حجم 74، العدد 4، سبتمبر 2001، الصفحات 443-448
صورة الغلاف
العقارات المضادة للأكسدة من مستخلص رائحة معزولة من براعم القرنفل [السيزية العطري (L.) Merr. وآخرون بيري]
كوانغ غون لي، تاكايوكي Shibamoto
عرض المزيد
دوى: 10.1016 / S0308-8146 (01) 00161-3
الحصول على الحقوق والمحتوى
ملخص
استخراج رائحة من براعم القرنفل المجففة [السيزية العطري (L.) Merr. تم الحصول آخرون بيري] باستخدام البخار التقطير تحت ظروف معتدلة (55 ° C و 95 ملم زئبق). تم تقييم الممتلكات المضادة للأكسدة من مستخلص رائحة في اثنين من فحوصات مختلفة. استخراج رائحة معزولة من براعم القرنفل يحول دون أكسدة hexanal لمدة 30 يوما عند مستوى 50 ميكروغرام / مل. استخراج القرنفل برعم تحول دون تشكيل malonaldehyde من زيت كبد سمك القد بنسبة 93٪ على مستوى / مل 160 ميكروغرام. وقد تم تحديد اثنين وعشرين المركبات في مقتطفات من براعم القرنفل التي اللوني للغاز واللوني للغاز / قياس الطيف الكتلي. كانت رائحة المكونات الرئيسية للبراعم القرنفل الأوجينول (24،371 ملغ / غ) وخلات eugenyl (2.354 ملغ / غ). الأوجينول، خلات eugenyl، والبنزيل الكحول تثبط أكسدة hexanal بنسبة 99، 99، و 82٪ على التوالي، لمدة 30 يوما في 500 ميكروغرام / مل. الأوجينول، خلات eugenyl، والبنزيل الكحول تحول دون تشكيل malonaldehyde من زيت كبد سمك القد بنسبة 88، 79، و 63٪ على التوالي، في 160 ميكروغرام / مل. النشاط المضادة للأكسدة من مستخلص القرنفل برعم ومكوناته الرئيسية رائحة، الأوجينول وخلات eugenyl، كانت مماثلة لتلك التي من مضادات الأكسدة الطبيعية، ألفا توكوفيرول (فيتامين E).
الكلمات المفتاحية
المواد الكيميائية رائحة. استخراج برعم القرنفل. الأوجينول. مضادات الأكسدة الطبيعية
1 المقدمة
المواد الكيميائية رائحة موجودة في أوراق الطبيعية والزهور واستخدمت على نطاق واسع في علاج رائحة منذ العصور القديمة، مما يوحي بأن لديهم بعض التأثيرات الصحية المفيدة، بالإضافة إلى رائحة طيبة،. حتى وقت قريب، وقد تم دراسة المواد الكيميائية رائحة أساسا من جوانب نكهة والكيمياء العطر. الصفات الطبية للمواد الكيميائية رائحة، مثل الأنشطة المضادة للأكسدة، التي تم اكتشافها مؤخرا. وقد تم التحقيق في الأنشطة المضادة للأكسدة من مقتطفات رائحة تم الحصول عليها من التوابل (Nakatami، 1997)، والأعشاب (أوكودا، 1999)، القهوة (سنغارا، Macku، وShibamoto، 1998)، والفاصوليا (لي، ميتشيل، وShibamoto، 2000) في النظم نموذج مختلف. بعض مكونات رائحة طبيعية معروفة، مثل 4-هيدروكسي-2،5-ثنائي ميثيل-3 تم الإبلاغ (2H) -furanone، المالتول، وmethylfurfural 5-هيدروكسي لامتلاك الأنشطة المضادة للأكسدة ملموسة (كوجا وآخرون، 1998 وسنغارا وآخرون آل.، 1998).
القرنفل هي براعم الزهور المجففة من السيزية العطري (L.) Merr. وآخرون بيري - شجرة عائلة الآس (Myrtaceae). هم مصادر مضادات للميكروبات ضد بكتيريا الفم التي ترتبط عادة مع تسوس الأسنان وأمراض اللثة (تساى وو و، 1996). في كوريا، وقد استخدمت القرنفل بنجاح لعلاج الربو ومختلف اضطرابات الحساسية عن طريق الفم (كيم وآخرون، 1998). Sesquiterpenes، وجدت في القرنفل، وتم التحقيق كعوامل مضادة للسرطان محتمل (تشنغ، كيني، ولام، 1992). A المكونة رائحة الرئيسي للبراعم القرنفل، الأوجينول أفيد، أن يكون نشاط مضاد (مارتيني، Weidenbِrner، آدمز، وكونز، 1996). في هذه الدراسة، تم فحص النشاط المضاد للأكسدة لمستخلصات رائحة معزولة من براعم القرنفل في اثنين من فحوصات مختلفة. تم فحص بعض المواد الكيميائية رائحة الرئيسية التي تم تحديدها في مقتطفات من براعم القرنفل أيضا للأنشطة مضادات الأكسدة بها.
2. المواد والأساليب
2.1. براعم القرنفل
براعم القرنفل المجففة [السيزية العطري (L.) Merr. وآخرون بيري] تم شراؤها من السوق المحلي.
2.2. الكواشف
تم شراؤها الأوجينول، خلات eugenyl، الكحول البنزيل، hexanal، حمض hexanoic، undecane، N-methylhydrazine (NMH)، 2-methylpyrazine، دوديسيل كبريتات الصوديوم (SDS)، كلوريد الحديدية، وα-توكوفيرول (فيتامين E) من الدريتش كميكال (ميلووكي، ويسكونسن). زيت كبد سمك القد (ما يقرب من 70٪ استرات حمض الميثيل ω-3 الدهنية)، hydroxytoluene الأنيسول (BHT)، trizma هيدروكلوريد، وtrizma قاعدة تم شراؤها من شركة سيجما للكيماويات (سانت لويس، MO). تم شراؤها بيروكسيد الهيدروجين، ثنائي كلورو ميثان، وخلات الإيثيل من فيشر شركة العلم، المحدودة (معرض الحديقة، NJ). وبإضافة 100 ملغ من 2 methylpyrazine إلى 10 مل من ثنائي كلورو ميثان إعداد محلول المخزون القياسي ل2-methylpyrazine وتخزينها في 5 ° C. تم تصنيعه أصيلة 1-methylpyrazole (1-MP) من malonaldehyde (MA) وN-methylhydrazine وفقا لطريقة تم تطويرها من قبل (Umano، دينيس، وShibamoto، 1988).
2.3. عزل المواد الكيميائية رائحة بواسطة البخار التقطير تحت ضغط منخفض (DRP)
وضعت براعم القرنفل المجففة (20 ز) في 3 لتر ذهابا وأسفل القارورة مع 1 لتر ماء منزوع الأيونات. وكان الحل عند 55 درجة مئوية لمدة 3 ساعات تحت ضغط منخفض (95 مم زئبق) المقطر بالبخار. تم استخراج المواد المقطرة (900 مل) مع 100 مل ثنائي كلورو ميثان، وذلك باستخدام مستخرج بين السوائل المستمر، لمدة 6 ساعات. بعد أن جفت استخراج أكثر من كبريتات الصوديوم اللامائية، تمت إزالة المذيب بواسطة المبخر فلاش الدوار. تم إيقاف التقطير عندما تم تخفيض حجم استخراج ما يقرب من 1 مل، ومن ثم تمت إزالة المذيب مزيد من تحت تيار النيتروجين النقي إلى أن تم تخفيض حجم 0.6 مل.
2.4. تحديد المواد الكيميائية رائحة في مقتطفات من براعم القرنفل
وقد تم تحديد المواد الكيميائية رائحة التي حصل عليها الحزب الثورى الديمقراطى بالمقارنة مع مؤشر Kovats الاحتفاظ الكروماتوغرافي الغاز I (Kovats، 1965)، ونمط تجزئة MS كل مكون مقارنة مع تلك المواد الكيميائية الأصيلة.
2.5. قياس من إجمالي المركبات رائحة في مقتطفات
أزيلت المذيبات من مقتطفات حصلت عليها DRP تحت تيار النيتروجين النقي إلى أن تم تخفيض الحجم الكلي للتركيز على ما يقرب من 500 ميكرولتر. وقد تم قياس كتلة التركيز باستخدام الميزان التحليلي. ثم حلل التركيز من قبل اللوني الغاز (GC)، ومجهزة للكشف عن تأين اللهب (FID)، لتحديد النسبة المئوية الإجمالية في منطقة ذروة المركبات رائحة والمذيبات. تم حساب مجموع كتلة من المواد الكيميائية رائحة بضرب النسبة المئوية التي تمثل مجموع منطقة ذروة المركبات رائحة مع كتلة كل استخراج. وتكررت كل تجربة ثلاث مرات. كانت الاستجابة للكشف عن لالمذيبات مصممة لتكون خطية على مجموعة من 0،2-1،0 ميكرولتر المحقون مع قيمة R2 0.99.
2.6. ألدهيد / الكربوكسيلية فحص الحمض
النشاط مضادات الأكسدة من العينات التي حصل عليها الحزب الثورى الديمقراطى تم اختبارها تستخدم تأثير كابح بشكل خاص تجاه أكسدة ألدهيد إلى حامض (Macku وShibamoto، 1991). أضيفت كميات متنوعة من مقتطفات رائحة ورائحة المواد الكيميائية إلى حل 2 مل dichlomethane من hexanal (3 ملغ / مل) تحتوي على 0.2 ملغ / مل من undecane كمعيار الداخلي GC. وقد بدأ أكسدة محلول العينة عن طريق التسخين عند 60 درجة مئوية لمدة 10 دقيقة في قارورة مختومة وتخزينها في درجة حرارة الغرفة. ويكفر فراغ الرأس من كل قارورة مع الهواء النقي (1.5 لتر / دقيقة، 3 ق) كل 24 ساعة لمدة 10 يوما الأولى. تم رصد انخفاض في hexanal في فترات زمنية لمدة 5 أيام لمدة 30 يوما. تم فحص معايير BHT وα-توكوفيرول أيضا للنشاط مضادات الأكسدة وذلك باستخدام نفس المنهجية.
2.7. الدهون / MA فحص
تم تحديد النشاط مضادات الأكسدة من مقتطفات من خلال تحليل MA تشكلت من زيت كبد سمك القد على أكسدة بعد derivatizing إلى 1-MP مع NMH (تامورا، Kitta، وShibamoto، 1991). وكان محلول مائي (5 مل) تحتوي على 10 ميكرولتر من زيت كبد سمك القد، 0،25 مليمول العازلة trizma (7.4 درجة الحموضة)، 5 ميكرومول من كلوريد الحديدية، 10 ميكرومول من بيروكسيد الهيدروجين، 0.75 ملمول من كلوريد البوتاسيوم، و 0.2٪ من بالسطح SDS حضنت مع كميات متنوعة من المستخلصات رائحة ورائحة المواد الكيميائية لمدة 18 ساعة عند 37 درجة مئوية في 20 مل أنبوب اختبار. تم إيقاف أكسدة العينات من خلال إضافة 50 ميكرولتر من حل BHT 4٪ (Ichinose، ميلر، وShibamoto، 1989). كانت مغطاة أنابيب العينات مع رقائق الألومنيوم خلال الحضانة لتجنب أي تأثير الضوء على بيروكسيد الدهون. مضادات الاكسدة المعروفة، ألفا توكوفيرول وBHT، استخدمت لمقارنة النشاط المضاد للأكسدة لذلك من مقتطفات رائحة اختبارها. وأضاف NMH (30 ميكرولتر) إلى حلول زيت كبد سمك القد أعلاه أكسدة، وكان يحرك حلول لمدة 1 ساعة في درجة حرارة الغرفة. تم استخراج كل محلول التفاعل مع 10 مل من ثنائي كلورو ميثان باستخدام مستخرج بين السوائل المستمر لمدة 3 ساعات. وقد المشبعة الحل مع كلوريد الصوديوم قبل استخراج لمنع تشكيل مستحلب. تم تعديل استخراج بالضبط 10 مل بإضافة ثنائي كلورو ميثان و 20 ميكرولتر من محلول 2-methylpyrazine كمعيار الداخلي GC. لتجنب الأضرار التي لحقت كشف nitogen الفوسفور (NPD)، والمذيبات، ثنائي كلورو ميثان، في أزيل حل المعدل تحت تيار النيتروجين النقي ومن ثم تم تعديل حجم بالضبط 10 مل مع ethylacetate. تم تحليل حل ل1-MP من قبل GC مع NPD.
2.8. التحليل الآلي
وقد أجري التحليل الكمي للhexanal و1-MP وفقا لأسلوب قياسي داخلي (Ettre، 1967). A هيوليت باكارد (HP) نموذج 5890 GC مجهزة 30 م × 0.25 ملم معرف (DF = 0.25 ميكرون) DB-1 العبودي المرحلة العمود تنصهر السيليكا الشعرية (J & W العلمي، فولسوم، CA) وااا كان يستخدم لتحليل hexanal. كانت سرعة خطية من الغاز الناقل الهيليوم 30 سم / ث على نسبة الانقسام من 20: 1. كانت حاقن ودرجات الحرارة كاشف 300 و 280 درجة مئوية، على التوالي. تم برمجتها درجة حرارة الفرن 40-180 ° C في 4 درجات مئوية / دقيقة، وعقد لمدة 10 دقيقة.
لتحديد مجموع المركبات رائحة في مقتطفات، وهذا نموذج HP 6890 GC مجهزة 30 م × 0.25 ملم معرف وقد استخدم (DF = 0.25 ميكرون) DB-WAX العبودي المرحلة العمود تنصهر السيليكا الشعرية (J & W العلمي، فولسوم، CA) وااا.
نموذج HP 6890 GC، مجهزة 30 م × 0.25 ملم معرف (DF = 0.25 ميكرون) DB-WAX العبودي المرحلة العمود تنصهر السيليكا الشعرية (J & W العلمي، فولسوم، CA)، وNPD كان يستخدم لتحليل 1-MP.
نموذج HP 6890 GC، ربطه إلى HP 5791A كتلة كاشف انتقائي (GC / MS)، وكان يستخدم لتحديد الطيفي الشامل لمكونات GC في MS التأين الجهد من 70 فولت. A 30 م × 0.25 ملم معك بطاقة تعريف (DF = 0.25 ميكرون) DB-WAX العبودي المرحلة العمود تنصهر السيليكا الشعرية (J & W العلمي، فولسوم، CA) كانت تستخدم لGC. كانت سرعة خطية من الغاز الناقل الهيليوم 30 سم / ثانية. كانت حاقن ودرجات الحرارة كشف 250 ° C. تم برمجتها درجة حرارة الفرن 50-180 ° C في 3 ° C / دقيقة، وعقد لمدة 40 دقيقة.
3. النتائج والمناقشة
كان المحصول الكلي للمواد الكيميائية رائحة من براعم القرنفل (النسبية لكمية من براعم القرنفل المجففة المستخدمة) 2.75 ± 0.57٪ (وزن / وزن). القيم هي ± متوسط الانحراف المعياري (ن = 3). ويبين الجدول 1 الكيميائية رائحة المحددة في مقتطفات من براعم القرنفل، جنبا إلى جنب مع تركيزها محسوبة ومؤشرات Kovats على عمود DB-WAX. تم حساب تركيز كل مادة كيميائية باستخدام المعادلة التالية:
https://translate.google.com/transla...613&edit-text=