http://journals.plos.org/plosone/art...l.pone.0007998
خلفية
Sarcopenia هو مشكلة صحية عامة رئيسية في الدول الصناعية، مما يضع عبئا متزايدا على أنظمة الرعاية الصحية العامة بسبب فقدان كتلة العضلات والهيكل العظمي والقوة التي تميز هذه المودة يزيد من التبعية وخطر الإصابة الناجمة عن السقوط المفاجئ في كبار السن. وإن كانت ممارسة الرياضة والحد من السعرات الحرارية تحسن الانخفاض المرتبط sarcopenia من العروض العضلات، والعلاج الدوائي أكثر ملاءمة وركزت لا يزال غير موجود.
منهجية / النتائج الرئيسية
من أجل تقييم مثل هذا العلاج ممكن، ونحن التحقيق في الآثار المترتبة على التعليم العام الأساسي 761، خلاصة الجنكة بيلوبا المستخدمة في تعتمد على سن الاضطرابات العصبية المزمنة، على وظيفة عضلة النعلية في الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين. التعليم العام الأساسي 761 يسببها مكاسب في كتلة العضلات التي كان مرتبطا مع تحسين الأداء العضلي وفقا لتقييم الاختبارات البيوكيميائية والكهربية. ويظهر تحليل متطورة للحمض النووي أن هذه التعديلات تكون مصحوبة إعادة برمجة النسخي الجينات المتعلقة تكون العضل خلال TGFβ إشارات الطريق، وإنتاج الطاقة عن طريق الأحماض الدهنية وأكسدة الجلوكوز. التعليم العام الأساسي 761 استعادة نمط التعبير الجيني أكثر الأحداث عن طريق تجديد العضلات الذين تتراوح أعمارهم بين وعكس التحول الأيضي المتعلقة بالعمر من الدهون إلى جلوكوز الاستفادة منها.
الاستنتاجات / أهمية
وبالتالي، قد التعليم العام الأساسي 761 تمثل معالجة جديدة لsarcopenia على حد سواء أكثر سهولة وأقل تعقيدا من ممارسة الرياضة والحد من السعرات الحرارية.
الأرقام
الاقتباس: Bidon C، Lachuer J، Molgó J، Wierinckx A، دي لا بورت S، Pignol B، وآخرون. (2009) ومستخلص
الجنكة بيلوبا التعليم العام الأساسي 761 ينشط في الملف الأحداث في العضلات الهيكلية من الجرذان Sarcopenic التي الترانسكربتي إعادة برمجة. بلوس وان 4 (11): e7998. دوى: 10.1371 / journal.pone.0007998
المحرر: خوسيه فينا، جامعة فالنسيا، اسبانيا
وردت: 1 يوليو 2009؛
المقبولة: 21 أكتوبر 2009؛
تاريخ النشر: 24 نوفمبر 2009
حقوق النشر: © 2009 Bidon وآخرون. هذا هو مقال الوصول المفتوح زعت بموجب شروط رخصة المشاع الإبداعي العزو، الذي يسمح بالاستخدام غير المقيد، والتوزيع، والاستنساخ في أي وسيط، بشرط تقيد المؤلف الأصلي والمصدر.
التمويل: تم تمويل هذا العمل جزئيا IPSEN ("معهد دي برودوي دي SYNTHESE وآخرون دي استخراج الطبيعي")
http://web2.ipsen.com/. كان CB المستفيد من على منحة أطروحة من IPSEN. ويعمل BP وYC التي كتبها IPSEN. وأيد هذا العمل من قبل Beaufour-ايبسن وCNRS كان الممولين أي دور في تصميم الدراسة وجمع البيانات وتحليلها، قرار نشر أو إعداد المخطوطة.
تضارب المصالح: قد أعلن المؤلفان أن لا المصالح المتنافسة موجودة.
مقدمة
Sarcopenia، وهو مصطلح ابتدعه روزنبرغ
[1]، هو سمة رئيسية من انخفاض المرتبطة بالعمر في أداء العصبية والعضلية ويتميز فقدان كتلة العضلات والهيكل العظمي، فضلا عن قوة
[2]. هذه التعديلات الشكلية والوظيفية تنتج عن الأحداث الجوهرية، مثل التغيرات في نوع الألياف العضلية تكوينها، وضعف الميتوكوندريا والضرر التأكسدي، ومن العوامل الخارجية بما في ذلك انخفاض النشاط البدني والإفراط و / أو الحصة الغذائية غير المتوازنة
[3]. ممارسة الرياضة والحد من السعرات الحرارية (CR)، والمعروف أن تبطئ ضعف في أداء العضلات الذين تتراوح أعمارهم بين
[4]، من الصعب إدارة في حين أن العلاج الدوائي أكثر تحديدا لsarcopenia التي من شأنها أن تكون أكثر مناسبة لكبار السن لا يزال غير موجود.
تلف العضلات والضعف المرتبطة sarcopenia قد يستفيدون من الأدوية التي تستهدف الأمراض العصبية، منذ سهم sarcopenia العديد من الميزات مع مختلف الاضطرابات العصبية والعضلية المرتبطة بالعمر
[5]. في هذا المنظور، واحدة من هذه العقاقير هو التعليم العام الأساسي 761، خلاصة
الجنكة بيلوبا، وهو ما ثبت ليكون علاجا فعالا في تعتمد على سن اضطرابات مزمنة عصبية مثل، على سبيل المثال، ومرض الزهايمر
[6]، [7]. ولذلك، فإننا تعامل مع التعليم العام الأساسي 761 الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين sarcopenic من أجل تقييم ما إذا كان هذا المركب، وبالمثل في ممارسة وCR، ويحسن وظائف العضلات ضعاف العمر. وتشير التحاليل البيوكيميائية والكهربية التي التعليم العام الأساسي 761 لديها تأثير وقائي على الهزال العضلي ويحسن عضلة
النعلية قوة مقلص متساوي القياس. وترتبط هذه الآثار، كما هو مبين من خلال تحليل متطورة للحمض النووي مع استعادة النشاط أكثر النسخي حدث في الجينات ذات الصلة لعمليات الإنتاج تجديد والطاقة في
النعلية من الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين. هذه هي المرة الأولى، على حد علمنا، أن التعليم العام الأساسي 761 وقد تبين أن تعود بالنفع على العضلات المسنين في الثدييات مما يشير إلى أنها قد تمثل علاجا جديدة لsarcopenia.
في بداية التجربة، تم فصل الفئران العمر شهرا و22 بشكل عشوائي في مجموعتين وتم ترجيح في فترات منتظمة. المجموعة الأولى، مراقبة المسنين (AC)، لم يحصل أي علاج، في حين أن المجموعة الثانية، الذين تتراوح أعمارهم بين المعالجة (AT)، تلقى التعليم العام الأساسي 761 في مياه الشرب. بعد 5 أسابيع من هذا النظام، وارتفع متوسط وزن الجسم من مجموعة AC بنسبة 2.2٪ في حين فقدت الفئران في المجموعة AT 4٪ (P = 0.02) من وزن الجسم الأولي، مشيرا إلى أن التعليم العام الأساسي 761 يصد زيادة الوزن بشكل طبيعي تحدث في فئران التجارب تتراوح أعمارهم بين
(الجدول 1).
تحميل:
الجدول 1. وزن الجسم والعضلات
النعلية.
دوى: 10.1371 / journal.pone.0007998.t001
من أجل التأكد مما إذا ارتبط هذا تأثير التعليم العام الأساسي 761 مع وجود اختلافات في العضلات الميزات التشريحية وظيفية، انتقلنا إلى إجراء المزيد من التحليلات وركزت دراستنا على عضلة
النعلية، بطيئة العضلات نشل (النوع الأول الألياف) مع الأيض المؤكسدة السائد. الموت الرحيم كانت الحيوانات والعضلات
النعلية تشريح والمرجحة.
والنعلية تعني زيادة في وزن بنسبة 6.5٪ في AT مقارنة مع مجموعة AC من الفئران. وعلاوة على ذلك، تم زيادة نسبة الوزن النعلية ذكرت أن إجمالي وزن الجسم بنسبة 13٪
(الجدول 1).
وتشير هذه النتيجة أن التعليم العام الأساسي 761 يؤثر على الجسم ووزن العضلات عن طريق زيادة الكتلة العضلية، وبالتالي عكس اتجاه الأحداث القيم الانخفاض المرتبط بالعمر من نسبة العضلات الخامس / ق وزن الجسم. من أجل تقييم ما إذا كان مرتبطا هذه الظاهرة أيضا مع وجود اختلافات في مؤشر البيوكيميائية العمليات تلف العضلات المرتبطة بالتقدم في السن، قمنا بتقييم تأثير العلاج التعليم العام الأساسي 761 على تعميم كيناز الكرياتين.
لاحظنا انخفاضا ضرب في كيناز الكرياتين في الدم (CK) مستويات في الفئران AT (371 ± 223 U / L)، مقارنة مع الفئران AC (737 ± 178 U / L). ومن المثير للاهتمام، وكانت قيمة CK التي تم الحصول عليها في الفئران AT مماثلة ارتباطا وثيقا القيمة التي لوحظت في مجموعة من الشباب (Y) الفئران العمر شهرا و4 (370 ± 53 U / L). منذ مستويات مصل CK بمثابة علامة الطرفية للتلف العضلات، هذه النتائج تشير إلى أن التعليم العام الأساسي 761 له تأثير وقائي ضد الأضرار التي تصيب العضلات الشيخوخة. من أجل التأكد مما إذا كان مرتبطا هذا التأثير الوقائي أيضا مع زيادة الأداء العضلي، قارنا قوة مقلص من العضلات النعلية في ظل ظروف مختلفة في AC و AT مجموعات من الفئران.
التعليم العام الأساسي 761 يعزز قوة مقلص متساوي القياس
قمنا بقياس القوة القصوى التي وضعتها العضلات
النعلية من AC و AT الفئران، سواء أثناء نشل متساوي القياس متقطعة واحد أو أثناء تقلصات كزازي، التي حركها تنشيط العضلات مباشرة ومن خلال تحفيز العصب
(الشكل 1، د). نشل والكزاز قوة متساوي القياس التي وضعتها الفرد في العضلات، التي حركها تنشيط العضلات مباشرة، ومقارنة القيم المتوسطة لعضلات AC بمعادلتها لوزن العضلات
(الشكل 1، ه، و). وكانت نسبة متوسط بين AT مقابل AC 2.1 لقوة العضلات نشل التي حركها التحفيز المباشر
(الشكل 1E) و1.46 للتقلصات كزازي في 40 هرتز
(الشكل 1F)، مما يشير إلى تحسن من قوة العضلات. لتقلصات-أثار العصبية، وتم الحصول على قيم متشابهة مع نسبة متوسط 2.3 للنشل واحد
(الشكل 1E) و 1.4 لتقلص كزازي في 40 هرتز
(الشكل 1F).
تحميل:
الشكل 1. دراسات انقباض.
نماذج تمثيلية من قوة مقلص متساوي القياس في معزولة العضلات النعلية من الضوابط الذين تتراوح أعمارهم بين (أ، ج) الفئران، والتعليم العام الأساسي 761 المعالجة (ب، د). في أ و ب التسجيلات التي تم الحصول عليها عن طريق تحفيز العضلات المباشر وجيم ودال عن طريق تحفيز العصب. في كل تسجيل (أ إلى د) وتظهر تشنجات أثار (0.2 التحفيز هرتز) وتقلصات كزازي (40 هرتز، والتحفيز 600 مللي ثانية). يتم التعبير عن القوة في نيوتن (N). تمثل رسوم بيانية القيم يعني ± SEM من قوة (معبرا عنها N / ز) للنشل واحد (ه) و لتحفيز كزازي (و). يعني قيم النسبة بين المعالجة ويشار إلى التحكم في صناديق كل منها مع عدد من القيم (ن) المستخدمة لإجراء العمليات الحسابية. * تختلف كثيرا عن الضوابط
ف <0.05.
دوى: 10.1371 / journal.pone.0007998.g001
وعلاوة على ذلك، تحليلات ذروة العلاقة قوة التردد خلال التحفيز كزازي المباشر (40-100 هرتز) كشفت أن AT
النعلية العضلات تنمو أعلى بكثير قوة الذروة في 40 و 60 هرتز بالمقارنة مع عضلات AC
(الشكل 2A). أيضا، تم الكشف عن تغيير كبير على الكزاز قوة ذروة أثار العصبية في 40 هرتز في العضلات AT بالمقارنة مع الضوابط
(الشكل 2B). أخذت معا، فإن هذه النتائج تشير إلى أن قوة متساوي القياس التي وضعتها عضلة
النعلية من التعليم العام الأساسي 761 معاملة تم تحسين فيما يتعلق ضوابط نفس السن الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين، مع تعزيز تعتمد على وتيرة التحفيز منذ اكتشاف أي تحسن ملموس على ترددات التحفيز أعلى درس.
تحميل:
الشكل 2. علاقة قوة التردد.
قوة الذروة خلال ردود كزازي متساوي القياس في العضلات النعلية معزولة من الضوابط الذين تتراوح أعمارهم بين (○) والتعليم العام الأساسي 761 معاملة الفئران (•) التي تم الحصول عليها عن طريق تحفيز العضلات المباشر (A) وتحفيز العصب (B) على ترددات أشارت (الإحداثي السيني) خلال القطارات من 600 مللي ثانية مدتها. تم استخدام فاصل زمني من 30 ثانية بين القطارات. كل دائرة تمثل يعني ± SEM (ن = 3). * هامة تختلف عن الضوابط ف <0.05.
دوى: 10.1371 / journal.pone.0007998.g002
بعد ذلك، من أجل اكتساب المعرفة حول الآليات الجزيئية الكامنة وراء هذه التعديلات التشريحية، والكيمياء الحيوية والفسيولوجية التي تسببها التعليم العام الأساسي 761، قمنا بتحليل التعبير الجيني العالمي في عضلة
النعلية الفئران عن طريق تحليل متطورة للحمض النووي. النتائج التي حصل عليها بالفعل نقطة إلى بعض الظواهر دقيقة على أساس تجديد أو تحسين إنتاج الطاقة من أجل تحسين وظائف العضلات التي تسببها التعليم العام الأساسي 761. ولذلك، فإن تحليل DNA التجارب ميكروأري التحقيق الأحداث الجزيئية المرتبطة بالشيخوخة ومع التعليم العام الأساسي 761 معاملة في الجينات العالمي وتركز النسخ على الجينات المتورطين في هذه العمليات على عدد محدود من الفئران لكل مجموعة.
التعرف على تحليل متطورة للحمض النووي ما مجموعه 1518 الجينات، من أصل 9906، التضمين إما عن طريق الشيخوخة أو التعليم العام الأساسي 761 أو كليهما. الشيخوخة أثرت على التعبير عن 1015 الجينات، 2/3 منهم، أي ما مجموعه 626، تم تنظيم أسفل، في حين كانت 389 المتبقية حتى التنظيم، وفقا لتقييم بمقارنة sarcopenic من العمر (AC) مقابل مجموعة الشباب (Y ) من الفئران
(الجدول S1). التعليم العام الأساسي 761 أثرت على التعبير من 618 الجينات بنسب تعادل تقريبا. تم تنظيم 333 الجينات يصل وكانت 284 الجينات ينظم أسفل عند مقارنة المعالجة (AT) مقابل مجموعة AC من الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين
(الجدول S2). بين الجينات عن طريق التضمين التعليم العام الأساسي 761، تم تعديل مجموعه 115 أيضا عن الشيخوخة
(الشكل 3). تم تحميل بيانات متطورة للحمض النووي في قاعدة البيانات ArrayExpress (ArrayExpress الانضمام: E-MEXP-1937، تاريخ الإصدار: 2009-06-30).
تحميل:
الرقم تحليل البيانات 3. ميكروأري والتكتلات.
المقارنة بين ملامح التعبير الجيني للعضلة
النعلية في الفئران الشابة (Y) والجرذان تحكم الذين تتراوح أعمارهم بين (AC) والفئران الذين تتراوح أعمارهم بين المعالجة (AT). وتتركز الجينات باستخدام ارتباط بيرسون. يتم تمثيل الجينات ينظم أسفل باللون الأخضر، الجينات تصل التنظيم، باللون الأحمر، وأفاد عدد من الجينات بين قوسين.
دوى: 10.1371 / journal.pone.0007998.g003
وكان التحقيق في البيانات ميكروأري باستخدام مزيد من تحليل المجموعات الهرمية على أساس التشابه العام للاختلافات في أنماط الجينات التعبير. أجري تحليل التقليب على ثلاث مجموعات مختلفة من الفئران تماما. حوالي 2/3 من الجينات عن طريق التضمين التعليم العام الأساسي 761 أو الشيخوخة اظهرت ان اكثر من 30٪ من التباين التعبير في كل مجموعة من المجموعات 3. تم تصنيف هذه الجينات على أنها غير قابلة للاستغلال (NE) ولم تستخدم لتحليل التكتل (انظر
طرق) (الشكل 3). باستخدام هذا النهج الصارم جدا، وقد تم تحديد أربع مجموعات مختلفة (A إلى D) عن طريق تحليل ارتباط بيرسون، والمقابلة لأنواع مختلفة من السلوك التعبير الجيني ردا على الشيخوخة و / أو العلاج
(الشكل 3). المجموعة الأولى وتجمع الجينات التي يتم التعبير عنها بشكل مختلف خلال الشيخوخة و، ثم عادت باتجاه مستوى التعبير الشباب عن طريق التعليم العام الأساسي 761 (المجموعة A،
الجدول S3). المجموعة الثانية تحتوي على الجينات التي تعرض لها تأثير المضافة الشيخوخة والتعليم العام الأساسي 761 على التعبير عنها، وهذا هو الجينات أسفل تنظيم أو ما يصل التنظيم أثناء الشيخوخة، والذي كان إلى مزيد من الانخفاض أو زيادة، على التوالي، من خلال التعليم العام الأساسي 761 (المجموعة B والتعبير
الجدول S4). على مجموعتين المتبقية تجميع الجينات التي تم تعديلها من قبل العلاج ولكن ليس عن طريق الشيخوخة (المجموعة C والتعبير
الجدول S5)، والجينات عن طريق التضمين الشيخوخة ولكن ليس عن طريق المعالجة (المجموعة D،
الجدول S6). منذ كنا مهتمين تأثير التعليم العام الأساسي 761 على الشيخوخة، وركزنا في تحليلنا على مجموعة A و B، في حين لم يتم التحقيق في مجموعات C و D أيضا.
وبالتالي، وفقا لنتائج التي تم الحصول عليها عن طريق تجميع التحليل، التعليم العام الأساسي 761 تعديل تعبيرا عن 30٪ (115 من 378) من الجينات تتأثر الشيخوخة. هذه النتيجة تؤكد تأثير مستخلص
الجنكة بيلوبا على الشيخوخة منذ هذه الجينات تمثل ما يقرب من 60٪ (115 من 198) من الجينات التي ينظمها التعليم العام الأساسي 761.
من أجل التحقق من صحة النتائج ميكروأري الحمض النووي قبل مزيد من التحليل، قمنا بتحليل مستويات التعبير م الحمض النووي الريبي 13 جينات منتقاة وجود مستويات مختلفة من التعبير في الوقت الحقيقي الكمية RT-PCR (QPCR) في عضلة
النعلية، بما فيها تلك المستخدمة ل ميكروأري.
المقارنة بين نمط التعبير في ثلاث مجموعات مختلفة من الفئران بين ميكروأري الحمض النووي وتحليل QPCR أكد أن جميع الجينات التي تظهر الاختلافات في نمط التعبير عنها في التحليل transcriptomic ويظهر أيضا اختلافات ما يصاحب ذلك من خلال تحليل QPCR
(الشكل 4) . وعلاوة على ذلك، من بين هذه الجينات
Acvr1، AdipoQ، بامبي، Col5A، FASN، الفريق الجراحي الميداني وGmfg، وكان نمط مماثل من التباين من قبل ميكروأري تحليل الحمض النووي وQPCR سواء عند مقارنة الشباب مع المجموعة الذين تتراوح أعمارهم بين الفئران وكذلك عند مقارنة العمر مع المجموعة الذين تتراوح أعمارهم بين المعالجة من الفئران. بين الجينات المتبقية،
Cd36، ID1 وUcp3، عرض نمط مماثل عندما تقارن بين الشباب مع المجموعة الذين تتراوح أعمارهم بين الفئران
وAreg، ID3
وTGF-β، عند المقارنة بين المسنين مع مجموعة الذين تتراوح أعمارهم بين المعالجة من الفئران
(الشكل 4 ). لذلك، تم تأكيد أغلبية 20 من أصل 26 (77٪) من المقارنة تتم مع 3 مجموعات من الفئران لهذه الجينات 13 بواسطة QPCR والتأكد من صحتها لمزيد من التحليل للبيانات متطورة للحمض النووي.
تحميل:
الرقم 4. التمثيل البياني للتغيرات التعبير الجيني.
مقارنة بين الاختلافات في التعبير الجيني في مجموعات مختلفة من الفئران وفقا إما لتحليل الحمض النووي ميكروأري (خطوط زرقاء) أو QPCR (الخطوط الحمراء). يتم توحيد قيم (مراقبة الذين تتراوح أعمارهم بين) فريق AC إلى 1 لكل الجينات.
دوى: 10.1371 / journal.pone.0007998.g004
نحن تصنيف جميع الجينات التي تنتمي إلى مجموعات A و B وفقا لوظائفها البيولوجية، وذلك باستخدام الإبداع برمجيات تحليل المسار وقاعدة البيانات الأنطولوجيا الجينات. والأكثر أهمية من هذه الوظائف، وفقا لعدد من الجينات المعدلة من جانب كل من الشيخوخة والتعليم العام الأساسي 761 معاملة، ترتبط دورة الخلية، موت الخلايا والنمو والانتشار، فضلا عن التمثيل الغذائي
(الجدول 2). بين الجينات الأكثر أهمية، هناك انقسام الخلية البروتين مراقبة 42
(Cdc42) وتحويل β2 عامل النمو
(Tgfb2)، والتي هي العوامل التي تتدخل في كل مكان أيضا في تطوير وتجديد الأنسجة الهيكل العظمي، والجهاز العصبي والضام. وعلاوة على ذلك، كان مرتبطا معاملة التعليم العام الأساسي 761 أيضا مع التنظيم يصل ما بين 50 الى 70٪ من الجينات المتورطة تحديدا في تنمية العضلات والهيكل العظمي مثل فوليستاتين
(الفريق الجراحي الميداني)، فوليستاتين البروتين ذات الصلة
(Fstl1)، BMP وactivin بغشاء المانع
(بامبي )، α2-غلوبولين كبروي
(A2M)، Activin نوع مستقبلات I
(Acvr1)، الميوسين الجنينية السلسلة الثقيلة
(Myh3) وRyanodine مستقبلات 3
(Ryr3). منذ العديد من هذه الجينات تشارك أيضا في إشارات الطريق TGFβ، الذي يلعب دور المعنيين في تكاثر الخلايا الأقمار الصناعية العضلات والتمايز
[8]، وهذه النتائج تشير إلى أن التعليم العام الأساسي 761 يعدل التعبير الجيني بطريقة تتفق مع إعادة تشكيل sarcopenic العضلات عن طريق تعديل لتكون العضل
(الشكل 5).
تحميل:
الرقم 5. تمثيل تخطيطي للتفاعلات بين الجينات التي ينظمها التعليم العام الأساسي 761 المرتبطة تكون العضل / تجديد في عضلة
النعلية من الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين.
يتم تضمين الجينات تنظم في الإطارات.
يشير يصل تنظيم التعبير الجيني عن طريق التعليم العام الأساسي 761.
يشير أسفل التنظيم في التعبير الجيني عن طريق التعليم العام الأساسي 761. → = التنشيط. -
= تثبيط. Activins وأفضل الممارسات الإدارية يمكن تحويلها إلى مسارات بديلة من خلال التفاعل مع بروتينات قابلة للذوبان ومحددة غشاء ملزمة Activin، myostatin وإشارة أفضل الممارسات الإدارية عن طريق نوع II activin مستقبلات. تم حظر وصول هؤلاء الاعضاء الفصيلة-TGF β2 لمن النوع الثاني مستقبلات الخلية من البروتينات ملزمة (follistatine، Fstl1 وα2-macroglubulin) وpseudoreceptors بغشاء (BAMBI لactivin الإشارات).
دوى: 10.1371 / journal.pone.0007998.g005
تحميل:
الجدول 2. قائمة من الجينات التضمين سواء أثناء الشيخوخة وبعد التعليم العام الأساسي المعاملة مصنفة وفقا لقاعدة بيانات الجينات علم الوجود.
دوى: 10.1371 / journal.pone.0007998.t002
ويرتبط تأثير الآخر الأكثر أهمية من التعليم العام الأساسي 761 إلى إعادة برمجة النسخي الجينات المتورطة في عمليات الأيض في الميتوكوندريا. وهي التعليم العام الأساسي 761 يسببها أسفل تنظيم محاضر لسينسيز الأحماض الدهنية
(FASN)، المسؤولة عن تركيب الأحماض الدهنية، وأسيتيل التميم A acyltransferase2
(Acaa2)، والمشاركة في الكولسترول والبروتين الدهني التوليف والأحماض الدهنية استطالة، وهيكسوكيناز 1
(Hk1) وفسفوفروكتوكيناز 1
(Pfk1)، وكلاهما متورط في عملية ايض الجلوكوز. علاج يسببها وكذلك تنظيم يصل من النصوص لالبيروفات كيناز نازعة 4
(Pdk4) وترانسلوكاز الأحماض الدهنية
(Cd36) تشارك في التمثيل الغذائي للدهون والنقل، على التوالي، والبروتينات فك ربط 1 و 3
(Ucp1 وUcp3) وذات صلة لإنتاج الطاقة
(الجدول 2).
هذه النتائج تتفق مع الملاحظة السابقة أن التعليم العام الأساسي 761 يعدل وظائف الميتوكوندريا في العديد من الأنسجة
[9] وتشير إلى أن التعليم العام الأساسي 761 تنسق التعبير عن الجينات التي تعزز إنتاج الطاقة الميتوكوندريا من خلال زيادة أكسدة الدهون بيتا وتمنع أكسدة الجلوكوز
(الشكل 6 ).
تحميل:
الرقم 6. تمثيل تخطيطي للتفاعلات بين الجينات التي ينظمها التعليم العام الأساسي 761 المرتبطة مع تنظيم استقلاب الطاقة في الميتوكوندريا في عضلة
النعلية من الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين.
يتم تضمين الجينات تنظم في الإطارات.
يشير يصل تنظيم التعبير الجيني عن طريق التعليم العام الأساسي 761.
يشير أسفل التنظيم في التعبير الجيني عن طريق التعليم العام الأساسي 761. → = التنشيط. ----
= تثبيط. تؤخذ FA (الأحماض الدهنية الحرة) من قبل الأحماض الدهنية البروتين الناقل Cd36 والمفعلين إلى الدهنية أسيل-أنزيم (FA-لجنة الزراعة). سوف FA-لجنة الزراعة أكسدة تزيد من نسب أسيتيل التميم / لجنة الزراعة وNADH / NAD +، والتي تحول دون البيروفات dehydogenase (PDH) مجمع من خلال تفعيل كيناز البيروفات نازعة 4 (Pdk4). زيادة FA منتجات الأكسدة عن سترات وينبغي مواصلة تمنع فسفوفروكتوكيناز (PFK) وهيكسوكيناز. ومن شأن هذه التغييرات إبطاء أكسدة الجلوكوز والبيروفات والحفاظ على المخزون الجليكوجين. في الوقت نفسه، سينسيز الأحماض الدهنية (FASN) والميتوكوندريا 3-oxoacyl-الإنزيم A الأسيتوأستيل (Acaa2) حرمانهم مما أدى إلى تثبيط تخليق الدهون والاستخدام التفضيلي من هذه الدهون لتخليق ATP.
دوى: 10.1371 / journal.pone.0007998.g006
Sarcopenia هو مشكلة صحية عامة رئيسية في الدول الصناعية، مما يضع عبئا متزايدا على أنظمة الرعاية الصحية العامة. الفقدان التدريجي من كتلة العضلات المرتبطة مع التقدم في السن التي تتميز تباطؤ الحركة وانخفاض تدريجي في قوة العضلات، وزيادة الاعتماد وخطر الإصابة من السقوط المفاجئ في كبار السن. على الرغم من أن الحد من السعرات الحرارية وممارسة الرياضة البدنية وقد ثبت أن تكون علاجات فعالة لsarcopenia، تأثيرها يقتصر على إبطاء فقدان التدريجي للكتلة العضلات وظائف وتنفيذها يمثل مشكلة في كبار السن. ولذلك، يبدو أن العلاج بالعقاقير لتكون أكثر ملاءمة لsarcopenia، وإن كان، حتى الآن، تم الإبلاغ عن أي علاج دوائي وبصرف النظر عن اقتراح بأن المكونات الغذائية-ليسين الغنية قد يساعد كبار السن على الحفاظ على كتلة العضلات
[10]. ومع ذلك، منذ عملية الشيخوخة تتجلى مع ميزات مشابهة في الأنسجة المختلفة، فقد قيل أن الأدوية للأمراض الاعصاب المرتبطة بالعمر قد تكون مفيدة أيضا لsarcopenia
[5]. في هذا السياق، التعليم العام الأساسي 761 (IPSEN)، مستخرج من
الجنكه بيلوبا، وقد تبين لتمديد العمر الافتراضي
للايليجانس انواع معينة [11] وتعزيز التعلم وطول العمر في الفئران
[12]. أيضا،
في والمجراة في التجارب
المختبرية أثبتت فعالية التعليم العام الأساسي 761 في حماية ضد عمليات المرتبطة بالعمر مثل زيادة الاكسدة والدماغ ضعف الميتوكوندريا
[9] والتي تعتمد على سن الاضطرابات العصبية المزمنة
[6]، [7]. هنا، علينا أن نبرهن على التعليم العام الأساسي 761 يحسن أداء العضلات، وفقا لتقييم الدراسات الكهربية، وبشكل ملحوظ جدا، يعيد "الحدث" لمحة في عضلة
النعلية من الفئران القديمة عن طريق تحوير التعبير النسخي الجينات المتورطة في التنمية / تجديد وإنتاج الطاقة مسارات.
فقد ركزنا دراستنا وتحليل متطورة للحمض النووي على
النعلية منذ هذه العضلات هي، في الفئران والبشر، تقريبا تتألف متجانس من قبل بطيء نوع نشل الأول من الألياف. وهكذا، فإن التغيرات العمرية ذات الصلة هي أسهل لتحليل لأنها لا تنتج عن نوع من الألياف التعديلات، على سبيل المثال، في
الساق و / أو غيرها من عضلات نوع الألياف المختلطة.
وكشف تحليل transcriptomic أن التعليم العام الأساسي 761 يصل ينظم
TGFβ والعديد من الجينات الأخرى مثل
الفريق الجراحي الميداني، Fstl1، بامبي وAcvr1 التي تشارك للتعديل من TGFβ إشارات الطريق أثناء تكون العضل.
Tgfb2 تساهم، مع عوامل أخرى من TGF فائقة الأسرة مثل هذه كما BMP، Activin وMyostatin، لتكون العضل
[13] (الشكل 5) ويمكن أن تشارك في عملية تجديد التي تنال من الشيخوخة، مما أدى إلى انتعاش الهيكلي والوظيفي غير مكتملة بعد إصابات العضلات لدى المسنين
[14]. ومن الجدير بالذكر أن TGF-β2 يلعب دورا السياقية في تكون العضل، لأنه يمنع تكاثر وتمايز، ولكن في الوقت نفسه، ويشجع على اندماج الخلايا الأقمار الصناعية اعتمادا على وجود أو عدم وجود عوامل أخرى
[15].
FST، واحدة من الجينات تنظم يصل عن طريق التعليم العام الأساسي 761 وما يرتبط بها إلى مسار TGFβ الإشارة، ويعمل كمنظم الإيجابي للتمايز العضلات
[16]، منذ ذلك الحين، ملزمة لmyostatin، ويمنع تثبيط الناجم عن myostatin الانتشار و التمايز
[17]. يزيد
الفريق الجراحي الميداني التعبير مع التقدم في السن كآلية وقائية ردا على ارتفاع مواز من myostatin، وإن كان هذا التأثير التعويضي غير فعالة في منع sarcopenia
[18]. وفقا لذلك، تظهر البيانات المتوفرة لدينا زيادة هامة (3 أضعاف) في التعبير عن
الفريق الجراحي الميداني في الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين. ومع ذلك، بعد التعليم العام الأساسي 761 وعزز الإفراط في التعبير عن هذه النسخة مزيدا من 2 أضعاف (انظر العنقودية التقدم). وعلاوة على ذلك، وفقا لنتائجنا، والبعض الآخر النصوص مثل
بامبي، Fstl1 وA2M، كل مثبطات أفضل الممارسات الإدارية وActivin
[19]، كما يصل ينظم التعليم العام الأساسي 761 ولكن ليس عن طريق الشيخوخة، مما يدل على أن العمل يصاحب ذلك من كل هذه العوامل على مسار TGFβ يتوسط آثار التجدد التعليم العام الأساسي 761.
تحليل transcriptomic يبرز تأثير كبير آخر من التعليم العام الأساسي 761 على النصوص، مثل
FASN، Acaa2، Cd36، Hk1 وPdk4 ترميز للأنزيمات الميتوكوندريا الرئيسية المرتبطة الدهون واستقلاب الجلوكوز وتشارك في كريبس دورة، β2 للأكسدة، نقل الأحماض الدهنية و الاكسدة
(الجدول 2). أثناء الشيخوخة التحول الميتوكوندريا من الدهون إلى جلوكوز كما الركيزة لإنتاج الطاقة، مما يؤدي إلى زيادة تراكم الدهون العضلي
[20]، [21]. التعليم العام الأساسي 761 انخفض التعبير عن
FASN، والمشاركة في FA التوليف،
وAcaa2، المتورطين في الكولسترول وتوليف البروتين الدهني وFA استطالة، وزيادة التعبير عن
Cd36، ونقل FA موجودة في غمد الليف العضلي، وهو ما يعزز دخول FA في الخلايا العضلية
[ 22]. منذ
FASN يزيد الدهون الثلاثية في الدم، ومع
Acaa2، تفضل تراكم الأنسجة الدهنية في العضل، والتنظيم السلبي من هذه الجينات يمكن بدلا من تسهيل أكسدة الدهون الميتوكوندريا
(الشكل 6).
الزيادة أربعة أضعاف لفتا للمحاضر
Ucp3 لوحظ من خلال تحليل بيانات متطورة للحمض النووي مزيد تؤكد تأثير التعليم العام الأساسي 761 في الاستخدام الأمثل FA. UCP3 هو بروتين فك ربط، أعرب تفضيلي في العضلات والهيكل العظمي، الذي الإفراط في التعبير يزيد من نشاط الانزيمات عدة الميتوكوندريا الرئيسية المرتبطة FA أكسدة، ويقلل محتوى الدهون الثلاثية العضلي
[23]. أيضا، UCP3 يخفض احتمال غشاء الميتوكوندريا، لا سيما من خلال الأحماض الدهنية أنيون التصدير من المصفوفة، وبالتالي يقلل أنواع الاكسجين التفاعلية (ROS) ويمنع الضرر الميتوكوندريا
[23]. ومن المثير للاهتمام، وزيادة النشاط UCPs يرتبط مع عمر ممتد في أنواع الطيور التي تعيش منذ فترة طويلة
[24]، [25] وفي الفئران
[26].
وكنتيجة طبيعية لتسهيل FA الأكسدة، والتعليم العام الأساسي 761 أيضا أكسدة الجلوكوز تثبيط في الميتوكوندريا التي كتبها
Hk1 التنظيم إلى أسفل، ويرتبط مع تحلل، والبروتين التنظيمي غلوكوكيناز، مما يعوق HK1،
وPdk4، الذي يحول دون نازعة البيروفات التنظيم حتى معقد
(الشكل 6). مجتمعة تسهم هذه التعديلات على إعادة برمجة "دورة حمض الجلوكوز الدهنية"، الذي المجانية FA تنافس مع الجلوكوز لالأكسدة الميتوكوندريا
[27]، باتجاه زيادة الاستفادة من اتحاد كرة القدم، مما أدى إلى زيادة إنتاج الطاقة والحد من الجيل الميتوكوندريا ROS وتخزين الدهون العضلي
(الشكل 6). وأفادت دراسات أخرى على التعبير الجيني التي تستخدم الحد من السعرات الحرارية (CR) أو التمرينات لمنع sarcopenia أن CR إما تحفيز تحلل، من خلال تنظيم يصل من الإنزيمات مثل هذه مزامرة الجلوكوز 6 فوسفات، وFA التوليف، بسبب الإفراط في التعبير عن
FASN [28] -
[30]، أو، بالاتفاق مع النتائج التي توصلنا إليها، بفعل التحول نحو النسخي بزيادة قدرها FA التمثيل الغذائي والحد من الدهون الحيوي في العضلات
[31]. التمرينات كذلك، على غرار التعليم العام الأساسي 761، ويحسن الميتوكوندريا FA امتصاص والأكسدة، عن طريق تخفيض مخازن الدهون في العضلات
[32]، [33]. وهكذا، التعليم العام الأساسي 761 آثارا مماثلة لCR أو ممارسة التدريب ويمثل خيارا أكثر قابلية للإدارة من أجل الوقاية والعلاج من sarcopenia.
وإلى جانب هذه الآثار الكبرى، التعليم العام الأساسي 761 أثارت أيضا الإفراط في التعبير عن النصوص التي عادة ما تكون موجودة أثناء عمليات تجديد مثل
Myh3 [34] وRyr3. وRyr3، وهو شكل بسيط من ryanodine مستقبلات، وينظم يستريح الحرة تركيز الكالسيوم 2+، وبالتالي قد يفضلون الانكماش المستمر مع زيادة قوة في العضلات والهيكل العظمي
[35].وبالإضافة إلى ذلك، وتنظيم ما يصل من النصوص
لMyh10 وMybph تسهم أيضا في زيادة قوة العضلات.
الزيادة شقين من Tenascin C
(المجلس الوطني الانتقالي) ويعطي مثالا آخر على كيفية التعليم العام الأساسي 761 قد تعدل النصوص التي هي ذات الصلة لقوة العضلات.
المجلس الوطني الانتقالي، في العضلات الكبار، هو جزيء المصفوفة خارج الخلية (ECM) أن يموضع في وتر جنبا إلى جنب مع المكونات الأخرى للECM مثل الكولاجين الأول والثالث، ولعب دورا هاما في انتقال القوة وبنية الأنسجة الصيانة. يشكل الكولاجين 60-85٪ من الوزن الجاف وتر ومعظمها من النوع الأول (~60٪) مرتبة في الألياف مقاومة الشد، وأنواع III (≤10٪)، والرابع (~2٪) [36]،
[37] ، V، VI و[38]. على وجه الخصوص، النوع الأول الكولاجين، تحمل ليفية قوة الشد، بما يسمح للانتقال القوة الناتجة عن العضلات والهيكل العظمي في حركة [39]. ومن المثير للاهتمام، وأنا الكولاجين، V، VI يزداد التعبير بين 50٪ و 100٪ من قبل التعليم العام الأساسي 761. لذلك، هذه المكونات من ECM قد إعادة تنظيم هيكل وتر والمشاركة في تحسين قوة العضلات والاستقرار الجسم، والذي ضعف يمثل السبب الرئيسي للانخفاض في كبار السن.
وأخيرا، يمثل الميتوكوندريا تحسين وظيفة العامل الرئيسي لتعزيز قوة العضلات بعد التعليم العام الأساسي 761 معاملة. الميتوكوندريا تلعب دورا مركزيا في إنتاج الطاقة الخلوية في شكل ATP، ولكن هي أيضا المنظمين الرئيسيين للموت الخلايا المبرمج، الذي يساهم في عمليات الشيخوخة الكامنة sarcopenia. الحد المرتبطة بالعمر في إنتاج ATP هو المسؤول عن انخفاض في قوة مقلص لوحظت خلال الشيخوخة. التعليم العام الأساسي 761 يسهم في تحسين إنتاج ATP وتوفر من خلال تحسين FA النقل والاستفادة منها.
في الختام، قد التعليم العام الأساسي 761 تمثل التدخل العلاجي الرواية، وهبت لها أثر تجديد بوساطة برمجة النسخي أغلبية الجينات المتورطة في الشيخوخة، ومع العديد من المزايا CR وممارسة التمارين الرياضية لمنع sarcopenia في كبار السن. ومن بين هذه المزايا هناك تنفيذ أكثر سهولة وبالتالي الامتثال بشكل أفضل مع العلاج. وعلاوة على ذلك، يتم بوساطة آثار التعليم العام الأساسي 761 سواء عن طريق إعادة التعبير عن الجينات التي مرضي أسفل ينظم من قبل الشيخوخة وتعزيز للتعبير عن الجينات التي هي من الناحية الفسيولوجية يصل ينظم لمواجهة الآثار المترتبة على عملية الشيخوخة. وهذه ميزة أخرى على ممارسة الرياضة وCR الذي يقتصر على إبطاء الشيخوخة تطور العضلات العمل. ومن الجدير بالذكر أيضا أن هذا التأثير قد تكون فريدة من نوعها
لالجنكه بيلوبا استخراج. في الواقع،
الجنكه بيلوبا هو واحد من أقدم أشكال الحياة ويحتوي على العديد من الجزيئات (مثل ginkgolides) التي لم تكن موجودة في الكائنات الحية الأخرى ويصعب للغاية لتجميع. وهكذا، فإن مستخلص طبيعي من مثل هذه المتحجرات الحية، التي شكلتها الانتقاء الطبيعي خلال عدة ملايين من السنين، قد تحتوي على العديد من الجزيئات الفريدة التي هي أقل إرباكا من المنتجات الصناعية وأكثر ملاءمة للتركيب مع النظم البيولوجية [40].
تم تنفيذ جميع الإجراءات الحيوانية تحت التراخيص من "اتجاه قصر الخدمات Vétérinaires دي باريس" من "ولاية دي الشرطة في باريس" واتباعها بدقة المبادئ التوجيهية لعلاج الأخلاقية للحيوانات التي حددها القانون الفرنسي (المرسوم رقم 87-848 بتاريخ 1987/11/19 والمعدلة بالمرسوم رقم 2001-464 بتاريخ 2001/5/29). وقد أجريت الدراسة على فئران ويستار الذكور على مجموعة من الشباب، 4 أشهر من العمر والجرذان (مجموعة الشباب = Y)، ومجموعتين من العمر، 23 شهرا من العمر، الفئران. الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين إما تلقت (مجموعة المعالجة المسنين = AT) أو لم يحصل (الذين تتراوح أعمارهم بين المجموعة الضابطة = AC) التعليم العام الأساسي 761 معاملة.
التعليم العام الأساسي 761 معاملة الجرذان
والجنكه بيلوبا استخراج (التعليم العام الأساسي 761)، التي تقدمها مختبرات IPSEN (فرنسا)، كانت تدار في الماء بجرعة 75 ملغم / كغم من وزن الجسم لمدة شهرين. خلال 60 يوما من التجربة، وتم وزن الحيوانات كل أسبوع، وكان قياس حجم حل الشرب. تمت التضحية المجموعات AC و AT في 23 شهرا من العمر، تم التضحية الفئران الشابة في 4 أشهر.
تحديد المصل كيناز الكرياتين
تم أخذ عينات دم من قلوب الفئران مخدرة، وعلى الفور قبل التضحية. تم تحديد أنشطة CK المصل باستخدام طقم Biomerieux (enzyline CK NAC الأمثل 10).
قياس النعلية انقباض
تم تخدير الفئران مع isoflurane (AErrane®، باكستر SA، يسينيه، بلجيكا) استنشاق قبل الذبح من قبل قسم من الشرايين السباتية.
النعلية أزيلت بعناية العضلات مع أعصابهم المرفقة، التي شنت في حمام مبطنة سيليكون مملوءة بمحلول كريبس-قارع الأجراس perfused باستمرار مع 95٪ O 2 و 5٪ CO 2 في كافة مراحل التجربة. واستمر الحل كريبس-قارع الأجراس في 22 ± 0.5 ° C بدلا من 37 درجة مئوية وذلك لتحسين الظروف التجريبية، لأن عند درجة حرارة 37 ° C لخطر الفشل التوصيل العصبي وزيادة كبيرة. واحدة من النعلية والأوتار ترسو بأمان على حمام المغلفة سيليكون، كان يعلق على وتر الآخر إلى FT03 متساوي القياس قوة محول (غراس الآلات، وست وارويك، الولايات المتحدة الأمريكية).
وقد أثار تشنجات العضلات وتقلصات كزازي إما عن طريق تحفيز العصب المحرك عن طريق لمسرى مكروي الشفط، مع البقول الحالية فوق الأعظمي من 0.15 مللي ثانية مدتها، على ترددات المشار إليها في النص، أو عن طريق التحفيز الكهربائي المباشر. تم تعديل التوتر يستريح لكل إعداد التحقيق مع مرحلة ميكرومتر المحمول (للسماح التعديلات الإضافية لطول العضلات) من أجل الحصول على ردود مقلص القصوى. وتضخمت إشارات من محول متساوي القياس، التي تم جمعها، ورقمية مع المعونة من جهاز كمبيوتر مجهزة التماثلية DT2821 لوحة واجهة رقمية (ترجمة البيانات، مارلبورو، الولايات المتحدة الأمريكية)، كما ذكرت سابقا [41]. أجريت الحصول على البيانات وتحليلها مع برنامج تفضلت التي تقدمها الدكتور جون ديمبستر (جامعة ستراثكلايد، اسكتلندا). يتم التعبير عن البيانات كما يعني ± SEM. تم تقييم الأهمية الإحصائية للفروق بين الضوابط والقيم الاختبار مع الطالب اختبار t (الذيل الثاني). واعتبرت اختلافات كبيرة إذا / P / <0.05.
تجهيز الأنسجة
لميكروأرس والتجارب QPCR والنعلية تم رفعه العضلات من كل حيوان، المفاجئة مجمدة في النيتروجين السائل وتخزينها في -80 ° C.
استخراج الحمض النووي الريبي
تم عزل الحمض النووي الريبي مجموع من قسامة من العضلات إذابة على الجليد. وأجريت استخراج بطريقة تنقية القائمة على هلام السيليكا (RNeasy البسيطة عدة، QIAGEN). لQPCR، تعرض إجمالي RNA للعلاج الدناز (QIAGEN) 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. وقد تم قياس العائد الإجمالي RNA من OD 260، وتم تقييم نوعية على nanochips مع اجيلنت 2100 Bioanalyzer (اجيلنت تكنولوجيز، بالو ألتو، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية).
المجهرية وتحليل
تم قياس مستويات التعبير الجيني باستخدام صفائف قليل النوكليوتيد الفئران كما هو موضح سابقا [42]. وميكروأرس تحتوي على 9906 جينات مختلفة (نظام CodeLink، Uniset الفئران I، جنرال إلكتريك للرعاية الصحية أوروبا المحدودة، فرايبورغ، ألمانيا). كل مجموعة التجريبية، الذين تتراوح أعمارهم بين المعالجة (AT)، مراقبة المسنين (AC) والشباب (Y) الفئران، تم تشكيلها من قبل 2 الفئران (مكررات البيولوجية) والحمض النووي الريبي مجموع معزولة عن النعلية العضلات والمهجنة في نسختين (مكررات التقنية). وهكذا استخدمت 4 ميكروأرس لكل مجموعة من الفئران.
بعد التهجين وغسل، وفحص الشرائح باستخدام ماسح ضوئي Genepix 4000B (أكسون، يونيون سيتي، الولايات المتحدة الأمريكية) والبرمجيات Genepix. وقد تم تحليل الملفات الصورة الممسوحة ضوئيا باستخدام برنامج التعبير CodeLink، الإصدار 4.0 (GE للرعاية الصحية).
تم استخدام برنامج CodeLink لتطبيع إشارة التهجين الخام. تم حساب عتبة الكشف باستخدام كثافة إشارة تطبيع من 100 ضوابط السلبية، ويطلق البقع مع انخفاض كثافة إشارة "غائبة".
وقد تم تحليل التكنولوجيات السليمة بيئيا عن طريق البحث BLAST على قواعد البيانات النيوكليوتيدات NCBI. تم إنشاء مجموعات باستخدام ارتباط بيرسون. أجريت المقارنة الإحصائية والتصفية باستخدام برنامج Genespring 7.0 (اجيلنت).
أجري الاختيار الأول للجينات من المقارنات الزوج الحكيم بين AT والجرذان AC (Egb761 المفعول) أو Y وAT الفئران (الشيخوخة المفعول). وتمت مقارنة كل عينة من مجموعة واحدة مع كل عينة من
« آخــر المشـاركــات »
12-03-2015, 05:46 PM
ستخراج من الجنكه بيلوبا التعليم العام الأساسي 761 ينشط في الملف الأحداث في العضلات الهيكلية من الجرذان Sarcopenic التي الترانسكربتي إعادة برمجة
العرض المتطور
