ميكروغرام مرتين يوميا) أدت إلى زيادات كبيرة في السيستين والجلوتاثيون (P <0.001 على حد سواء) وكذلك تحسينات كبيرة في سلوك التوحد كما يقاس على مقياس السلوك التكيفي فينلاند (VABS) 0،137

وقد ركزت العديد من الدراسات التي أجريت مؤخرا على نقص حمض الفوليك الدماغي (CFD) كسبب للأعراض التوحد أو ASD. على سبيل المثال، في دراسة واحدة من 7 أطفال مع CFD، كان كل انحسار النمو، و 5 اجتمع المعايير التشخيصية لASD.138 في تقرير حالة واحدة، وهي فتاة تبلغ من العمر 6 سنوات مع CFD والميزات التوحد لديهم مستويات منخفضة من CSF 5-ميثيل تتراهيدروفولات (5 MTHF، النموذج النشط بيولوجيا من حمض الفوليك)؛ كانت الفولات في الدم ومستويات فيتامين B12 العادي. العلاج بحمض الفولينيك (0،5-1 ملغ / كغ / د) عكس النتائج CSF وأدى إلى تحسينات في skills.139 السيارات في دراسة أكبر من 25 طفلا يعانون من مرض التوحد المنخفض تعمل، وكانت مستويات CSF من 5 MTHF انخفاض في 23 كانت مرتفعة الأطفال، والمصل الأجسام المضادة لمستقبلات حمض الفوليك في 19 طفلا. عن طريق الفم مكملات حمض الفولينيك (1-3 ملغ / كغ / د) عكس النتائج CSF وأدى إلى الشفاء السريري (جزئيا أو كليا) بعد 12 شهرا من treatment.140 وفي دراسة أخرى من 24 طفلا مع CFD، وإزالة حليب البقر من النظام الغذائي في 12 طفلا انخفضت بشكل ملحوظ إنتاج الأجسام المضادة لمستقبلات حمض الفوليك (P = 0.012)، وشوهدت تحسينات في بعض الأطفال في ترنح، وتردد الاستيلاء، والاتصالات، والرتابة. التتر الأجسام المضادة زيادة عندما أعيد الحليب (P = 0.013). في المجموعة الضابطة من 12 طفلا الذين لم قضاء على حليب البقر من وجباتهم الغذائية، وعيار الأجسام المضادة ارتفع بشكل ملحوظ خلال فترة 10- إلى 24 شهرا (P = 0.001) 0.141

الجنكه بيلوبا (الصف D). في دراسة المفتوح التسمية واحد، أعطيت 3 البالغين الذين يعانون من التوحد 200 ملغم / د الجنكة بيلوبا لمدة 4 أسابيع. وقد لوحظت خفيفة، وإدخال تحسينات nonsignificant في التهيج، وفرط النشاط، التواصل البصري، والكلام كما صنفت من قبل الآباء والأمهات على المرجعية السلوك الشاذ (ABC)؛ لا وحظت التحسينات الكبيرة التي clinicians.142

إينوزيتول (الصف D). 8 أسابيع محاكمة DBPC كروس من إينوزيتول (200 ملغ / كغ / د) في 9 أطفال المصابين بالتوحد وجدت أي فائدة مقارنة مع placebo.143

الحديد (الصف D). ارتبط نقص الحديد في مهدها مع المعرفية الأكثر فقرا، والسيارات، والاجتماعي / الأداء العاطفي في مرحلة الطفولة في وقت لاحق وadolescence.144 في دراسة أجريت على 5398 طفل النامي عادة، ويرتبط نقص الحديد بشكل ملحوظ مع انخفاض درجات الرياضيات الموحدة (OR = 2.3؛ 95 وقد تبين أن٪ CI، 1،1-4،4) 0.145 مكملات مع كبريتات الحديدوز في الفتيات نقص الحديد إلى حد كبير تحسين التعلم والذاكرة اللفظية مقارنة مع الدواء الوهمي (P <0.02) 0.146 نقص الحديد يبدو أنه شائع في ASD، والمصل فيريتين منخفضة في عدد الأطفال الذين يعانون من التوحد، 147148 والذي يرجع إلى غير كافي intake.149 الحديد الغذائي في معظم الحالات في دراسة المفتوح التسمية 8 أسابيع من 33 طفلا يعانون من التوحد، والتغذية التكميلية بالحديد (6 ملغ / كغ / د ) تحسن كبير في النوم وزيادة مستويات الفيرتين متوسط. وتشمل الآثار السلبية الإمساك، براز رخو، وتلطيخ الأسنان. تم العثور على وجود علاقة عكسية بين مستويات الفيريتين ومشاكل الاتصالات، مقاسا جدول تشخيص التوحد مراقبة (ADOS) (P = 0.009). وبعبارة أخرى، ارتبطت مشاكل الاتصالات أشد مع مستويات الفيرتين أقل. واقترح الباحثون أن الأطفال الذين يعانون من التوحد يجب فحص روتيني لdeficiency.150 الحديد

البروبيوتيك وأنزيمات الهضم (الصف D). لأن بعض الأطفال الذين يعانون من التوحد قد انخفض إنتاج enzymes58،60 الجهاز الهضمي وزيادة dysbiosis، وتكهن 151 بعض المحققين أن مكملات البروبيوتيك مع والإنزيمات الهضمية يمكن beneficial.152،153 في تقرير حالة واحدة، وكان الطفل البالغ من العمر 6 سنوات مع مرض التوحد التحسينات في سلوك التوحد مع البروبيوتيك وتفاقم السلوك عندما كانت البروبيوتيك removed.154 في دراسة المفتوح التسمية لمدة 12 أسبوعا إلى 46 من الأفراد مع ASD، مع مكملات الإنزيمات الهضمية عن طريق الفم أدى إلى تحسن كبير في سلوكيات التوحد متعددة (P <0.05) ؛ وتشمل الآثار السلبية وفرط النشاط وstools.152 فضفاضة

نبتة سانت جون (بيرفوراتوم) (الصف D). في دراسة المفتوح التسمية واحد، وقدمت 3 البالغين الذين يعانون من التوحد نبتة سانت جون (20 ملغ / يوم لمدة 4 أسابيع). وقد لوحظ تحسن كبير في التهيج، وفرط النشاط، التواصل البصري، والكلام (P <0.05 لكل منهما)، كما صنفت من قبل الآباء والأمهات على ABC؛ كما صنفت من قبل الأطباء، لم تكن هناك تحسينات كبيرة found.155

Trimethylglycine وثنائي مثيل (الصف D). أفادت دراسة DBPC كروس 14 أسبوعا من 8 أفراد المصابين بالتوحد لا فائدة كبيرة مع جرعة منخفضة من ثنائي مثيل (DMG، ما يقرب من 4-6 ملغ / كغ / د) مقارنة مع placebo.156 A أكبر 4 أسابيع الدراسة R-DBPC من تظاهر 37 طفلا يعانون من التوحد لا تحسينات كبيرة مع جرعة أعلى من DMG (حوالي 6-10 ملغ / كغ / د) مقارنة مع placebo.157 كما نوقش سابقا، واستخدام مجموعة طلعت مصطفى، جنبا إلى جنب مع حمض الفولينيك وMB12، وزيادة مستويات الجلوتاثيون في الأطفال الذين يعانون من التوحد ويبدو أن تحسين الكلام وcognition.45

التربتوفان و5-هيدروكسيتريبتوفان (الصف D). في دراسة كروس R-DBPC من 20 البالغين الذين يعانون من التوحد، وارتبط استنزاف التربتوفان من النظام الغذائي لمدة 24 ساعة مع انخفاض ملحوظ في مستويات تريبتوفان البلازما (P <0.001) وزيادة كبيرة في الرتابة (P <0.05) ، بما في ذلك الخفقان، هزاز، اصبع القدم المشي، سرعة، والاعتداء على الذات، مقارنة مع اتباع نظام غذائي يحتوي على صورية tryptophan.158 وفي دراسة DBPC كروس-20 أسبوع من 3 أطفال المصابين بالتوحد، L-5-هيدروكسيتريبتوفان (5 بالمشاركه. أعطيت 50-500 ملغ / د) في تركيبة مع كاربيدوبا (100 ملغم / د)، وأي فائدة ملموسة لوحظ مقارنة عندما تلقى الأطفال placebo.159

الفيتامينات A، D، والكالسيوم (الصف D). في دراسة واحدة من 46 طفلا يعانون من التوحد و31 طفلا النامية عادة، كانت مجموعة ASD على كمية الكالسيوم أقل يعني (P <0.05) 0.40 بسبب المدخول الغذائي المحدود، كما تم وصفها نقص الفيتامينات A و D في بعض الأطفال الذين يعانون من ASD. وتكهن بعض الباحثين أن نقص فيتامين D قد تلعب دورا في autism.160 على سبيل المثال، في تقرير حالة واحدة، وهو صبي يبلغ من العمر 15 عاما مع ASD الذين لديهم نقص كلس الدم ومستويات غير قابلة للكشف فيتامين D وضعت في وقت لاحق rickets.161 طفل آخر مع وضعت التوحد نقص كلس الدم، تقرحات القرنية، والكساح بعد تناول البطاطا المقلية فقط والماء لعدة years.162 تم عكس التشوهات الجسدية والكيميائية الحيوية في هذا الطفل مع المكملات الغذائية، بما في ذلك الفيتامينات A و D.162 صبي يبلغ من العمر 5 سنوات مع التوحد الذين يتناولون لحم الخنزير المقدد والوحيدة عنبية الكعك ويشربون كان فقط كوول الاسعاف منخفضة جدا من فيتامين A مستوى، وبعد ذلك وضع قرحة القرنية وتحسين بفيتامين A supplementation.163 صبي يبلغ من العمر 8 سنوات أخرى مع التوحد xerophthalmia.163 هذه المشاكل التي أكل البطاطا المقلية فقط خلال فترة 4 سنوات وكان فيتامين قابل للكشف تقريبا مستوى وضعت جفاف الملتحمة وفقدان البصر، وكلاهما تحسنت بشكل كبير مع فيتامين A supplementation.164 في سلسلة حالة واحدة، وكان 60 طفلا يعانون من مرض التوحد "دراماتيكية وفورية تحسينات "على اتصال العين، والاهتمام، والتنشئة الاجتماعية، واللغة مع استخدام فيتامين (أ) (3500 وحدة دولية / د) وبيثانيكول (12.5 ملغ مرتين يوميا)؛ لم تكن هناك آثار سلبية noted.165 ومع ذلك، فيتامين وقد وصف التسمم في الأطفال nonautistic البالغ من العمر 4 سنوات يتلقون العلاج الفيتامين الفائق، 166 وطفل يبلغ من العمر 3 سنوات مع مرض التوحد الذي كان يأخذ 100،000 إلى 150،000 وحدة دولية يوميا من فيتامين وعلى مدى فترة 6 أشهر وضعت فيتامين (أ) سمية وhypercalcemia.167 لذلك، في الأطفال الذين يعانون من التوحد، وفيتامين ينبغي رصدها وتناول بعناية. لم يتم تحديد أي دراسات على استخدام الكالسيوم أو فيتامين D كعلاج للASD.

السيلينيوم (الصف N). ذكرت دراسة واحدة من 20 طفلا يعانون من مرض التوحد و 15 طفلا النامية عادة ما يكون أقل بكثير متوسط ​​مستوى السيلينيوم خلايا الدم الحمراء (P <0.0006) في group.168 التوحد ومع ذلك، تم تحديد توجد دراسات على استخدام السيلينيوم كعلاج للASD .

الزنك (الصف N). وقد ارتبطت مستويات الزنك المنخفضة في الأطفال النامية عادة ما يعانون من مشاكل في التعلم والتخلف العقلي، وhyperactivity.169 في دراسة واحدة، تم الإبلاغ عن انخفاض كبير في مستويات الزنك في البلازما 21 طفلا يعانون من اضطراب العناد الشارد، مقارنة مع 24 طفلا النامية عادة (P <. 05) ذكرت 0،170 دراستان صغيرتان التحكم في مستويات الزنك مماثلة في الأطفال الذين يعانون من التوحد مقارنة مع controls.168،171 ومع ذلك، ذكرت دراسة للرقابة أكبر من 45 طفلا يعانون من مرض التوحد و41 طفلا النامية عادة أن مستويات البلازما وكرات الدم الحمراء الزنك كانت أقل بشكل ملحوظ في مرض التوحد وقد تم تحديد مجموعة (P <0.05) 0.172 أية دراسات على استخدام الزنك لعلاج الأفراد مع ASD.
العلاجات البيولوجية: وجبات القضاء

حمية القضاء (الصف C). في عام 1979، اقترح Panksepp أولا أن الكازين والجلوتين سوء الامتصاص قد تلعب دورا السببية في التوحد عن طريق تغيير العصبي metabolism.173 ومنذ ذلك الحين، وقد درست العديد من الدراسات الآليات الممكنة من الغلوتين والكازين التعصب في الأطفال الذين يعانون من التوحد. في دراسة أجريت على 40 طفلا يعانون من مرض التوحد، والأجسام المضادة للبن butyrophilin اقترح عبر تفاعلت مع 9 مستضدات الخلايا العصبية محددة مختلفة بالمقارنة مع 40 طفلا النامية عادة (P <0.001)، والمحققون هذا عبر التفاعل يمكن أن يسهم في المناعة الذاتية في وgroup.174 التوحد وفي دراسة أخرى من 50 طفلا يعانون من مرض التوحد، 44٪ إنتاج الأجسام المضادة مفتش ضد غليادين والكازين، مقارنة مع 12٪ من الأطفال النامية عادة (P <0.0001)؛ وارتبط هذا إنتاج الأجسام المضادة مع ردود فعل المناعة الذاتية كبيرة في التوحد ذكرت group.175 دراسة واحدة من 50 طفلا يعانون من مرض التوحد و50 طفلا النامية عادة أن 42٪ من مجموعة التوحد أنتجت الأجسام المضادة مفتش لغليادين الببتيدات، مقارنة مع 16٪ من الضوابط (P <0.0001)، وهذه الأجسام المضادة أيضا عبر رد فعل مع الببتيدات العصبية للدماغ وخلايا (رد فعل P <0.003) 0.176 غليادين الببتيد مع بعض peptidases والتي يسببها تشكيل الأجسام المضادة في دراسة أخرى من 50 طفلا يعانون من مرض التوحد (P <. 001)، الذي اقترح الباحثون "قد يؤدي إلى التقلبات neuroimmune والمناعة الذاتية." 177 وفي دراسة شملت 72 طفلا يعانون من التوحد و41 طفلا النامية عادة، والتعرض للالببتيدات الغذائية من الحليب غليادين والبقر كان مرتبطا بشكل مستقل مع زيادة إنتاج السيتوكينات proinflammatory ، بما في ذلك الإنترفيرون γ وعامل نخر الورم-α (TNF-α)، من خلايا الدم وحيدات النوى المحيطية في المجموعة ASD مقارنة مع مجموعة التحكم (P <0.02)؛ كان يعتقد هذا التعرض للمساهمة في زيادة GI التهاب في group.178 ASD وفي دراسة أخرى من 109 طفل يعانون من التوحد، مع تلك الأعراض المعدية المعوية (75 طفلا) تنتج أكثر بكثير TNF-α من خلايا الدم وحيدات النوى المحيطية بعد التعرض لبروتين حليب البقر (P <0.005) وغليادين (P <0.02)، مقارنة مع 19 طفلا النامية عادة. كان أكثر ما لوحظ هذا رد فعل على غليادين في الأطفال ASD في الأطفال الذين لديهم أيضا stools.64 فضفاضة في دراسة أجريت على 21 طفلا يعانون من التوحد، وتلك على (GFCF) النظام الغذائي وخالية من الكازين خالية من الغلوتين كان أقل-TNF α- إنتاج الخلايا في الغشاء المخاطي للقولون مقارنة مع الأطفال الذين لا استثناءات الغذائية (P <0.05) 0.179 وفي دراسة استعادية واحد من 103 طفل يعانون من التوحد و29 طفلا النامية عادة استهلاك حليب البقر ويرتبط بشكل كبير مع الإمساك (P <0.01 ) في group.180 ASD أخيرا، تجدر الإشارة إلى أن دراسة استعادية من 150 طفلا يعانون من التوحد وجدت 3 أضعاف ارتفاع معدل انتشار مرض الاضطرابات الهضمية مما كانت عليه في عدد من الأطفال العام؛ اقترح الباحثون أن جميع الأطفال ASD يجب فحص لمرض الاضطرابات الهضمية، بغض النظر عن وجود أو عدم الأعراض المعدية المعوية هي present.181 منذ الاختبار المناسب لمرض الاضطرابات الهضمية يتطلب التعرض المستمر لالغلوتين، ينبغي النظر في الاختبارات المعملية لمرض الاضطرابات الهضمية قبل وضع الطفل على القيود الغذائية.

وقد حقق العديد من الدراسات آثار القيود الغذائية على سلوكيات معينة في الأطفال الذين يعانون من التوحد. في دراسة لمدة 8 أسابيع من 36 طفلا يعانون من مرض التوحد، أدى إلى القضاء على الأطعمة الحساسية (على النحو الذي يحدده اختبار الجلد إيجابية) إلى تحسينات كبيرة في سلوكيات التوحد (P <0.05) وتفاقم هذه السلوكيات عندما يعيد الأطعمة الحساسية ذكرت إحدى الدراسات 0.182 فتح التسمية من اتباع نظام غذائي الكيتون في 30 طفلا يعانون من التوحد مع السلوك أن 18 طفلا (60٪) لديهم مختلف التحسينات (P <0.001)، بما في ذلك التفاعل الاجتماعي، الرتابة، وفرط النشاط، والتعاون، والتعلم على مدى 6 -month period.183 تقرير حالة الطفل البالغ من العمر 8 سنوات مع مرض التوحد، الذي تم رصد مستمر في غرفة العلاج لمدة 31 يوما متتالية، وجدت أن إعادة إدخال بعض الأطعمة (بما في ذلك القمح والذرة ومنتجات الألبان) بعد وقد تم القضاء على جميع المواد الغذائية لمدة 6 أيام (الطفل شرب الماء فقط خلال هذه الأيام 6) أدى إلى التدهور الخطير للسلوك المصابين بالتوحد، بما في ذلك فرط النشاط، والضحك غير المنضبط، والسلوك المضطرب (مثل الصراخ، العض، والأشياء رمي) في 0،184 ، وقد لوحظت تقرير حالة أخرى لطفل يبلغ من العمر 6 سنوات مع مرض التوحد تحسينات في السلوك مع القضاء على الغلوتين والكازين من diet.154 في دراسة واحدة من 7 أطفال المصابين بالتوحد، لم يلاحظ أي فوائد كبيرة مع الأخذ نظام غذائي خال من الغلوتين على period.185 لمدة 6 أشهر ولكن، 6 دراسات المفتوح التسمية (كل الالتحاق 15-70 الأطفال مع ASD) أن القضاء على الغلوتين و / أو الكازين من النظام الغذائي للطفل (أكثر من 2 شهر إلى سنة 1 فترة) ذكرت التحسينات السريرية كبيرة في السلوك، بما في ذلك الكلام التعبيري، والاهتمام، والتنسيق، وفرط النشاط، وsleep.182،186-190 ومع ذلك، فقد لاحظ باحثون آخرون أن بعض هذه الدراسات لديها flaws.191 المنهجية في دراسة طبية حديثة من 479 آباء طفل يعانون من مرض التوحد، وكان 155 طفلا حاولت اتباع نظام غذائي GFCF. ذكرت 51٪ من الآباء أن طفلهم شهدت تحسينات السلوكية مع استخدام هذا النظام الغذائي. وكان 10٪ تفاقم السلوك على هذا diet.192 في العشوائية، واحد الأعمى، دراسة للرقابة من 20 طفلا يعانون من التوحد، وضعت 10 من الأطفال على اتباع نظام غذائي GFCF و10 آخرين تناولوا طعاما عاديا. كان الأطفال على اتباع نظام غذائي GFCF تحسينات كبيرة على مدى فترة 12 شهرا في الاهتمام، والتنشئة الاجتماعية، والاتصالات، والإدراك (P <0.05 لكل منهما) مقارنة مع الأطفال الذين تناولوا diet.193 الطبيعي A، دراسة كروس مزدوجة التعمية من 15 طفلا يعانون من التوحد الإبلاغ عن أي تحسينات كبيرة في حين كان الأطفال على اتباع نظام غذائي GFCF لمدة 6 أسابيع، مقارنة مع اتباع نظام غذائي طبيعي لمدة 6 أسابيع، و 194 ولكن هذه الفترة الزمنية قد تكون قصيرة جدا لمراقبة تغيرات كبيرة، وكان أفراد عينة الدراسة صغيرة نسبيا. مراجعة كوكرين مؤخرا دراسة النظام الغذائي GFCF في ASD لا يمكن إجراء التحليل التلوي ولكن كان قادرا على بيانات الدراسة بركة. وأفاد استعراض تحسينات في الصفات العامة التوحد (P = 0.001)، والعزلة الاجتماعية (P = 0.002)، والاتصالات العام والتفاعل (P = 0.006) في الأطفال الذين يعانون من التوحد الذي حصل على نظام غذائي GFCF مقارنة مع اتباع نظام غذائي السيطرة. لم يتم تحديد أي نتائج ضارة، وأوصى الباحثون تجارب أكبر للرقابة، 195 والتي هي حاليا في الدراسات حمية progress.191 في الأطفال يمكن أن يكون من الصعب القيام بها، ولكن درست دراسة حديثة عن 52 طفلا يعانون من مرض التوحد جدوى النظام الغذائي GFCF وذكرت التي كان معظم الأطفال على استعداد لتناول الأطعمة التي لا تحتوي على الغلوتين وهناك حاجة casein.196 دراسات إضافية لتقييم فعالية النظام الغذائي المقيد (بما في ذلك الوجبات الغذائية GFCF) في الأطفال الذين يعانون من التوحد وتحديد الأطفال التي تستجيب لهذه الوجبات.

الأطفال الذين يعانون من التوحد الذي يتم وضعها على حمية مقيدة بحاجة إشراف وثيق لضمان الحصة الغذائية الكافية. على سبيل المثال، في دراسة استعادية واحدة من 36 طفلا يعانون من التوحد، كان هناك اتجاه للأطفال على نظام غذائي GFCF (10 طفلا) أن يكون أقل البلازما مستويات الأحماض الأمينية الأساسية، بما في ذلك التربتوفان والتيروزين، مقارنة مع الأطفال على اتباع نظام غذائي غير المقيد (26 الأطفال) ومع 24 children.197 السيطرة تأخر في النمو وفي دراسة أخرى غير المنضبط المحتملين من 75 طفلا يعانون من التوحد، أفيد انخفاض سماكة العظام القشرية، مقارنة مع مجموعة المرجعية القياسية. وهذه النتيجة أكثر وضوحا في الأطفال الذين كانوا على اتباع نظام غذائي مقيد الكازين، والتي عادة ما يرتبط مع انخفاض intake.198 الكالسيوم
العلاجات البيولوجية: الأدوية

مثبطات أستيل (الصف A). وقد وصفت العجز في وظيفة الدماغ الكوليني في بعض الأفراد مع واختبرت دراسات عديدة autism.199 استخدام مثبطات أستيل، بما في ذلك rivastigmine، donepezil، وgalantamine في الأطفال الذين يعانون من التوحد. في دراسة المفتوح التسمية لمدة 12 أسبوعا إلى 32 من الأطفال المصابين بالتوحد، واستخدام rivastigmine (0،4-0،8 ملغ مرتين يوميا) أدت إلى تحسن كبير في الخطاب والسلوك التعبيري التوحد الكلي (P = 0.001). وتشمل الآثار السلبية والغثيان، والإسهال، والتهيج، وhyperactivity.200

وأفادت دراسة استعادية من donepezil في 8 أطفال المصابين بالتوحد تحسينات في التهيج وفرط النشاط في 4 من children.201 في دراسة المفتوح التسمية لمدة 12 أسبوعا من donepezil (2،5-5 ملغ / د) في 25 طفلا يعانون من التوحد، وكانت التحسينات وجدت في الكلام التعبيري (P = 0.032)، مع زيادة متوسط ​​في خطاب 8 months.202 وفي دراسة R-DBPC من 43 طفلا يعانون من التوحد، واستخدام donepezil 6 أسابيع (1،25 حتي 2،5 ملغ / د) أدى إلى تحسينات في معبر (P = 0.044) واللغة الاستقبالية (P = 0.002) وانخفاض في سلوك التوحد الكلي (P = 0.004) مقارنة مع الدواء الوهمي. كان التأثير السلبي الأكثر شيوعا lability.203 المزاج

استخدام galantamine (4 ملغ / د) تعزيز اللغة التعبيرية في دراسة المفتوح التسمية من 3 البالغين الذين يعانون من autism.204 في مدة 12 أسبوعا، ودراسة المفتوح التسمية آخر 13 طفلا يعانون من مرض التوحد، galantamine (4-24 ملغ / د ) كان جيد التحمل، وأدى إلى تحسينات كبيرة في التهيج (P = 0.03)، والانسحاب الاجتماعي (P = 0.01)، والغفلة (P = 0.02) كما صنفت من قبل والديه؛ انخفاض في الغضب (P = 0.03)، وسلوك التوحد (P = 0.001) وقد لوحظ أيضا clinicians.205 في دراسة كروس R-DBPC من 20 طفلا يعانون من مرض التوحد، والمعاملة مع galantamine كان جيد التحمل، وأدى إلى تحسينات في التهيج (P = 0.039)، وفرط النشاط (P = 0.038)، والعين الاتصال (P = 0.049)، والكلام غير اللائق (P = 0.045) مقارنة مع placebo.206

النالتريكسون (الصف A). وأفادت الدراسات DBPC العديد من التحسينات السريرية الهامة مع استخدام النالتريكسون في الأطفال الذين يعانون ASD.207-212 مراجعة منهجية لل3 تقارير الحالة، 8 سلسلة من الحالات، و 14 التجارب السريرية المستقبلية أفاد أن النالتريكسون، بجرعات تتراوح 0،5-2 ملغ / كغ / د، أدى إلى تحسينات كبيرة في السلوك المضر بالنفس، وفرط النشاط، والانسحاب الاجتماعي، والرتابة، والإثارة، والتهيج لدى الأطفال الذين يعانون من التوحد. كان التخدير عابرة الأكثر شيوعا تأثير ضار noted.213

ألفا-2 منبهات الأدرينالية (الصف B). واختبرت دراسات عديدة استخدام منبهات ألفا 2 الأدرينالية، بما في ذلك الكلونيدين وguanfacine، في الأطفال الذين يعانون من التوحد. في تقرير حالة واحدة من الكبار المصابين بالتوحد والسلوك العنيف، عبر الجلد الكلونيدين (0.6 ملغم / د) أدى إلى انخفاض كبير في behavior.214 عنيفة في دراسة استعادية من 19 طفلا يعانون من التوحد، واستخدام الكلونيدين (0،05 حتي 0،1 ملغ في وقت النوم) تحسين النوم، والاستيقاظ ليلا، والانتباه، وفرط النشاط، والعدوان، وmood.215 دراسة DBPC لمدة 12 أسبوعا من 9 أطفال المصابين بالتوحد وذكرت أن الكلونيدين عبر الجلد (0.005 ملغ / كغ / د) أدى إلى تحسينات كبيرة في مشاكل حسية ( P = 0.049) والعالمية الأعراض (P <0.0001)، كما صنفت من قبل طبيب نفسي أو طبيب نفسي، مقارنة مع الدواء الوهمي. وتشمل الآثار السلبية التعب والتخدير خلال الأسابيع الأولى 2 من treatment.216 وفي دراسة على 14 أسبوع كروس R-DBPC من 8 أطفال المصابين بالتوحد الذين لديهم أيضا إما الغفلة والاندفاع، أو فرط النشاط، واستخدام الكلونيدين عن طريق الفم (4-10 ميكروغرام / كغ / د) أدى إلى تحسينات كبيرة في التهيج (P = 0.01)، نمطية (P = 0.05)، وفرط النشاط (P = 0.03)، والكلام غير اللائق (P = 0.05)، والسلوكيات المناقضة (P = 0.05) مقارنة مع الدواء الوهمي. وتشمل الآثار السلبية النعاس (P = 0.01) وانخفاض النشاط (P = 0.03) 0،217

في دراسة استعادية من 80 طفلا يعانون من التوحد، واستخدام guanfacine (يعني جرعة 2.6 ملغم / د) وارتبط مع تحسن في الانتباه، وفرط النشاط، والأرق، والتشنجات اللاإرادية.









المضادات الحيوية (الصف D). في دراسة واحدة الأعمى 8 أسابيع من 12 شخصا يعانون من مرض التوحد، تم العثور على تحسينات في الانسحاب الاجتماعي (P = 0.02) مع استخدام Dcycloserine (تصل إلى 2.8 ملغ / كغ / د)، مضاد حيوي وناهض جزئي في مستقبلات الغلوتامات و. وتشمل الآثار السلبية وعرة عابرة في child.294 واحد في دراسة المفتوح التسمية واحدة من 11 طفلا يعانون من مرض التوحد الارتدادي، أدى استخدام فانكومايسين عن طريق الفم (والذي يتم امتصاصه الحد الأدنى) على مدى فترة 8 أسابيع إلى تحسينات كبيرة في سلوك التوحد (P = 0.003) والاتصالات (P = 0.003). كان يعتقد أن فانكومايسين لتحسين السلوك عن طريق قتل البكتيريا المنتجة للعصبي مثل المطثيات. لم يلاحظ أي آثار سلبية، وكان 80٪ من الأطفال التحسينات، كما صنفت من قبل طبيب نفساني الطفل بالعمى الذي فحص أشرطة الفيديو يقترن في ترتيب عشوائي. ومع ذلك، عندما أوقف الدواء، والتحسينات اختفى إلى حد كبير في معظم children.151

سيكريتين (الصف D). وأفادت أكثر من عشر دراسات DBPC التي تشمل أكثر من 700 طفل مع ASD أن سيكريتين الوريد يوضح أي فائدة كبيرة مقارنة مع placebo.295-297 ومع ذلك، ذكرت إحدى الدراسات كروس R-DBPC الأخيرة في 15 طفلا يعانون من التوحد تحسن كبير في الكلام ( P = 0.0479) مع الأدمة سيكريتين مقارنة مع الدواء الوهمي (لوحظ هذا التحسن إلا في الأطفال عدم استخدام أي أدوية أخرى) 0،298
العلاجات غير بيولوجية

العلاج بالموسيقى (الصف A). في دراسة المفتوح التسمية من 8 البالغين الذين يعانون من التوحد، أدت 60 دقيقة من العلاج بالموسيقى الأسبوعي (بما في ذلك الغناء، والطبول، واللعب على البيانو) إلى تحسينات كبيرة في أعراض التوحد على period.299 52 أسبوعا في دراسة المفتوح التسمية آخر 4 أطفال المصابين بالتوحد، أدى استخدام العلاج بالموسيقى إلى تحسينات في اللعب skills.300 في العشوائية، دراسة، التي تسيطر عليها من 15 طفلا يعانون من مرض التوحد، أدى استخدام العلاج بالموسيقى ارتجالية إلى تحسينات أكبر في السلوك اهتمام مشترك (P = 0.01) ومدة الاتصال العين (P <0.0001)، مقارنة مع الدورات اللعب مع toys.301 في محاكمة DBPC الأخيرة من Tomatis (شكل من أشكال العلاج بالموسيقى) في 11 طفلا يعانون من مرض التوحد، كانت تحسينات مماثلة لplacebo.302 في التلوي تحليل 9 دراسات دراسة استخدام العلاج بالموسيقى في الأطفال الذين يعانون من التوحد، تم العثور على تحسينات كبيرة (P <0.01) مع حجم كبير الأثر (0.77)، مقارنة مع أولئك الذين يتلقون أي therapy.303 الموسيقى في مراجعة كوكرين مؤخرا، والموسيقى كان العلاج متفوقة على "وهمي" العلاج والرعاية القياسية، أو أي العلاج بالموسيقى في تحسين مهارات التواصل لدى الأطفال الذين يعانون من التوحد ولكن لم يكن لها تأثير كبير على behavior.304 التوحد

العلاج رؤية (الصف B). في دراسة عشوائية، التي تسيطر عليها من 14 طفلا يعانون من مرض التوحد، واستخدام العدسات المنشور المحيطة تحسين الموقف والتنسيق البصري الحركي (P <0.001 على حد سواء) مقارنة مع أي ارتداء العدسات المحيطة غير صحيحة أو لا lenses.305 في إطار متابعة R-DBPC كروس الدراسة من 18 طفلا يعانون من مرض التوحد، لوحظ التحسن في سلوكيات التوحد مع استخدام العدسات المحيطة المنشور الانتقالية مقارنة مع العدسات وهمي (P <0.05) 0،306

الوخز بالإبر (الصف C). ذكرت دراسة المفتوح التسمية من 2 الأطفال الذين يعانون من التوحد الذي حصل الكهربائي لمدة 24 العلاجات أكثر من 2 أشهر تحسينات في problems.307 الحسية عشوائية A 9 أشهر، دراسة للرقابة من 20 طفلا يعانون من مرض التوحد (جميع الذين العلاج لغة يرد مرتين في الأسبوع) ذكرت أن 10 من الأطفال الذين تلقوا أيضا فروة الرأس الوخز بالإبر مرتين في الأسبوع كان تحسينات كبيرة في الاهتمام (P = 0.008) ودلالات تقبلا (P = 0.034)، كما صنفت من قبل الطبيب المعالج لغة أعمى، مقارنة مع 10 الأطفال الذين تلقوا فقط therapy.308 اللغة

تدريب التكامل السمعي (الصف C). ما يصل إلى 40٪ من الأطفال الذين يعانون من التوحد قد يكون لها بعض درجة الصوت sensitivity.309 تدريب التكامل السمعي (AIT) ينطوي على الاستماع إلى الموسيقى معين تصفيتها من خلال مجموعة من سماعات الرأس للمساعدة في تقليل حساسية الصوت. في واحد 3 أشهر مزدوجة التعمية دراسة للرقابة من 17 فردا يعانون من مرض التوحد، أولئك الذين تلقوا AIT كان تحسينات كبيرة في التهيج (P <0.05)، الرتابة (P <0.01)، وفرط النشاط (P <0.05)، ومعبرة كلمة (P <0.01) مقارنة مع مجموعة التحكم الذي حصل على نفس الموسيقى التي كانت فلتر. استمرت هذه التحسينات لمدة 3 months.309 في مراجعة منهجية حديثة من AIT لASD، تم تحديد 6 المضبوطة، التي تضم ما مجموعه 171 طفلا. وكان التحليل التلوي غير ممكن، ولكن 3 من دراسات نشرت تحسينات في سلوك التوحد بشكل عام في المجموعة AIT. ذكرت 3 دراسات لا benefits.310 كبيرة

التدليك واليوغا (الصف C). التدليك في الأطفال الذين يعانون من التوحد قد تعزز الرابطة العاطفية بين الأم (ق) وchild.311 في دراسة المفتوح التسمية من 12 طفلا يعانون من صعوبات في التوحد والتعلم، وأظهر استخدام التدليك العطرية مع زيت اللافندر أي تأثير مفيد كبير على النوم بالمقارنة مع أي treatment.312 في 1 الشهر العشوائية تسيطر عليها الدراسة من 20 طفلا يعانون من مرض التوحد، الأطفال الذين يتلقون العلاج بالتدليك لمدة 15 دقيقة في وقت النوم أظهرت تحسينات في فرط النشاط، والرتابة، والتفاعل الاجتماعي (P <0.05 لكل منهما) مقارنة مع الأطفال الذين تم قراءة القصص لمدة 15 دقيقة في bedtime.313 في دراسة المفتوح التسمية-9 شهر 8 أطفال المصابين بالتوحد، أدى استخدام التدليك كيغونغ الطبية إلى انخفاض في سلوك التوحد وزيادة في language.314 في آخر دراسة المفتوح التسمية من التدليك كيغونغ في 26 طفلا يعانون من مرض التوحد، لوحظ تحسن كبير في behaviors.315 التوحد في دراسة للرقابة من 15 طفلا يعانون من مرض التوحد، أدى استخدام التدليك كيغونغ خلال فترة 5 أشهر في 8 أطفال إلى تحسينات في الإعاقات الحسية (P <0.01)، والمهارات الاجتماعية (P <0.04)، ومهارات الحياة الأساسية (P <0.02) كما صنفت من قبل المقيمين أعمى، مقارنة مع 7 أطفال الذين كانوا untreated.316

Neurofeedback (الصف C). في دراسة أجريت على 24 طفلا يعانون من مرض التوحد، تلقى 12 neurofeedback، مما أدى إلى تحسن في الكلام (P <0.001)، والتفاعل الاجتماعي (P <0.01)، والإدراك (P <0.001)، مقارنة مع الأطفال تحكم 12 الذين لم يتلقوا أي treatment.317

المثلية (الصف D). ذكرت دراسة واحدة من المثلية في 12 من البالغين المصابين بالتوحد أن المثلية سيكريتين نظرا أسبوعيا لمدة 12 أسابيع أظهرت بعض سوءا من خلال السلوك treatment.318

المبهم مشجعا العصبية (الصف D). كان راشدا يعانون من متلازمة والمستعصية المضبوطات اسبرجر التحسينات في كل من النشاط ضبط والسلوكيات عندما تعامل مع مشجعا العصب المبهم (VNS) 0.319 في دراسة المفتوح التسمية واحدة من 6 أطفال متلازمة لانداو كليفنر و 59 الأفراد المصابين بالتوحد، واستخدام لتنشيط العصب الحائر لالمضبوطات مستعصية تسبب في خفض ≥50٪ في النوبات في 58٪ من مجموعة التوحد في 12 شهرا. لوحظ تحسن في نوعية الحياة أيضا في المجموعة التوحد في 12 شهرا، بما في ذلك اليقظة في 76٪، والمزاج في 61٪، والإنجاز في 53٪ 0.320 ومع ذلك، في دراسة المفتوح التسمية آخر من 8 أطفال الذين يعانون من التوحد وبالمخدرات الصرع المقاوم، فإن استخدام VNS لا يقلل النشاط المصادرة، ووحظت فقط التحسينات الطفيفة في سير على period.321 من العمر 2
النتائج

يستعرض هذا المقال بصورة نقدية استخدام الرواية والعلاجات الناشئة عن الأفراد مع ASD. العديد من هذه العلاجات، وخاصة المكملات الغذائية، ويتم التسامح بشكل جيد وتعتبر بصفة عامة آمنة. ويدعم العديد من العلاجات التي كتبها المضبوطة المحتملين. بعض من العلاجات الواعدة تشمل الميلاتونين، ومضادات الأكسدة، مثبطات أستيل، النالتريكسون، والعلاج بالموسيقى. كل من العلاجات التي تم استعراضها في هذا المقال هي حاليا خارج التسمية (أي لم توافق FDA) وبعض يكون لها آثار ضارة. وهناك حاجة إلى مزيد من الدراسات استكشاف هذه العلاجات. يجب أن الأطباء علاج الأطفال الذين يعانون من التوحد تجعل من الممارسة القياسية للاستفسار عن استخدام الطفل ممكن من هذه الأنواع من العلاجات.

إفصاحات: صاحب البلاغ 2 الأطفال الذين يعانون من التوحد، وهو يمارس طبيب الرعاية الأولية الذي يعامل الأطفال ASD مع العلاجات القياسية والتكاملية، بما في ذلك بعض العلاجات التي تم استعراضها في هذا المقال. وقد تلقى صاحب البلاغ بتمويل من جمعية Hyperbarics الدولي لل2 دراسات على استخدام العلاج الضغط الزائد لدى الأطفال مع autism.224،226 كما كان المؤلف المشارك لتقرير حالة استخدام السبيرونولاكتون في الطفل مع autism.234 المؤلف لا يوجد لديه إضافي المتنافسة المصالح، وأنه وحده هو المسؤول عن المحتوى والكتابة من هذه الورقة.

شكر وتقدير: صاحب البلاغ بفضل السيد مايكل هاينز للحصول على اقتراحات التحرير.

المراجع
الدليل التشخيصي والإحصائي للاضطرابات النفسية، 4TH أد. واشنطن، DC: الرابطة الأمريكية للطب النفسي. 1994.
بيرد G، T شارمان، بارون كوهين S، وآخرون. أداة تحري عن مرض التوحد في سن 18 شهرا: دراسة متابعة مدتها 6 سنوات. J آم أكاد الطفل Adolesc الطب النفسي. 2000؛ 39: 694-702.
برتراند J، المريخ A، C بويل، وآخرون. انتشار مرض التوحد في سكان الولايات المتحدة: لبنة بلدة، نيو جيرسي، التحقيق. طب الأطفال. 2001؛ 108: 1155-1161.
تشاكرابارتي S، Fombonne E. اضطرابات النمو المتفشي في الأطفال قبل سن المدرسة. JAMA. 2001؛ 285: 3093-3099.
الأرز C. انتشار طيف التوحد اضطرابات التوحد والتنموية شبكة رصد الإعاقة، 14 موقعا، الولايات المتحدة الأمريكية، عام 2002. MMWR. 2007؛ 56: 12-28.
MUHLE R، Trentacoste SV، رابين أولا جينات التوحد. طب الأطفال. 2004؛ 113: e472-e486.
الأخضر VA، Pituch KA، Itchon J، وآخرون. مسح الانترنت من العلاجات المستخدمة من قبل آباء وأمهات الأطفال المصابين بالتوحد. الدقة ديف Disabil. 2006؛ 27: 70-84.
أمان MG، لام KS، كولير-Crespin A. انتشار وأنماط استخدام الأدوية ذات التأثير العقلي بين الأفراد المصابين بالتوحد في جمعية التوحد من ولاية أوهايو. J التوحد ديف Disord. 2003؛ 33: 527-534.
Witwer A، Lecavalier L. علاج حالات وأنماط لدى الأطفال والمراهقين الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد. J الطفل Adolesc Psychopharmacol. 2005؛ 15: 671-681.
Langworthy لام KS، امان MG، فان Bourgondien ME. انتشار وأنماط استخدام الأدوية ذات التأثير النفساني في الأفراد المصابين بالتوحد في جمعية التوحد من ولاية كارولينا الشمالية. J الطفل Adolesc Psychopharmacol. 2002؛ 12: 311-321.
الولايات المتحدة إدارة الغذاء والدواء. FDA توافق على أول عقار لعلاج التهيج المرتبطة بالتوحد، ريسبردال 2006. متاح على العنوان التالي: http://www.fda.gov/bbs/topics/news/2006/new01485.html. الوصول إلى 6 مايو 2009.
سكوت LJ، ​​ديلون S. ريسبيريدون: استعراض استخدامه في علاج التهيج المرتبطة اضطراب التوحد لدى الأطفال والمراهقين. Paediatr المخدرات. 2007؛ 9: 343-354.
غصن الورد PI، Mazurek MF. الآثار الجانبية العصبية في مرضى ذهان السذاجة تعامل مع هالوبيريدول أو ريسبيريدون. الأعصاب. 1999؛ 52: 782-785.
هيمان SL، ليفي SE. مقدمة: علاجات جديدة في تنموي إعاقات الأمل، والسبب، والأدلة. منة تؤخر ديف Disabil بحوث القس 2005؛ 11: 107-109.
الأكاديمية الأمريكية لطب الأطفال. أسر الإرشاد الذين يختارون الطب التكميلي والبديل لأطفالهم الذين يعانون من مرض مزمن أو إعاقة. جنة الأطفال المعوقين. طب الأطفال. 2001؛ 107: 598-601.
فيليبس B، C الكرة، ساكت D، وآخرون. مركز أكسفورد للمستويات الطب المبني على البراهين من الإثبات. 2001. خالية في: http://www.cebm.net/levels_of_evidence.asp. الوصول إلى 6 مايو 2009.
ساندلر AD، Bodfish JW. آثار وهمي في التوحد: الدروس المستفادة من سيكريتين. J ديف Behav Pediatr. 2000؛ 21: 347-350.
الملك BH، رايت DM، Handen BL، وآخرون. مزدوجة التعمية، وهمي تسيطر عليها الدراسة من هيدروكلوريد الأمانتادين في علاج الأطفال الذين يعانون من اضطراب التوحد. J آم أكاد الطفل Adolesc الطب النفسي. 2001؛ 40: 658-665.
تعريف ووصف الطب التكميلي والبديل. لوحة على تعريف والوصف، CAM مؤتمر مناهج البحث العلمي، أبريل 1995. Altern ذر الصحة ميد. 1997؛ 3: 49-57.
ومان DG. استخدام ممارسات الرعاية الصحية التكميلية والبديلة بين الأطفال. J Pediatr الرعاية الصحية. 2003؛ 17: 58-63.
ساندرز H، ديفيس MF، دنكان B، وآخرون. استخدام العلاجات الطبية التكميلية والبديلة بين الأطفال مع الرعاية الصحية الخاصة يحتاج في جنوب ولاية اريزونا. طب الأطفال. 2003؛ 111: 584-587.
وونغ HH، RG سميث. أنماط العلاج الطبي التكميلي والبديل تستخدم في تشخيص الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد. J التوحد ديف Disord. 2006؛ 36: 901-909.
هانسون E، كاليش LA، بونز E، وآخرون. استخدام الطب التكميلي والبديل بين الأطفال المصابين بهذا الاضطراب طيف التوحد. J التوحد ديف Disord. 2007؛ 37: 628-636.
وونغ VC. استخدام الطب التكميلي والبديل (CAM) في اضطراب طيف التوحد (ASD): مقارنة بين الثقافة الصينية والغربية (جزء A). J التوحد ديف Disord. 2009؛ 39: 454-463.
معهد بحوث التوحد. تقييمات الأم من آثار behavorial التدخلات الطبية البيولوجية. ARI سنة النشر 34؛ فبراير 2008. http://www.autism.com/treatable/form34qr.htm. الوصول إلى 6 مايو 2009.
ليفي SE، مندل DS، Merhar S، وآخرون. استخدام الطب التكميلي والبديل بين الأطفال تشخيص مؤخرا مع اضطراب طيف التوحد. J ديف Behav Pediatr. 2003؛ 24: 418-423.
Golnik AE، أيرلندا M. الطب البديل التكميلي للأطفال المصابين بالتوحد: مسح الطبيب. J التوحد ديف Disord. 2009؛ 39: 996-1005.
Liptak GS، أورلاندو M، ينجلينج JT، وآخرون. الارتياح مع الرعاية الصحية الأولية التي تلقتها أسر الأطفال ذوي العاهات الخلقية. J Pediatr الرعاية الصحية. 2006؛ 20: 245-252.
كمبر KJ، أوكونور KG. توصيات أطباء الأطفال للالطبية (CAM) العلاجات التكميلية والبديلة. Ambul Pediatr. 2004؛ 4: 482-487.
مايرز SM، جونسون CP. إدارة الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد. طب الأطفال. 2007؛ 120: 1162-1182.
Muskiet FA، Kemperman RF. حمض الفوليك وسلسلة طويلة من الأحماض الدهنية غير مشبع في المرض النفسي. J نوتر الكيميائية الحيوية. 2006؛ 17: 717-727.
Fernstrom دينار. يمكن أن المكملات الغذائية تعديل وظيفة الدماغ؟ صباحا J كلين نوتر. 2000؛ 71: 1669S-1675S.
لاخان SE، فييرا KF. العلاجات الغذائية لاضطرابات الصحة العقلية. نوتر J. 2008؛ 7: 2.
كارلتون RM، إينتي G، L بلوم، وآخرون. جرعات عقلانية من العناصر الغذائية لها تأثير طويل الأمد على صعوبات التعلم. Altern ذر الصحة ميد. 2000؛ 6: 85-91.
بينتون D، روبرتس G. تأثير الفيتامينات والمكملات المعدنية على معلومات استخباراتية لعينة من أطفال المدارس. انسيت. 1988؛ 1: 140-143.
SJ Osendarp، Baghurst KI، بريان J، وآخرون. تأثير التدخل المغذيات الدقيقة 12 مو على التعلم والذاكرة في سن المدرسة الأطفال تغذية جيدة ويتغذى بشكل هامشي: 2 موازاة ذلك، عشوائية، والدراسات التي تسيطر عليها وهمي في استراليا وإندونيسيا. صباحا J كلين نوتر. 2007؛ 86: 1082-1093.
هاسكل CF، Scholey AB، جاكسون السلطة الفلسطينية، وآخرون. الآثار المعرفية والمزاجية في الأطفال الأصحاء أثناء مكملات 12 أسبوعا مع متعدد الفيتامينات / المعادن. ر J نوتر. 2008؛ 100: 1086-1096.
MacLellan D، J تايلور، وتناول الخشب K. الأغذية والأداء الأكاديمي بين المراهقين. يمكن J حمية تطبيقي الدقة. 2008؛ 69: 141-144.
Schreck KA، وليامز K، سميث AF. مقارنة بين تناول السلوك بين الأطفال مع وبدون التوحد. J التوحد ديف Disord. 2004؛ 34: 433-438.
هرندون AC، DiGuiseppi C، جونسون SL، وآخرون. لا تختلف كمية التغذية بين الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد والأطفال ذوي النمو النموذجي؟ J التوحد ديف Disord. 2009؛ 39: 212-222.
نانوغرام F، M بيرك، عميد O، وآخرون. الاكسدة في الاضطرابات النفسية: قاعدة الأدلة والآثار العلاجية. الباحث J Neuropsychopharmacol. 2008؛ 11: 851-876.
Tsaluchidu S، M Cocchi، TONELLO L، وآخرون. الأحماض الدهنية والاكسدة في الاضطرابات النفسية. BMC للطب النفسي. 2008 (8)؛ (ملحق 1): S5.
Yorbik O، Sayal A، C أكاي، وآخرون. التحقيق في الإنزيمات المضادة للأكسدة في الأطفال الذين يعانون من اضطراب التوحد. البروستاجلاندين Leukot الأحماض الدهنية إيزينت. 2002؛ 67: 341-343.
جيمس SJ، Melnyk S، Jernigan S، وآخرون. ترتبط endophenotype التمثيل الغذائي والأنماط الجينية ذات الصلة مع الاكسدة في الأطفال الذين يعانون من التوحد. صباحا J ميد جينيه B Neuropsychiatr جينيه. 2006؛ 141: 947-956.
جيمس SJ، كاتلر P، S Melnyk، وآخرون. المؤشرات الحيوية الأيضية لزيادة الاكسدة والقدرة مثيلة ضعف في الأطفال الذين يعانون من التوحد. صباحا J كلين نوتر. 2004؛ 80: 1611-1617.
تشوهان A، تشوهان V، بنى WT، وآخرون. الاكسدة في التوحد: زيادة بيروكسيد الدهون وانخفاض مستويات مصل سيرولوبلازمين وترانسفيرين-البروتينات المضادة للأكسدة. علوم الحياة. 2004؛ 75: 2539-2549.
تشوهان A، تشوهان V. مؤكسد الاجهاد في مرض التوحد. الفيزيولوجيا المرضية. 2006؛ 13: 171-181.
Sperner-Unterweger B. المناعية المسببات المرضية للاضطرابات النفسية الرئيسية: الأدلة والآثار العلاجية. المخدرات. 2005؛ 65: 1493-1520.
باردو CA، فارغاس DL، زيمرمان AW. الحصانة، دبق عصبي وneuroinflammation في التوحد. الباحث القس الطب النفسي. 2005؛ 17: 485-495.
فارغاس DL، Nascimbene C، C كريشنان، وآخرون. تفعيل دبقية وneuroinflammation في الدماغ من المرضى الذين يعانون من مرض التوحد. آن Neurol. 2005؛ 57: 67-81.
الأولمبيك MG، داولنغ T، باتل PB، وآخرون. ارتفاع عامل نخر الورم ألفا في السائل المخي الشوكي من الأطفال الذين يعانون من التوحد. Pediatr Neurol. 2007؛ 36: 361-365.
كونولي AM، شي MG، Pestronk A، وآخرون. الأجسام المضادة في الدم إلى الدماغ في لانداو كليفنر البديل، والتوحد، واضطرابات عصبية أخرى. J Pediatr. 1999؛ 134: 607-613.
كونولي AM، شي M، Streif EM، وآخرون. الدماغ تستمد عامل التغذية العصبية والأجسام المضادة لمستضدات العصبية في مصل الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد، ومتلازمة لانداو كليفنر، والصرع. بيول الطب النفسي. 2006؛ 59: 354-363.
تورانت F، P أشووود، يوم R، وآخرون. الأمعاء الأمعاء الصغيرة مع الظهارية مفتش وتكملة ترسب في الأطفال الذين يعانون من التوحد التراجعي. مول الطب النفسي. 2002؛ 7: 375-382، 334.
Furlano RI، أنتوني A، يوم R، وآخرون. القولون CD8 وجاما دلتا تسلل خلايا T مع الضرر الظهارية في الأطفال الذين يعانون من التوحد. J Pediatr. 2001؛ 138: 366-372.
أشووود P، أنتوني A، AA بليسر، وآخرون. السكان الأمعاء لمفاوية في الأطفال الذين يعانون من التوحد الارتدادي: الدليل على نطاق واسع المخاطية الباثولوجيا المناعية. J كلين IMMUNOL. 2003؛ 23: 504-517.
Balzola F، دانييلا C، Repici A، وآخرون. التهاب الأمعاء التوحد: تأكيد مرض التهاب الأمعاء جديد في فوج الايطالية من المرضى. أمراض الجهاز الهضمي. 2005؛ 128: A303.
هورفاث K، باباديميتريو JC، Rabsztyn A، وآخرون. تشوهات الجهاز الهضمي في الأطفال الذين يعانون من اضطراب التوحد. J Pediatr. 1999؛ 135: 559-563.
Valicenti-ماكديرموت M، McVicar K، I رابين، وآخرون. تواتر الأعراض المعدية المعوية في الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد وتكوين الجمعيات مع تاريخ عائلي من أمراض المناعة الذاتية. J ديف Behav Pediatr. 2006؛ 27: S128-S136.
هورفاث K، بيرمان JA. التوحد والأعراض المعدية المعوية. داء Gastroenterol التشيك 2002؛ 4: 251-258.
Finegold SM، Molitoris D، أغنية Y، وآخرون. الدراسات الدقيقة في الجهاز الهضمي في وقت متأخر من حدوث التوحد. كلين تعدى ديس. 2002؛ 35: S6-S16.
أغنية Y، ليو C، Finegold SM. في الوقت الحقيقي PCR الكميات على البكتيريا في البراز من الأطفال الذين يعانون من التوحد. تطبيق ورقة البيئى Microbiol. 2004؛ 70: 6459-6465.
Parracho HM، بينغهام MO، جيبسون GR، وآخرون. الاختلافات بين الدقيقة أمعاء الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد والتي من الأطفال الأصحاء. J ميد Microbiol. 2005؛ 54: 987-991.
Jyonouchi H، L قنغ، روبي، وآخرون. تقييم وجود ارتباط بين الأعراض المعدية المعوية وإنتاج السيتوكينات ضد بروتينات غذائية شائعة عند الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد. J Pediatr. 2005؛ 146: 605-610.
Buie TM. الارتداد المعدي المريئي عند الأطفال المصابين بالتوحد: كيف الأطفال الحاضر ويمكن للمرء أن يختبر هؤلاء الأطفال؟ J Pediatr Gastroenterol نوتر. 2005؛ 41: 505.
ليفي SE، هيمان SL. علاجات جديدة للاضطرابات طيف التوحد. منة تؤخر ديف Disabil بحوث القس 2005؛ 11: 131-142.
نير I، مئير D، N Zilber، وآخرون. تقرير موجز: الميلاتونين الساعة البيولوجية، وهرمون الغدة الدرقية، البرولاكتين، ومستويات الكورتيزول في الدم من الشباب يعانون من مرض التوحد. J التوحد ديف Disord. 1995؛ 25: 641-654.
Kulman G، يسوني P، روفيللي F، وآخرون. دليل على الصنوبرية hypofunction الغدد الصماء في الأطفال الذين يعانون من التوحد. العصبية Endocrinol بادئة رسالة. 2000؛ 21: 31-34.
Tordjman S، أندرسون GM، Pichard N، وآخرون. إفراز ليلية من 6 sulphatoxymelatonin في الأطفال والمراهقين الذين يعانون من اضطراب التوحد. بيول الطب النفسي. 2005؛ 57: 134-138.
Melke J، Goubran بطرس H، P عفيف، وآخرون. تركيب الميلاتونين غير طبيعي في اضطرابات طيف التوحد. مول الطب النفسي. 2008؛ 13: 90-98.
يناير JE، أودونيل ME. استخدام الميلاتونين في علاج اضطرابات النوم عند الأطفال. J بينيل الدقة. 1996؛ 21: 193-199.
هاياشي E. تأثير الميلاتونين على إيقاع النوم واليقظة: مذكرات النوم من الذكور الذين يعانون من التوحد. الطب النفسي كلين Neurosci. 2000؛ 54: 383-384.
Ishizaki A، Sugama M، تاكوشي N. [فائدة الميلاتونين للنوم التنموي والدراسات الاضطرابات العاطفية / سلوك الميلاتونين المحاكمة في 50 المرضى الذين يعانون من اضطرابات النمو] [باللغة اليابانية]. لا للHattatsu. 1999؛ 31: 428-437.
Paavonen EJ، نيمينن-فون يندت T، Vanhala R، وآخرون. فعالية الميلاتونين في علاج اضطرابات النوم عند الأطفال الذين يعانون من اضطراب اسبرجر. J الطفل Adolesc Psychopharmacol. 2003؛ 13: 83-95.
Giannotti F، Cortesi F، Cerquiglini A، وآخرون. دراسة المفتوح التسمية من تسيطر عليها الافراج عن الميلاتونين في علاج اضطرابات النوم لدى الأطفال المصابين بالتوحد. J التوحد ديف Disord. 2006؛ 36: 741-752.
أندرسون IM، Kaczmarska J، McGrew SG، وآخرون. الميلاتونين للأرق عند الأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد. J Neurol الطفل. 2008؛ 23: 482-485.
Wasdell MB، يناير JE، Bomben MM، وآخرون. A العشوائية، والمحاكمة التي تسيطر عليها وهمي الإفراج تسيطر العلاج الميلاتونين من متلازمة تأخر مرحلة النوم وضعف الصيانة النوم لدى الأطفال ذوي الإعاقة النمائية العصبية. J بينيل الدقة. 2008؛ 44: 57-64.
غارستانغ J، واليس M. العشوائية تسيطر محاكمة الميلاتونين للأطفال الذين يعانون من اضطرابات طيف التوحد ومشاكل في النوم. رعاية الطفل الصحة ديف. 2006؛ 32: 585-589.
Wirojanan J، Jacquemont S، R دياز، وآخرون. فعالية الميلاتونين لمشاكل النوم عند الأطفال الذين يعانون من التوحد، ومتلازمة X الهشة، أو التوحد ومتلازمة X الهشة. J كلين النوم ميد. 2009؛ 5: 145-150.
Filipek PA، Juranek J، نجوين MT، وآخرون. نقص الكارنيتين النسبي في التوحد. J التوحد ديف Disord. 2004؛ 34: 615-623.
Ellaway CJ، الخث J، K ويليامز، وآخرون. متوسطة الأجل محاكمة التسمية مفتوحة من L-كارنيتين في متلازمة ريت. الدماغ ديف. 2001؛ 23 ملحق 1: S85-S89.
Ellaway C، K ويليامز، ليونارد H، وآخرون. متلازمة ريت: العشوائية تسيطر محاكمة L-الكارنيتين. J Neurol الطفل. 1999؛ 14: 162-167.
تاني Y، Fernell E، واتانابي Y، وآخرون. النقص في المحتوى 6R-5،6،7،8-tetrahydrobiopterin في السائل النخاعي من المرضى الذين يعانون من التوحد. Neurosci بادئة رسالة. 1994؛ 181: 169-172.
كوموري H، Matsuishi T، S يامادا، وآخرون. بيوبتيرين السائل النخاعي والأيض الأمينات حيوية المنشأ أثناء العلاج عن طريق الفم R-THBP لمرض التوحد الطفولي. J التوحد ديف Disord. 1995؛ 25: 183-193.
Nagahata M، H Kazamaturi، Nuruse H، وآخرون. التقييم السريري من هيدروكلوريد apropterin (R-TH P) على التوحد الطفولي: دراسة تعاونية متعددة المراكز. في: ناروسي H، Ornitz EM، محرران. البيولوجيا العصبية من التوحد الطفولي. وقائع الندوة الدولية حول بيولوجيا الأعصاب من الرضع التوحد. 10-11 نوفمبر، 1990؛ طوكيو، اليابان. أمستردام: إلسفير العلوم المحدودة. 1992: 351-354.
Fernell E، واتانابي Y، I Adolfsson، وآخرون. الآثار المحتملة للعلاج tetrahydrobiopterin من كل ستة أطفال مع بيانات التصوير المقطعي الانبعاثات التوحد السريري وبوزيترون: دراسة تجريبية. ديف ميد Neurol الطفل. 1997؛ 39: 313-318.
Danfors T، فون Knorring AL، Hartvig P، وآخرون. Tetrahydrobiopterin في علاج الأطفال الذين يعانون من اضطراب التوحد: دراسة كروس التي تسيطر عليها وهمي مزدوجة التعمية. J كلين Psychopharmacol. 2005؛ 25: 485-489.
Nakane Y، ناروسي H، Takesada M، وآخرون. الاثر السريري لR-THBP على autis الطفلي

 

[رافت ابراهيم]

 

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/1...0.00217.x/full

الكلمات الدالة:

• الاكتئاب الشديد؛
• النورادرينالين.
• مركبات نورأدريني

الموجز

على الرغم من النورادرينالين قد تم الاعتراف بها باعتبارها واحدة من الناقلات العصبية الرئيسية في الفيزيولوجيا المرضية للاكتئاب شديد (MD)، ومركبات نورأدريني استخدمت أقل على نطاق واسع في الممارسة السريرية، مقارنة مع مثبطات امتصاص السيروتونين الانتقائية (اس اس اراي). تطوير أول انتقائية نورأدريني reuptake المانع (NRI)، Reboxetine، لم يتغير جوهريا في الدولة من الفن. بالإضافة إلى ذلك، اتومكيسيتين، وهو NRI النقي نسبيا تستخدم لعلاج ADHD، وقد أظهرت نتائج متباينة عندما تدار في زيادة لمواضيع الاكتئاب. من خلال البحث ميدلاين 2000-2010، توفر هذه المادة لمحة عامة محدثة من الجوانب السريرية والدوائية الرئيسية من الطبقات المضادة للاكتئاب ذلك، جزئيا أو بشكل انتقائي، والعمل على أنظمة نورأدريني. العمل نورأدريني يلعب تأثير سريري مهم في الطبقات المضادة للاكتئاب مختلفة، وهو ما أكدته فعالية مضادات الاكتئاب العمل المزدوج مثل مثبطات السيروتونين النورادرينالين امتصاص (اس اس اراي)، ونورأدريني والدوبامين reuptake المانع (وقد صنف) بوبروبيون، ومركبات أخرى (على سبيل المثال، ميانسيرين، ميرتازابين)، التي تعزز انتقال نورأدريني. بالإضافة إلى ذلك، العديد من ثلاثية الحلقات، مثل ديسيبرامين والنورتريبتيلين، يكون لها تأثير نورأدريني انتشارا. مثبطات أوكسيديز (MAOIs)، علاوة على ذلك، منع انهيار السيروتونين، النورادرينالين، الدوبامين وتزيد من توافر هذه الأمينات الأحادية. وهناك فئة جديدة من العقاقير المضادة للاكتئاب، وامتصاص ثلاثية مثبطات هي قيد التطوير في التصرف بشكل انتقائي على السيروتونين، النورادرينالين، والدوبامين. وأخيرا، وتأثير مضاد للاكتئاب من الكيوتيابين المهدئة، وأشار لعلاج الاكتئاب ثنائي القطب، ومن المرجح أن تكون ذات صلة إلى العمل نورأدريني من مستقلبه Norquetiapine. على الرغم من أن العمل نورأدريني النقي قد لا يكون كافيا للحصول على تأثير مضاد للاكتئاب كامل، والعمل pronoradrenergic يمثل عنصرا هاما لزيادة فعالية مضادات الاكتئاب العمل المختلطة. على وجه الخصوص، يبدو أن العمل نورأدريني لتكون ذات صلة إلى النشاط الحركي، والاهتمام، والإثارة.

المقدمة

ومن الثابت أن العديد من المركبات المضادة للاكتئاب مع ثبت الفعل الفعالية السريرية أيضا على مسارات نورأدريني. فرضية الكاتيكولامين من الاكتئاب الشديد (MD)، في الواقع، يشير النورادرينالين باعتبارها واحدة من الناقلات العصبية الرئيسية المشاركة في pathophisiology من اضطراب على أساس مختلف القضايا العصبية الحيوية والكيميائية العصبية [1،2]. في الواقع، والآن الثابت أن الكاتيكولامينات (الدوبامين، النورادرينالين، والسيروتونين) [3،4] ليست هي العوامل الوحيدة المشاركة في الفيزيولوجيا المرضية لMD مع العديد من الناقلات العصبية الأخرى (على سبيل المثال، الصوديوم، حامض جاما-الغاما [GABA]) [5،6]، وأنظمة مختلفة (على سبيل المثال، neuroimmune، محور الغدة النخامية، رسل الثانية، المرونة العصبية غيرت [7-10]) يلعب أيضا دورا هاما [11،12]. فيما يتعلق بنظم العصبي المركزي، وعلاوة على ذلك، يعتقد الآن أن التعديلات ترتبط مع سلوكيات معينة وأبعاد الأعراض بدلا من مباشرة مع MD [13]. على سبيل المثال، فقد أشارت البحوث في الحقل الذي تشوهات في نقل السيروتونين ترتبط مع الاندفاع والعدوانية، والسلوكيات حريصة [14 - 16]، في حين أن تركيزات نورأدريني مختلفة مع النشاط الحركي، والاهتمام، والإثارة [15،17]. لذلك، في استعراض عمل نورأدريني من مضادات الاكتئاب المتاحة حاليا وتلخيص القواعد nauroanatomic، الكيميائية العصبية، والدوائية الرئيسية للانتقال نورأدريني، فإنه من المفيد أن نشدد على أن الآثار في هذه الأنظمة لا ترتبط تحديدا مع تأثير مضاد للاكتئاب، ولكن أكثر بشكل صحيح، ل إجراءات محددة على الأبعاد السلوكية ومجموعات من الأعراض.

التشريح العصبي لنقل نورأدريني

وتقع دوائر الدماغ نورأدريني الرئيسية في coeruleus مكان، والذي يتألف من مجموعة كبيرة من الخلايا العصبية نورأدريني في المادة الرمادية حول البطينات الدماغية والمحيطة بالمسال، وربط قشرة الدماغ، المخيخ، وجذع الدماغ. وcoeruleus موضع تشارك أساسا في الاستجابة لظروف خارجية واليقظة، وتوفير مسارات تنازلي إلى الحبل الشوكي والتصميم في جميع أنحاء الجهاز الحوفي والدماغ البيني بالإضافة إلى القشرة [18،19]. تقع الخلايا العصبية نورأدريني أخرى عادة ما تكون في النخاع وبونس، لربط النواة غامضة، نواة الجهاز الانفرادي، والظهرية السيارات مبهمية النواة. مسارات نورأدريني تتفاعل مع العديد من أنظمة النواقل العصبية الأخرى. على سبيل المثال، من المفترض أن تشارك في الفيزيولوجيا المرضية لاضطرابات المزاج خلايا نورأدريني مثيرة من التمثيل coeruleus مكان على مستقبلات المسكارينية [نظم gabaergic والكوليني 20]. بالإضافة إلى ذلك، نظم نورأدريني وهرمون السيروتونين تتداخل على عدة مستويات، وهي بعيدة أن تكون مستقلة، سواء توزع على المناطق القشرية واسعة [21]. في الواقع، يبدو أن الخلايا العصبية السيروتونين لإظهار مستقبلات نورأدريني والعكس بالعكس، وهناك ثابت عبر الحديث من الرسل هم ثاني [22].

الكيمياء الحيوية

النورادرينالين هو cathecholamine مع دور الهرموني يزيد من تحلل الغليكوجين ومعدل ضربات القلب، وتدفق الدم: هذه الإجراءات تؤدي على حدوث حالة استنفار العالمية في الاستجابة للضغط النفسي. يتم تصنيعه النورادرينالين في النخاع الكظرية بدءا من التيروزين aminoacid التي oxidated إلى diidroxiphenilalanine أو L-دوبا. ثم يتم decarboxylated L-دوبا إلى دوبامين والنهائي β-oxydation تحويل الدوبامين إلى النورادرينالين. يتم تحريرها النورادرينالين في الدم ملزمة لنقل النورادرينالين (NAT). NAT هو بروتين تعتمد على الصوديوم الذي يحمل النورادرينالين والدوبامين من المشبك إلى العصارة الخلوية، والتي من غيرها من شركات النقل مونوامين vescicolar القاء الحجز على أحاديات الأمين اثنين الى الحويصلات للتخزين في وقت لاحق والافراج عنهم. النورادرينالين ديه عدة مستقبلات التي يمكن تقسيمها إلى أربعة أنواع (2 ألفا وبيتا 2)، ومعظمهم من استخدام نظام رسول الثاني adenylcyclase، وخاصة في الجهاز العصبي المركزي (CNS). عادة، تتحلل النورادرينالين إلى نورميتانيفرين، حمض 3،4-Dihydroxymandelic، وحامض 3-ميثوكسي-4-hydroxymandelic، 3-ميثوكسي-4-hydroxyphenylethylene غليكول، وادرينالين [21،22].

السلوكية الاقتران نظم نورأدريني

كما ذكر سابقا، ويبدو أن انتقال نورأدريني إلى الترابط وخاصة مع الاهتمام، والإثارة، والسيارات، والنشاط المعرفي [15،17]. ويشارك مسارات نورأدريني في وظائف عاطفية مختلفة، وتوسط الاستجابة للضغط النفسي للمؤثرات مخيفة. على سبيل المثال، تم المتعلقة أعراض الحزينة والقلق المتفشي أثناء نوبات اكتئاب غير نمطية لنظام نورأدريني [23]. من جهة، التقاء في الأدلة يشير إلى أن زيادة انتقال نورأدريني قد لم تقلل ضعف التركيز، واللامبالاة، وأعراض الاكتئاب [24]. من ناحية أخرى، بزيادة قدرها مستويات نورأدريني قد يؤدي إلى حالة سلوكية من الإثارة، وزيادة اليقظة، والإدراك، والتعلم، والنوم ديسريغولاتيون [25]. الاتصالات إلى الغدد الصماء وأنظمة القلب والأوعية الدموية، عبر ما تحت المهاد، قد يكون متورطا في التسبب في القلق، بوساطة تفعيل السمبتاوي [26-27]. أعراض القلق من خلال مسارات محددة نورأدريني قد يبادر أو تفاقم الأعراض الاكتئابية [28]. وقد أظهرت العديد من الدراسات أن نقل نورأدريني يزداد بشكل ملحوظ عندما يتم تقديم محفزات جديدة، وبالتالي، يبدو النورادرينالين أن تلعب دورا هاما في السيطرة على اضطرابات في وظائف الخضري المرتبطة العاطفية، والقلق، والاضطرابات المعرفية [28]. نقص النورادرينالين، وخاصة في تلك الممرات التي تربط coeruleus مكان مع الجهاز الحوفي، قد يقلل من التركيز وتؤثر الذاكرة العاملة، ويسبب التخلف النفسي، مما أدى إلى اللامبالاة والاكتئاب [25].

ككل، يرتبط السلوكية للانتقال نورأدريني هي ذات الصلة ولا سيما إلى النشاط الحركي، والاهتمام، والإثارة، والعمليات المعرفية. انخفاض في هذه السلوكيات، وذلك بسبب انتقال نورأدريني تغير، ليست محددة من MD ويمكن العثور عليها أيضا في اضطرابات القلق، واضطرابات السيطرة على الانفعالات، نقص الانتباه وفرط الحركة واضطراب (ADHD)، الخ.

مضادات الاكتئاب والمركبات العقلية الأخرى التي تعمل على أنظمة نورأدريني

فئات مختلفة من المركبات يمكن أن تعزز النشاط نورأدريني، التي تعمل أساسا على تثبيط امتصاص النقل (الجدولين 1 و 2). وتشمل هذه بعض مضادات الاكتئاب ثلاثية الحلقات (مضادات الاكتئاب ثلاثية الحلقات) مثل ديسيبرامين وNortryptiline، أو نقية نسبيا مثبطات امتصاص النورادرينالين (الهنود غير المقيمين) مثل Reboxetine واتومكيسيتين. بالإضافة إلى ذلك، السيروتونين والنورادرينالين مثبطات امتصاص (اس اس اراي)، النورادرينالين ومثبطات امتصاص الدوبامين (NDRIs)، نورأدريني ومضادات الاكتئاب هرمون السيروتونين محددة (NaSSAs)، وفي الآونة الأخيرة، الطبقة رواية من مثبطات امتصاص ثلاثية (تريس)، قيد التطوير لكبح بشكل انتقائي على امتصاص من أحاديات الأمين الثلاثة الرئيسية، يمكن أن تعزز نقل نورأدريني. وأخيرا، monoaminoxidase مثبطات (MAO-IS) لا تزال تمثل خيارا علاجيا في MD، بناء على الأمينات الاحيائية الرئيسية الثلاث ولكن مع وجود نمط انخفاض الانتقائية المحاسبة عن الآثار السلبية الكبرى. حتى بعض مضادات الذهان غير التقليدية، مثل الكيوتيابين، ومستقلبه Norquetiapine على وجه الخصوص، تعمل على نظام نورأدريني ربط NAT. مركبات أخرى هي القادرة على تثبيط إنزيمات تعطيل النورادرينالين في الشق متشابك مثل Tropolone، والكاتيكول-O-ميثيل ترانسفيراز (COMT) مانع [29]. الفينتولامين وهو مركب يستخدم لحالات الطوارئ ارتفاع ضغط الدم، ومن المعروف أن تكون مستقبلات مانع ألفا، في حين الكلونيدين، وتستخدم لعلاج الصداع النصفي وارتفاع ضغط الدم، وعدم انتظام دقات القلب، يمكن أن تحفز نفس مواقع مستقبلات. وأخيرا، تشارك الأمفيتامينات في الإفراج عن النورادرينالين في النهايات العصبية [30].

الجدول 1. مجموعة الجرعة، والمؤشرات السريرية، والجانب الرئيسي آثار المركبات العقلية مع العمل نورأدريني جزيء الجرعة المعيارية (ملغ / يوم) الاستخدامات السريرية المشتركة آثار جانبية كبيرة ثلاثية الحلقات مع العمل نورأدريني انتشارا ديسيبرامين النورتريبتيلين أميتريبتيلين 100-200 50-150 75-150 اضطراب اكتئابي ولا سيما مع أعراض عصبي إنباتي، اضطراب القلق العام واضطراب ما بعد الصدمة تثبيط استثارة عضلة القلب، انخفاض ضغط الدم الشرياني، والآثار الجانبية الكولين المركزية والطرفية مونو أمين أوكسيديز مثبطات (MAO-I) موكلوبميد 300-600 الخوف من الأماكن المكشوفة أو القلق الاجتماعي، ومرض باركنسون، والاكتئاب ومقاومة، والقلق النعاس، والدوخة، وزيادة حساسية الشمس، أو عدم وضوح الرؤية. اضطراب في المعدة، وفقدان الشهية، والهزات، والتهيج، والأرق، وبيغ، وصداع شديد، وسرعة دقات القلب أو عدم انتظام، الطفح الجلدي، والحمى، اصفرار العينين أو الجلد مثبطات امتصاص نورأدريني (الهنود غير المقيمين) Reboxetine 12/08 اضطراب اكتئابي، والاكتئاب الموسمي، والاهتمام العجز / اضطراب فرط النشاط، اضطرابات القلق (اضطراب القلق العام) والشره المرضي، والعجز الجنسي (الاضطراب الجنسي ipoactive)، والفصام ويرجع ذلك أساسا إلى خصائص مضادات الكولين: جفاف الفم، والإمساك، والصداع، النعاس، والدوخة، والتعرق، واحتباس البول، والأرق اتومكيسيتين 40-100 نقص الانتباه / فرط النشاط آلام في البطن، وفقدان الشهية، والغثيان، والقيء مثبطات امتصاص السيروتونين النورادرينالين (اس اس اراي) الفينلافاكسين Desvenlafaxine 75-375 50-100 اضطراب والقلق والاضطرابات الاكتئابية الكبرى (اضطراب القلق الاجتماعي، واضطراب القلق العام واضطراب ما بعد الصدمة، اضطراب الهلع، واضطراب الوسواس القهري) الغثيان، والإسهال، جفاف الفم، والدوخة، ونعاس، والتعب، والأرق، والعجز الجنسي تناولوها 60-120 اضطراب اكتئابي، اضطراب القلق العام (بالإضافة إلى مؤشرات nonpsychiatric كما الطرفية ألم الاعتلال العصبي السكري والضغط الإناث سلس البول) الغثيان، وجفاف الفم، والصداع، والإمساك، والدوخة، والتعب Milnacipran 100-200 اضطراب والقلق واضطرابات الاكتئابية الرئيسية؛ مؤشرات nonpsychiatric مثل الألم العضلي الليفي العصبية، والغثيان، والإمساك، والتعرق والدوار مثبطات امتصاص النورادرينالين، الدوبامين (NDRIs) بوبروبيون 150-300 اضطراب اكتئابي مع ميزات الحزينة أو فرط النوم والتعب، واستراتيجيات الاكتئاب وزيادة الموسمية. الإقلاع عن التدخين مصادرة وارتفاع ضغط الدم، والأرق، والتعرق، والقلق، وسمية الكبد نورأدريني ومضادات الاكتئاب هرمون السيروتونين محددة (NaSSA) ميرتازابين 15-45 الاضطرابات الاكتئابية الرئيسية بشكل خاص للمرضى في منتصف العمر وكبار السن، واضطرابات القلق (الوسواس القهري) المفاضلة اضطراب جسدي النعاس، والتخدير، وزيادة الشهية وزيادة الوزن Mianserine 30-90 الاكتئاب المرتبطة القلق والانفعالات، ولا سيما في الحالات التي يتم فيها طلب التخدير نعاس، والتعب مثبطات امتصاص ثلاثية Brasofensine، Dichloropane، Diclofensine، Indatraline، Tesofensine في الدراسة الاكتئاب الشديد، على دراسة لحالة عصبية مثل مرض باركنسون ومرض الزهايمر، والألم المزمن، والسمنة، وإدمان الكحول، وإدمان الكوكايين في الدراسة مضادات الذهان غير التقليدية كيوتيابين 300-800 الاضطراب الثنائي القطب، الفصام، وخارج التسمية: الوسواس القهري، اضطراب ما بعد الصدمة، متلازمة تململ الساقين، ومرض التوحد، وإدمان الكحول، متلازمة توريت، اضطرابات النوم التخدير، وعدم انتظام دقات القلب، خلل الحركة المتأخر، المتلازمة الخبيثة للذهان
الجدول 2. الانجذاب لنقل نورادرينالين (NET) لبعض المركبات pronoradrenergic مجمعات سكنية تقارب لNET

• TCA، مضادات الاكتئاب ثلاثية الحلقات. SNRI، السيروتونين النورادرينالين reuptake المانع. الهنود غير المقيمين، نورادرينالين reuptake المانع.

اتومكيسيتين (NRI) ++++ Nortriptiline (TCA) ++++ تناولوها (SNRI) +++ Amitriptiline (TCA) +++ Norquetiapine (المستقلب من الكيوتيابين) +++ الفينلافاكسين (SNRI) ++ كيوتيابين (شاذة المضادة للذهان) -

الهدف من الدراسة

وتهدف هذه المادة إلى توفير نظرة شاملة ومحدثة فيما يتعلق العمل نورأدريني من مضادات الاكتئاب المتاحة حاليا، مع التركيز على آليات الدوائية العمل الرئيسية، الدوائية والخصائص الدوائية، والمؤشرات السريرية.

المواد والطرق

وقد تم تحديد مواد لإدراجها إجراء بحث الأدب في PubMed يشير، على وجه الخصوص، لالسنوات ال 10 الماضية (من يناير 2000 إلى يونيو 2010). تم البحث على النحو التالي قبل اثنين من المراجعين المستقلين: "النورادرينالين"، "مثبطات امتصاص النورادرينالين" (الهنود غير المقيمين)، "مضادات الاكتئاب نورأدريني"، "مضادات الاكتئاب العمل المزدوج"، "مثبطات امتصاص السيروتونين النورادرينالين" (اس اس اراي)، "مثبطات إعادة امتصاص الدوبامين النورادرينالين" (NDRIs)، و "تريس". أخذت الأبحاث المنشورة باللغة الإنجليزية فقط بعين الاعتبار. لغرض الدراسة، وتركز الاهتمام بشكل خاص على -analyses الفوقية، والدراسات التي تسيطر عليها وهمي، المراجعات المنهجية، والمبادئ التوجيهية للعلاج الدولية.

النتائج

وقد تم تحديد أكثر من 150 مقالة وتم فحص الفئات التالية من مضادات الاكتئاب والمركبات ذات الصلة بعناية: ثلاثية الحلقات مع النشاط نورأدريني بارز (أي Nortryptiline وديسيبرامين)، MAO-هو، الهنود غير المقيمين (Reboxetine واتومكيسيتين)، اس اس اراي (فينلافاكسين وDesmetylvenlafaxine، تناولوها وMilnacipran)، وقد صنف (بوبروبيون)، NASSAs (ميرتازابين وميانسيرين)، وتريس. كما تم استعراض الكيوتيابين المهدئة لفترة وجيزة. هنا، كل فئة محددة مع المركبات ذات الصلة يتم فحص تلخيص معالمه الدوائية الرئيسية والنشاط السريري.

ثلاثية الحلقات مع السائدة نورأدريني آخر

ديسيبرامين والنورتريبتيلين هي مضادات الاكتئاب ثلاثية الحلقات مع النشاط السائد على النظام نورأدريني.

عندما يخضع أميتريبتيلين الأيض المؤكسدة في سلسلة الجانب، يتم إنتاج النورتريبتيلين أمين ثانوي [31]. نورتريبتيلين له 100 مرة تقارب العالي للNAT من أجل نقل السيروتونين [32]. في حين أميتريبتيلين هو واحد من مضادات الاكتئاب أكثر الكولين، ديسيبرامين، وهو المستقلب النشط للإميبرامين، هو أقل ثلاثية الحلقات المضادة للكولين [33].

كلا النورتريبتيلين وديسيبرامين استخدمت على نطاق واسع في المرضى الذين يعانون من الاكتئاب واضطرابات القلق، مع فعالية مختلفة. في دراسة مثيرة للاهتمام تحليل الشخصية من عمل ديسيبرامين مقابل SSRI الباروكستين في قدامى المحاربين في المستشفى، كان ديسيبرامين أكثر فعالية في الحد من تخلف حركي والعداء في حين الباروكستين تحسن في البداية القلق والعداء [34]. وفي الآونة الأخيرة، في محاكمة متعددة المراكز (الجينوم القائم العلاجية أدوية لدراسة الاكتئاب)، تم علاج 811 البالغين الذين يعانون من معتدلة إلى شديدة من الاكتئاب أحادي القطب مع جرعات مرنة من إسيتالوبرام أو النورتريبتيلين لمدة 12 أسبوعا. وأظهرت النتائج عدم وجود فرق بين المركبين من حيث الفعالية. ومع ذلك، والمزاج وأعراض معرفية تحسنت أكثر مع إسيتالوبرام من مع النورتريبتيلين، في حين أن أعراض عصبي إنباتي تحسنت أكثر مع النورتريبتيلين [32].

على أساس عدة تجارب صغيرة في علاج الاكتئاب ثنائي القطب الحادة، إميبرامين وديسيبرامين أدى بالمثل أو أقل فعال من لا رجعة فيه اانتقائي MAO-هو، اس اس اراي (أي فلوكستين والباروكستين)، وبوبروبيون [35]. ومع ذلك، فقد ارتبط استخدام ثلاثية الحلقات في الاضطراب الثنائي القطب مع أكثر عرضة للاكتئاب الناجم عن هوس [36]. عند استخدامها في المرضى الذين يعانون من اضطراب القلق المعمم (GAD) والاكتئاب poststroke، أظهرت النورتريبتيلين تأثير أكبر من العلاج الوهمي [37]. وفيما يتعلق علاج اضطراب الوسواس القهري (OCD)، تم العثور على مركبات مع النشاط نورأدريني السائد أن تكون أقل فعالية من الأدوية مع العمل proserotonergic، ويجري تثبيط امتصاص السيروتونين شرط أساسي لالأدوية الفعالة في الوسواس القهري [38]. وقد أثبتت ثلاثية الحلقات مستويات عالية من الفاعلية في علاج اضطرابات المزاج، ويجري بالتأكيد ليست أقل فعالية من مضادات الاكتئاب من الجيل الثاني [33]. على وجه الخصوص، بين ثلاثية الحلقات، والأمينات الثانوية مثل ديسيبرامين والنورتريبتيلين لها آثار جانبية أقل مقارنة مع الأمينات الثلاثية (على سبيل المثال، أميتريبتيلين، إميبرامين) [35]. ومع ذلك، يتم تأسيس جيدا السمية المحتملة للمركبات ثلاثية الحلقات، ويتكون من تثبيط استثارة عضلة القلب، انخفاض ضغط الدم الشرياني، ومضادة للآثار المركزية والطرفية. كونها مضادات الاكتئاب من الجيل الثاني يحتمل أن تكون أقل سمية وأكثر تحملا من ثلاثية الحلقات، ويفضل على أنها علاج الخيار الأول في كل من القلق والاكتئاب [39].

مثبطات أوكسيديز

مثبطات أوكسيديز (MAOIs) التصرف عن طريق تثبيط نشاط انزيم مونوامين أوكسيديز، وبالتالي منع انهيار الناقلات العصبية مونوامين وزيادة مخازن المتاحة. اثنين إيسفورمس متميزة من أوكسيديز موجودة: MAO-A وMAO-B. السابق deaminates تفضيلي السيروتونين، الميلاتونين، ادرينالين، والنورادرينالين، في حين أن هذا الأخير deaminates تفضيلي phenylethylamine وتتبع الأمينات. وdeaminated الدوبامين بالتساوي كلا النوعين. MAOIs تختلف من الانتقائية لمستقبلات MAO. من حيث الفعالية السريرية، metanalyses مع عينات نية إلى علاج وكشفت آثار مماثلة عموما لMAOIs مثل فينيلزين، إيزوكربوكسازيد، وترانيلسيبرومين. بالإضافة إلى ذلك، على حد سواء فينيلزين وترانيلسيبرومين يبدو أن يكون أكثر فعالية من ثلاثية الحلقات في العيادات الخارجية الاكتئاب مع ميزات شاذة. MAOIs أيضا علاجات فعالة للمرضى الخارجيين الذين فشلوا في الرد على مضادات الاكتئاب ثلاثية الحلقات [40]. على الرغم من فعاليتها في MD وبعض اضطرابات القلق (على سبيل المثال، اضطراب القلق الاجتماعي) [41]، قد تكون قضايا التحمل مزعجة. MAOIs، في الواقع، تتفاعل مع بعض الأطعمة والمشروبات الكحولية، وبعض الأدوية، لإنتاج رد فعل حاد والتي غالبا ما لا تظهر لعدة ساعات بعد تناول الدواء ويمكن أن تتضمن زيادة خطيرة في ضغط الدم، وكذلك الصداع والغثيان والقيء وعدم انتظام دقات القلب، والمضبوطات، والسكتة الدماغية، وغيبوبة.

Noradrenenaline امتصاص المانعون


Reboxetine

Reboxetine يتصرف ربط NAT ومنع امتصاص النورادرينالين من خارج الخلية إلى المحطات، مع تقارب منخفضة لنقل أو مستقبلات [أخرى 42]. في الواقع، Reboxetine هو مركب مزيج من اثنين من أصل أربعة الفراغية ممكن من نفس الجزيء مع العمل العلاجي. فمن بيولوجيا معظمها (حوالي 95٪) مع نصف عمر 13 ح [43]. Reboxetine "الأيض في الكبد بشكل رئيسي، وينطوي CYP3A4: تفرز عناصره الرئيسية مع البول [44]. عادة ما تميل كل من فشل كلوي وكبدي تختلف ينبغي النظر نصف الحياة والدم مستويات Reboxetine 'حين البت في جرعة البداية [43]. حتى الآن، الدراسات، على مستويات البلازما Reboxetine غير متوفرة ولكن يمكن أن تكون ذات فائدة في تقييم مجموعة علاجية آمنة. يوفر الاتحاد العالمي لجمعيات الطب النفسي البيولوجي (WFSBP) المبادئ التوجيهية حول الجرعة، والتوصية جرعة البداية بين 4-8 ملغ يوميا في كبار السن، و8-12 ملغ يوميا في جرعة قياسية. مع الاحترام لعمل المضادة للاكتئاب للجزيء في الاكتئاب أحادي القطب، وجدت تحليلها. الفوقية الأخيرة Reboxetine أقل فعالية من غيرها من مضادات الاكتئاب من الجيل الجديد [45]. ومع ذلك، فقد Reboxetine استخدامها بشكل فعال لعلاج الاضطرابات النفسية المختلفة إلى جانب MD مثل الاكتئاب الموسمي، ADHD، GAD، الشره المرضي، اضطراب الجنسي قاصر النشاط، وحتى انفصام الشخصية [46]. بالإضافة إلى ذلك، كما خارج التسمية، وقد أجريت دراسات سريرية مع Reboxetine لعلاج fibromialgia وألم الاعتلال العصبي [47].

وفيما يتعلق الاضطرابات العاطفية الموسمية، وجدت دراسة حديثة مقارنة إسيتالوبرام إلى Reboxetine أن معدلات الاستجابة ومغفرة كانت لا تختلف كثيرا في مجموعات العلاج اثنين. وقت بداية، ومع ذلك، كان أقصر مع Reboxetine، في حين أظهرت إسيتالوبرام آثار جانبية أقل [48]. قد يكون Reboxetine مفيدة أيضا لاستراتيجيات زيادة لاس اس اراي، وفي هذا المنظور، يمكن مقارنة فعاليتها في اس اس اراي [49]. الآثار الجانبية الشائعة لReboxetine تتفق مع خصائصه المضادة للكولين وتشمل جفاف الفم، والإمساك، والصداع، النعاس، والدوخة، والتعرق، والأرق [50]. ومع ذلك، حيث أن معظم مضادات الاكتئاب من الجيل الثالث، Reboxetine عادة جيد التحمل أو على أي حال أفضل من tollerated MAO-IS و ثلاثية الحلقات، مع انخفاض معدل انقطاع [51]. ويمكن الاطلاع على السلامة في جرعة زائدة من بعض البيانات.

اتومكيسيتين

اتومكيسيتين هو NRI انتقائية مع وجود تقارب طفيف للنقل العصبي الأخرى ومستقبلات [52]. اتومكيسيتين يعمل على الغشاء قبل المشبكي من خلال إعاقة إعادة امتصاص النورادرينالين مضخة: في هذه الطريقة، زيادة توافر نتائج النورادرينالين intrasynaptic [53]. لا هو المسمى اتومكيسيتين بمثابة منبه ومؤشر الرئيسي هو علاج ADHD [54].

يتم استقلاب اتومكيسيتين من قبل السيتوكروم P450 2D6 وإزالة أنواع أخرى من المخدرات استقلاب من الانزيمات CYP لا يتأثر اتومكيسيتين [55]. وقد تم التحقيق في علاج الاكتئاب. ومع ذلك، فإن عدم وجود تأثير كبير مقارنة مع الدواء الوهمي لا يسمح للجزيء إلى أن تتم الموافقة لعلاج MD. ومع ذلك، هناك بعض الأدلة مؤخرا أن اتومكيسيتين قد يكون فعالا في علاج ADHD يعانون من الاكتئاب المرضية لدى المراهقين [56] وتكون استراتيجية زيادة ممكنة للمرضى المقاوم للعلاج [57]. من حيث التحمل، آلام في البطن، وفقدان الشهية، والغثيان، والقيء هي الآثار الجانبية الأكثر شيوعا ذكرت من قبل المرضى الذين يعانون من ADHD على اتومكيسيتين [58]. على الرغم من عدم الموافقة لاضطرابات المزاج، واستخدام اتومكيسيتين في ADHD، وهي حالة تتميز المهام التنفيذية ضعف، وفرط النشاط، والسلوكيات تفريط والتسرع، قد تساعد على فهم كيفية عمل على النظام نورأدريني يمكن أن تؤثر على المهارات الإدراكية والحركية.

السيروتونين النورادرينالين امتصاص المانعون

اس اس اراي زيادة مستويات السيروتونين والنورادرينالين على حد سواء داخل الجهاز العصبي المركزي عن طريق تثبيط انتقائي امتصاص في الشقوق متشابك. تدرج الفينلافاكسين والمستقلب النشط Desmetylvenlafaxine، تناولوها، وMilnacipran حاليا في فئة من اس اس اراي.

الفينلافاكسين وDesmetylvenlafaxine

كتل الفينلافاكسين على امتصاص السيروتونين متشابك في الجرعات المنخفضة، وامتصاص النورادرينالين في الجرعات الكبيرة وامتصاص الدوبامين في أعلى جرعات [59]. الفينلافاكسين هو 2-فينيل-2- (1-hydroxycycloalkyl) إيثيلامين مشتق. المستقلب الرئيسي من فينلافاكسين هو O-desmethylvenlafaxine، الذي يشبه إلى فينلافاكسين في قوة لتثبيط 5HT وNE امتصاص وفي تقارب لنقل 5HT وNE. جرعة البداية لفينلافاكسين بشكل عام 75 ملغ / يوم والجرعة القصوى الموصى بها هي من 375 ملغ / يوم.

أظهرت عدة تجارب عشوائية محكومة فعالية وسلامة فينلافاكسين في علاج اضطرابات القلق بما في ذلك اضطراب القلق الاجتماعي، GAD، اضطراب ما بعد الصدمة، اضطراب الهلع، والوسواس القهري [60]. عموما، فينلافاكسين جيد التحمل والآثار الجانبية لها عادة تنخفض مع استمرار العلاج [61]. الرئيسية الآثار الجانبية ذكرت تخص الجهاز الهضمي (على سبيل المثال، والغثيان، وجفاف الفم)، العصبي (على سبيل المثال، والدوخة، ونعاس، والأرق)، والبولي (تأخر القذف) نظم [62]. التعرق هو تعتمد على الجرعة الآثار الجانبية ذكرت في كثير من الأحيان. معدلات الانقطاع ليست أعلى من تلك التي ذكرت مع مضادات الاكتئاب الأخرى مثل فلوكستين أو الباروكستين [63].

وقد تمت الموافقة دي metil-الفينلافاكسين سوسينات من قبل إدارة الغذاء والدواء (FDA) في فبراير 2008 لعلاج المرضى البالغين الذين يعانون من اضطراب اكتئابي (MDD) وهذا هو SNRI الثالث مع موافقة ادارة الاغذية والعقاقير لهذا الشرط [64]، على الرغم من عدم الموافقة على MD من قبل الوكالة الأوروبية للأدوية (EMEA). تحت نقطة الدوائية للعرض، DES-metil-الفينلافاكسين يختلف من المخدرات الأم لا سيما من حيث التمثيل الغذائي: يتم استقلاب فينلافاكسين في المقام الأول CYP2D6، في حين مترافق DES-metil-الفينلافاكسين عبر يوريدين ثنائي فسفات glucuronyl ترانسفيراز.لهذا السبب، قد يكون المحتملة المخدرات التفاعلات العالي للفينلافاكسين من لDesvenlafaxine خلال الادارة ما يصاحب ذلك مع الأدوية الأخرى التي تؤثر على مسار CYP 2D6 [65].

وجدت الدراسات السريرية التي تحقق في فعالية DES-metil-الفينلافاكسين لعلاج MD جرعة من 50 ملغ / يوم أكثر فعالية من العلاج الوهمي في الحد من أعراض الاكتئاب [66]. تعتبر مجموعة جرعة 50-100 ملغ / يوم واحد العلاجية، مع عدم وجود فائدة إضافية في جرعات أعلى وخطر أعلى بكثير من الآثار الجانبية [67]. وتشمل الآثار الجانبية الرئيسية الغثيان والأرق وقلة الشهية، والتعب، النعاس، والإمساك [68].

تناولوها

تناولوها هو المانع من امكانات السيروتونين والنورادرينالين امتصاص، مع آثار ضعيفة على امتصاص الدوبامين. أن لها قابلية منخفضة للمستقبلات أخرى. تناولوها هو المضادة للاكتئاب العمل المزدوج مع وافقت مجموعة جرعات عن طريق الفم من 40-60 ملغ / يوم [69]. الموافقة تناولوها حاليا لMD، آلام الأعصاب الطرفية السكري، الإناث الإجهاد سلس البول، وGAD [70]. عندما تمت مقارنة فينلافاكسين وتناولوها في علاج GAD، سواء نتج متفوقة على همي وفعالة على قدم المساواة [71].

تناولوها بشكل عام جيد التحمل والآثار الجانبية الأكثر شيوعا لوحظ والغثيان، وجفاف الفم، والصداع، والإمساك، والدوخة، والتعب. مع الاحترام لمخاطر القلب والأوعية الدموية، لا يبدو تناولوها لتترافق مع مخاطر كبيرة بما في ذلك الارتفاعات حقت ضغط الدم، إطالة qtc في الفاصل الزمني، أو التغييرات electrocardiographic أخرى [72].

Milnacipran

Milnacipran هو SNRI مع آثار طفيفة على أي مستقبلات قبل المشبكي أو بعد المشبكي [73].

وفيما يتعلق الدوائية ومكانتها الدوائية، Milnacipran يختلف بوضوح من اس اس اراي الأخرى. أنه يحتوي على مادة السيروتونين متساوية الفاعلية والنورادرينالين امتصاص تثبيط واتجاه العلاقة بين الجرعة والتركيز الخطي في الجرعات العلاجية. كما تفاعله مع السيتوكروم P-450 نظام محدود جدا، Milnacipran لديها مخاطر المنخفض للتفاعل الدواء. من ناحية أخرى، يتم القضاء عليها عن طريق إفراز الكلى، وبالتالي، ينبغي إيلاء اهتمام خاص لأولئك المرضى الذين يعانون من الفشل الكلوي أي. لها نصف عمر حوالي 8-12 ساعة. وقد تمت الموافقة على Milnacipran في بعض البلدان الآسيوية لعلاج MD وكما أنها فعالة في علاج أعراض الألم العضلي الليفي، والتعب، والقلق. الفعالية الشاملة والتحمل من Milnacipran مقابل لا يبدو مضادات الاكتئاب الأخرى تختلف في علاج الحادة MD؛ كلاهما متفوقة على تلك مضادات الاكتئاب ثلاثية الحلقات ومماثلة لتلك التي من اس اس اراي.

ككل، اس اس اراي تمثل بديلا صالحا لاس اس اراي وأنها تستخدم بشكل متزايد في المرضى الذين يعانون من اضطرابات القلق. في علاج MD، قد اس اس اراي الجمع بين الكمون أقصر من بداية مع ارتفاع معدلات مغفرة الشاملة مقارنة اس اس اراي، ويمكن أن تكون ذات قيمة خاصة في المرضى الذين يعانون من أعراض جسدية المرضية [60].

النورادرينالين والدوبامين reuptake المانع

عدة جزيئات تشترك في عمل انتقائي نسبيا على النورادرينالين والدوبامين النقل، وتعزيز مستوياتها في الشق متشابك، مثل الأمينيبتين، ميثيل، Pipradol، ونوميفينزين [74]. ومع ذلك، فإن العديد من هذه المركبات أظهرت آثار جانبية كبيرة نظرا لهيكلها والعمل، والتي هي في الواقع مشابهة للعقاقير منبه نفسي. حتى اثنين المركبات النباتية، والمستمدة من نبتة سانت جون (بيرفوراتوم) تم Adhyperforin وجدت -Hyperforin والتصرف بشكل إيجابي على مستقبلات عابرة المحتملة القناة الايونية تسبب تثبيط مونوامين امتصاص بينما التدخل مع دخول الصوديوم والكالسيوم إلى داخل الخلية [75]. ويمثل المجمع الأكثر استخداما على نطاق واسع في هذه الفئة من قبل بوبروبيون.

بوبروبيون

التركيب الجزيئي بوبروبيون "هو aminoketon أحادي الحلقة، على غرار بطريقة أو بأخرى إلى الأمفيتامينات. كلاهما يتصرف على أحاديات الأمين امتصاص والأمفيتامينات من خلال تعزيز الإفراج عنهم، بوبروبيون عن طريق منع امتصاص ليس بشكل دائم بهم. في عام 1974، وكان يسمى في البداية بوبروبيون "amfebutamone" وبعد ذلك فقط منظمة الصحة العالمية غيرت اسم الجزيء في النظام الحالي. أعمال بوبروبيون كما انتقائي جدا الدوبامين reuptake المانع [76-78]، على أي حال تقارب لها في المختبر أضعف من العديد من الأدوية أو حتى بعض اس اس اراي، مثل سيرترالين. وعلى الرغم من عدم وجود تقارب، بوبروبيون يزيد من التعبير عن نقل الدوبامين مرنا، وارتفاع تركيز الدوبامين [79-81]. ومع ذلك، والخصائص المضادة للاكتئاب الرئيسية بوبروبيون هي نتيجة لامتصاص النورادرينالين، على الرغم من تقارب لها لامتصاص النورادرينالين، بل هو أضعف من الدوبامين، لأنه هو امتصاص النورادرينالين الهائل من المقرر أن hydroxybupropion، وهو المستقلب زيادة مجمع السلف بنسبة 6 أضعاف. هذه الزيادة من النورادرينالين يعطل زيادة الدوبامين [82]. وأخيرا، بوبروبيون تعمل بشكل غير مباشر على عملية التمثيل الغذائي السيروتونين وربما يحول دون alpha3beta4 مستقبلات النيكوتين [83].

بوبروبيون ديه الاستقلاب الكبدي بسبب CYP2B6 و، ثانوي لCYP1A2، 2A6، 2C9، 3A4، و2E1. Hydroxybupropion هو المستقلب الرئيسي (Radafaxine)، ولكن كما أن لديها العديد من نواتج أخرى القضاء عليه من خلال إفراز الكلى. يتم التوصل إلى أقصى تركيز في 03/02 ساعة وحالة مستقرة في 5-8 أيام. نصف الحياة والجرعة الفعالة تظهر مجموعة واسعة نتيجة لعملية التمثيل الغذائي المتغير.

وMD مؤشرات العلاجية على نطاق واسع مع ميزات الحزينة والاكتئاب الموسمي، ولكن كان أول استخدام لها للإقلاع عن التدخين مع انخفاض الرغبة من معدل التدخين [83]. وتشمل وجهات النظر العلاج المقترح كذلك إدارة العجز الجنسي الناجم عن مضادات الاكتئاب هرمون السيروتونين، والعلاج الكيميائي، وحتى أولئك من الأصول الأولية وكذلك ADHD [84-86]. كما مضاد للاكتئاب، وأظهرت بوبروبيون معدل مغفرة أعلى بينما مقارنة مع الدواء الوهمي، ولكن تأثير بسيط قليلا بالمقارنة مع SSRI أو SNRI [87،88]. ومع ذلك، هذه النتيجة مثيرة للجدل كما ارتفاع معدل مغفرة من فينلافاكسين تم الإبلاغ كذلك [89].

وقد استخدمت البوبروبيون أيضا في زيادة لاس اس اراي، والتي تبين لمحة مواتية من التحمل [90]. لا يشار البوبروبيون للمرضى الذين لديهم تاريخ السريري للحجز و، حيث أن جميع مضادات الاكتئاب، ويجب أن تستخدم بحذر في حالات الاكتئاب ثنائي القطب نظرا لخطر الهوس الاستقراء. كان الاستيلاء التأثير السلبي الرئيسي الذي أثار إلغاء من السوق لمعظم NDRIs. في البداية، في الواقع، حتى ألغي بوبروبيون، كما خفضت بشكل كبير من الاستيلاء على عتبة عندما تعطى في جرعة من 450-600 ملغ / يوم. بهذا المعنى، ومع ذلك، وجدت لتكون بدقة الجرعة تعتمد وغير مألوف مع الجرعة المعتمدة حاليا من 150-300 ملغ / يوم [91]. ومع ذلك، يحتاج هذا الخطر المحتمل أن تؤخذ بعين الاعتبار عند يشرع مجمع في المرضى الذين يعانون من أورام الدماغ، ومادة الكحول أو التوقف، وفقدان الشهية أو الشره المرضي مع العصبي. وفيما يتعلق التمثيل الغذائي، وينبغي أن المرضى الذين يعانون من فشل في الكبد أو الكلى تلقي جرعة أقل من بوبروبيون. وتشمل الآثار الجانبية الأكثر شيوعا الغثيان، والأرق، والتعرق، والقلق. تم الإبلاغ عن ارتفاع ضغط الدم دون تأثير على معدل تردد القلب كذلك [92].

نورأدريني ومحددة هرمون السيروتونين مضادات الاكتئاب


ميانسيرين

ميانسيرين هو العقاقير المضادة للاكتئاب tetracyclic تدار كما راسيمات من R (-) وS (+) ميانسيرين هيدروكلوريد بجرعة 30-90 ملغ / يوم [93]. يفترض بعض عناصره للعب دور سواء في الآثار العلاجية والسامة [94]. وقد تم تصميم ميانسيرين أصلا باعتباره دواء مضاد الأرجية. لديها خصائص مهدئة والآثار الجانبية الأكثر تكرارا هو النعاس، الذي يقلل غالبا في غضون الأسبوع الأول من العلاج. كما لوحظ في التجارب السريرية، مضادة للآثار هامشية أقل تواترا من مع ثلاثية الحلقات. من المذكرة، وعدم وجود آثار جانبية القلب والأوعية الدموية مثل زيادة معدل ضربات القلب وانخفاض ضغط الدم هو ميزة أخرى هامة من ميانسيرين [95،96]. يشار ميانسيرين لعلاج الاكتئاب المرتبطة القلق والانفعالات، ومثل ميرتازابين، يشار إليه بشكل خاص للمرضى تجربة الأرق [97].

ميرتازابين

ميرتازابين هو خصم قوي للα المركزي (2) autoreceptors الأدرينالية وheteroreceptors. حصار autoreceptors قبل المشبكي يعزز في نهاية المطاف الإفراج النورادرينالين. من ناحية أخرى، والحصار المفروض على heteroreceptors على الخلايا العصبية السيروتونين يزيد إطلاق السيروتونين. الحصار المفروض على 5-HT2 ومستقبلات 5-HT3 يعزز إطلاق السيروتونين، مما أدى إلى زيادة في النقل العصبي 5-HT1 بوساطة. ميرتازابين ديها تقارب منخفضة لالمسكارينية، الكوليني، ومستقبلات الدوبامين، ولكن تقارب العالية لمستقبلات H1 histaminic يحدد آثاره الرئيسية antihistaminergic (على سبيل المثال، والنعاس، وزيادة الوزن، والتخدير)، التي تسود في الجرعات المنخفضة، في حين أن الزيادات العصبي نورأدريني مع الجرعات العالية، مواجهة بعض الآثار antihistaminergic. على عكس فينلافاكسين، ميرتازابين له آثار الدنيا على مثبطات إعادة امتصاص. جنبا إلى جنب مع الأمينيبتين، بوبروبيون، وموكلوبميد، ميرتازابين هو واحد من مضادات الاكتئاب مع أقل عرضة لخطر العجز الجنسي [98،99]. قد يكون ميرتازابين مناسبة بشكل خاص للمجموعات فرعية مختارة من المرضى مثل تلك متدنية جدا، وخاصة تلك التي في منتصف العمر وكبار السن. من الآثار الجانبية لا يزال إلى حد ما أكثر تفضيلا عن تلك التي ثلاثية الحلقات [100]. وقد أظهرت ميرتازابين أيضا قدر من الفعالية في علاج اضطرابات القلق (بما في ذلك اضطراب ما بعد الصدمة الإجهاد، واضطراب الهلع، اضطراب القلق الاجتماعي، وOCD) واضطراب جسدي غير متمايز [101].

الثلاثي امتصاص المانعون

مثبطات امتصاص السيروتونين، النورادرينالين، الدوبامين، والمعروف باسم تريس هي فئة من مضادات الاكتئاب قيد التطوير من أجل تثبيط انتقائي نقل السيروتونين، النورادرينالين، والدوبامين. على مدى السنوات ال 3 الماضية، وقد تم دراسة العديد من المركبات: دوف 216، 303، دوف 21947، PCR200-SS، NS-2359، وSEP-225289. ويتميز كل من هذه المركبات التي تقارب غريب لمختلف شركات النقل [102]. حتى الآن، أكثر المركبات درس هي Brasofensine (NS-2214)، Dichloropane (RTI-111، O-401)، Diclofensine (رو-8-4650)، Indatraline (لو-19-005)، وTesofensine (NS-2330) . كل من هذه الجزيئات لديها الأيض نشطة والتي، بدورها، قد يكون لها آثار مضادة للاكتئاب. وبداية أسرع من العمل هو التوقع الرئيسي للتريس [103]. وعلاوة على ذلك، وتحليل الشبكة من الدماغ واختلال وظيفي لها تشير إلى أن وكلاء وسائط متعددة مع ومتكاملة من العمل هم أكثر عرضة لإظهار فعالية على نطاق واسع ضد الأعراض الأساسية والمرضية للاكتئاب [104]. في نهاية المطاف، فإن الهدف الرئيسي للتريس يكون لتحقيق أكبر فعالية من حيث الاستجابة ومعدلات الشفاء مع الحفاظ على البيانات الشخصية مواتية من التحمل نتيجة لعمل انتقائي على الناقلين مونوامين.

في الوقت الحاضر لا TRI في السوق، في حين أن معظم منهم يخضعون لمحاكمات قبل السريرية.

مضادات الذهان غير التقليدية


كيوتيابين

كيوتيابين، وهي مضادات الذهان غير التقليدية المستخدمة لعلاج مرض الفصام، وقد استخدمت بنجاح على مدى السنوات الماضية في علاج الاكتئاب، والاكتئاب ثنائي القطب وخاصة [104]. اعتبارا من ديسمبر 2009، وافقت ادارة الاغذية والعقاقير الكيوتيابين XR لعلاج مساعد للMD. وفي الآونة الأخيرة، كما تم أثبتت فعالية الكيوتيابين 'في علاج الاكتئاب ثنائي القطب. إجراء Suppes وزملاء لها 8 أسابيع وهمي تسيطر عليها، والعشوائية محاكمة التعمية المزدوجة على مرضى الاكتئاب ثنائي القطب، مما يدل على درجة كبيرة من الكفاءة ومغفرة [105]. آثار الإجراءات المضادة للاكتئاب كيوتيابين "على 5-HT (2A)، 5-HT (1A)، الدوبامين والغلوتامات المستقبلات، وNAT [106107]. Norquetiapine (المستقلب الرئيسي للQuietiapine)، على وجه الخصوص، لديها تقارب قوي لNET وتمنع أكثر قدرة، في حين الكيوتيابين نفسها حتى لا ربط NET (Norquietiapine: كي = 34.8 مليمول؛ الكيوتيابين: كي> 10000) (جدول رقم 2 ).

نقاش

التقاء في الأدلة أن المركبات المؤثرة على النقل العصبي نورأدريني هي أكثر فعالية من تلك التي مع عمل هرمون السيروتونين النقي موجودا. باور وزملاؤه في الفوقية، وجدت، تحليل كل التجارب المتوفرة مع فينلافاكسين في علاج MD، بما في ذلك الاكتئاب المقاوم للعلاج والوقاية من الانتكاس طويلة الأجل التي فينلافاكسين كان مرتبطا مع زيادة معدلات الاستجابة ومغفرة مقارنة مع اس اس اراي drop- مماثلة اسعار خارج. مقارنة ثلاثية الحلقات، وقدرت ردا على فينلافاكسين أن يكون أكبر ولكن ليس إلى حد يعتد به إحصائيا. لم يلاحظ أي فرق في معدلات الشفاء. ثلاثية الحلقات كانت أقل التسامح مع ارتفاع معدلات التسرب الإجمالية. وخلص الباحثون إلى أن فينلافاكسين يبدو أكثر فعالية من اس اس اراي، وعلى الأقل بنفس فعالية مضادات الاكتئاب ثلاثية الحلقات، في علاج MDD [108109].

أندرسون وTomenson، في هم الفوقية تحليلها. تقييم فعالية اس اس اراي ومضادات الاكتئاب ثلاثية الحلقات، لاحظ أن هذه الأخيرة كانت أكثر فعالية من اس اس اراي في المرضى المنومين الذين يعانون من الاكتئاب الشديد [110]. هذه البيانات قد تشير إلى أن مضادات الاكتئاب مع العمل نورأدريني أكثر فعالية في علاج الاكتئاب الشديد من تلك التي مع عنصر هرمون السيروتونين الحصري. الى جانب ذلك، في الدراسة المذكورة، تلك مضادات الاكتئاب بدرجة أكبر من تثبيط نورأدريني أو العمل المزدوج (أي ميرتازابين، فينلافاكسين، وMilnacipran)، أظهر فعالية أكبر من اس اس اراي. فعالية متفوقة من هذه مضادات الاكتئاب قد تكون ذات صلة إلى عنصر نورأدريني بها [111].

كما واقع الأمر، في أكبر الفوقية تحليلها. أجريت حتى الآن، مقارنة فعالية من اس اس اراي مقابل سيروتونيني المفعول ونورأدريني مضادات الاكتئاب (بما في ذلك فينلافاكسين، تناولوها، Milnacipran، ميرتازابين، ميانسيرين، وموكلوبميد)، تم العثور على ميزة متواضعة في صالح هذه المركبات [112].

من حيث الفعالية والتحمل، ومؤخرا ميتا - تحليل ومقارنة Reboxetine مع اس اس اراي في علاج MD، وجد انخفاض معدل التوقف بسبب التعصب للاس اس اراي وفعاليتها الشاملة [112]. تم العثور على نتائج مماثلة النظر ميرتازابين مقابل اس اس اراي [113]. وفيما يتعلق علاج الاكتئاب المقاوم للSSRI، والتحول إلى a-SSRI غير الطبقة يبدو لإنتاج متواضعة، ولكن ذات دلالة إحصائية، ميزة من التحول إلى مختلف SSRI [115]. من ناحية أخرى، الدراسات المختلفة تشير إلى أن اس اس اراي (أي إسيتالوبرام) هي فعالة مثل فينلافاكسين أو تناولوها، وأفضل تسامحت [114]. أخيرا، بعض الفوقية -analyses تشير إسيتالوبرام لتكون متفوقة على غيرها اس اس اراي واس اس اراي [115].

فإنه سيكون من مصلحة سريرية كبيرة ليس فقط لمقارنة فعالية والتحمل من مضادات الاكتئاب نورأدريني والمختلط فيما بينها وبالمقارنة مع اس اس اراي في الاضطرابات الوجدانية، ولكن أيضا لتقييم مدى يترجم العمل نورأدريني من حيث تحسين الأعراض. على سبيل المثال، عندما تم ذلك في دراسات سابقة [13]، ظهرت الارتباطات الهامة من حيث الإجراءات المضادة للاكتئاب معين وتحسين الأعراض الأولية (على سبيل المثال، عملت ديسيبرامين أفضل على التخلف السيارات والمزاج المكتئب حين الباروكستين على العداء والقلق). سيتم إجراء المزيد من الدراسات في هذا المنظور ولذلك محل تقدير كبير من أجل تطوير عقاقير جديدة بعقلانية وفهم أفضل لتأثير الأنظمة الحالية.

في الختام، على الرغم من التقدم لفتا في pathophisiology من الاضطرابات العاطفية في العقد الأخير، ونظام نورأدريني لا يزال لديه دور محوري في علم الادوية النفسية السريرية من مضادات الاكتئاب. على الرغم من المركبات pronoradrenergic نقية قد لا تكون فعالة كما اس اس اراي في علاج MD، عندما يتم الجمع بين باعتبارها تصرفات اثنين يحدث في كثير من مضادات الاكتئاب للعمل المختلط-تأثير تآزر على ذلك. يجب الدراسات Pharmacogenomic وpharmacogenetic في المستقبل القادم تساعد الأطباء على فهم والتي من المفترض المرضى على الاستجابة بشكل أفضل للالمضادة للاكتئاب محددة بدلا من واحد آخر.

تضارب المصالح

الكتاب ليس لديهم تضارب في المصالح.

المراجع

• 1
  Bunney WE، الابن، ديفيس JM. بافراز في ردود فعل اكتئابية. مراجعة. قوس الجنرال الطب النفسي 1965؛ 13: 483 - 494.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 826
• 2
  Schildkraut JJ. الفرضية الكاتيكولامين من الاضطرابات العاطفية: استعراض الأدلة الداعمة. آم J الطب النفسي 1995؛ 122: 509 - 522.

  • CROSSREF
• 3
  ميلان MJ. المزدوجة والوكلاء الذين يتصرفون الثلاثي لعلاج الأعراض الأساسية وشارك في المهووسين من الاكتئاب الشديد: مفاهيم جديدة، وعقاقير جديدة. Neurotherapeutics 2009؛ 6: +53 - 77.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 47
• 4
  شرم Mansari M، Guiard BP، Chernoloz O، قنبري R، كاتز N، Blier P. الأقرب للتفاعلات بافراز-الدوبامين في علاج اضطراب اكتئابي. CNS Neurosci ذر 2010؛ 16: +1 - +17.

  رابط مباشر:

  • ملخص
  • المادة كاملة (HTML)
  • PDF (564K)
  • المراجع
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 10
• 5
  ميتشل ND، بيكر GB. تحديثا على دور الغلوتامات في الفيزيولوجيا المرضية للاكتئاب. اكتا Psychiatr Scand 2010؛ 122: 192 - 210.

  رابط مباشر:

  • ملخص
  • المادة كاملة (HTML)
  • PDF (192K)
  • المراجع
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 13
• 6
  ليفنسون AJ، فيتزجيرالد PB، فافالي G، Blumberger DM، ديغل] M، Daskalakis ZJ. والدليل على عجز المثبطة القشرية في اضطراب اكتئابي. بيول الطب النفسي 2010؛ 67: 458 - 464.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 18
• 7
  مولر N، شوارتز MJ. المتبادل Neuroimmune الغدد الصماء في اضطرابات الفصام والمزاج. الخبراء القس Neurother 2006؛ 6: 1017 - 1038.

  • CROSSREF،
  • مجلات
• 8
  وفتيس JM، Huckans M، Morasco BJ. آليات Neuroimmune التي يسببها خلوى الاكتئاب: النظريات الحالية واستراتيجيات العلاج الرواية. Neurobiol ديس 2010؛ 37: 519 - 533.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 26
• 9
  اسرمان D، واسرمان J، Sokolowski M. راثة HPA محور، والاكتئاب والانتحار. اليورو الطب النفسي 2010؛ 25: 278 - 280.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 5
• 10
  يانسن DG، Caniato RN، فيرستر JC، Baune BT. مراجعة psychoneuroimmunological على السيتوكينات تشارك في الاستجابة للعلاج المضاد للاكتئاب. همهمة Psychopharmacol 2010؛ 25: 201 - 215.

  رابط مباشر:

  • ملخص
  • PDF (152K)
  • المراجع
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 24
• 11
  كاتانيو A، Sesta A، كالابريس F، نيلسن G، ريفا MA، Gennarelli M. يتم تخفيض تعبير عن VGF في الكريات البيض من مرضى الاكتئاب ويتم استعادة من قبل العلاج المضاد للاكتئاب فعالة. Neuropsychopharmacology 2010؛ 35: 1423 - 1428 ه.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 9
• 12
  Bocchio-Chiavetto L، Bagnardi V، Zanardini R، وآخرون. المصل والبلازما BDNF المستويات في الاكتئاب الشديد: دراسة التكرار والتحليلات الوصفية. العالم J بيول الطب النفسي 2010؛ 11: 763 - 773.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 27
• 13
  كاتز MM، بودين CL، فريزر A. إعادة النظر في الاكتئاب والإجراءات من مضادات الاكتئاب: كشف الروابط بين العصبية والعناصر السلوكية. J تؤثر Disord 2010؛ 120: +16 - +23.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 7
• 14
  Linnoila M، Virkkunen M، شينين M، Nuutila A، ريمون R، جودوين FK. يفرق انخفاض السائل النخاعي تركيز حمض 5-hydroxyindoleacetic التسرع من السلوك العنيف nonimpulsive. علوم الحياة 1983؛ 33: 2609 - 2614.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 932
• 15
  كاتز MM، ماس JW. علم الادوية النفسية والمسببات الدول psychopathologic: نبحث في الطريق الصحيح Neuropsychopharmacology 1994؛ 10: 139 - 144.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 13
• 16
  هاندلي SL. مسارات 5-هيدروكسي في القلق وعلاجه. Pharmacol ذر 1995؛ 66: 103 - 148.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 146
• 17
  Morilak DA، فريزر A. مضادات الاكتئاب والنظم ذو مفعول أحادي الأمين الدماغ: نهج الأبعاد لفهم التأثيرات السلوكية في الاكتئاب واضطرابات القلق. الباحث J Neuropsychopharmacol 2004؛ 7: 193 - 218.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 84
• 18
  Racagni G، برونيللو N. الفسيولوجيا إلى وظيفة: نشاط المخ والموصلات العصبية. كثافة العمليات كلين Psychopharmacol 1999؛ 14 (ملحق 1): S3 - S7.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 22
• 19
  Geerling JC، شين JW، شيمنتي PC، [لووي] م. مجاور للبطين نواة تحت المهاد البصري: التوقعات محور عصبي إلى الدماغ. J شركات Neurol 2009؛ 518: 1460 - 1499.

  رابط مباشر:

  • ملخص
  • المادة كاملة (HTML)
  • PDF (15421K)
  • المراجع
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 21
• 20
  يوان WX، تشن SR، تشن H، بان HL. تحفيز ألفا (1) -adrenoceptors يقلل من مدخلات متشابك glutamatergic من afferents الأولية من خلال GABA (A) مستقبلات وT-نوع كا (2+) قنوات. علم الأعصاب 2009؛ 158: 1616 - 1624.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 7
• 21
  برول AB، Kaffenberger T، هيرفج U. هرمون السيروتونين وتعديل نورأدريني معالجة العاطفة مضادات الاكتئاب جرعة واحدة. Neuropsychopharmacology 2010؛ 35: 521 - 533.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 15
• 22
  Gorea E، أدريان J. تنظيم هرمون السيروتونين من الخلايا العصبية coerulean نورأدريني: أدلة الكهربية لإشراك مستقبلات 5-HT2. اليورو J Pharmacol 1988؛ 154: 285 - 291.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 79
• 23
  الذهب PW، Chrousos GP. منظمة النظام التوتر والتقلبات في السوداوي وغير نمطية الاكتئاب: ارتفاع مقابل انخفاض CRH / EN. مول الطب النفسي 2002؛ 7: 254 - 275.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 447
• 24
  ستال SM. علم الأدوية النفسية بسيطة من مضادات الاكتئاب، الجزء 1: مضادات الاكتئاب لديها سبع آليات متميزة للعمل. J كلين الطب النفسي 1998؛ 59 (ملحق 4): +5 - +14.

  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 153
• 25
  فريزر A. إشراك بافراز في العمل المضادة للاكتئاب. J كلين الطب النفسي 2000؛ 61 (ملحق 10): +25 - 30.

  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 55
• 26
  هود SD، Melichar JK، تايلور LG، وآخرون. وظيفة نورأدريني في اضطراب القلق العام: تأثير العلاج مع الفينلافاكسين على الاستجابات الفسيولوجية والنفسية للطعن الكلونيدين. J Psychopharmacol 2010. دوى: 10.1177 / 0269881109359099.
• 27
  الشباب EA، أبيلسون JL، كاميرون OG. تفاعل الدماغ نظام نورأدريني والغدة النخامية، الغدة الكظرية (HPA) المحور في الإنسان. Psychoneuroendocrinology 2005؛ 30: 807 - 814.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 17
• 28
  برونيللو N، Blier P، جاد ليرة لبنانية، وآخرون. النورادرينالين في المزاج واضطرابات القلق: الدراسات الأساسية والسريرية. كثافة العمليات كلين Psychopharmacol 2003؛ 18: 191 - 202.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 49
• 29
  Boudet C، Peyrin L. تأثير المقارن من tropolone وديوسمين على COMT الوريدي والنشاط متعاطفة في الفئران. القوس كثافة العمليات Pharmacodyn ذر 1986؛ 283: 312 - 320.

  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 7
• 30
  أندرسون J، كريستنسن AS، بانج-أندرسون B، Strømgaard K. التطورات الحديثة في فهم التفاعل من العقاقير المضادة للاكتئاب مع السيروتونين والنورادرينالين النقل. تشيم COMMUN (Camb) 2009، 25: 3677 - 3692.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 11
• 31
  براير-فاف U. مصير الأيضي أميتريبتيلين، نورتريبتيلين وamitriptylinoxide في الإنسان. المخدرات متعب القس 2004؛ 36: 723 - 746.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 23
• 32
  UHER R، ماير W، هاوزر J، وآخرون. فعالية التفاضلية من إسيتالوبرام ونورتريبتيلين بشأن التدابير الأبعاد من الاكتئاب. برازيلي J الطب النفسي 2009؛ 194: 252 - 259.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 42
• 33
  Holtzheimer PE، Nemeroff CB. العلاجات الناشئة عن الاكتئاب. الخبراء أوبان Pharmacother 2006؛ 7: 2323 - 2339.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 16
• 34
  كاتز MM، Tekell JL، بودين CL، برانان S، هيوستن JP، بيرمان N، فريزر A. ظهور والآثار السلوكية في وقت مبكر من مضادات الاكتئاب مختلفة دواء وهمي في الاكتئاب. Neuropsychopharmacology 2004؛ 29: 566 - 579.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 93
• 35
  Grunze H، كاسبر S، جودوين G، وآخرون؛ لفرقة العمل WFSBP على إرشادات العلاج للاضطرابات القطبين. الاتحاد العالمي لجمعيات الطب النفسي البيولوجي (WFSBP) مبادئ توجيهية لالمعالجة البيولوجية للاضطرابات القطبين، الجزء الأول: علاج الاكتئاب الثنائي القطب . العالم J بيول الطب النفسي 2002؛ 3: 115 - 124.

  • CROSSREF،
  • مجلات
• 36
  بييت M، بيترز S. الهوس الناجم عن المخدرات. المخدرات ساف 1995؛ 12: 146 - 153.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • CAS،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 47
• 37
  كيمورا M، Tateno A، روبنسون RG. علاج poststroke معمم اضطرابات القلق المرضية مع poststroke الاكتئاب: تحليل مدموجة المحاكمات نورتريبتيلين. آم J Geriatr الطب النفسي 2003؛ 11: 320 - 327.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 20
• 38
  Bandelow B، زوهار J، هولاندر E، وآخرون؛ لقوة WFSBP العمل بشأن المبادئ التوجيهية لعلاج القلق، والوسواس القهري واضطرابات ما بعد الصدمة. الاتحاد العالمي لجمعيات الطب النفسي البيولوجي (WFSBP) المبادئ التوجيهية لعلاج الدوائي من القلق، الوسواس القهري واضطرابات ما بعد الصدمة. العالم J بيول الطب النفسي 2002؛ 3: 171 - 199.

  • CROSSREF،
  • مجلات
• 39
  بودمير M. التسمم بمضادات الاكتئاب. ذر Umsch 2009؛ 66: 335 - 341.

 

[رافت ابراهيم]

 

http://hmg.oxfordjournals.org/content/16/6/691.full

القسم التالي

ملخص

الكروموسوم البشري 15q11-13 هو مكان معقد يحتوي على جينات مطبوع، فضلا عن مجموعة من ثلاثة GABA A مستقبلات الوحيدات (جبر) GABRB3 genes-، GABRA5 وGABRG3. حذف أو ازدواجية 15q11-13 الجينات جبر يحدث في العديد من الاضطرابات العصبية النمائية الإنسان بما في ذلك متلازمة برادر ويلي (PWS)، متلازمة أنجلمان (AS) والتوحد. يتم تخفيض GABRB3 البروتين التعبير أيضا في متلازمة ريت (RTT)، التي تسببها طفرات في MECP2 على Xq28. على الرغم من Gabrb3 وأعرب عن biallelically في مخ الفأر، توجد بيانات متضاربة بشأن الوضع يطبع من الجينات 15q11-13 جبر في البشر. باستخدام الترميز الأشكال النووية المنفردة وتبين لنا أن كل الجينات جبر ثلاثة يتم التعبير عن biallelically في 21 عينة الدماغ السيطرة، مما يدل على أن هذه الجينات لا مطبوع في القشرة الإنسان العادي. ومن المثير للاهتمام، وأربعة من ثمانية التوحد واحدة من خمس عينات الدماغ RTT أظهرت monoallelic أو منحرفا للغاية التعبير أليلية واحد أو أكثر جبر الجيني، مما يشير إلى أن التقلبات جينية من هذه الجينات هو شائع لظهور هذه الاضطرابات السلوكية. كشف الكمي في الوقت الحقيقي تحليل RT-PCR من PWS وAS العينات مع الأب والحذف 15q11-13 الأمهات تحيز التعبير الأب من GABRB3، في حين أظهرت عينات الدماغ RTT انخفاض كبير في GABRB3 وUBE3A. أظهر مناعي لونين وتسلسل بيسلفيت في الخلايا العصبية SH-SY5Y أن MeCP2 بربط المواقع الدليل السياسي الشامل مثيلة داخل GABRB3. أظهرت دراساتنا السابقة أن الاقتران مثلي 15q11-13 في الخلايا العصبية يتوقف على MeCP2 وعطلت في RTT والتوحد القشرة. جنبا إلى جنب، وتشير هذه النتائج إلى أن MeCP2 بمثابة منظم لونين للتعبير الأمثل لكل من الأليلات من GABRB3 في الخلايا العصبية.

القسم السابق القسم التالي

المقدمة

الكروموسوم البشري 15q11-13 هو مكان معقد يحتوي على جينات مطبوع تشارك في اثنين من العصبية متلازمة الاضطرابات برادر ويلي (PWS) ومتلازمة أنجلمان (AS). PWS، وهو اضطراب يتميز فرط الأكل مما يؤدي إلى السمنة مع خفيفة الى معتدلة التخلف العقلي، وينتج عن نقص الأب من 15q11-13. AS، تتميز التخلف العقلي الشديد مع عدم وجود الكلام والضحك غير مناسب المفرط، والناجمة عن الأمهات 15q11-13 نقص (1). غالبية PWS وAS الحالات (~70٪) نتيجة من دي نوفو الحذف تمتد المنطقة 4 ميجا بايت من 15q11-13. disomy أحد الأبوين (UPD) من كروموسوم الأمهات سبب آخر شائع (~25٪ من الحالات) من PWS، في حين أن الأب UPD هو سبب نادر من AS. الطفرات داخل أعربت أمهات مطبوع UBE3A الجينات، كافية للتسبب AS (2، 3)، وتحدث في ~10٪ من الحالات (1).
التوحد هو اضطراب النمو العصبي المعقدة التي تتميز ضعف في التفاعل الاجتماعي، والسلوكيات المحظورة والنمطية، والعجز في اللغة والتواصل (4). بالرغم من وجود عنصر وراثي قوي لمرض التوحد، تم تحديد عدد قليل من الجينات المرشحة (5). كروموسوم 15q11-13 هو واحد من المواضع الجينية المتورطين في التوحد، والازدواجية الأمهات في هذه المنطقة لا تزال واحدة من تشوهات الوراثية الخلوية الأكثر شيوعا وجدت في حالات التوحد مجهول السبب (6). أدلة إضافية من الربط وجمعية دراسات متعددة تشير تشارك 15q11-13 الجينات في مرض التوحد (+7 - 10).
متلازمة ريت (RTT) هو اضطراب النمو العصبي الشديد الذي يؤثر في المقام الأول الإناث والتي تسببها طفرات في العاشر مرتبطة MECP2 الجيني، والميثيل الدليل السياسي الشامل بروتين 2 (11). يتميز RTT في أوائل التنمية ما بعد الولادة الطبيعية تليها خسارة مفاجئة من المعالم التنموية حول 6-18 شهرا من العمر مما يؤدي إلى غياب الكلام، والتخلف العقلي الشديد وفقدان حركات اليد هادفة (12). مثل التوحد، يتم تصنيفها RTT كاضطراب النمو المتفشي (PDD)، وهو الوحيد من خمسة ثائق تصميم المشاريع مع سبب وراثي معروف (4). في دراسة جزيئية الأخيرة من الدماغ البشري بعد الوفاة، سواء RTT وعينات التوحد أظهرت عيوب التعبير في اثنين من الجينات 15q11-13، UBE3A وGABRB3، مما يشير إلى أن مسارات متداخلة وdysregulated في هذه الاضطرابات (13).
كروموسوم 15q11-13 يحتوي على مجموعة من ثلاثة GABA A مستقبلات الجينات الوحيدات، GABRB3، GABRA5 وGABRG3، ترميز مفارز مستقبلات الناقل العصبي المثبط للالغاما غاما حمض (GABA). وorthologues الماوس، الواردة ضمن كتلة syntenic على الصبغي 7qB5، يتم التعبير عن biallelically في الدماغ (+14 - +16)، ومع ذلك، توجد بيانات متضاربة حول الوضع يطبع من البشر 15q11-13 GABA A جينات مستقبلة الوحيدات (17 - 21). اقترحت دراسة مبكرة من GABRB3 التعبير في الخلد عداري الشكل والأنسجة البشرية الزغب العادية تفضيلية التعبير الجيني الأم (20). جبريل وآخرون. (21) الكشف في وقت لاحق 15q11-13 GABA تعبير مستقبلات في خطوط هجين بين الإنسان والفأر خلية جسدية متعددة تحتوي على الأم أو الأب الكروموسوم البشري 15، مما يشير إلى أن هذه الجينات هي غير مطبوع. ميغورو آخرون. (17) يقوم بنقل الخلية بوساطة microcell لخلق الماوس الهجينة A9 إيواء إما العادي الأب أو الأم الكروموسوم البشري 15. إن الإنسان أعربت أبويا الجينات مطبوع احتفظت يطبع طبيعية في الهجينة A9، ومع ذلك، فإن GABA وأعرب عن جينات مستقبلة فقط من كروموسوم الأب. Bittel وآخرون. (18، 19) أثبتت أدلة تدعم الأب التحيز التعبير عن GABA الإنسان جينات مستقبلة مع ميكروأري تحليلات. كلتا الدراستين، مقارنة الحذف وUPD خطوط الخلايا lymphoblastoid من PWS وAS المرضى، وجد التحيز الأب ثابت من GABRB3 والتعبير GABRA5 الجينات.
أدلة توحي إضافي ليطبع من الإنسان 15q11-13 GABA A مستقبلات يأتي من الخلافات توقيت تكرار أليل معين من تسلسل الجينوم بالقرب من GABA A جينات مستقبلة (22)، وفروق في التوقيت النسخ المتماثل بين المتماثلات الأبوية هي سمة من الجينات مطبوع (23) . كلاهما مطلوب مساهمات الكروموسومات الأبوية لتوقيت تكرار السليم لل15q11-13 GABA A جينات مستقبلة، مما يشير إلى التفاعلات العابرة بين homologs الوالدين (24). وعلاوة على ذلك، جمعية مثلي من 15q11-13 المجالات يحدث في الخلايا الليمفاوية الطبيعية، ولكن ناقصة في PWS وAS العينات، مما يدل على أن التفاعل عبر ينطوي على جمعية المتماثلات مطبوع معاكس (25). جمعية مثلي من 15q11-13 الأليلات GABRB3 يحدث في الخلايا العصبية الناضجة داخل الدماغ، وناقصة في RTT والتوحد (26).
وبما أن تورط 15q11-13 GABA A مستقبلات الجينات في الإنسان اضطرابات متعددة، بما في ذلك مرض التوحد، وتحديد نهائيا الوضع يطبع من هذه الجينات في الدماغ البشري أمر بالغ الأهمية لفهم دورها المحتمل في التسبب في اضطرابات النمو العصبي. في هذه الدراسة، تم استخدام الأشكال النووية المنفردة (النيوكلوتايد) في المنطقة ترميز GABRB3، GABRA5 وGABRG3 للتحقيق في التعبير أليلية النصوص من القشرة الدماغية. منذ عدة جينات مطبوع، بما في ذلك UBE3A، يحمل الخلايا العصبية محددة يطبع (16، 27 - +29)، وقد أجريت هذه الدراسة يطبع باستخدام ما بعد الوفاة أنسجة المخ البشري. والإنسان 15q11-13 GABA تم تحديد مستقبلات الجينات الوحيدات أن يكون التعبير biallelic على قدم المساواة في جميع العينات السيطرة، مما يدل على أن هذه الجينات لا مطبوع في العادية القشرة الأمامية. في المقابل، كشف تحليل التعبير أليلية أن أربع عينات التوحد مجهول السبب وعينة واحدة RTT أظهرت monoallelic أو منحرفا للغاية التعبير أليلية من GABA واحد أو أكثر من الجين المستقبل. وعلاوة على ذلك، أظهر التحليل الكمي للGABRB3 نص في PWS وAS عينات الدماغ دليل على وجود تحيز التعبير الأب عندما متحدر من والدين 15q11-13 مساهمة تفتقر. هذه النتائج تفسر الملاحظات السابقة بالانحياز الأب من GABRB3 التعبير، وتشير إلى أن تشوهات جينية في 15q11-13 التي تعمل على dysregulate GABRB3 التعبير قد يكون أمرا شائعا نسبيا في الأفراد المصابين بالتوحد دون التعديلات الوراثية الخلوية يمكن اكتشافها.

القسم السابق القسم التالي

النتائج

عادة يتم التعبير عن الجينات 15q11-13 GABA A مستقبلات biallelically في القشرة، ولكن monoallelically أعرب في بعض العينات RTT والتوحد

من أجل تحديد بشكل قاطع إذا 15q11-13 GABA تعبير جينات مستقبلات المعرض مطبوع، تم تحليل التعبير أليلية في عينات الدماغ السيطرة من القشرة الأمامية، أدرجت منطقة برودمان 9. RTT والتوحد عينات الدماغ أيضا في تحليل لاختبار دليل على جينية التقلبات. تم عزل DNA و RNA من المجمدة عينات الدماغ بعد الوفاة مع فاصل زمني بعد الوفاة (PMI) <30 ساعة (التفاصيل في المواد التكميلية، الجدول S1). تم تحليل نسخة من كروموسوم رقم 15q11-13 من قبل مضان DNA الموقع التهجين (FISH DNA) في استخدام مسبار GABRB3 (26)، تهجين لعينات الدماغ على ميكروأري الأنسجة (30). وتم التحقق العادية disomic 15q11-13 مساهمات في جميع السيطرة، RTT وAUT عينات الدماغ (لا تظهر البيانات).
لتحديد الأشكال للتمييز التعبير أليلية، تم فحص تعدد الأشكال في المنطقة ترميز GABRB3، GABRA5 وGABRG3 للتغاير في عينات من الحمض النووي الجيني من القشرة الدماغية الإنسان. تم تحديد المورثات التي أليل معين انزيم الهضم تقييد المنتجات PCR أو عن طريق التسلسل المباشر. وكانت الترددات أليل تحت سيطرة واضطراب طيف التوحد العينات التي تم تحليلها مقارنة بالقيم التي أعلن عنها في قاعدة البيانات SNP (http://www.ncbi.nlm.nih.gov) لrs2912582، rs140679 وrs140682 (الجدول 1). وكان تردد البيانات أليلية غير متوفر لrs20318 SNP داخل GABRB3، ومع ذلك تغاير لهذا SNP كان من الشائع في إطار دراسة السكان (الجدول 1).

عرض هذا الجدول:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

الجدول 1.

ملخص الترددات أليل لتعدد الأشكال المستخدمة في تحليل التعبير أليلية

تم تحديد التعبير أليلية في عينات متخالف بواسطة RT-PCR، تليها أليل معين تقييد الهضم أو كدنا] تسلسل (الشكل 1). كل 21 الضوابط متخالف تحليلها أظهرت التعبير biallelic المساواة لكل GABA A بالمعلومات SNP جين مستقبلات الوحيدات (الجدول 2 وبيانات تمثيلية في الشكل 1). بالإضافة إلى ذلك، كما أظهرت العينة الضابطة واحد التعبير biallelic المتساوي للrs2912582 GABRB3 3'-UTR SNP (لا تظهر البيانات). حلل أظهرت معظم RTT (أربع من خمس سنوات) وأربعة من ثمانية عينات التوحد الدماغ التعبير biallelic المتساوي للGABA A جينات مستقبلات الوحيدات، ولكن أربعة من ثمانية التوحد بالمعلومات واحد من أصل خمسة عينات RTT بالمعلومات أظهرت التعبير monoallelic أو منحرفا للغاية، تلخيصها في الجدول 3 مع بيانات تمثيلية هو مبين في الشكل 1. كان التعبير عن GABA A مستقبلات النصوص لا يمكن كشفها في عدة RTT والتوحد عينات (ND، الجدول 3)، على الأرجح بسبب مستويات منخفضة جدا من التعبير، التي سبق وصفها لGABRB3 (13). تم التحقق من جودة النص بواسطة RT-PCR من الجينات التدبير المنزلي، GAPDH. جميع العينات، بما في ذلك RTT 1748، RTT 1815 وAUT 5173 أظهرت مستويات طبيعية من GAPDH بواسطة RT-PCR (لا تظهر البيانات)، مما يدل على أن مستويات GABA A مستقبلات نص لا يمكن اكتشافها على وجه التحديد في هذه العينات. العدد الكلي للعينات السيطرة تحليلها (21 كان) أكبر من عدد RTT (5) أو التوحد (8) العينات التي تم تحليلها لكل الجينات، مما يشير إلى أن التعبير monoallelic من 15q11-13 GABA A جينات مستقبلة ليس متغير في عموم السكان ولكن محددة إلى RTT وعينات من مرض التوحد.

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الشكل 1.

يطبع تحليل 15q11-13 GABA A جينات مستقبلة. (A) الاستشرابية التسلسل تثبت التعبير biallelic متساو من GABRB3 (SNP rs20318) وGABRG3 في عينات السيطرة. تسلسل في لوحات العليا هي الحمض النووي ومتواليات في لوحات أقل الجيني هم من كدنا]. السهام السوداء تبرز SNP في كل اللوني. AUT 797 يظهر واضحا التعبير monoallelic من GABRB3 وGABRG3 وRTT 5214 قد انحرفت التعبير عن أليل T في GABRG3. والتسلسل كلا الاتجاهين الأمامي والخلفي لكل فرد وكانت الاستشرابية ثابت. (B) أليل محددة تحليل تقييد هضم GABRA5 يوضح العادي التعبير المساواة biallelic في الضوابط ومعظم التوحد والعينات RTT. تحتوي لوحة العليا لجنة التنسيق الإدارية I-هضم الحمض النووي الجيني من كل فرد ويحتوي على لوحة أقل المنتجات [كدنا لجنة التنسيق الإدارية I هضمها. لجنة التنسيق الإدارية I يقطع أليل C ولكن لا قطع أليل T من GABRA5 SNP. الضوابط والعديد من التوحد والعينات RTT تثبت التعبير biallelic على قدم المساواة، تم الكشف عن ولكن فقط أليل C من GABRA5 في AUT 5173.

عرض هذا الجدول:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

الجدول 2.

النمط الجيني وأليلية التعبير النتائج للعينات سيطرة الدماغ

عرض هذا الجدول:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

الجدول 3.

النمط الجيني والتعبير أليلية النتائج للعينات الدماغ RTT وAUT

15q11-13 GABA A مستقبلات الخسارة من biallelic التعبير يرتبط مع بروتين العيوب GABRB3 في عينات التوحد الدماغ

سابقا، وجدنا انخفاض كبير في البروتين GABRB3 في مجموعة فرعية من عينات التوحد الدماغ (13). لتحديد ما إذا كانت الخسارة من وbiallelic (لوب) تعبيرا عن GABA A جينات مستقبلات الوحيدات في عينات التوحد يرتبط مع انخفاض مستويات البروتين GABRB3، قارنا القيم البروتين السابقة GABRB3 تطبيع يحددها طخة مناعية شبه الكمي (13) بين مجموعات من الأفراد بناء في حالة التعبير أليلية. عينات التوحد مع لوب تعبير عن واحد أو أكثر 15q11-13 GABA A مستقبلات الوحيدات الجينات قد خفضت بشكل ملحوظ للغاية نسبة البروتين GABRB3 مقارنة مع الضوابط والتعبير عن biallelically عينات التوحد (الشكل 2 A). لم يكن هناك اختلاف في البروتين GABRB3 بين عينات الرقابة وعينات التوحد مع GABA biallelic تعبير مستقبلات (الشكل 2 A). وتشير هذه النتائج إلى أن الوضع أليلية التعبير عن 15q11-13 GABA A مستقبلات الجينات الوحيدات تتوقع العيوب البروتين التعبير عن GABRB3 في التوحد.

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الرقم 2.

GABRB3 البروتين ونص المستويات في عينات التوحد الدماغ. (A) مستويات البروتين GABRB3 المنشورة سابقا (13) كنسبة يعني ± SEM من جميع العينات في كل فئة وتمت مقارنة بين الضوابط (شريط أبيض)، وعينات من التوحد مع التعبير biallelic (شريط رمادي فاتح) وعينات من التوحد مع لوب 15q11-13 GABA تعبير مستقبلات واحد على الأقل الجينات جبر (لوب، شريط رمادي غامق). عدد الأفراد المدرجة في كل فئة يظهر بين قوسين إلى جانب تسمية كل خ -axis. عينات لوب التوحد أظهرت أقل بكثير تعبير البروتين GABRB3 من الضوابط (P = 0.0004) وعينات التوحد biallelic (P = 0.004)، ولكن لم يكن هناك اختلاف كبير (NS) بين الضوابط وعينات التوحد biallelic. تم قياس (B) مستويات النص GABRB3 في التوحد والسيطرة على عينات القشرة المخية التي كتبها الكمي في الوقت الحقيقي وأظهرت مستويات RT-PCR. GABRB3 نسخة طبيعية لGAPDH لعناصر (شريط أبيض، تمثل متوسط ​​± SEM من سبع عينات) وعينات التوحد الفردية تمثل يعني ± SEM من مكررات ثلاثة لكل عينة التوحد. يشار إلى عينات لوب التوحد مع أشرطة رمادية داكنة والحانات رمادي فاتح تمثل عينات التوحد مع التعبير biallelic. اثنين من أربع عينات لوب التوحد، AUT 1174 وAUT 5173، عرضت بشكل ملحوظ انخفضت مستويات النص مقارنة مع الضوابط.

الكمي في الوقت الحقيقي RT-PCR ثم يقوم بنفس عينات [كدنا التوحد الدماغ تحليلها في الجدولين 2 و 3 لتحديد ما إذا كان الوضع التعبير أليلية يعكس مستوى النص الكامل. وعلى النقيض من اختلافات واضحة في بروتين GABRB3، كانت مستويات النص GABRB3 المتغيرة في عينات التوحد لوب التعبير. شخصين (AUT 1174 وAUT 5173) أظهرت انخفاضا كبيرا GABRB3 نسخة وشخصين (AUT 797 وAUT 4925) أظهرت مستويات النص لا تختلف كثيرا من الضوابط (الشكل 2 B). تم تنفيذ الكمية RT-PCR أيضا لGABRG3 وGABRA5. وكانت مستويات التعبير عن GABRG3 وGABRA5 على ما يبدو 1000 أضعاف أقل من GABRB3 عندما تطبيع GAPDH، ولكن الضوابط والتوحد والعينات RTT أظهرت انخفاض مستويات مماثلة من التعبير عن كل من GABRG3 وGABRA5 (التكميلي المواد، الشكل S1).

الكمية RT-PCR يكشف عن التحيز الأب في GABRB3 التعبير في 15q11-13 عينات الحذف وانخفاض كبير GABRB3 التعبير في RTT

لمزيد من التحقيق يطبع الآثار على GABRB3 التعبير، تم تنفيذ الكمي في الوقت الحقيقي تحليل RT-PCR على PWS وAS [كدنا الدماغ مع الحذف 15q11-13 الأب أو الأم، على التوالي (الشكل 3 A). كانت تسيطر الاختلافات في نوعية الحمض النووي الريبي لتطبيع GAPDH الجينات التدبير المنزلي. كان GABRB3 نسخة أقل بكثير من عينات مراقبة في كل PWS وAS عينات الحذف، ولكن كان عينات حذف PWS التعبير أقل بكثير من عينات AS الحذف، مما يشير إلى وجود تحيز الأب في التعبير الجيني عند منطقة 15q11-13 واحدة موجودة. PWS عينات UPD الأمهات، على الرغم من وجود نسختين من GABRB3، عرضت انخفاضا كبيرا التعبير GABRB3 بالمقارنة مع الضوابط، مما يشير إلى وجود تحيز التعبير الأب في حالة عدم وجود متحدر من والدين كروموسوم 15 مساهمة.

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الرقم 3.

الكمية RT-PCR من 15q11-13 الجينات في القشرة الإنسان. تم إجراء الكمي التضخيم RT-PCR من GABRB3، UBE3A وSNRPN في التجارب ثلاث نسخ على بعد الوفاة كدنا] دماغ الإنسان من السيطرة، RTT، AS الحذف، PWS الحذف وPWS عينات UPD الأمهات. يتم عرض عدد من الأفراد تحليل لكل فئة بين قوسين تحت تسمية س -axis. تم تطبيع جميع الجينات ضد GAPDH تحكم الجينات التدبير المنزلي والقيم -axis ص تمثل يعني ± SEM من كل يعيد لجميع الأفراد في كل فئة. و(A) مستويات GABRB3 نسخة انخفاضا كبيرا في جميع الفئات اضطراب مقارنة مع الضوابط (يشار -values ​​P مع العلامات النجمية ومدرجة أدناه الشكل). AS الحذف وعينات حذف PWS تمت مقارنة وكانت أيضا مختلفة إلى حد كبير. (B) UBE3A التعبير كان أقل من ذلك بكثير في RTT وAS عينات الحذف وأعلى بكثير في عينات PWS UPD. (C) SNRPN التعبير كان غائبا في PWS الحذف وعينات UPD وانخفاض كبير في AS عينات الحذف.

UBE3A، جينة مطبوع أعربت أمهات، وSNRPN، وقد تم تحليل الجينات مطبوع أعرب أبويا كما جينات التحكم لالكمي RT-PCR مقايسة (الشكل 3 B و C). وعينات حذف AS أظهرت انخفاضا كبيرا التعبير UBE3A، أظهرت كما هو متوقع بالمقارنة مع الضوابط العينات حذف PWS أي تغيير في UBE3A التعبير، وكان PWS عينات UPD الأمهات ارتفاع كبير في مستويات UBE3A (الشكل 3 B). كما هو متوقع، كان SNRPN غائبة في PWS الحذف وعينات UPD (الشكل 3 C). AS عينات الحذف، ومع ذلك، أظهرت وجود خلل خفية لكنه مهم من المستغرب في SNRPN (الشكل 3 C).
وقد أظهرت عينات مخ الفأر -deficient كلا RTT وMecp2 سابقا من نقص في البروتين كبيرة GABRB3 (13). كما عرضت Mecp2 الماوس -deficient الدماغ عيب النسخي في Gabrb3، ولذلك أدرجت عينات الدماغ RTT في التحليل GABRB3 نسخة الكمي. كما هو متوقع من الدراسات الماوس، لوحظ وجود خلل كبير في GABRB3 نص في RTT المخ بالمقارنة مع التحكم (الشكل 3 A). على الرغم من أن تم الإبلاغ عن بيانات متضاربة حول التقلبات من Ube3a في Mecp2 الماوس -deficient (13، 31، 32)، وقد وجد انخفاض ملحوظ في UBE3A التعبير في RTT الدماغ (الشكل 3 B)، بما يتفق مع البروتين انخفضت لوحظ سابقا ( 13). على الرغم من MeCP2 بربط المروج من SNRPN (13، 26)، لم يلاحظ أي فرق في SNRPN نص (الشكل 3، بما يتفق مع صيانة يطبع العادية للSNRPN في RTT (C) 33)، والتعبير العادي في Mecp2 - الدماغ نقص الماوس (13، 34).

MeCP2 بربط تسلسل الحمض النووي intronic المصب من الجزر 5'-CPG في GABRB3 وGABRG3

العيوب GABRB3 التعبير في RTT وMecp2 دماغ الفأر -deficient (13) وقد تورط MeCP2 في تنظيم جينية من 15q11-13 GABA A مستقبلات. بالإضافة إلى ذلك، لوب التعبير عن 15q11-13 GABA A المستقبلات في عينة RTT واحدة وعينات التوحد متعددة مع وصف سابقا MeCP2 عيوب التعبير (30) تشير إلى أن MeCP2 يلعب دورا في تنظيم هذه الجينات. لتحديد ما إذا MeCP2 تشارك مباشرة في تنظيم GABA 15q11-13 A مستقبلات الجينات الوحيدات، لونين مناعي (رقاقة) قد أنجز على لونين عزل من خلايا العصبية SH-SH5Y الإنسان سلطة النقد الفلسطينية متباينة. وقد سبق أن أظهرت MeCP2 لربط المواقع الدليل السياسي الشامل مميثل بزخارف المجاورة تسلسل A / T (35)، لذلك تم تصميم الاشعال الشذرة بناء على هذه المعايير. وقد تبين المروج الميثيلي وأمهات من SNRPN أن يكون الهدف من MeCP2، وكان يستخدم كعنصر تحكم إيجابية (13، 26). وقد تم تحديد منطقتين داخل 5 'نهاية GABRB3 ومنطقة واحدة ضمن 5 "نهاية GABRG3 إيجابية بالنسبة للMeCP2 ملزمة الشذرة (الشكل 4 A). مواقع ملزمة رقاقة إيجابي ضمن المناطق intronic نحو 5 "نهاية الجينات. التجليد كان MeCP2 لا يمكن كشفها في موقع مماثل قرب نهاية 5 'من GABRA5.

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الرقم 4.

MeCP2 بربط المواقع الدليل السياسي الشامل مثيلة داخل سلاسل intron من GABRB3 وGABRG3. (A) لونين مناعي من 48 ساعة التفريق بين الخلايا SH-SY5Y. DNA يمثل مساهمة لونين قبل مناعي، MeCP2 أب يمثل ونين immunoprecipitated مع MeCP2 الضد-C المحطة، وقبل المناعي (سلبي) مراقبة الأجسام المضادة. وتظهر الجينات يعاير للربط إلى يسار اللوحة. وقد استخدم المروج SNRPN كعنصر تحكم إيجابية (26). تظهر منطقتين من GABRB3 ومنطقة intronic من GABRG3 كشف MeCP2 ملزمة، ومع ذلك، MeCP2 ملزمة لGABRA5 كان لا يمكن كشفها. (B) تخطيطي من 2.5 كيلوبايت من 5 'نهاية GABRB3. يشار إلى الإكسونات الترميز مع مربعات مرقمة سوداء وصناديق رمادية تمثل 5'-UTR. خط متقطع فوق التخطيطي الجين يمثل موقع الجزيرة الدليل السياسي الشامل "نهاية 5. خطوط سوداء مع السهام أقل من الجينات تظهر الوضع النسبي للمنتجات الشذرة PCR (A) وخطوط مع الدوائر المرقمة أعلاه تظهر الجينات الوضع النسبي للمنتجات التسلسل بيسلفيت. وأظهرت نتائج التسلسل بيسلفيت من 48 ساعة متباينة الخلايا SH-SY5Y أدناه التخطيطي الجينات. كل سطر يمثل استنساخ الأفراد والدوائر وتشير المواقع الدليل السياسي الشامل. الدوائر مليئة تمثل المواقع الدليل السياسي الشامل للمثيلة ودوائر شاغرة تمثل المواقع الدليل السياسي الشامل unmethylated. النجوم فوق مواقع مثيلة بينت المواقع الدليل السياسي الشامل بزخارف تسلسل A / T المجاورة التي هي مواقع الربط قابلية عالية MeCP2 (35). (C) تخطيطي من 2.0 كيلوبايت من 5 'نهاية GABRG3 تبين تسلسل intronic ميثليته للغاية، كما هو موضح أن تكون إيجابية لMeCP2 ملزمة في (A).

للتأكد من أن النتائج الإيجابية الشذرة كان من المقرر أن ربط MeCP2 إلى المواقع الدليل السياسي الشامل ميثليته، تم إجراء التسلسل بيسلفيت. كان الحمض النووي الجيني من الخلايا SH-SH5Y بيسلفيت تحويلها وصممت الاشعال داخل المناطق رقاقة إيجابي عندما يكون ذلك ممكنا. الرقم 4 B و C توضح مناطق GABRB3 وGABRG3 التي تم تحليلها. على الرغم من أن المناطق تحليلها من الجزيرة GABRB3 الدليل السياسي الشامل كانت unmethylated تماما تقريبا، ومنطقة محددة MeCP2 المجاورة إنترون 3 أظهرت مثيلة الجزئي (الشكل 4 B). وبالمثل، التسلسل بيسلفيت المنطقة متجهة MeCP2 من GABRG3 أظهرت مستويات عالية من الدليل السياسي الشامل مثيلة (الشكل 4 C) كذلك يشير إلى أن كل من هذه السلاسل الجينومية وأهداف MeCP2.

الميثيلي مناطق محددة MeCP2 من GABRB3 وGABRG3 في الدماغ البشري

تم تحليل الحمض النووي الجيني الدماغ البشري من خلال التسلسل بيسلفيت لتحديد ما إذا كان مثيلة لوحظ في الخلايا SH-SY5Y موجود أيضا في الدماغ. وقد تم تحليل 10 على الأقل الحيوانات المستنسخة لكل فرد وعدد من الأفراد المدرجة في كل فئة والمدرجة أسفل كل رسم بياني (الشكل 5). النسبة المئوية للمواقع مثيلة تعكس عدد من المواقع الدليل السياسي الشامل مميثل مقسوما على جميع المواقع مثيلة المحتملة التي تم تحليلها. عينات الدماغ السيطرة أظهرت أنماط مثيلة مماثلة لمثيلة لوحظ في الخلايا SH-SY5Y (الشكل 4 B و C)، كما هو موضح في الشكل رقم 5 أ و ب.

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الرقم 5.

التسلسل بيسلفيت من الدماغ البشري والحمض النووي الدم. تم تنفيذ التسلسل بيسلفيت على الحمض النووي الجيني البشري من السيطرة، PWS، AS والأفراد التوحد. وقد تم تحليل 10 على الأقل الحيوانات المستنسخة لكل فرد المدرجة، ويعكس في المئة مثيلة نسبة المواقع الدليل السياسي الشامل مثيلة من العدد الإجمالي للمواقع الدليل السياسي الشامل يعاير لجميع الحيوانات المستنسخة من كل عينة. يتم رسم النتائج على النحو يعني ± SEM من مثيلة في المئة لجميع العينات المدرجة في كل فئة. يتم عرض عدد من الأفراد تحليلها في كل فئة تحت تسمية س -axis. (A) GABRB3 تسلسل intronic ميثليته هو مبين في الشكل 4 كان (B) بيسلفيت التسلسل في الدماغ الحمض النووي الجيني من السيطرة، PWS الذكور، PWS أنثى، AS وعينات من مرض التوحد. لم PWS عينات الذكور وعينات التوحد ليس لديها مثيلة تختلف كثيرا من الضوابط. في المقابل، فإن الأنثى عينات PWS وAS العينات أظهرت انخفاضا كبيرا مثيلة GABRB3. (B) تسلسل ميثليته من GABRG3 إنترون 1 هو مبين في الشكل 4 كان (C) بيسلفيت التسلسل في السيطرة، PWS، AS والتوحد عينات الدماغ البشري. جميع العينات التي تم تحليلها أظهرت مماثل مستوى عال من مثيلة. ومقارنة (C) التحكم في الدماغ الحامض النووي من GABRB3 إنترون 3 مع مثيلة في عينات الدم سيطرة الإنسان وعينة من الحيوانات المنوية واحد. عينات الدم والسائل المنوي انخفاضا في مثيلة مقارنة مع الدماغ (P <0.02 في الدم). وتمت مقارنة (D) التحكم في الدماغ ومثيلة الدم المستويات لGABRG3 إنترون 1 و لم يلاحظ أي اختلاف كبير.

لتحديد ما إذا كان مثيلة لاحظ الوالدين، PWS الحذف، AS الحذف وPWS الأم عينات UPD تم تحليل أليل معين. الخلافات البارزة ومن المثير للاهتمام، وعينات PWS معروضة في GABRB3 مثيلة على أساس الجنس، لم تراع الفوارق بين الجنسين ولكن مشابهة لعناصر أو فئات اضطرابات أخرى. كل من الإناث PWS وAS عينات (الذكور والإناث) أظهرت أوجه قصور مهمة في مثيلة لGABRB3 إنترون 3 بالمقارنة مع عينات التحكم (الشكل 5 أ)، مما يوحي بأن مثيلة GABRB3 ليس بين الوالدين ومن أصل معين ولكن قد تعتمد على وضعها الطبيعي مساهمة الكروموسومات متحدر من والدين. وعلى النقيض من GABRB3، لم استنساخ GABRG3 لا تظهر فروق ذات دلالة إحصائية في مثيلة بين الضوابط وPWS / AS العينات، على الرغم من أن المستويات العامة للمثيلة كانت عالية (الشكل 5 B). وقد تم تحليل عينات التوحد الدماغ للتحقيق في احتمال تشوهات الحامض المساهمة في التعبير لوب في بعض هذه العينات. لم يلاحظ أي فرق في مثيلة بين العينات التوحد وضوابط لGABRB3 أو GABRG3 (الشكل 5 أ و ب).
لاختبار الفرضية القائلة بأن مثيلة intronic من GABRB3 يرتبط بشكل إيجابي مع التعبير، ونحن ننظر في أنماط مثيلة في مصادر الأنسجة الإضافية. تحليل GABRB3 مثيلة في الدم والسائل المنوي وكشف مستوى أقل بكثير من مثيلة مقارنة مع القشرة (الشكل 5 C)، مما يعني أن زيادة مثيلة من GABRB3 إنترون 3 تكتسب biallelically في الدماغ. وعلى النقيض من الأنسجة محددة GABRB3 مثيلة، كان GABRG3 مثيلة عالية على قدم المساواة في الدماغ والدم (الشكل 5 D).

القسم السابق القسم التالي

نقاش

لأن الكروموسوم البشري 15q11-13 متورط في الاضطرابات العصبية النمائية متعددة، فمن الأهمية بمكان أن نفهم كيف يتم تنظيم الجينات في هذا الموضع والتعبير عنها. في هذه الدراسة، لدينا حل النزاع حول يطبع من 15q11-13 GABA كتلة المستقبل من خلال إظهار أن هذه الجينات يتم التعبير عن biallelically في القشرة الجبهية الإنسان حتى الآن يتم التعبير عن aberrantly في الاضطرابات العصبية النمائية متعددة. كما توفر البيانات لدينا أدلة على التأثيرات العابرة مثلي على مستويات التعبير عن GABRB3، كعينات مع الوالدين إظهار مساهمة التعبير دون المستوى الأمثل واحد. حددنا كل من الآثار العابرة والجنس على مثيلة الدماغ محددة من تسلسل intronic من GABRB3 التي هي بمثابة موقع ملزم للMeCP2. وأخيرا، قدمنا ​​الأدلة الداعمة التي MeCP2 غير منظم الإيجابي للGABRB3 التعبير واقتراح دور الآلية رواية لMeCP2 كمنشط في التعبير الجيني.
بينما يطبع يتميز جيدا لبعض 15q11-13 الجينات، مثل SNRPN (36) وUBE3A (27، 28)، ووضع يطبع من GABA قد شكك كتلة مستقبلات (+18 - 21). قمنا بتحليل مباشرة التعبير أليلية من 15q11-13 GABA A مستقبلات الجينات الوحيدات في الدماغ البشري وأفيد بأن GABRB3، GABRA5 وGABRG3 يتم عادة أعرب biallelically في القشرة المخية الجبهية، ودعم النتائج السابقة في الماوس (14، 15). ومن المثير للاهتمام، اكتشفنا وجود تحيز الأب تعبيرا عن GABRB3 في عينات الدماغ مع واحدة 15q11-13 المساهمات الأبوية، كما لوحظ سابقا في PWS الإنسان وخطوط الخلايا AS lymphoblastoid (18، 19) وبوساطة microcell نقل كروموسوم (17). نحن نفترض أن يتم التعبير عن GABRB3 أكثر كفاءة من كروموسوم الأب من كروموسوم الأمهات في عزلة لأن كروموسوم الأب، تحتوي على العديد من الجينات مطبوع أعرب أبويا، لديها بطبيعتها تكوين لونين أكثر نشاطا من الكروموسوم الأمهات. لم يكن هناك أي دليل على وجود تحيز الأب في سبع عينات مختلفة تحكم متخالف مع المساواة التعبير GABRB3 biallelic (الجدول 2)، مما يشير إلى أن الأمهات عيب GABRB3 التعبير انقاذهم من قبل تكامل مع الأب 15q11-13 أليل.
على الرغم من وجود 15q11-13 المساهمات متحدر من والدين، RTT واحدة وأربع عينات التوحد الدماغ أظهرت خسارة التعبير biallelic متساو من واحد أو أكثر من GABA 15q11-13 A جينات مستقبلات الوحيدات (الجدول 3). على الرغم من أن لوحظ لوب التعبير عن كل ثلاثة من 15q11-13 GABA A مستقبلات الجينات الوحيدات، كان GABRB3 وأعرب معظم غاية وهي الأكثر ملاءمة لاضطرابات التوحد. عينات التوحد مع لوب التعبير عن أي واحد من GABA 15q11-13 وكان مستقبلات الجينات الوحيدات انخفاض كبير في مستويات البروتين GABRB3 مقارنة العينات مع التعبير biallelic. وعلاوة على ذلك، عينة واحدة، AUT 797، متخالف لجميع GABA A ثلاثة جينات مستقبلة، أظهر لوب التعبير لكلا GABRB3 وGABRG3 (الشكل 1). هذه الملاحظات تشير إلى أن العيوب في عينات التوحد موجودة في جميع أنحاء GABA 15q11-13 كتلة المستقبل وربما يرجع ذلك إلى التقلبات جينية من أليل واحد الوالدين. وكانت عينات من الحمض النووي الأبوية غير متوفرة لعينات الدماغ بعد الوفاة، وبالتالي فإن أصل الوالدين من أليل أعرب غير معروف حاليا.
كنا نتوقع GABRB3 نص على أن تخفض بشكل كبير في العينات مع لوب التعبير، ومع ذلك، مستويات النص المترابطة للبروتين انخفاض في اثنين فقط من أربع عينات التوحد مع لوب التعبير. هذا التناقض يمكن تفسير جزئيا خلفيات وراثية معقدة من عينات التوحد. تم الكشف عن أية طفرات ضمن تسلسل ترميز GABRB3 في عينات مرض التوحد، ولكن الاختلافات في تسلسل التنظيمية قد يؤثر بشكل كبير النسخ والاستقرار النصوص. ومن المثير للاهتمام، وGABRB3 أفيد تعدد الأشكال المروج مؤخرا لإضعاف النشاط النسخي في مقايسة luciferase المراسل (37)، ولكن تم العثور على هذا التعدد في كثير من الأحيان ضمن عينات لدينا، ولا يمكن تفسير الاختلافات في GABRB3 التعبير (لا تظهر البيانات). بدلا من ذلك، الفروق الفردية في التنظيم بعد النسخي من GABRB3 داخل عينات التوحد قد يفسر الاختلافات بين النص والبروتين. بالإضافة إلى ذلك، GABA A وقد ثبت مستقبلات الوحيدات الجينات لعرض مجمع تنسيق تنظيم (38)، وبالتالي قد تكون مسؤولة آلية التعويض عن الاختلافات النسخي لوحظ في بعض العينات التوحد الدماغ.
وتمشيا مع الجينات وأعرب بنشاط، والمروج من GABRB3 كان hypomethylated، ولكن منطقة intronic المجاورة ومميثل أكثر شدة في الدماغ البشري مما كانت عليه في الدم (الشكل 5 C). وتبين لدينا بيانات الوقت الحقيقي RT-PCR الكمية التي القشرة الدماغية لديها مستويات عالية من GABRB3 التعبير (الشكل 3 أ)، في حين أن الخلايا lymphoblastoid لها بالكاد يمكن كشفها GABRB3 مستويات التعبير أقل من 1/1000 من مستويات النص الدماغ (لا تظهر البيانات) . الحامض النووي داخل المناطق intronic أو بين الجينات وقد وصفت سابقا لإضفاء تأثير إيجابي على التعبير الجيني (39، 40)، ولذا فإننا نقترح أن مثيلة intronic من GABRB3 يرتبط بشكل إيجابي مع التعبير. في حين PWS وAS عينات الدماغ لم تكشف الأم المنشأ أنماط مثيلة محددة في GABRB3 وGABRG3، AS عينات الحذف وعينات الإناث PWS خفضت بشكل ملحوظ من مستويات GABRB3 إنترون مثيلة. وhypomethylation كل من عينات AS وPWS تشير إلى أن العابرة الآثار بين الأليلات الأبوية تعمل على تنظيم مستويات الحامض المناسبة في هذا الموضع في القشرة. الفرق بين الجنسين في عينات PWS لGABRB3 كان غير متوقع، ولكن، Liljelund وآخرون. (41)، كما وجدت بين الجنسين وبين الوالدين والمنشأ الآثار على Gabrb3 تعبير البروتين في الفئران متخالف لصغير Gabrb3 الحذف التي تضم منطقة syntenic للمواقع مثيلة إنترون 3. لم عينات السيطرة والتوحد الدماغ لا يحمل آثار الجنسين على مثيلة والتوحد العينات مع لوب التعبير لم يكن لديهم عيوب مثيلة داخل المناطق يعاير من GABRB3 أو GABRG3 (الشكل 5). ربما، وانخفاض كبير في التعبير MeCP2 الملاحظة في عينات التوحد مع التعبير لوب (30، 42 قد) يكون الخلل الجيني الرئيسي مما تسبب dysregulated التعبير GABRB3. بالإضافة إلى ذلك، عيوب مثيلة قد تكون موجودة في المناطق البعيدة داخل أو بالقرب GABRB3 باستخدام تقنيات عالية الإنتاجية في عينات التوحد مع لوب GABA 15q11-13 A التعبير مستقبلات في الدراسات المستقبلية.
وصفناها سابقا عملية تنظيم تنمويا من الاقتران مثلي من الإنسان 15q11-13 GABRB3 الأليلات في الدماغ الطبيعي أن تعاني من عجز في PWS، AS، RTT وعينات التوحد (26). أوجه القصور في الخلايا العصبية عبر تم تفاعلات 15q11-13 المجالات ارتباطا مباشرا MeCP2 التي كتبها الاجتثاث من MeCP2 ملزمة في الخلايا العصبية SH-SY5Y أن يخفف كثيرا من الاقتران من GABRB3 الأليلات (26). على الرغم من MeCP2 طفرة أو نقص ليست كافية للتسبب لوب التعبير عن 15q11-13 GABA A جينات مستقبلات في جميع العينات RTT والتوحد، نتائجنا تشير إلى أن عبر التفاعلات بين المتماثلات 15q11-13 الوالدين تسهم في السليم العادي التعبير الجيني biallelic داخل GABA A مجال مستقبلات. الانخفاض الكبير غير المتوقع للSNRPN التعبير في عينات AS الحذف (الشكل 3 C) تشير إلى أن عبر تفاعلات مهمة للحصول على أفضل مستويات التعبير الجيني داخل 15q11-13. وتشير البيانات المتوفرة لدينا أن التعبير monoallelic من GABRB3 لا تحدث في الدماغ العادي، مما يوحي بأن التعبير biallelic من GABRB3 يتم الاحتفاظ بنشاط. نحن نفترض أن قربها من الكتلة مستقبلات GABA 15q11-13 إلى الجينات مطبوع يتطلب عملية نشطة فيه كل GABRB3 الأليلات المنتسبين فعليا من أجل أن تتجلى على النحو الأمثل من كل الأليلات.
عينات RTT مع التعبير biallelic أيضا خفضت بشكل ملحوظ GABRB3 التعبير (الشكل 3 أ)، تورط دورا إيجابيا لMeCP2 في تنظيم GABRB3 التعبير عن طريق الربط بين المواقع الدليل السياسي الشامل مثيلة في كل من رابطة الدول المستقلة والعابرة. نموذج هو موضح في الشكل 6 يوضح احتمالين لتفسير انخفاض biallelic والتعبير monoallelic من GABRB3 في RTT الدماغ. في الدماغ العادي، MeCP2 ملزمة لINTRON 3 مواقع مثيلة يعمل على تنظيم إيجابيا GABRB3 التعبير من خلال جلب كل من الأليلات الأبوية إلى موقع نووي مع الآلات النسخي المثلى، مثل مصنع النسخ (43). في حالات انخفاض التعبير biallelic، لا يتم إقران 15q11-13 المتماثلات بسبب النقص في MeCP2، ونسخه لا كروموسوم الوالدين على النحو الأمثل. وبالمثل، Mecp2 الفئران -deficient أيضا يحمل انخفاض شقين كبير في Gabrb3 على الرغم من التعبير biallelic العادي (13). في التوحد والعينات RTT مع التعبير monoallelic، وتعطلت الاقتران، ولكن جينية إضافية أو خلل جيني يمنع النسخ من أليل واحد (الشكل 6). على الرغم من أننا التكهن بأن أليل الأمهات صامت، وذلك بسبب أدلة على وجود تحيز الأب في التعبير (الشكل 3 أ)، وأصل الوالدين من الأليلات في التوحد وRTT عينات بعد الوفاة الدماغ غير معروف حاليا.

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الرقم 6.

نموذج للمشاركة MeCP2 في التنظيم الإيجابي للGABRB3 التعبير في الدماغ. وتظهر الصبغيات الأبوية للأم وكما الوردي (الأم) والأزرق (الأب) الخطوط المنقطة، على التوالي. حجم السهام يمثل المستويات النسبية في التعبير الجيني. وحدة النسخ الأب محددة كبيرة من SNRPN من خلال نص العقاقير من UBE3A هو مبين في شكل سحابة. في عينات المخ المعتادة MeCP2 بربط المواقع الدليل السياسي الشامل مثيلة داخل إنترون من GABRB3 على كل من الكروموسومات ويعزز GABRB3 التعبير والاقتران مثلي كتبها توطين كل من الأليلات لمساحة النسخ نشط مثل مصنع النسخ. في المرضى الذين يعانون متلازمة ريت مع طفرة MeCP2 أو نقص، وتعطلت الاقتران مثلي من 15q11-13، كما هو موضح سابقا في ثاتشر وآخرون. (26). في RTT الأفراد مع انخفاض التعبير biallelic الأليلات كل من الأم والأب وكتب عند مستويات منخفضة بسبب موقعها النووي دون المستوى الأمثل. الأفراد مع لوب التعبير قد يكون لها عيب جينية إضافية مما يؤدي إلى تخفيض الانتقائي للأليل واحد (ممثلة في X). لأن 15q11-13 الحذف يؤدي إلى فقدان الاقتران مثلي والتحيز الأب في GABRB3 التعبير، ونحن نفترض أن الأليل الأب وأعرب عن تفضيلي في مثل هذه الحالات.

في هذا التقرير نعرض بواسطة رقاقة وتسلسل بيسلفيت أن MeCP2 بربط intronic متواليات الدليل السياسي الشامل مثيلة داخل GABRB3 في خلايا SH-SH5Y الإنسان متباينة (الشكل 4). على الرغم من أن ينظر إليها عادة على أنها قامع النسخي (44، 45)، وقد تم مؤخرا أظهرت MeCP2 غير مباشر لتنظيم إيجابا على الجينات المستهدفة عامل التغذية العصبية الدماغي (46) والتعبير الجينوم على نطاق التنميط التحليلات أثبتت العديد يحتمل أن تكون أسفل تنظيم الجينات مع MeCP2 نقص (47 - 49). في نموذجنا (الشكل 6)، نقترح أن ربط MeCP2 إلى مواقع الدليل السياسي الشامل مميثل الدماغ محددة داخل GABRB3 يؤثر إيجابيا التعبير من خلال الترويج عبر التفاعلات بين المتماثلات وتنظيم إيجابيا لونين في رابطة الدول المستقلة. Horike وآخرون. (34) سبق وصفها دور للMeCP2 كمنظم لونين حلقات هذا التعبير الصمت الجينات. نحن نفترض أن ملزمة لمواقع متعددة في رابطة الدول المستقلة في GABA A كتلة المستقبل، MeCP2 يعزز تشكيل هياكل لونين مواتية للنسخ النشط، كما يتضح من قربها من مصنع النسخ النشط في النموذج في الشكل 6.
GABA هو الناقل العصبي المثبط الرئيسي في الدماغ، ويلعب دورا مهما في وظيفة الدماغ. انقطاع جزئي من الخلايا العصبية GABAergic في القشرة من الفئران يسبب نوبات والقلق والسلوك الاجتماعي ضعاف، بما يتفق مع GABA مما يشير إلى عيوب المساهمة في مسببات اضطرابات التوحد (50). على عكس GABRB3، GABRA5 وGABRG3 البروتينات لا توطين في المقام الأول في القشرة المخية (+51 - 53)، بما يتفق مع البيانات التعبير لدينا (المواد التكميلية، الشكل S1). حذف كل من Gabra5 وGabrg3 لا يسبب النمط الظاهري واضح في الفئران (54، 55)، ومع ذلك، Gabrb3 الفئران -deficient الظواهر المعرض مثل المضبوطات، وتشوهات النوم والسلوكيات النمطية تتفق مع خصائص AS، RTT والتوحد (55).
التداخل الوراثي والمظهري في RTT والتوحد وAS تشير إلى أن تداخل المسارات الجزيئية وdysregulated في هذه الاضطرابات النمائية العصبية مماثلة. وإن كان نادرا، MECP2 تم الإبلاغ عن الطفرات في الأفراد المشخصة سريريا مع AS أو التوحد (56، 57)، وMECP2 تم الإبلاغ عن الطفرات جنبا إلى جنب مع إعادة ترتيب في 15q11-13 في الأشخاص الذين يعانون RTT (58). في هذه الدراسة تبين لنا أن GABRB3، جين 15q11-13، وينظم إيجابيا MeCP2 وبشكل ملحوظ انخفاض في كل من RTT وAS. الملاحظات السريرية للشذوذ EEG نموذجية من AS في المرضى الذين يعانون RTT دعم مشاركة GABRB3 في الظواهر الصرع المشتركة في هذه الاضطرابات (59، 60). الازدواجية الأمهات من 15q11-13، بما في ذلك GABRB3 تحدث في نسبة صغيرة من الأفراد المصابين بالتوحد، إلا أنه من غير الواضح كيفية تأثير هذه الازدواجية GABRB3 التعبير في الدماغ. وعلى الرغم من توقع زيادة عدد النسخ لزيادة التعبير، بياناتنا تظهر معقدة عبر تنظيم GABRB3 في الدماغ البشري مما يدل على أن الانحراف عن العادي مساهمة الكروموسومات متحدر من والدين قد يؤثر سلبا GABRB3 التعبير. كما يوفر دراستنا الحالية دليل على التقلبات جينية معقدة من GABA 15q11-13 A كتلة المستقبل في عينات التوحد مجهول السبب مع العيوب البروتين GABRB3، مما يشير إلى أن المسارات الجزيئية المشتركة وdysregulated في الاضطرابات العصبية النمائية ذات الصلة.

القسم السابق القسم التالي

المواد والأساليب

عينات الدماغ بعد الوفاة الإنسان

أمامي المجمدة قشرة الدماغ (منطقة برودمان 9) تم الحصول على عينات من الأنسجة برنامج التوحد من جامعة ماريلاند الدماغ والأنسجة بنك الاضطرابات العصبية النمائية، ومركز هارفارد نسيج الدماغ الموارد وجامعة ميامي الدماغ والأنسجة بنك الاضطرابات العصبية النمائية. وقد تم اختيار عينات الدماغ من الجثث البشرية حيث كان PMI <30 ساعة. وتقدم سبب الوفاة، وPMI معلومات إضافية حول كل عينة الأنسجة في المواد التكميلية، الجدول S1. تم تخزين جميع العينات في -80 ° C إلى الحفاظ على سلامة الحمض النووي الريبي.

تحليل البصمة الدماغ البشري

تم عزل الحمض النووي الجيني الدماغ البشري من قشرة الدماغ المجمدة مع Puregene ® DNA كيت تنقية (نظم Gentra). وقد تم تحديد تعدد الأشكال داخل المناطق ترميز كل الجينات باستخدام متصفح UC سانتا كروز الجينوم (http://genome.ucsc.edu) وقاعدة بيانات NCBI SNP (http://www.ncbi.nlm.nih.gov). الاشعال تستخدم لتضخيم PCR تم العثور على عينات من الحمض النووي الجينومية لالتنميط الجيني في المواد التكميلية، الجدول S2. تسبب rs2912582 تعدد الأشكال وrs140682 تم تحديد الفرق انزيم الهضم قيود الانقسام والمورثات بعد 3 ساعات من الهضم مع وجود فائض من ScrFI (rs2912582) أو ACCI (rs140682). تم استخدام التسلسل المباشر لالوراثي rs20318 تعدد الأشكال وrs140679 (UC قسم ديفيس من مرفق العلوم البيولوجية تسلسل الحمض النووي).
تم تحليل التعبير أليلية كل SNP في الأفراد متخالف من قبل نفس الأساليب المذكورة أعلاه لالتنميط الجيني. تم استخراج الحمض النووي الريبي من الأنسجة القشرة الدماغية الإنسان المجمدة باستخدام TRIzol كاشف (إينفيتروجن). تم قياس تركيزات RNA مع معمل NanoDrop ® استخدمت-D 1000 معمل وذات جودة عالية RNA لتخليق [كدنا]. تم تصنيعه [كدنا من واحد أو اثنين ميكروغرام من الدناز I (إينفيتروجن) RNA المعالجة، مع بنسبة ضئيلة (DT) التمهيدي وSS II الناسخ العكسي (إينفيتروجن). تم إنشاء ضوابط السلبية لكل فرد دون إضافة الإنزيم SS II الناسخ العكسي لضمان التلوث الجيني DNA أو التضخيم غير محددة لم يحدث. حوالي 50-100 نانوغرام من [كدنا الدماغ وPCR تضخيم مع ظروف التفاعل القياسية باستخدام الحدود إنترون-إكسون تمتد الاشعال وجدت في المواد التكميلية، الجدول S2. نفس الاشعال DNA الجينومية تستخدم لتضخيم GABRB3 استخدمت 3'-UTR لكدنا] التضخيم. واستخدمت عينات سلبي السيطرة كدنا] (-RT) لجميع ردود الفعل RT-PCR لضمان التضخيم محددة من المنتجات كدنا].

الكمي في الوقت الحقيقي RT-PCR من [كدنا الدماغ البشري

تم تنفيذ الكمي في الوقت الحقيقي RT-PCR باستخدام نظام روش LightCycler وفقا لتعليمات الشركة الصانعة مع 1 × DNA سيد SYBR الأخضر I العازلة رد فعل (روش)، 3 م م MgCl 2، 0،5 μ م الاشعال و20-25 نانوغرام من كدنا]. لتأكيد التضخيم التحديد، كانت منتجات PCR تخضع لتحليل منحنى ذوبان، والتي لوحظ قمة واحدة فقط. تم قياس القيم المعبر مع تحليل LightCycler برنامج الإصدار 2.0 وأجريت الكمي النهائي باستخدام طريقة CT المقارن (النظم البيولوجية التطبيقية). تم تنفيذ ثلاثة ردود الفعل تكرار لكل فرد في الجينات تحليلها وكانت القيم تطبيع إلى الجينات التدبير المنزلي GAPDH. وقد صممت الاشعال تمتد واحد على الأقل الحدود إنترون-إكسون والمذكورة في المواد التكميلية، الجدول S2.

مناعي لونين

وقد أعد لونين من الخلايا العصبية SH-SY5Y الإنسان وتنقيته بواسطة اليوريا التدرج الطرد المركزي كما هو موضح سابقا (61، 62). أجريت مناعي، عكس يشابك وPCR التضخيم كما هو موضح سابقا (26، 63) مع تعديلات طفيفة. لفترة وجيزة، وهضم لونين مع فريق من الانزيمات التقييد (نيو إنجلاند Biolabs) إلى 100-700 شظايا غليان الحمض النووي. وprecleared لونين يتفاعل مع PrecipHen الخرز agarose (إيفس مختبرات) وحدها، ثم مع استيعابها قبل IGY الدجاج (إيفس مختبرات)، يليه الخرز agarose. وقد حضنت لونين Precleared بين عشية وضحاها مع 5 ميكروغرام من-C محطة مكافحة MeCP2 (26) أو مع المبالغ المعادلة من IGY قبل المناعة كجهاز تحكم عن غير محددة وملزمة. تم تنفيذ PCR التضخيم لمدة 31 دورات مع واحد على عشرين من المنتجات IP في رد فعل تحتوي على 1 متر البيتين، 1 × إينفيتروجن العازلة، 1 U طق (إينفيتروجن)، 4 م م MgCl 2، 2،5 م م dNTPs و 0.4 μ م من الاشعال التالية: GABRB3 5'-F: CCAGAATCTCTTTCCAAACGA. R: CATCGACATGGTTTCCGA)، GABRB3 إنترون 3 (F: CTTGGGGTCCCTGCATTTAA؛ R: AACAGCTTGGCGTGGTCAAA)، GABRG3 (F: GGAGTGTGGGGACTCAGATTA؛ R: TGGAAGGTGTGTGTGTGTGTT)، GABRA5 (F: CATCACGTTTTCAGTGGCTTT؛ R: TCTGGGGGTTTTCTGAAGTT)، SNRPN (26).

التسلسل بيسلفيت

تم عزل الحمض النووي الجيني من الخلايا SH-SY5Y والأنسجة البشرية مع Puregene ® DNA كيت تنقية (نظم Gentra) وفقا لبروتوكول الشركة الصانعة. وقد تم قياس العائد DNA مع معمل NanoDrop ®-D 1000 معمل وكانت تستخدم 1 ميكروغرام من الحمض النووي الجيني لتحويل بيسلفيت مع مجموعة CpGenome ™ DNA تعديل التالية بروتوكول الشركة المصنعة (Chemicon الدولية). وقد صممت الاشعال بيسلفيت PCR باستخدام MethPrimer (www.urogene.org/methprimer/index1.htm) (64) وكما يلي: GABRB3 المنطقة 1 (F: GAGGGATATTTTGGAAGGAGTATTT؛ R: CAAAACTCCAACCTATCTTAATCAAA)، GABRB3 المنطقة 2 (F: GGATTTAATATTTTGATTTGTGGGA؛ R : AAAAAAACCATCCTTCTCCTAATTC)، GABRB3 المنطقة 3 (F: GTTTTGAGGATTGGGGGTTAT؛ R: AAAACATATCCTTTATAAAAAAAAC)، GABRB3 المنطقة 4 (F: GTTTAGGAGGTAGTTTTGGAAAAAT؛ R: TAAACTC CCAACTCCTCCAAC)، GABRG3 المنطقة 1 (F: GTAGGGGTTATTTTTGGTTTTTTAT؛ R: ATTTAACCCTTTAAATCCCACTATC). تم تنفيذ PCR التضخيم لمدة 38 دورات مع ظروف التفاعل القياسية و~25 نانوغرام من الحمض النووي الجيني تحويل بيسلفيت. المنتجات PCR وتنقيته هلام مع عدة تنقية Qiaquick جل (QIAGEN) وligated في ناقلات الاستنساخ pGEM T-سهل (PROMEGA). تم تحويل خلايا المختصة JM109 (PROMEGA) مع منتجات بيسلفيت ligated ومطلي على LB وحات الأمبيسلين أجار مع IPTG وX-غال. وقد تم اختيار المستعمرات بيضاء واحدة، ونمت في LB مع الأمبيسلين بين عشية وضحاها وتمت تنقية البلازميدات استخدام عدة Qiaprep (QIAGEN). هضم البلازميدات مع عدم I التحقق من وجود إدراج الصحيح ثم والتسلسل إدراج البلازميد في قسم ديفيس UC من مرفق العلوم البيولوجية تسلسل الحمض النووي. والتسلسل لا يقل عن 10 مستعمرات لكل عينة الدماغ تحليلها.

القسم السابق القسم التالي

المواد التكميلية

المواد التكميلية متوفرة في HMG على الانترنت.

القسم السابق القسم التالي

المراجع

• ↵
  • نيكولز RD،
  • نيبر JL

  منظمة الجينوم، وظيفة، ويطبع في برادر ويلي والمتلازمات Angelman. أنو. القس الجينوم هوم. جينيه. 2001؛ 2: 153 - 175.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • Kishino T.،
  • لند M.،
  • اغستاف J.

  الطفرات UBE3A / E6-AP تسبب متلازمة أنجلمان. نات. جينيه. 1997؛ 15: 70 - 73.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • ماتسورا T.،
  • ساتكليف JS،
  • فانغ P.،
  • Galjaard RJ،
  • جيانغ YH،
  • بينتون CS،
  • Rommens JM،
  • Beaudet AL

  دي نوفو اقتطاع الطفرات في E6-AP بتحول البروتين يغاز الجين (UBE3A) في متلازمة أنجلمان. نات. جينيه. 1997؛ 15: 74 - 77.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • فولكمار FR،
  • بولس D.

  مرض التوحد. انسيت 2003؛ 362: 1133 - 1141.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • MUHLE R.،
  • Trentacoste SV،
  • رابين I.

  جينات التوحد. لطب الأطفال 2004؛ 113: 472 - 486.
  CROSSREF الباحث العلمي من Google
• ↵
  • كوك EH،
  • الابن،
  • يندغرين V.،
  • يفينثال BL،
  • Courchesne R.،
  • لينكولن A.،
  • شولمان C.،
  • اللورد جيم،
  • Courchesne E.

  التوحد أو مرض التوحد شاذة في أمهات لكن ليس مشتقا أبويا القريبة 15q الازدواجية. آم. J. هوم. جينيه. 1997؛ 60: 928 - 934.
  ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • ماكولي JL،
  • أولسون LM،
  • Delahanty R.،
  • أمين T.،
  • نورمي EL،
  • جهاز EL،
  • يعقوب MM،
  • Folstein SE،
  • هينز JL،
  • ساتكليف JS

  خريطة الربط اختلال التوازن من 1 ميغابايت 15q12 GABA (A) كتلة مستقبلات الوحيدات وجمعية لمرض التوحد. آم. J. ميد. جينيه 2004؛ 131: +51 - +59.
  منحة جوجل
• ↵
  • نورمي EL،
  • أمين T.،
  • أولسون LM،
  • يعقوب MM،
  • ماكولي JL،
  • لام AY،
  • جهاز EL،
  • Folstein SE،
  • هينز JL،
  • ساتكليف JS

  كثيفة خرائط الربط اختلال التوازن في 15q11-Q13 الأمهات مجال التعبير ينتج الدليل على الجمعيات في التوحد. مول. الطب النفسي 2003؛ 8: 624 - 634.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• • شاو Y.،
  • Cuccaro ML،
  • هاوزر ER،
  • رايفورد KL،
  • Menold MM،
  • ولبرت CM،
  • رافان SA،
  • إيلستون L.،
  • Decena K.،
  • دونلي SL،
  • وآخرون

  . رسم الخرائط الجميلة من اضطراب التوحد لكروموسوم 15q11-Q13 عن طريق استخدام أنواع فرعية المظهرية. آم. J. هوم. جينيه. 2003؛ 72: 539 - 548.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • Menold MM،
  • شاو Y.،
  • ولبرت CM،
  • دونلي SL،
  • رايفورد KL،
  • مارتن ER،
  • رافان SA،
  • أبرامسون RK،
  • رايت HH،
  • ديلونغ GR،
  • وآخرون

  . تحليل رابطة كروموسوم 15 جبعة جينات مستقبلات الوحيدات في اضطراب التوحد. J. Neurogenet. 2001؛ 15: 245 - 259.
  ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • أمير RE،
  • فان دن Veyver IB،
  • وان M.،
  • تران CQ،
  • فرانك U.،
  • الزغبي HY

  هو سبب متلازمة ريت بواسطة الطفرات في X-ربط MECP2، الترميز ميثيل الدليل السياسي الشامل ملزم البروتين 2. نات. جينيه. 1999؛ 23: 185 - 188.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • الزغبي HY

  لقاء في المشبك: اضطرابات النمو العصبي ما بعد الولادة؟ العلوم 2003؛ 302: 826 - 830.
  الملخص / الحرة النص الكامل
• ↵
  • ساماكو RC،
  • Hogart A.،
  • اسال JM

  تداخل جينية في التوحد اضطرابات النمو العصبي: أسباب نقص MECP2 تخفيض تعبير عن UBE3A وGABRB3. همهمة. مول. جينيه. 2005؛ 14: 483 - 492.
  الملخص / الحرة النص الكامل
• ↵
  • بوتنر VL،
  • Longmate JA،
  • باريش ME،
  • مان JR،
  • المغني وسام J.

  تحليل البصمة في الفئران مع الازدواجية أحد الأبوين من الكروموسومات الداني 7 و 15 عن طريق استخدام ميكروأري قليل النوكليوتيد العرف. Mamm. الجينوم 2004؛ 15: 199 - 209.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • نيكولز RD،
  • غوتليب W.،
  • راسيل LB،
  • Davda M.،
  • Horsthemke B.،
  • Rinchik EM

  تقييم النماذج المحتملة لمكونات مطبوع وnonimprinted من كروموسوم المتلازمات 15q11-Q13 الإنسان من خلال رسم الخرائط تناظر غرامة هيكل في الماوس. بروك. Natl أكاد. الخيال العلمي. الولايات المتحدة الأمريكية 1993؛ 90: عام 2050 - 2054.
  الملخص / الحرة النص الكامل
• ↵
  • ياماساكي K.،
  • جون ماير عادوا K.،
  • أوتا T.،
  • Masuzaki H.،
  • Ishimaru T.،
  • موكاي T.،
  • Niikawa N.،
  • اوجاوا M.،
  • اغستاف J.،
  • Kishino T.

  الخلايا العصبية ولكن ليس الخلايا الدبقية تظهر يطبع متبادلة من الحس والعقاقير محاضر Ube3a. همهمة. مول. جينيه. 2003؛ 12: 837 - 847.
  الملخص / الحرة النص الكامل
• ↵
  • ميغورو M.،
  • Mitsuya K.،
  • سوي H.،
  • Shigenami K.،
  • Kugoh H.،
  • ناكاو M.،
  • Oshimura M.

  دليل لأحد الأبوين، والتعبير الأب من GABAA مستقبلات الجينات الوحيدات الإنسان، وذلك باستخدام بوساطة microcell نقل كروموسوم. همهمة. مول. جينيه. 1997؛ 6: 2127 - 2133.
  الملخص / الحرة النص الكامل
• ↵
  • Bittel DC،
  • Kibiryeva N.،
  • Talebizadeh Z.،
  • بتلر MG

  تحليل ميكروأري التعبير الجيني / نسخة في متلازمة برادر ويلي: حذف مقابل UPD. J. ميد. جينيه. 2003؛ 40: 568 - 574.
  الملخص / الحرة النص الكامل
• ↵
  • Bittel DC،
  • Kibiryeva N.،
  • Talebizadeh Z.،
  • دريسكول DJ،
  • بتلر MG

  تحليل ميكروأري التعبير الجيني / نسخة في متلازمة أنجلمان: الحذف مقابل UPD. جينوم 2005؛ 85: 85 - 91.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • كوبوتا T.،
  • Niikawa N.،
  • Jinno Y.،
  • Ishimaru T.

  وربما مطبوع GABAA مستقبلات بيتا 3 الوحيدات الجينات أبويا في البشر. آم. J. ميد. جينيه. 1994؛ 49: 452 - 453.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • غابرييل JM،
  • هيغنز MJ،
  • Gebuhr TC،
  • يظهر مرض السل،
  • Saitoh S.،
  • نيكولز RD

  نظام نموذجي لدراسة البصمة الجينومية من الجينات البشرية. بروك. Natl أكاد. الخيال العلمي. الولايات المتحدة الأمريكية 1998؛ 95: 14857 - 14862.
  الملخص / الحرة النص الكامل
• ↵
  • الربوة JHM،
  • تشنغ S.-D.،
  • لند M.

  أليل speificity من توقيت تكرار الحمض النووي في Angelman /-برادر ويلي متلازمة مطبوع المنطقة الكروموسومات. نات. جينيه. 1994؛ 6: +41 - +46.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • Kitsberg D.،
  • سيليج S.،
  • برانديز M.،
  • سيمون أولا،
  • كيشت أولا،
  • دريسكول DJ،
  • نيكولز RD،
  • الأرز H.

  أليل معين توقيت تكرار المناطق الجينات مطبوع. الطبيعة 1994؛ 364: 459 - 463.
  منحة جوجل
• ↵
  • اسال JM،
  • لند M.

  تنظيم المجال من تكرار أليل معين داخل الكتلة GABRB3 الجين تتطلب متحدر من والدين 15q11-13 مساهمة. نات. جينيه. 1995؛ 9: 386 - 394.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • اسال J.،
  • لند M.

  جمعية مثلي من المجالات الكروموسومات مطبوع معاكس. العلوم 1996؛ 272: 725 - 728.
  الملخص / الحرة النص الكامل
• ↵
  • تاتشر KN،
  • Peddada S.،
  • ياسوي DH،
  • اسال JM

  وينظم الاقتران مثلي من 15q11-13 المجالات مطبوع في الدماغ تنمويا كنه يعاني من نقص في ريت وعينات من مرض التوحد. همهمة. مول. جينيه. 2005؛ 14: 785 - 797.
  الملخص / الحرة النص الكامل
• ↵
  • Rougeulle C.،
  • جلات H.،
  • لند M.

  هو مطبوع على Angelman متلازمة الجينات مرشح، UBE3A / E6-AP، في الدماغ. نات. جينيه. 1997؛ 17: +14 - 15.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • فو T.،
  • هوفمان A.

  يقتصر يطبع من هذا الجين متلازمة أنجلمان، UBE3A، إلى الدماغ. نات. جينيه. 1997؛ 17: 12 - 13.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • ألبرخت U.،
  • ساتكليف JS،
  • Cattanach BM،
  • بيتشي CV،
  • ارمسترونغ D.،
  • ايشيل G.،
  • Beaudet AL

  التعبير مطبوع من الفئران الجينات متلازمة أنجلمان، Ube3a، في قرن آمون والخلايا العصبية العصبية. نات. جينيه. 1997؛ 17: 75 - 78.
  CROSSREF ميدلاين ويب للعلوم الباحث العلمي من Google
• ↵
  • Nagarajan RP،
  • Hogart A.،
  • Gwye Y.،
  • مارتن MR،
  • اسال JM

  انخفاض التعبير MeCP2 متكرر في التوحد القشرة الأمامية ويرتبط الشاذة MECP2 المروج مثيلة. علم التخلق 2006؛ 1: 172 - 182.
  ميدلاين الباحث العلمي من Google
• ↵
  • ماكيدونسكي K.،
  • Abuhatzira L.،
  • كوفمان Y.،
  • رازين A.،
  • شيمر R.

  نقص MeCP2 في متلازمة ريت يسبب انحرافات جينية في / AS مركز PWS يطبع أن يؤثر UBE3A التعبير. همهمة. مو

 

[رافت ابراهيم]

 

http://hmg.oxfordjournals.org/content/16/14/1682.full

التوحد هو حالة غير المتجانسة التي يرجح أن يترتب من آثار جنبا إلى جنب العوامل الوراثية متعددة تتفاعل مع العوامل البيئية. وفي ضوء تعقيده، ودراسة التوحد المصاحب للاضطرابات جين واحد مندل أو مسببات الصبغية المعروفة تقدم وجهة نظر هامة. واستخدم الباحثون تحليل ميكروأري لمقارنة الشخصي التعبير مرنا في الخلايا lymphoblastoid من الذكور المصابين بالتوحد نتيجة لطفرة X الهشة (FMR1-FM)، أو الازدواجية 15q11-Q13 (الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q))، والضوابط غير التوحد. ملامح التعبير الجيني التمييز بوضوح التوحد من الضوابط وفصل الأفراد المصابين بالتوحد على أساس المسببات الجيني. حددنا 68 الجينات التي تم dysregulated مشتركة بين التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). حددنا أيضا وصلة الجزيئي المحتمل بين FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)، وFMR1 حشوية التفاعل البروتين 1 (CYFIP1)، والتي كانت تصل التنظيم في الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) من المرضى. كنا قادرين على تأكيد هذا الرابط في المختبر من خلال إظهار التنظيم المشترك لاثنين من الجينات dysregulated أخرى، JAKMIP1 وGPR155، المصب FMR1 أو CYFIP1. نحن أيضا أكد الحد من البروتين Jakmip1 في Fmr1 الفئران خروج المغلوب، مما يدل على أهمية في الجسم الحي. وأخيرا، أظهرنا تأكيد مستقل لأدوار JAKMIP1 وGPR155 في اضطرابات طيف التوحد (أي إس دي إس) بإظهار التعبير عنها التفاضلية في أزواج السيب الذكور المتنافرة لASD مجهول السبب. وتوفر هذه النتائج دليل على أن التعبير خلايا الدم lymphoblastoid مشتقة الجينات من المرجح أن تكون مفيدة لتحديد مجموعات فرعية المسببة لمرض التوحد واستكشاف الفيزيولوجيا المرضية لها.

القسم السابق القسم التالي

المقدمة

العوامل الوراثية هي المحددات الهامة من اضطرابات طيف التوحد (أي إس دي إس) الفيزيولوجيا المرضية (1 - 4). الآن، وقد أعاق تحديد الجينات المسببة بواسطة التجانس الوراثي والمظهري (1 - 18). وهكذا، فإنه يبدو من المعقول لتسريع عملية اكتشاف الجينات باستخدام مزيج من النهج التجريبية، مثل دراسة "جين واحد" أو أكثر من الأسباب بسيطة، مثل الاختلالات عدد نسخ الكروموسومات التي تشمل ASD (الظواهر 1 - +4). واحدة من هذه الفوضى هي متلازمة X الهش (FXS) (1 - 4، 19)، والذي كان سببه التوسع في تسلسل المتكررة ثلاثي النوكليوتيد (CGG) ن في منطقة المروج للX التخلف العقلي الهش يقع 1 (FMR1) الجينات في Xq27.3 (20). هذا التحول يؤدي إلى عجز كبير من البروتين FMR1 (FMRP) والنمط الظاهري بما في ذلك ضعف الادراك والانحرافات السلوكية الأخرى التي تتداخل مع ASD. ويقدر انتشار ASD بين الحالات FXS في 15-33٪ (21، 22) و~1-3٪ من الذين يعانون من مرض التوحد وليس الخصائص الفيزيائية واضحة من FXS وجدت لديك FMR1-FM (19، 23).
اضطراب آخر يرتبط التعرض للASD هو الازدواجية الموروثة للأمهات من 15q11-Q13 (الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)) (+1 - +4، 24). عناصر تكرار متعددة داخل منطقة تتوسط مجموعة متنوعة من إعادة ترتيب، بما في ذلك الازدواجية الخلالي، triplications فراغي والزائدة الكروموسومات علامة isodicentric (25). الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) يحدث مع تردد المقدرة 1: 600 طفل مع تأخر في النمو (26)، وهو الأكثر شيوعا التباين في عدد النسخ تسبب ASD (3، 24). عدة أسطر من الأدلة (24، 27) تشير إلى أن التقلبات الجينات غير مطبوع في المنطقة تكرار يمكن أن تسهم في النمط الظاهري يعانون من التوحد لوحظ في الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q).
ولذلك، فإننا مسبب أن تحديد الجينات التي يتم dysregulated من قبل كل من FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) التعبير قد تكون ذات صلة ASD، منذ عقدين من تشوهات وراثية تمثل حالات الطفرات حيث واحدة، وإما تكرار ثلاثي النوكليوتيد أو نسخ تباين عدد (28 )، تسبب ASD. أردنا أيضا أن تدرس، كدليل على المبدأ، سواء ملامح التعبير lymphoblast الجينات التي حددها المجهرية يمكن أن تفرق أسباب هذه طفرة واحدة 'بسيطة' التوحد من بعضها البعض والضوابط. وهذا من شأنه توفير أساس لمواصلة تطبيق هذه الأساليب في التوحد مجهول السبب، حيث يمكن أن تشارك الميراث والبيئية التأثيرات مزيد من multigenic (1 - +4).
في الآونة الأخيرة، وأشارت العديد من الدراسات أن خلايا lymphoblastoid يمكن استخدامها للكشف عن الارتباطات معقولة بيولوجيا بين الجينات المرشحة والأمراض العصبية والنفسية، بما في ذلك متلازمة ريت (29)، مرتبطة X التخلف العقلي غير محدد (30)، والهوس الاكتئابي (31)، FXS (32) والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) (27). في هذه الدراسة، ونحن التحقيق ما إذا كانت ملامح التعبير الجيني للخلايا lymphoblastoid يمكن استخدامها ل: (ط) تمييز موضوعات التوحد الذين تم التحقق من وتشخيص وجود ASD في بورصة التوحد الوراثية الموارد (أوافق) (33) مستودع في فئات المسببة ( FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)) و (ب) تحديد الجينات والممرات المشتركة بين FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) التي قد تكون ذات صلة بمرض التوحد الفيزيولوجيا المرضية. هنا، علينا أن نبرهن على ملامح التعبير الجيني كانت قادرة على التمييز بوضوح الأفراد على أساس المسببات الخاصة بهم. حددنا أيضا 68 الجينات dysregulated في كل من التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). ومن المثير للاهتمام، حددنا اتصال الجزيئي بين FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)، CYFIP1، الذي يتسبب بشكل كبير في الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) وكما هو معروف لاستعداء بعض جوانب وظيفة FMRP (34). أثبتنا أيضا أن التعبير عن يانوس كيناز وأنيبيب التفاعل البروتين 1 (JAKMIP1) وG البروتين يقترن مستقبلات 155 (GPR155) تم dysregulated عادة من قبل الحد من FMR1 أو تحريض CYFIP1 في المختبر. وdysregulated التعبير عن Jakmip1 أيضا في الدماغ من Fmr1 خروج المغلوب الماوس. وأخيرا، كنا قادرين على إظهار أن JAKMIP1 وGPR155 تم dysregulated في الذكور مع أي إس دي إس النسبية لأشقائهم غير المتضررة، وتوفير تأكيد مستقل لاقتراح ترتبط هذه الجينات مع ASD.

القسم السابق القسم التالي

النتائج

المجموعات الهرمية وتحليل المكون الرئيسي الأفراد المتميزين بناء على مسببات وراثية

قمنا بتحليل كامل الجينوم الشخصي التعبير مرنا في الخلايا lymphoblastoid من 15 من الذكور التوحد (8 ذكور التوحد مع FMR1-FM و 7 ذكور التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)) و 15 من الذكور السيطرة غير التوحد من اغري (المواد التكميلية، الجدول S1) باستخدام اجيلنت الجامع الجينوم ميكروأرس الإنسان. وعموما، من 41 000 تحقيقات تحليلها، 31 044 تحقيقات، وهو ما يمثل 23 822 الجينات، وأعرب في الخلايا lymphoblastoid. للعثور على الجينات التي أعرب تفاضلي عبر المجموعات الخاضعة ثلاثة، تعرض ملف تعبير عن خلايا lymphoblastoid لتحليل التباين (ANOVA) (35). حددت ANOVA 293 المسابير (277 الجينات) أقل من معدل اكتشاف كاذبة محددة (FDR) عتبة 5٪ (المواد التكميلية، الجدول S2). وقد تبين أن التعبير عن FMR1 ينخفض ​​في الخلايا lymphoblastoid مع FMR1-FM (36)، وأنه تعبير عن UBE3A هو زيادة في الخلايا lymphoblastoid مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) (37). متطابقة مع هذه التقارير، كانت FMR1 وUBE3A بين 293 تحقيقات أعرب تفاضلي، وتوفير ضوابط مستقلة لتحليل ميكروأري.
كما هو مبين في الشكل 1 A و B، المجموعات الهرمية باستخدام 293 تحقيقات تصنف بشكل واضح الأفراد على أساس التركيب الوراثي بهم. تعرضوا للتحقيقات 293 أيضا إلى تحليل المكون الرئيسي (PCA). كما هو مبين في الشكل 1 C، ثلاثة عناصر PCA المهيمنة التي تحتوي على 70٪ من التباين في مصفوفة بيانات الأفراد فصل واضح على أساس المسببات الجينية. في هذه المؤامرة، وشكلت أول محور المكون الرئيسي ل56٪ من التباين في مجموعة البيانات وفصلها بشكل واضح التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) من الضوابط، في حين بلغت نسبة المكون الرئيسي الثاني (PC2) عن 10٪ من التباين والتوحد منفصل مع FMR1-FM من التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). أفضل 10 الجينات التي تسهم في PC2 تشمل FMR1، UBE3A، CYFIP1، غير مطبوع في برادر ويلي / Angelman متلازمة 2 (NIPA2) ومجال وكان الحاخام هيشت وRLD 2 (HERC2). وتقع جميع الأخيرة أربع جينات في 15q11-Q13. وتشير هذه النتائج إلى أن تخفيض الانتقائي للFMR1 والحث الانتقائي لأربعة جينات تقع في 15q11-Q13 متباينة التوحد مع FMR1-FM من التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). وتوفر هذه البيانات دليلا حاسما من حيث المبدأ أن ملامح التعبير الجيني للخلايا lymphoblastoid مفيد في دراسة مرض التوحد.

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الشكل 1.

المجموعات الهرمية وPCA تفرق الأفراد على أساس المسببات الخاصة بهم. حددت ANOVA 293 تحقيقات مع التعبير يختلف كثيرا بين التوحد مع FMR1-FM (ن = 8)، التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) (ن = 7) والسيطرة (ن = 15). تعرضوا للتحقيقات إلى المجموعات الهرمية وPCA. (A) التجميع الهرمي من 30 شخصا والجينات. يمثل كل صف الفرد ويمثل كل عمود واحد للتحقيقات 293. ويرد تمثيل الملونة الزائفة من كثافة نسبية، مثل أن اللون الأحمر يشير تعبير عالية واللون الأخضر التعبير منخفضة، مع حجم هو مبين أدناه. وأظهرت أيضا المسافة النسبية لكل التحقيق (المحور الأفقي) والأفراد (المحور الرأسي). (B) زيادة عدد أعضاء dendrogram المجموعات الهرمية من العينة في (A). كل ثمانية التوحد مع FMR1-FM، سبعة التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) و 15 الضوابط تتجمع بشكل صحيح ضمن فئاتها المسببة. يبين مقياس سبيرمان معامل ارتباط الرتب المستخدمة لبناء dendrogram. (C) PCA ملف التعريف التعبير عن تحقيقات 293 من 30 فردا. يظهر هنا ثلاثة عناصر رئيسية. وصفت التوحد مع FMR1-FM كما البرتقال، التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) كما أرجواني والسيطرة كما السماوي. تتجمع الأفراد وفقا لمسببات وراثية.

ميكروأري التحليلات كشف تداخل كبير من FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)

لتحديد مجموعة من الجينات الأكثر بقوة وأعرب تفاضلي في كل مجموعة، طبقنا ثلاثة الأساليب الإحصائية المختلفة، ANOVA، تحليل كبير من ميكروأري (SAM) (38) والرتبة تحليل المنتج (RankProd) (39). SAM هو تعديل الإحصائية ر -test، في حين RankProd هو إحصائية غير المعلمية التي يكشف العناصر التي يتم باستمرار مرتبة عالية في عدد من القوائم. حددت SAM 5139 تحقيقات وتحقيقات 1281 بالمهم (روزفلت <5٪) في التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)، على التوالي (الشكل 2 ألف وباء، التكميلية المواد، جداول S3 و S4). حددت RankProd 2281 تحقيقات و 1444 تحقيقات بالمهم (روزفلت <5٪) في التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)، على التوالي (الشكل 2 ألف وباء، التكميلية المواد، جداول S5 وS6). حددت مجموعة من ANOVA، SAM وRankProd 146 المسابير (120 الجينات) في التوحد مع FMR1-FM و 97 المسابير (80 الجينات) في التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) (الشكل 2 C). تم dysregulated ثلاثة وثمانين تحقيقات يمثلون 68 جينات في كل من التوحد مع FMR1-FM ومع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) (الجدول 1). وكانت هذه الدرجة من التداخل هامة للغاية (احتمال فوق الهندسي، P = 1.2 × 10 -153). تم dysregulated الخمسين اثنين من الجينات و 12 الجينات بشكل انتقائي في أي التوحد مع FMR1-FM والتوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)، على التوالي (الجدول 2)، مع التغييرات أضعاف تتراوح بين 0.54 و 1.98 أضعاف.

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الرقم 2.

وأعرب تفاضلي تحقيقات التي حددها ثلاثة الأساليب الإحصائية المختلفة، ANOVA، SAM وRankProd. فين الرسم البياني يبين عدد من التحقيقات التي تم تحديدها كما أعرب تفاضلي بين (A) التوحد مع FMR1-FM (ن = 8) والسيطرة (ن = 15) و (B) التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) (ن = 7) والسيطرة ( ن = 15). (C) تداخل تحقيقات أعرب تفاضلي (الجينات) في التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q).

عرض هذا الجدول:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

الجدول 1.

الجينات dysregulated في كل من التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)

عرض هذا الجدول:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

الجدول 2.

الجينات dysregulated بشكل انتقائي في التوحد مع FMR1-FM أو الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)

أكد الكمي في الوقت الحقيقي PCR التعبير التفاضلية التي حددها تحليل ميكروأري

للتحقق من صحة التعبير التفاضلية التي حددها تحليل ميكروأري باستخدام أساليب مستقلة، أجرينا الكمي في الوقت الحقيقي PCR (qRTPCR) تحليل 19 الجينات اختيرت المقطع العرضي باستخدام نفس العينات المستخدمة في تحليل ميكروأري. أكد qRTPCR أن 17 من أصل 19 الجينات وأعرب تفاضلي كما هو متوقع من التحليل ميكروأري (الشكل 3 A-C). كان هناك ارتباط كبير للغاية الشامل بين ميكروأري والنتائج qRTPCR (ارتباط بيرسون، ص = 0.57، P <0.0001). وكانت أضعاف التغيرات الملحوظة مع qRTPCR أعلى عادة أن التغيير أضعاف أصغر لوحظ على المصفوفات.

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الرقم 3.

تأكيد التعبير التفاضلي الجينات التي qRTPCR. تم استخراج الحمض النووي الريبي مجموع من خلايا lymphoblastoid مع FMR1-FM، الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) أو السيطرة وqRTPCR أجريت للتأكد من التعبير التفاضلية التي حددها تحليل ميكروأري. (A) الجينات dysregulated تحديدا في التوحد مع FMR1-FM أو الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). (B) الجينات التنظيم صعودا في كل من التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). (C) الجينات downregulated في كل من التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). وتمثل نتائج سائل ± SD من كل مجموعة. تم تعيين متوسط ​​قيمة الضابطة كما تم حساب 1. P -value التي كتبها مان ويتني U اختبار استخدام جهاز التحكم (N = 15) مقابل التوحد مع FMR1-FM (N = 8) أو التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) ( N = 7). * P <0.05، ** P <0.01 *** P <0.001.

كان CYFIP1 واحد من الجينات التي يسببها بشكل انتقائي في التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). لأنه من المعروف CYFIP1 استعداء FMRP (34)، ونحن مسبب أن تحريض CYFIP1 في الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) قد يفسر بعض التداخل الكبير بين التوحد مع FMR1-FM ومع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). JAKMIP1، المعروف أيضا باسم MARLIN- 1، وكان المستحث بشكل كبير في التوحد مع FMR1-FM، وكان اتجاها إيجابيا في التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) (P = 0.062)، مما يوحي بأن JAKMIP1 يمكن أن تمثل طريقا dysregulated عادة. في الواقع، حدد RankProd JAKMIP1 باسم الجينات بشكل ملحوظ التنظيم في الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) عن طريق التحليل ميكروأري (المواد التكميلية، جدول S6). هذا الجين هو مرشح لا سيما مهم من الناحية البيولوجية، نظرا لدوره المفترض في GABA B مستقبلات التعبير (40) والشبكات أنيبيب (41).

وظيفية الشرح كشف مسار ديسريغولاتيون

في محاولة للكشف عن الكسور الشائعة بين الجينات وأعرب تفاضلي، ونحن المصنفة الجينات في مجموعات الأنطولوجيا الجينات باستخدام DAVID (42). الجدول 3 يظهر أعلى المجموعات الثلاث التي حددها DAVID باستخدام الجينات 68 dysregulated في التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) أو 52 الجينات dysregulated بشكل انتقائي في التوحد مع FMR1-FM. وكان عدد من الجينات dysregulated بشكل انتقائي في التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) صغير جدا لتحليل باستخدام الوظيفي تجميع الشرح.

عرض هذا الجدول:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

الجدول 3.

وظيفية تجميع الشرح باستخدام الجينات 68 dysregulated في كل من التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) أو 52 الجينات dysregulated بشكل انتقائي في التوحد مع FMR1-FM

الجينات المتعلقة بالاتصالات الخلية (P = 7.6 × 10 -6) ونقل الإشارة (P = 2.2 × 10 -5) وإثراء الأهم في الجينات 68 dysregulated عادة في التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). وقد أثرى الجينات المتعلقة الاستجابة المناعية (P = 3.7 × 10 -3) والاستجابة الدفاع (P = 7.3 × 10 -3) أيضا في هذه المجموعة الجينات. الجينات المتعلقة كوصي تم تخصيب (P = 2.6 × 10 -2) والبروتين للطي (P = 3.2 × 10 -2) في 52 الجينات dysregulated بشكل انتقائي في التوحد مع FMR1-FM. الجينات المتعلقة RNA ملزم (P = 1.2 × 10 -2) ومرنا الأيض (P = 2.1 × 10 -2) وقد أثرى أيضا في هذه المجموعة الجينات، بما يتفق مع وظيفة البروتين FMRP باعتبارها بروتين ملزمة RNA المهم في الترجمة التنظيمية ( 43). تم العثور على المحرمين والبروتينات للطي عادة للعمل المشترك translationally، وتوفير وجود صلة محتملة مع وظيفة FMRP.
لتوفير تصنيف وظيفي أكثر دقة من الجينات، وكنا الإبداع تحليل المسار (IPA) (44)، أداة قوية للتحقيق في المسارات البيولوجية ممثلة في الجينات dysregulated عادة في التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). يستخدم IPA البروتين البروتين والجينات الجين التفاعلات المعروفة التي تم اعدامها في قاعدة بيانات برعاية وشركاه قائمة الجينات وأعرب تفاضلي مع شبكات البيولوجية. حددت IPA ثلاث شبكات ذات دلالة إحصائية، تحتوي كل منها على 10 على الأقل الجينات (الجدول 4، المواد التكميلية، الشكل S1). وكانت المهام الرئيسية المرتبطة بهذه الشبكات دورة الخلية (P = 5.2 × 10 -8)، حركة الخلوية (P = 1.3 × 10 -8) وخلية الى خلية الإشارات والتفاعل (P = 4.3 × 10 -8). وكانت "الإشارات والتفاعل خلية الى خلية" تتفق مع "خلية الاتصال" و "نقل الإشارة" فئات حددها DAVID. كان تحديد "النقل الجزيئي" مسار تحتوي على JAKMIP1 بالغا، نظرا لدور هذا الجين المعروف في الاتجار الجبار داخل الخلايا العصبية (41). وكانت هناك أيضا جينات أخرى مهمة في هذا المسار، بما في ذلك PSCD3، عاملا ADP-ribosylation من غير معروفة وظيفة الجهاز العصبي المركزي، وACTN1، وهو هيكل الخلية ترسيخ البروتين. JAKMIP1 يمكن أن تعمل جنبا إلى جنب مع هذه الجينات في فصل يشير المجمعات تشارك في نقل العصبي.

عرض هذا الجدول:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

جدول (4).

شبكات الجينات التي حددها IPA باستخدام الجينات dysregulated في كل من التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)

تأثير downregulation من FMR1 ويصل تنظيم CYFIP1 في خلية العصبية على التعبير عن الجينات dysregulated المحددة في خلايا lymphoblastoid

على الرغم من أننا حددت الجينات dysregulated في التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) باستخدام خلايا lymphoblastoid، ونحن مهتمون في ما إذا كان التعبير عن هذه الجينات ستكون أيضا تعتمد على FMR1 وCYFIP1 في الخلايا العصبية. لدراسة تأثير FMR1 وCYFIP1 في الخلايا العصبية، استخدمنا خط جيدا اتسم الإنسان الخلية العصبية SH-SY5Y (45). FMR1 وCYFIP1 الاعتماد في الخلايا SH-SY5Y تم تقييمها باستخدام الحمض النووي الريبي دبوس الشعر القصير (shRNA) للحد من التعبير عن FMR1 وناقلات التعبير البلازميد للحث على التعبير عن CYFIP1، على التوالي. كما هو مبين في الشكل 4 A، تم تخفيض التعبير عن FMR1 إلى ~60٪ من المستوى الطبيعي في خلايا SH-SY5Y التعبير عن ثابت FMR1 shRNAs، في حين أن التعبير عن CYFIP1 وكان المستحث إلى حد كبير (11 ضعفا) في الخلايا SH-SY5Y ثابت مع transfected البلازميد CYFIP1.

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الرقم 4.

وdysregulated JAKMIP1 وGPR155 بتخفيض FMR1 وتحريض CYFIP1. و transfected الخلايا SH-SY5Y مستقر مع (ط) ناقلات تعبر عن shRNA للسيطرة، (ب) ناقلات معربا عن shRNA لFMR1، (ج) ناقلات التعبير فارغة أو (د) ناقلات التعبير عن CYFIP1. تم استخراج الحمض النووي الريبي مجموع من كل وأجريت qRTPCR للتحقق من تأثير FMR1 وCYFIP1 على التعبير عن JAKMIP1 وGPR155. (A) هو انخفاض التعبير عن FMR1 بشكل كبير في الخلايا SH-SY5Y معربا عن shRNA لFMR1، في حين أن التعبير عن CYFIP1 كان المستحث بشكل كبير في الخلايا SY5Y الإفراط في التعبير عن CYFIP1. (B) يتم تخفيض تعبير عن JAKMIP1 بشكل كبير في الخلايا SH-SY5Y معربا عن shRNA لFMR1 والإفراط في التعبير عن CYFIP1. هو فعل للتعبير عن GPR155 بشكل كبير في الخلايا SH-SY5Y معربا عن shRNA لFMR1 والإفراط في التعبير عن CYFIP1. وتمثل نتائج سائل ± SD من كل مجموعة. تم تعيين متوسط ​​قيمة كل عنصر تحكم كما تم احتساب 1. أهمية من اختبار مان ويتني U باستخدام الخلايا SH-SY5Y معربا عن shRNA من أجل السيطرة (N = 4) مقابل shRNA لFMR1 (N = 4) أو فارغة ناقلات التعبير (N = 8) مقابل ناقلات التعبير عن CYFIP1 (N = 7). * P <0.05، ** P <0.01.

كنا قادرين على مواصلة إثبات تأثير downregulation من FMR1 ويصل تنظيم CYFIP1 على التعبير عن اثنين من الجينات الرئيسية المصب (الشكل 4 B). في الخلايا SH-SY5Y مع transfected FMR1 shRNA، والتعبير عن JAKMIP1 وGPR155 انخفض بشكل كبير والتي يسببها، على التوالي. في الخلايا SH-SY5Y تم تخفيض أيضا الإفراط في التعبير عن CYFIP1، والتعبير عن JAKMIP1 وGPR155 والتي يسببها، على التوالي. وأظهرت هذه النتائج أن التعبير عن JAKMIP1 وGPR155 كان يعتمد أيضا على FMR1 وCYFIP1 في الخلايا SH-SY5Y وأن الحد من FMR1 وتحريض CYFIP1 يمكن أن تشترك الآثار المصب المشتركة على التعبير عن JAKMIP1 وGPR155.

كان التعبير عن بروتين JAKMIP1 تعتمد على FMR1 وCYFIP1

نحن التحقق من صحة بجانب تأثير FMR1 أو CYFIP1 على التعبير البروتين من JAKMIP1 في الجهاز العصبي المركزي (CNS). درسنا التعبير عن بروتين JAKMIP1 في قشرة Fmr1 خروج المغلوب (KO) والبرية من نوع (WT) الفئران والخلايا SH-SY5Y مع transfected في CYFIP1 الإفراط في التعبير البلازميد. تم تخفيض التعبير عن Jakmip1 في قشرة Fmr1 KO الفئران (الشكل 5 A) والخلايا SH-SY5Y الإفراط في التعبير عن CYFIP1 (الشكل 5 B). وأكدت هذه النتائج في المختبر النتائج التي كان التعبير عن Jakmip1 تعتمد على Fmr1 في مخ الفأر، مما يشير إلى أن على الأقل بعض التغيرات الملحوظة في الخلايا lymphoblastoid تعكس تغييرات مماثلة في الجهاز العصبي المركزي.

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الرقم 5.

كان التعبير عن JAKMIP1 تعتمد على FMR1 وCYFIP1 في القشرة الماوس والخلايا SH-SY5Y. تم استخراج البروتينات من القشور من Fmr1 WT أو الفئران KO (A)، أو خلايا SH-SY5Y مع transfected ناقلات فارغة أو CYFIP1 كدنا] (B). تم تنفيذ النشاف الغربي للتحقق من أثر في الحد من FMR1 أو تحريض CYFIP1 على التعبير عن بروتين JAKMIP1. تم تخفيض التعبير البروتين من Jakmip1 في القشرة من الفئران Fmr1-KO (A)، وكذلك الخلايا SH-SY5Y مع transfected shRNA لFMR1 (لا تظهر البيانات) وSH-SY5Y أكثر، معربا عن CYFIP1 (B). وكانت البيانات الواردة في (A) و (B) ممثل تجربتين مستقلة.

كان التعبير عن JAKMIP1 وGPR155 تختلف كثيرا بين 27 أزواج السيب الذكور مخالف للASD مجهول السبب

لتحديد إمكانية تعميم المحتمل لهذه النتائج إلى التوحد مجهول السبب، قمنا بفحص ما إذا كان dysregulated التعبير عن JAKMIP1 وGPR155 أيضا في الخلايا lymphoblastoid من الحالات مجهولة السبب ASD. اخترنا 27 أزواج السيب الذكور المتنافرة لASD من اغري (المواد التكميلية، الجدول S1). لم الذكور 27 مع ASD ليس لديها FMR1-FM أو الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) وكان علامات الذكاء البديلة (المصفوفات الغراب التقدمية)> 70. كما هو مبين في الشكل 6، والتعبير عن JAKMIP1 وGPR155 كان dysregulated بشكل ملحوظ في 27 من الذكور مع ASD بالمقارنة مع sibs من دون ASD. وتشير هذه النتائج إلى أن التقلبات من JAKMIP1 وGPR155 يرتبط مع ASD. عدم وجود الإعاقة الذهنية العامة في هذه المجموعة ASD تبين أيضا أن هذه dysregulations ليست مجرد نتيجة لضعف الادراك غير محددة أو الإعاقة الذهنية التي لوحظت في FXS والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). ومع ذلك، في كل من في المختبر (خلايا SH-SY5Y) والحية (الدماغ) أنسجة الجهاز العصبي المركزي، وكانت توجيهات JAKMIP1 وتنظيم GPR155 معاكسة لتلك التي لوحظت في الخلايا lymphoblastoid. قد تعكس الاختلافات العديد من الحقائق، بما في ذلك تخليد أو مسارات الإشارات التنظيمية البديلة في الأنسجة المختلفة. ومع ذلك، وهذه البيانات هي ثابتة بين FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) وتشير إلى أن التعبير عن JAKMIP1 وGPR155 ينظمه كل من FMR1 وCYFIP1 المستويات، على الرغم من أن مختلف بين الأنسجة العصبية والخلايا lymphoblastoid، وتوفير مسارات الإشارات المشتركة المحتملة dysregulated في ASD ( الشكل 7).

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الرقم 6.

وdysregulated JAKMIP1 وGPR155 في المستلفت ASD في المتنافرة أزواج السيب الذكور. تم استخراج الحمض النووي الريبي مجموع من خلايا lymphoblastoid من 27 أزواج السيب الذكور المتنافرة لASD وqRTPCR أجريت للتأكد من التعبير التفاضلية من JAKMIP1 وGPR155. وتمثل نتائج سائل ± SD من كل مجموعة. تم تعيين متوسط ​​قيمة الضابطة كما تم احتساب 1. P -value من قبل اختبار Wilcoxon رتبة محصلتها استخدام وسائل منع (N = 27) مقابل ASD (N = 27). * P <0.05.

عرض نسخة أكبر:

• في هذا الإطار
• في نافذة جديدة

• تحميل ك شريحة PowerPoint

الرقم 7.

التقارب الجزيئي للFMR1-FM، الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) وASD مجهول السبب. وتمت مقارنة البيانات الشخصية التعبير مرنا في الخلايا lymphoblastoid من التوحد مع FMR1-FM أو الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) والتحكم باستخدام تحليل ميكروأري. تم dysregulated ثمانية وستين الجينات في كل من التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). تحريض CYFIP1 في الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) هو وجود صلة محتملة بين الجزيئية FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). بين الجينات dysregulated، وقد تم تحليل JAKMIP1 وGPR155 كذلك لتأكيد العلاقة السببية بين CYFIP1 والتعبير FMR1 والتعبير عنها في الخلايا العصبية أو الأنسجة وللتحقق من صحة ديسريغولاتيون من هذه الجينات في الخلايا lymphoblastoid من الموضوعات مع ASD مجهول السبب.

القسم السابق القسم التالي

نقاش

التوحد هو حالة غير متجانسة والنتائج المحتملة من الآثار المجتمعة للتغيرات جينية متعددة بما في ذلك نسخة الاختلافات عدد والأشكال النووية المنفردة، والتفاعل مع العوامل البيئية (+1 - 4). تصنيف المرضى الذين يعانون من التوحد على أساس الوراثي والمعلومات المظهرية هي طريقة واحدة فعالة لتحديد مجموعات فرعية أكثر تجانسا والإسراع في التعرف على الجينات الكامنة وراء مرض التوحد (1 - 4). حوالي 3٪ من الأطفال الذين يعانون من التوحد إما FMR1-FM أو الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)؛ يضم هؤلاء المرضى السكان متجانسة للتحقيق.
في هذه الدراسة، أجرينا التعبير مرنا التنميط العالمي في الذكور المصابين بالتوحد تحمل إما FMR1-FM أو الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) والذكور في السيطرة. وجدنا أن هؤلاء الأفراد الذين يعانون من التوحد يمكن التمييز على أساس مسببات وراثية على أساس lymphoblast ملامح التعبير الجيني. ومن المثير للاهتمام، كما كشف هذا التحليل المشترك توقيع التعبير الجيني عبر هذه شرطين جينية منفصلة الذي كان مختلفا كثيرا عن ملامح السيطرة. كنا تقاطع ثلاثة الاختبارات الإحصائية المختلفة لتحديد الجينات الأكثر بقوة وأعرب تفاضلي (35، 38، 39)، وأكدت البيانات qRTPCR هذه الاستراتيجية اختيار الجينات.
ملامح التعبير الجيني للخلايا lymphoblastoid تحمل FMR1-FM

حددنا 120 الجينات وأعرب تفاضلي في ناقلات FMR1-FM مقارنة مع الضوابط. ومن بين هذه الجينات، NR3C1 وVIM تم تحديدها سابقا باسم الرنا الهدف من FMRP (46)، على الرغم من أن التغييرات مرنا التعبير عن هذه الجينات في FMR1-FM لم يتم الإبلاغ عنها. براون وآخرون. (32) التي سبق تحديدها 144 الجينات كما أعرب تفاضلي في الابيضاض اللمفاوي مع FMR1-FM باستخدام تجميع الخلايا lymphoblastoid X الهش والخلايا lymphoblastoid العادية المجمعة. لأنه لم يكن هناك أي تداخل فيما عدا FMR1 بين هذه الجينات 144 و 120 الجينات المحددة هنا مع التحليلات الأكثر صرامة لدينا باستخدام ANOVA، SAM وRankProd، استخدمنا قائمة الجينات أكبر تحديدها من قبل أي SAM و / أو RankProd للمقارنة مع الجينات 144 التي حددها براون وآخرون. وجدنا أن 13 جينات تم تبادل في قوائم الجينات هذه، بما في ذلك iduronate 2-سلفاتاز (IDS)، شعر ومحسن من الانقسام 1 (HES1) والغلوبولين المناعي الفصيلة، عضو 3 (IGSF3) ما يصل التنظيم الجينات والبروتينات المرتبطة CDK2 2 (CDK2AP2)، ببتيداز محدد بتحول 8 (USP8)، MAX مثل البروتين X (MLX)، البروتين الريباسي S5 (RPS5)، C-محطة بروتين ملزمة 1 (CTBP1)، الطحال التيروزين كيناز (SYK)، F-مربع بروتين 6 (FBXO6)، تنشيط بروتين كيناز mitogen كيناز كيناز 11 (MAP3K11)، والفرز نيكسين 15 (SNX15) وCD44 المستضد (CD44)، والجينات downregulated. ومع أنه لم يتم الإبلاغ عن هذه الجينات ما يرتبط بها مع FMR1 أو التوحد، وارتبط HES1 مع اضطراب نقص الانتباه فرط النشاط الحركي (47)، وهو أحد أعراض غالبا ما نراها في FXS (48) ومتداخلة مع ASD (49). التداخل منخفض نسبيا بين القوائم الجينات اثنين يمكن أن يعزى لاختلاف المظاهر السريرية للأفراد (التوحد مقابل يست محددة لمرض التوحد)، التصميم التجريبي (كل على حدة مقابل مجمع)، منصات ميكروأري (اجيلنت مقابل Affymetrix) والتحليل الإحصائي المستخدمة للعثور على التعبير الفرق بين المجموعات. الدراسة الأولية (32) هدفها الأساسي هو إيجاد FMRP mRNPs يجند كان أضعفت نسبيا لكشف الفروق الشاملة في التعبير الجيني واستخدمت دراستنا معايير إحصائية متحفظة جدا. ومع ذلك، هذه مجموعة أساسية من الجينات يوفر قائمة الجينات مثيرة للاهتمام لمزيد من التحقيق.

ملامح التعبير الجيني للخلايا lymphoblastoid مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)

حددنا 80 الجينات وأعرب تفاضلي في الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) ناقلات مقارنة مع الضوابط. ومن بين هذه الجينات، أربع جينات تقع في 15q11-Q13 (منطقة الازدواجية) UBE3A، CYFIP1، NIPA2 وGOLGA8F كانت يسببها جميع. ومن المهم أن نلاحظ أن خمسة جينات أخرى تقع في منطقة تكرار، تويولين جاما مجمع بروتين يرتبط 5 (TUBGCP5)، HERC2، HERC2 جين كاذب 2 (HERC2P2)، وقد تم تحديد NIPA1 وATP10A أيضا ما يصل التنظيم الجينات واحدة على الأقل من التحليلات الإحصائية الثلاثة المختلفة (المواد التكميلية، جدول S7). خمسة جينات أخرى في المنطقة تكرار، وحمض الغاما غاما A مستقبلات (جبر) بيتا 3 (GABRB3)، جبر ألفا 5 (GABRA5)، جبر غاما 3 (GABRG3)، عيني جلدي المهق II (OCA2) وhomolog necdin (NDN)، لم أعرب في المستويات التي يمكن اكتشافها في الخلايا lymphoblastoid. ومن المهم التأكيد على أن المنطقة 15q11-Q13 تخضع ليطبع الأب. ثلاثة جينات مطبوع أبويا، خاتم makorin البروتين إصبع 3 (MKRN3)، أظهر وأعرب عن 2 (MAGEL2) وSNRPN إطار القراءة المنبع (SNURF) -small بروتين نووي ريبوزي ببتيد النووي N (SNRPN) في الابيضاض اللمفاوي، ولكن مثل MAGE أي تغييرات كبيرة مقارنة لضوابط. هذه البيانات تتفق مع حقيقة أن المنطقة تكرار استمد للأمهات في جميع الحالات السبع التي تم تحليلها في هذه الدراسة. لذلك، وعموما، فإن هذه النتائج تشير إلى أن الجينات الموجودة في المنطقة تتكرر كانت على مستوى العالم باستثناء الجينات مطبوع أبويا التنظيم صعودا. كما تم الإبلاغ العالمي يصل التنظيم بسبب الجينات الجرعة في متلازمة داون (50، 51).
بارون وآخرون.(27) حددت 81 الجينات المعروفة باسم أعرب تفاضلي في الخلايا lymphoblastoid مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) (سبعة أشخاص) مقارنة مع الضوابط (ثمانية أشخاص) باستخدام منصة Affymetrix. حددوا يصل تنظيم UBE3A، NIPA1، NIPA2 وHERC2، والنتائج متسقة مع النتائج التي حققناها. استخدمنا قائمة الجينات التي حددها SAM و / أو RankProd للمقارنة مع الجينات 81 التي حددها بارون وآخرون. وحددت 11 الجينات الأخرى المشتركة في القوائم الجينات اثنين، تداخل كبير (احتمال فوق الهندسي هو 0.001). وكانت هذه الجينات abhydrolase مجال تحتوي على 6 (ABHD6)، قناة البوتاسيوم، فصيلة K، عضو 1 (KCNK1)، البروتين افتراضية KIAA1147 والزنك الاصبع، مجال DHHC تحتوي على 14 (ZDHCC14) ما يصل التنظيم ورو GTPase تفعيل بروتين 25 (ARHGAP25) ، استنساخ LOC387882، الليكوترين B4 12 hydroxydehydrogenase (LTB4DH)، استنساخ MGC27165، PFTAIRE بروتين كيناز 1 (PFTK1) والزنك البروتين إصبع 43 (ZNF43) وحلقة البروتين إصبع 41 (RNF41) كما downregulated. ولا تزال العلاقات بين هذه الجينات والتوحد غير معروفة. مرة أخرى، على غرار دراسات FMR1-FM، هذه الجينات تمثل مجموعة من الجينات تكرارها بشكل مستقل بين دراستين.

تداخل كبير من الجينات dysregulated في التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)

حددنا 68 الجينات التي تم dysregulated في كل من التوحد مع FMR1-FM ومع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)، وهي نتيجة كبيرة جدا (فوق الهندسي احتمال من هذا التداخل هو 1.2 × 10 -153). ومع ذلك، لا يمكننا استبعاد احتمال رسميا أن بعض الجينات 68 dysregulated المشتركة قد تكون ذات صلة لمسارات مشتركة بين FMR-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) لا علاقة لها ASD. هناك حاجة إلى تحليل ميكروأري باستخدام خلايا lymphoblastoid مع FMR1-FM أو الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)، ولكن من دون ASD لاستبعاد احتمال، كما حدث في حالات التصلب درني مع وبدون التوحد (51).
وجدنا أن التعبير عن CYFIP1 وكان المستحث بشكل كبير في التوحد مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). وقد تبين CYFIP1 استعداء FMRP في النظام العين والجهاز العصبي من ذبابة الفاكهة (34). في FXS، وغياب FMRP، وهو شريك ملزمة لCYFIP1، والنتائج في CYFIP1 مجانا الزائدة. وبالمثل، قد يكون CYFIP1 مجانا تتجاوز نتائج الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). وهكذا، antagonization من FMRP عن الإفراط في التعبير عن CYFIP1 و / أو إجراءات بديلة لCYFIP1 الزائدة قد تكون الروابط الآلية المشتركة بين FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q).

تأثير FMR1 وCYFIP1 على الجينات dysregulated عادة في SH-SY5Y ومخ الفأر

نحن التحقق من صحة تأثير downregulation من FMR1 في الخلايا SH-SY5Y والفأر الدماغ وتصل تنظيم CYFIP1 في الخلايا SH-SY5Y على التعبير عن الجينات dysregulated شيوعا التي تم تحديدها في خلايا lymphoblastoid المرضى. أثبتنا أن التعبير عن JAKIMIP1 وGPR155 كان dysregulated بتخفيض FMR1 وتحريض CYFIP1 في الخلايا SH-SY5Y. وdysregulated البروتين Jakmip1 أيضا الضربة القاضية من Fmr1 في مخ الفأر. ومن المثير للاهتمام، وكان اتجاه التغيرات التي لوحظت في كل من هذه الجينات في الأنسجة العصبية المعاكس (خلايا SH-SY5Y والدماغ) والخلايا lymphoblastoid. هذه الاختلافات بين خلايا المخ والدم وقد لوحظ سابقا في مسارات الإشارات الأخرى (31، 52). ومن المرجح أنه ليس الاتجاه الدقيق لوحظ في خلايا lymphoblastoid وهذا هو الاهم، ولكن التقلبات مشترك من JAKMIP1 وGPR155 المصب من هذه العيوب جين واحد، والذي لوحظ في ASD مجهول السبب.
JAKMIP1 يترافق مع تحركات يانوس (41)، الأنابيب الدقيقة (41) وجبر B مستقبلات (40). مستويات التعبير عن JAKMIP1 تؤثر على مستويات الخلايا من جبر B مستقبلات (40). لأن جبر B مستقبلات يمكن أن تتفاعل مع مستقبلات الغلوتامات metabotropic 1 (mGluR1) وزيادة حساسية الغلوتامات من mGluR1 (53)، JAKMIP1 قد تؤثر mGluR1 يشير من خلال جبر B مستقبلات. ومن المهم أن نلاحظ مبالغ فيه في ذلك إشارة mGluR Fmr1 الفئران خروج المغلوب (54) والتي glutamergic وتم الإبلاغ نظم GABAergic أن يكون غير طبيعي في التوحد (55). Jakmip1 يتم التعبير بدرجة عالية من مخ الفأر، وخصوصا في الحصين، حيث جبر B أيضا يتم التعبير عن درجة عالية من مستقبلات وmGluR1 (56). على الرغم من أن وظيفة Gpr155 غير معروفة، يتم التعبير عن ذلك بشكل كبير في الجهاز الحوفي في الدماغ الماوس (56)، مما يوحي بأن Gpr155 قد يكون لها وظائف ذات الصلة إلى الجهاز الحوفي.
ومن المثير للاهتمام أيضا للنظر في كيفية الحد من FMR1 وتحريض CYFIP1 قد تنظم التعبير عن JAKMIP1 وGPR155. وقد ثبت الزخارف G-quadruplex في الحمض النووي الريبي للعب أدوار هامة في FMRP ملزم (57). باستخدام QGRS مخطط (58)، وجدنا أن الإنسان والفأر JAKMIP1 كان كل اثنين من G-quadruplex (G 2 N 2-4 G 2 N 2-4 G 2 N 2-4 G 2) وأن الإنسان والفأر GPR155 وكان خمسة واحدة من G-quadruplex، على التوالي (لا تظهر البيانات). ويمكن أيضا ربط FMRP الرنا المستهدفة من خلال الرنا غير المكودة (59) أو microRNAs (60). باستخدام miRBase (61)، وجدنا المفترض الرنا الميكروي المواقع في الإنسان والفأر ملزمة JAKIMIP1 وGPR155 (لا تظهر البيانات). هناك حاجة لدراسات إضافية لتوضيح أهمية وظيفية من JAKMIP1 وGPR155 في التوحد وآلية تنظيم هذه الجينات التي FMR1 وCYFIP1. في هذا الصدد، والعلاقة المحتملة مع انتقال الخلايا العصبية هو فضول.

التعبير عن JAKMIP1 وGPR155 كان dysregulated أيضا في 27 من الذكور مع ASD مجهول السبب

وتشير هذه النتائج في التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) أن JAKMIP1 وGPR155 قد يكون متورطا بشكل عام في ASD مجهول السبب، منذ لوحظ التقلبات في الخلايا العصبية والمخ. نحن اختبار ما إذا كانت التقلبات من هذه الجينات كانوا أكثر للتعميم في عينة مستقلة من الحالات مجهولة السبب ASD. في محاولة للحد من عدم تجانس مجهول السبب ASD وتوسيع هذه النتائج تتجاوز تلك بالتخلف العقلي أو الإعاقة الذهنية، استخدمنا بديل IQ بناء على مصفوفات الغراب، والذي يرتبط ارتباطا وثيقا IQ يحددها تدابير أخرى (62). اخترنا 27 من الذكور ASD مع درجة الذكاء أكثر من 70. وهذه البيانات أظهرت أن التعبير عن JAKMIP1 وGPR155 كان dysregulated بشكل كبير في الخلايا lymphoblastoid من ASD مجهول السبب عند مقارنة مع الضوابط. هذه النتائج بناء على بيانات مستقلة على lymphoblastoid التعبير الجيني خلية من المواد ASD مع FMR1-FM، أو الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q)، وكذلك ASD مجهول السبب، تشير إلى أن JAKMIP1 وGPR155 قد يكون من المفيد والمؤشرات الحيوية لASD. في هذه العينة عموما، JAKMIP1 يبدو أن dysregulated أكثر بقوة من GPR155، على الرغم من أن ظهرت الخلافات التعبير غير المتجانسة. كيف ديسريغولاتيون من هذه الجينات يتعلق فرعية التوحد متميزة سيكون من المهم أيضا لتحديد في المستقبل.
آلية لتنظيم المعاكس من JAKMIP1 وGPR155 يبقى في الخلايا العصبية والخلايا lymphobastoid غير واضحة. هناك عدة تقارير سابقة من الجينات التي تبين التعبير المعاكس بين الخلايا lymphoblastoid والعقول في أمراض العصبية والنفسية. ومن الأمثلة على ذلك إينوزيتول monophosphatase 2 (IMPA2)، والتي تم تحديدها على أنها مكان معقول لالاضطراب الثنائي القطب (+63 - 65). التعبير عن IMPA2 تم تخفيض ويتسبب في الخلايا والعقول lymphoblastoid، على التوالي، في المرضى الذين يعانون من اضطراب ثنائي القطب (66). وجود ارتباط الوراثية بين IMPA2 تم تأكيد تعدد الأشكال المروج والاضطراب الثنائي القطب (67، 68). وفي هذا الصدد، تجدر الإشارة إلى أن GPR155 يقع على 2q31.1، 300 كيلو بايت من D2S2188، التي أظهرت صلة قوية إلى التوحد في الدراسات التي مجموعتين مستقلة (6، 69). تحليلات جمعية GPR155 وJAKMIP1 جارية باستخدام فوج اغري كبيرة. وتوفر هذه البيانات تحديد الأول والتحقق المستقل من أدوار JAKMIP1 وGPR155 التقلبات في ASD (الشكل 7). هناك حاجة إلى مزيد من العمل لفهم العواقب الوظيفية لهذه التغيرات في الدماغ النامية وتقييم فائدة العامة من هذه الجينات وغيرها من المؤشرات الحيوية المحتملة.

القسم السابق القسم التالي

المواد والأساليب

الأفراد والخلايا lymphoblastoid تحليلها في هذه الدراسة

قمنا بتحليل الأفراد تشخيص ASD باستخدام المعايير القياسية التحقق من صحتها، بما في ذلك مقابلة تشخيص التوحد (ADI-R) (70) والتوحد جدول التشخيص مراقبة (ADOS) (71). وضعت ثمانية ذكور مع FMR1-FM وثلاثة ذكور مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) من آغر (33) (http://www.agre.org/). وقد حصلت على أربعة ذكور إضافية مع الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) من NCS سبعة وعشرون من الذكور دون التوحد، ووضعت FMR1-FM أو الحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) من آغر لعناصر. وبالإضافة إلى ذلك، تم اختيار 27 ذكور آخر مع ASD مجهول السبب ومع الأشقاء الذكور تتأثر من آغر لعينة المقارنة (المواد التكميلية، الجدول S1). وكانت درجات معدل الذكاء البديلة (باستخدام الغراب مصفوفات) المتاحة. تم فحص FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q) بواسطة PCR ومضان خارج الموقع في التهجين، على التوالي. وقد استمدت هذه المناطق تكرار 15q11-Q13 في الذكور سبعة تحليلها في هذه الدراسة جميع أمهات. كنا أيضا 14 شخصا آخرين من اغري للمرجعية مشتركة (تجمع) في تحليل ميكروأري (لا تظهر البيانات). وكانت خطوط الخلايا lymphoblastoid (ابشتاين بار فيروس تتحول الخلايا الليمفاوية الإنسان) من هؤلاء الأفراد المتاحة من اغري.
وقد نمت الخلايا lymphoblastoid من الموضوعات في RPMI 1640 متوسطة مع 2 م م L-الجلوتامين و 25 م م HEPES (إينفيتروجن، كارلسباد، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية)، و 10٪ مصل بقري جنيني، و1 حل × مضادات الحيوية مضاد فطري (إينفيتروجن) عند 37 درجة مئوية في ترطيب 5٪ CO 2 غرفة. وقد نمت الخلايا إلى كثافة 6 × 10 5 / مل. وأولي اهتمام خاص للحفاظ على جميع خطوط الخلايا في نفس الظروف لتقليل التباين البيئي.

تجارب ميكروأري

ما مجموعه 9 × 10 6 وكانت المصنفة الخلايا lymphoblastoid في T-75 قارورة في 30 مل من المتوسط ​​الطازجة. بعد 24 ساعة، تم استخراج الحمض النووي الريبي مجموع من الخلايا باستخدام أدوات RNeasy البسيطة مع العلاج الدناز (QIAGEN، فالنسيا، CA، الولايات المتحدة الأمريكية) وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. تم قياس كمية الحمض النووي الريبي والجودة من خلال ND-100 (معمل NanoDrop، ويلمنجتون، DE، الولايات المتحدة الأمريكية) و 2100 Bioanalyzer (اجيلنت، سانتا كلارا، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية)، على التوالي.
تم تنفيذ إعداد المستهدفة باستخدام منخفض RNA الإدخال الفلورية الخطية التضخيم كيت (اجيلنت) وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. استخرجنا مجموع RNA من خلايا lymphoblastoid من كل هدف على حدة وجعل وصفت مع Cy5 مضان. ونحن أيضا الهدف المرجع باستخدام تجميع الحمض النووي الريبي مجموع من 14 شخصا للرجوع إليها وصفت مع CY3 مضان. كانت الأهداف ولدت مختلطة وتعرض لالتهجين إلى الجامع الجينوم البشري صفيف G4112A (اجيلنت) وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. وقد أجريت المسح الضوئي للالمجهرية التي كتبها ماسح ضوئي متطورة للحمض النووي (اجيلنت).
وكانت الماسح الضوئي الناتج ملفات الصور تطبيع وتصفيتها باستخدام v8.5 ميزة استخراج البرمجيات (اجيلنت). تم إجراء تطبيع لذلك هي أن نسبة كثافة الشاملة للCy5 إلى CY3 يساوي واحد. واستخدمت تحقيقات مع نسبة الإشارة إلى الضوضاء> 2.7 في كل CY3 وCy5 في ما لا يقل عن 14 من 15 ضوابط لمزيد من التحليل.

التحليل الإحصائي للبيانات ميكروأري

تم تنفيذ ANOVA التي كتبها MeV3.1 (72). P حسبت -values ​​استنادا 1000 التباديل. تم تنفيذ المجموعات الهرمية باستخدام رتبة ارتباط سبيرمان مع متوسط ​​ربط المجموعات التي MeV3.1. تم تنفيذ PCA باستخدام GeneSpring GX7.3 (اجيلنت). SAM (38) وRankProd (39 تم تنفيذها) باستخدام Bioconductor (73) الحزم Siggene وRankProd، على التوالي. لعبر التحقق من صحة في SAM وRankProd، على التوالي، تم تنفيذ 100 و 1000 التباديل. كنا ثلاثة الاختبارات الإحصائية المختلفة لتحديد متحفظ الجينات الأكثر بقوة وأعرب تفاضلي. وقد تم تطبيق العديد من طرق اختيار الميزة لتحديد الجينات وأعرب تفاضلي في البيانات ميكروأري (74). الجينات التي تم تحديدها عادة من قبل ANOVA، SAM وRankProd من المرجح أن يتم التعبير عنها بشكل مختلف، نظرا لقوة النسبية لهذه الطرق الإحصائية (35، 38، 39، 74). تم إجراء وظيفي الشرح للمجموعات التي كتبها DAVID (42) مع تصنيف التشدد المتوسطة. ويستند خوارزمية التجميع على الفرضية القائلة بأن يجب أن يكون الشروح مماثلة أعضاء جين مماثل. يستخدم الوظيفي الشرح تقسيم اثنين إحصاءات مختلفة لقياس درجة من الجينات المشتركة بين اثنين من الشروح وتصنيف المجموعات مع شروح مماثلة. نقاط المجموعة التخصيب هو المتوسط ​​الهندسي (في - تسجيل نطاق) لأحد أعضاء لP -values ​​في كتلة الشرح المقابلة. وقد استخدم IPA لإيجاد مسارات هامة تتعلق الجينات dysregulated عادة في التوحد مع FMR1-FM والحزب الاتحادي الديمقراطي (15q). قاعدة معارف المسار الإبداع يبني شبكات الجينات بناء على البروتين والجين التفاعلات المعروفة (44). IPA يحدد النتيجة الإحصائية لكل الشبكة وفقا لاحتمال الشبكة التي وردت في قائمة الجينات. يوفر قاعدة المعارف الإبداع المسار مسارات مع وظيفة بيولوجية استنادا إلى الأدبيات العلمية. قيمة الأهمية المرتبطة الوظائف وسبل يقيس مدى احتمال هو أن جينات من ملف مجموعة البيانات تشارك في تلك الوظيفة البيولوجية. وأعرب عن أهمية باعتبارها P -value، والذي يحسب باستخدام اختبار الحق الذيل فيشر الدقيق.

تحليل qRTPCR

وقد استخدم واحد ميكروجرام من مجموع RNA لجعل كدنا] من قبل مرتفع الثالث لأول ستراند التجميعي SuperMix (إينفيتروجن). تم إجراء qRTPCR التي كتبها ABI بريزم 7900 (النظم البيولوجية التطبيقية، فوستر سيتي، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية) باستخدام البلاتين SYBR الأخضر QPCR SuperMix UDG مع ROX (إينفيتروجن). وتألفت الدراجات الحرارية خطوة مبدئية عند 50 درجة مئوية لمدة 2 دقيقة تليها خطوة أخرى في 95 درجة مئوية لمدة 2 دقيقة و 50 دورات من 95 درجة مئوية لمدة 15 ثانية و 60 درجة مئوية لمدة 30 ثانية. تم إجراء qRTPCR لمدة 16 الجينات. يتم عرض الاشعال المستخدمة في هذه الدراسة في المواد التكميلية، جدول S8. TAQMAN التحقيق (Hs00327005_m1، النظم البيولوجية التطبيقية) وذلك لقياس JAKMIP1 التعبير في الخلايا lymphoblastoid. وتم تطبيع البيانات عن طريق كمية هيبوزانتين فسفوريبوزيل 1 (HPRT1). HPRT1 اختير بدلا من بيتا الأكتين، نازعة غليسيرألدهيد-3-فوسفات أو غيرها من الضوابط الداخلية المحتملة لأنه تبين لها أن تكون الأنواع RNA الأكثر استقرارا من خطوط الخلايا lymphoblastoid . هذا يسمح لنا لحساب التغير في كفاءة التحويل من رد فعل عكس النسخ.

تنبيغ shRNAs فيروسات

لبناء ناقلات الارتجاعي معربا عن shRNAs، [أليغنوكليوتيد ترميز الجذعية حلقة shRNAs لFMR1 تم ligated (المواد التكميلية، جدول S8) والسيطرة السلبية في BamHI وEcoRI موقع pSIREN-RetroQ (BD Clontech، ماونتن فيو، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية). و transfected الخلايا PT67 (BD Clontech) لإنتاج الفيروس الارتجاعي. ما مجموعه 6 × 10 6 وكانت المصنفة الخلايا SH-SY5Y في T-75 قارورة في 20 مل من متوسطة جديدة من DMEM (إينفيتروجن) مع 10٪ FBS. بعد 1 يوم، أصيب الخلايا SH-SY5Y مع الفيروسات في وجود 5 ميكروغرام / مل من polybrene. بعد 2 أيام، تم علاج الخلايا SH-SY5Y مع 10 ميكروغرام / مل من بوروميسين (سيغما، سانت لويس، MO، الولايات المتحدة الأمريكية). وقد تم جمع الخلايا التي نجت بعد 4 أسابيع، وكان يستخدم هذه الفئة من السكان من الخلايا لمزيد من التجارب. تم استخراج الحمض النووي الريبي مجموع من الخلايا باستخدام أدوات RNeasy البسيطة مع العلاج الدناز (QIAGEN) وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. قارنا الخلايا SH-SY5Y معربا عن FMR1 shRNA (ن = 4) والخلايا SH-SY5Y معربا عن shRNAs للسيطرة سلبية (ن = 4) لدراسة تأثير تخفيض FMR1 على التعبير عن JAKMIP1 وGPR155.

ترنسفكأيشن من CYFIP1

الإنسان CYFIP1 الترميز المنطقة (الأحماض الأمينية 1-1254) التي حصلت عليها PCR باستخدام IMAGE استنساخ 10625411 (آي تي سي سي، ماناساس، VA، الولايات المتحدة الأمريكية) وsubcloned في EcoRV وليس المواقع الأول من ناقلات البلازميد بيريس-neo3 (BD Clontech). وأكد تسلسل للبناء من تسلسل الحمض النووي الآلي.
ما مجموعه 6 × 10 6 وكانت المصنفة الخلايا SH-SY5Y في T-75 قارورة في 20 مل من متوسطة جديدة من DMEM (إينفيتروجن) مع 10٪ FBS. بعد 1 يوم، و transfected الخلايا SH-SY5Y مع 120 ميكرولتر من lipofectamine 2000 (إينفيتروجن) المخفف مع 3 مل من OptiMEM (إينفيتروجن) و 24 ميكروغرام من البلازميد (بيريس-CYFIP1 أو بيريس) المخفف مع 3 مل من OptiMEM (إينفيتروجن). بعد 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة، وكانوا جنبا إلى جنب والمحتضنة لمدة 20 دقيقة. وأضاف خليط التفاعل مع 16 مل من DMEM مع 10٪ FBS. تم استبدال مستنبت الخلية عن طريق هذا الحل. بعد 2 أيام، تم علاج الخلايا SH-SY5Y مع 500 ميكروغرام / مل من G418 (إينفيتروجن). وقد تم جمع الخلايا التي نجت بعد 3 أسابيع، وكان يستخدم هذه الفئة من السكان من الخلايا لمزيد من التجارب. تم استخراج الحمض النووي الريبي مجموع من الخلايا باستخدام أدوات RNeasy البسيطة مع العلاج الدناز (QIAGEN) وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. قارنا الخلايا SH-SY5Y ستابلي مع ناقلات التعبير عن CYFIP1 (ن = 7) والخلايا SH-SY5Y مع transfected متجه التعبير فارغة (ن = 8) لدراسة تأثير تحريض CYFIP1 على التعبير عن JAKMIP1 وGPR155 . تم استخراج البروتين أيضا باستخدام Cellytic M (سيغما) مع مثبطات بروتين (سيغما) وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة.

الحيوانات وجمع الأنسجة

WT وFmr1 أثيرت KO الفئران في منشأة الحيوان جامعة إيموري ومعالجتها وفقا للInstitue الوطني للوائح الصحية وتحت موافقة لجنة رعاية الحيوان المؤسسية واستخدم جامعة إيموري. WT وFmr1 أنتجت KO تتزاحم عن طريق تربية الإناث متخالف مع FMR1 الذكور KO في خلفية مسانج من C57BL / 6. وأكد التركيب الوراثي من كل حيوان عن طريق PCR. لجمع الأنسجة، تم تشريح القشور وتم عزل بروتين باستخدام Cellytic M (سيغما) مع مثبطات بروتين (سيغما) وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة.

تحليل طخة مناعية

البروتينات المستخرجة من الخلايا SH-SY5Y أو القشور من Fmr1 تعرضوا WT والفئران KO إلى SDS-PAGE باستخدام NuPAGE NOVEX 4-20٪ مكرر تريس جل واجتماعات الأطراف العازلة (إينفيتروجن) وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. بعد الكهربائي، تم electroblotted المواد الهلامية على الأغشية PVDF (ميليبور، بيدفورد، MA، الولايات المتحدة الأمريكية). بعد electroblotting، سدت الأغشية في SuperBlock عازلة تمنع (بيرس التكنولوجيا الحيوية، روكفورد، IL، الولايات المتحدة الأمريكية). جرى التحقيق الأغشية في عرقلة الحل في 4 درجات مئوية خلال الليل مع الأجسام المضادة التالية: FMRP (Chemicon، تيميكولا، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية)، CYFIP1 (ريف، تيميكولا، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية)، JAKMIP1 (41) أو GAPDH. وجرفت المياه الأغشية 3 × في برنامج تلفزيوني تستكمل مع 0.05٪ توين 20 (PBS-T) وحضنت مع الأجسام المضادة الثانوية الفجل البيروكسيداز مترافق المناسب في عرقلة الحل لمدة 1 ساعة في درجة حرارة الغرفة. الأغشية تم غسلها مرة أخرى 3 × في برنامج تلفزيوني-T وتطورت مع SuperSignal الغربية بيكو Chemiluminescent (بيرس التكنولوجيا الحيوية). تم تجريد الأغشية التي كتبها استعادة البقعة الغربية تجريد العازلة (بيرس التكنولوجيا الحيوية) وتستخدم لأجسام مختلفة.